新生儿血清梅毒抗体酶联免疫吸附试验检测假阳性结果分析
梅毒检验的假阴性与假阳性结果影响因素探析
于梅毒的检测具有很高的敏感性和准确性。但是在实际实验 室检验 工作 中 , 发现存在 检验结果 假 阳性 和假 阴性 的现象 。 不仅对 临床检 验工作造 成一定 的困扰 , 还会影 响检 验结果 ,
激化 医患关 系 , 带来 较大的负面影 响。因此 , 分析发生 假阳
和假 阴性出现的原 因 , 采取积极 的措施予 以干预 , 提高诊断率 非 常重要 。本 文 回顾性 研究 1 5 0 0份梅 毒血清 学检 验报 告 ,
分析检验结果假 阳性和假阴性的原因 , 现将结果报告如下 。
1 资 料 与 方 法
性和假 阴性 的原 因 , 针对原 因采取有效 的措施 进行 规避对于 选择 本院 2 0 1 3 年l ~ 1 2月进 行实验 室检查 提高临床检验工作 质量 、 改善 医患关系具有很好的临床价值 。 通 过对本组研 究 中 2 8 例检 验结果呈 假阳性和假 阴性的 患者进行分析 , 认 为造成高结构 的原 因主要有以下几 点。
临床 中诊断和筛查梅毒 的主要 方法之一 , 随着血 清学检验方 法 的不 断改 善 , 其筛查率显著提高 。但是假 阳性 与假阴性率 也逐渐上升 , 不仅对 医护人员的临床工作造成影响 , 还容易造 成 医患之间 的矛盾激化 J 。因此 , 探讨 梅毒检验结果假 阳性 梅毒血清学检查是 当前临床 中诊断和筛查梅毒的主要途 径之一 , 具体 的检 验方法有多种 , 临床 中应 用最为广泛的
参 考
文
献
[ 收稿 日 期 : 2 0 1 5 — 0 6 — 0 8 ]
[ 1 ] 高凯 , 王立德 , 齐志 明 , 等. 前交叉韧带 损伤的 M R I 诊断与临
酶联免疫吸附试验(ELISA)测定错误结果的原因分析
ELISA测定错误结果的原因分析ELISA即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。
Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。
ELISA的基本原理是:①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;③测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。
本文就标本因素对ELISA测定的影响做如下讨论。
血清是最常用的ELISA标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种:1.内源性物质有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。
常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig (s)抗体、交叉反应物质和其它物质等。
(1)类风湿因子人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性原因探讨
4.1 酶标仪使用的影响 酶标仪是 ELISA试验
医药论坛杂志 2010年 11月 第 31卷 第 21期
所必须的仪器 , 它是对反应孔进行垂直比色 , 当反 应板底部有污染时 , 容易出现吸光度值升高 , 导致 假阳性的结果 。 4.2 拖带阳性 全自动加样仪加样时不是一份 标本一个加样头 , 虽然仪器能对加 样针内壁和外 壁自动清洗 , 但遇到高浓度抗体标本时 , 由于加样 针清洗程度不够 , 同一加样针拖带 污染导致其后 一孔甚至多孔出现假阳性的现象 [ 4] 。
3 操作因素
洗涤过程中有溢出现象, 使强阳性标本的反 应液污染临近的阴性孔而出现假阳 性 ;洗涤时 间 短或洗涤次数少 , 使洗涤不充分 , 板孔中酶试剂残 留而出现假阳性 ;底物液反复使 用被污染或受 到 强光照射时间过长也会出现假阳性 ;判读结果 或 登记 、发报告时错位 , 出现错报的假阳性结果 。
JournalofMedicalForum Vol.3 1 No.2 1 November2 010
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3 讨论
CHE是一种生物酶 , 具有降解胆碱酯 并在自 主神经 系统和 肌肉运 动系统 中起神 经传 递的 功 能 , 对其检测常被用于有机磷中 毒患者的辅助 诊 断 。体内胆碱酯酶分 为二种 :一 种为乙酰胆碱 酯 酶 , 又称真性胆碱酯酶 (AChE), 主要存在于胆 碱 能神经末梢突触间隙 , 和拟胆碱酯酶 (PChE)两部 分组成 。 AChE来源 于神 经细 胞和 新生红 细胞 , PChE主要来源于肝脏 , 血清中主要含 PChE, AChE 含量甚微 。 从病理学 角度看 , 各 型肝病患者由 于 肝细胞大量坏死 , 肝脏内网器功能受损 , 其合成功 能下降严重 , 发生肝细胞变性 、坏死和 /或纤维化 。 变性 、坏死越重 , 即肝 细胞炎症越重 , 肝细胞合 成 胆碱酯酶减少 , 胆碱酯酶活力下降越明显 。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体准确性分析
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体准确性分析【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验对梅毒检测的准确性。
方法采用ELISA检测方法,对210例被确诊为梅毒患者进行血清梅毒抗体检测分析,并与用梅毒螺旋体明胶凝集试验检测的210例作对照,比较2种方法的准确性。
结果观察组采用酶联免疫吸附试验对被确诊为梅毒患者的血清样本进行梅毒抗体检测,阳性检出率为98.10%;对照组采用梅毒螺旋体明胶凝集试验进行梅毒检测,阳性检出率为100%;两组相比梅毒筛查符合率无明显差异(P>0.05)。
结论酶联免疫吸附试验是进行梅毒抗体检测的一种简便、特异性高的方法,值得推广。
【关键词】酶联免疫吸附试验;梅毒螺旋体;特异性梅毒是由苍白密螺旋体感染引起的一种性传播疾病,近年来呈现逐渐增多趋势。
梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器,造成多器官病变、功能失常、组织破坏甚至死亡。
实验室检查是诊断和发现梅毒的重要手段,而选择合适的检查方法对临床确诊具有重要意义。
我们于2003年2月至2007年5月用酶联免疫吸附试验(ELISA)对后经确诊的梅毒患者进行了梅毒血清学检测,并用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)作为参照方法,对检测结果进行比较,评价酶联免疫吸附试验检测梅毒血清学试验的适用性,现报告如下。
1 资料与方法1.1 病例来源2003年2月至2007年5月在我院性病门诊就诊后被确诊为梅毒患者治疗前的血标本420例,随机分成2组,每组210例,观察组采用酶联免疫吸附试验进行梅毒抗体检测,对照组采用梅毒螺旋体明胶凝集试验进行梅毒检测,两组患者在年龄性别以及一般临床资料等方面均无明显差异(P>0.05),具有可比性。
1.2 试剂和方法采用梅毒专用混匀器、Biocell awl型洗板机和Biocel2010型酶标仪,试剂由北医大贝尔生物制药有限公司提供。
①ELISA法预包被酶标孔中加入待检血清50 μl,同时设阴、阳性对照,质控及空白孔,每孔加入酶标记抗原,置37℃30 min,Biocell awl型洗板机上洗板5次,拍干后加入显色剂A、B液各50 μl,置37℃10 min,加终止液50 μl,混匀后在Biocell 2010型酶标仪上450 nm比色(参考波长630 nm),以阳性OD值/阴性对照OD值大于2.1判为阳性;②TPPA法取1∶20、1∶40、1∶80等倍稀释的待检血清25 μl加于微量反应板中,于1∶20稀释孔加入未致敏粒子25 μl,其余稀释孔分别加入致敏粒子25 μl (血清最终稀释倍数为加入倍数的2倍),轻轻混匀后加盖放置于室温2 h,以未致敏粒子孔不出现凝集、致敏粒子孔出现凝集判为阳性。
酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体产生假阳性的原因分析
吴 荣 萸 6g 陈 皮 1 、 甘 草 6g 水 煎 服 , 日 3次 , 天 l 、 2g 炙 , 每 每 剂 , 前 3 n服 。服 l 后 , 饭 Omi 剂 大便 开始 成 形 , 数 明 显 减 少 , 次
连 服 5剂 后 大 便 转 正 常 。随 访 1 月 , 见 复 发 。 个 未 参考 文献
全 书 ・ 泻 》 指 出“ 泻 之 本 , 不 由 于脾 胃” “ 为 胃关 , 泄 篇 泄 无 ,肾 开
窍 于 二 阴 , 以二 便 之 开 闭 , 肾 脏 所 主 , 肾 中 阳 气 不 足 , 所 皆 今 则 命 门火 衰 , … 阴气 极 盛 之 时 , 令 人 洞 泄 不 止 也 ” … 则 。
不 良反 应 l ; 易蒙 停 、 方 苯 乙 哌 啶疗 效 也 不 甚 满 意 。 1用 ] 复 因此 , 医 辨证 施 治 , 可 获得 满 意疗 效 。据 作 者 统 计 , 中 常 约
9 的糖 尿 病 性 腹 泻 者 属 脾 气 虚 弱 或 脾 肾 阳 虚 之 证 。故 立 健 O 脾 益 气 、 敛 止 泻 法 治之 。基 本 方 药 : 黄芪 、 参 、 苡 仁 、 收 生 党 薏 茯 苓 、 白术 、 山药 、 焦 炒 葛根 、 茱 萸 、 吴 陈皮 、 炙甘 草 。方 中生 黄 芪 、 党参 、 苡 仁 、 苓 、 白术 、 山 药 补气 健脾 , 葛 根 可 升 脾 胃 薏 茯 焦 炒 而 之 阳气 , 改 善 纳 差 的 良药 , 以吴 茱 萸 温 脾 散 寒 , 皮 调 中 、 是 配 陈 燥 湿 、 气 , 甘 草 调 中和 胃 , 和 诸 药 , 行 炙 调 相互 配伍 , 到 健 脾 益 起 气 , 敛 止 泻 之 功 。据 资 料 记 载 , 术 、 收 白 山药 、 根 又 有 降 血 糖 葛 的 作用 [ 。若 湿 盛 者 , 加 苍 术 、 香 、 兰 ; 盛 者 , 生 芪 、 2 酌 藿 佩 热 去
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性原因分析
1 疾病 因素 . 2
某些疾病 例如系统性红斑狼疮 、丙 型肝
炎、 艾滋病 、 麻风 、y e 、 L m 病 肝硬化 、 巴肉瘤 、 淋 结肠癌 、 生殖
器疱 疹 、 糖尿病 、 海洛 因成瘾及 妊娠等可 出现检测 结果假 阳性 。本文发现 白血病 、 冠心病 、 脑供血不足等内科慢 性病 亦 引起 出现假 阳性 , 提示患有难 以治愈的慢性疾病患者 长 期用药可使机体免疫机能发 生改 变 , 出现抗 原 一抗体交叉
反 应 , 扰 试 验 结 果 , 致 出现 假 阳性 。 干 导
2 标本 因素
孔有划痕 , 可使测定 A值升 高 , 如果不设空 白对照 , 读结 判
果 时 可 引 起假 阳性 。
综上所 述 , 在工作 中出现可疑 的阳性标 本时 , 应仔 细
查找干 扰因素 , 并重抽 血复查 , 果还不 能确定 的标本应 如 建议 其定期随访 , P R检测梅毒 D A, 用 C N 必要时做确证试 验来 确定结果 , 避免假 阳性报告 的发 出。
结果。 4 仪器 因素
度高 、 价格低廉 、 操作方便 、 结果客观在 国内广泛使用 。但
在工作 中遇到的最 大问题是 出现假 阳性的问题 , 为避免假
阳性结果 的出现 , 现将产生假阳性的原因作 以总结如下 :
1 机体 的内在因素
41 酶标仪使用 的影响 .
。 LS E IA试剂盒主要是选
23 标本被 细菌污染 .
细菌污染 , 因一些 细菌体内可能含有 内源性辣 根过氧化物
[l 2 周毅 . 老年梅毒 螺旋体感染 5 例调查 与分析 [ ] l J. 中国现代 医
药 杂 志 ,0 465 :. 2 0 ,()7
梅毒检验的假阳性结果影响因素分析
梅毒检验的假阳性结果影响因素分析目的:分析梅毒检验出现假阳性结果的原因。
方法:选取我院自2010年1月至2013年1月收治的已确定梅毒阳性患者18例和梅毒阴性患者82例进行分析研究,利用RPR、TP-ELISA和TPPA三种检验方法进行梅毒螺旋体感染检验,比较三种检验方法的检验准确率,并分析影响其检验结果的原因。
结果:TPPA 检验结果准确性要明显优于RPR和TP-ELISA检验结果,P<0.05,具有统计学意义。
结论:在对患者进行梅毒螺旋体感染检验时,为防止出现假阳性结果,应尽量减少客观因素对试验的影响,并对特殊患者进行相关的复检,保证检测结果的准确性。
标签:梅毒螺旋体;检验;假阳性结果;影响因素梅毒是一种广泛流行的性病,早期侵犯皮肤黏膜,晚期以侵犯心血管和神经系统为主,并可侵犯全身的组织和器官而产生多种多样的症状和体征[1]。
其严重影响着患者的身体健康和生活质量,因此,及时发现并进行治疗十分必要。
目前临床上用于梅毒检验的方法有很多,但检验准确性都需要进一步进行探究。
为进一步探究影响梅毒检验结果的因素,本文选取100例皮肤性病科患者进行分析研究,具体结果报告如下。
1资料与方法1.1一般资料选取我院自2010年1月至2013年1月收治的已确定梅毒阳性患者18例和梅毒阴性患者82例,共100例皮肤性病科患者为研究对象,进行回归性分析。
其中男68例,女32例,年龄在24~75岁之间。
1.2检验方法对100例患者都采用快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和梅素螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)三种血清学试验进行血清检验。
1.2.1试剂采用上海科华RPR试剂盒、珠海丽珠ELISA试剂盒、日本富士株式会社TPPA试剂盒[2]。
具体试验操作方法按照相关说明书进行。
且参加研究者的血清样本是新鲜提取的,试剂也在有效期内。
1.2.2仪器本实验中采用的仪器是我院购买的安图2100酶标仪和上海科华全自动洗板机KHB ST-96W。
酶联免疫吸附方法检测梅毒抗体假阳性结果分析张拓
酶联免疫吸附方法检测梅毒抗体假阳性结果分析张拓发布时间:2023-06-14T05:41:00.950Z 来源:《中国医学人文》(学术版)2023年6月6期作者:张拓[导读] 目的:以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测法结果为标准,分析酶联免疫吸附(ELISA)方法检测梅毒抗体假阳性结果。
方法:本次研究年限为2018年4月~2022年4月,将在西安630医院接受检测的100份血液标本纳入此次研究中。
根据阳性标本的吸光度/临界值比值(S/CO)分为低值组与高值组;并对所有标本利用TPPA检测法进行复检,最终分析梅毒ELISA法假阳性结果。
结果:ELISA法在检测梅毒抗体假阳性方面与TPPA法相比没有明显的临床改变(P>0.05);但S/CO低值组与S/CO高值组相比结果具有统计学意义(P<0.05)。
结论:TPPA为梅毒抗体检测的金标准,ELISA法可用于临床梅毒筛查试验,阳性结果的确定需要进一步行TPPA法,以减少误诊及漏诊的发生。
西安630医院陕西西安 710089摘要:目的:以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测法结果为标准,分析酶联免疫吸附(ELISA)方法检测梅毒抗体假阳性结果。
方法:本次研究年限为2018年4月~2022年4月,将在西安630医院接受检测的100份血液标本纳入此次研究中。
根据阳性标本的吸光度/临界值比值(S/CO)分为低值组与高值组;并对所有标本利用TPPA检测法进行复检,最终分析梅毒ELISA法假阳性结果。
结果:ELISA法在检测梅毒抗体假阳性方面与TPPA法相比没有明显的临床改变(P>0.05);但S/CO低值组与S/CO高值组相比结果具有统计学意义(P<0.05)。
结论:TPPA为梅毒抗体检测的金标准,ELISA法可用于临床梅毒筛查试验,阳性结果的确定需要进一步行TPPA法,以减少误诊及漏诊的发生。
关键词:梅毒抗体;假阳性;酶联免疫吸附梅毒是临床上常见的性传播疾病,由苍白螺旋体引起,传播途径广泛,性传播、母婴传播以及输血等都是疾病传播的重要因素[1]。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因分析
准 确 性 有 很 大 的影 响 。 由于 反 应 孔 有 划 痕 , 使 测定 A 值升 高 , 可 如 果不 设 空 白对 照 , 读 结 果 时 可 引 起假 『性 。 判 j 日 综 上 所 述 , 毒血 清 学 检查 是 诊断 梅 毒 的重 要 依据 , 不是 唯 梅 但
影 像 与 检 验
酶 联 免 疫 吸 附 法 检 测 梅 毒 抗 体 假 阳 性 产 生 的 原 因 分 析
周 武 杰 ’ 王 守芳
(. 1 黑龙 江省 宁安市 人 民医院检 验科 ; 2 黑龙 江省 宁安市 妇幼 保健 院检验 科 黑龙 江宁 安 1 0 ) . 7 0 54
【 要l酶联 免疫吸 附法检 测梅毒是 目前检验科 常 用的免疫 学检 测方法 , 摘 其操作 简单 , 无需特殊 设备 , 已在国 内广泛 应 用, 但是 , 忽 如
强光 照射 时 间过 长 也 会 出现 假 阳性 ; 读 结 果 或登 记 、发报 告 时 判
梅 毒是苍 白螺旋 体引起 的危 害人类健 康较为 严重 的一种性 传播
性 疾病 之一 , 近年 来在 我国的 发病率呈逐 年上升 的趋 势 , 对梅 毒作 出 快速 、准确的 诊断是非 常重要 的 。 目前临 床上梅毒 的诊 断主要是 根 据临床症状和血清学检查 , 酶联免疫吸附法(LS 对 G g 都有 E IA) 、IM 很好 的检 测能 力 , J 但在 工作 中遇 到 的最 大 问题是 出现假 阳性 的 问
酶联免疫吸附方法检测梅毒抗体假阳性结果分析
11 一般资料 随机选取 2015年 6月—2016年 6月治疗的 300例梅
毒患者,平均 分 为 三 组,分 别 为 ELISA组、WB组 以 及 TPPA组,每组 100例患者。ELISA组中中青年 45例,平 均年龄为(251±63)岁,老年组 55例,平均年龄(601 ±63)岁,男 51例,女 49例,其中梅毒一期的患者为 15 例,梅毒二期的患者为 45例,梅毒三期的患者为 30例, 治愈后复查为 10例。WB组中中青年 46例,平均年龄为 (241±63)岁,老年组 54例,平均年龄(631±63)岁, 男 54例,女 46例,其中梅毒一期的患者为 20例,梅毒二 期的患者为 15例,梅毒三期的患者为 45例,治愈后复查 为 20例。TPPA组中中青年 55例,平 均 年 龄 为 (241± 63)岁,老年组 45例,平均年龄(632±63)岁,男 54 例,女 46例,其中梅毒一期的患者为 20例,梅毒二期的 患者为 25例,梅毒三期的患者为 35例,治愈后复查为 20
<005),TPPA组的假阳性率要比 WB组的假阳性率要 低,差异有统计学意义(P<005),见表 1。 22 老年组和中青年组两组的梅毒抗体检测情况
采用 ELISA方法检验的老年组和中青年组比较,老年
黑龙江医学 第 42卷 2018年 第 9期 HEILONGJIANGMEDICALJOURNAL Vol.42 No.9 Sep.2018
观察 ELISA组、WB组以及 TPPA组这三组的假阳性 率,中老年组以及青年组两组的梅毒抗体检测的对比。 14 统计学方法
数据采用 SPSS180软件进行统计分析,计数资料以 例数和百分比(%)表示,组间比较采用 χ2 检验,以 P< 005为差异有统计学意义。
酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析
表 1 不同样本的制备方法对 TP检测结果的影响
immunosorbentassay, ELISA)检 测结 果 的影 响进 行 分析 , 以总 结 经 验 。 报 告 如下 。
1 资料与方法
1.1 标本来 源 从我站 2004年 6月 至 2005 年 7 月的 献血 者 中随 机选 88 名 , 男女各 44 名 , 均 无 不 良 生活 史 且 经 TP-ELISA检测确认梅毒抗体阴性 。 1.2 试剂 和仪 器 梅毒 酶 联 免疫 试 剂盒由厦 门新 创 公司 提 供 ;TECAN全
高于 TRUST和 RPR〔2〕, 但 常常因 标本 以 3000/min速度离心 7min, 分 离出 血 方法一出现 1例 (1.14%)假阳性 。 见
溶血或纤维蛋 白残留 过多等 因素 而影 清或血 浆 。 分 离 后 样本 即 刻 加样 , 在 表 1。 阳性 标本加大离心复检 后 , 方法
现代实用医学 2006年 2月 第 18卷 第 2 期
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酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析
彭明喜
【摘要 】 目的 分析酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测梅 毒抗体假阳性的原因及其对策 。 方 法 采集 88份经 TP-ELISA检测确认梅毒抗体阴性的血样 , 每份分成 3 管 , 分别 用 3种方 法制备 :一放 置于 4℃冰 箱过夜 , 分离血清 ;二不加抗凝 剂 , 快速分 离血 清 ;三加 EDTA抗 凝 , 人为 造成不 同程 度溶 血 , 分离血 浆 。 全自动检测梅毒抗体 。阳性标 本第 2d重复检测 。 观察 3组实验结果并比较其差异性 。 结果 方法二 与方法三阳性率分别 为 11.36%和 20.45%, 明 显高于 方法一 (1.14%)(P<0.05), 加强离 心重复检 测 , 方法一与方法二的阳 性全部消除 , 方法三中阳性重 复率为 66.67%。 结论 纤维 蛋白残 留和溶 血是导 致假阳性的主要原因 , 加强离心和防止标本溶血能减少假阳性发生 。 【关键词 】 酶联免疫吸附测定 ;梅毒血清诊断 ;假阳性反应 【中图分类号 】 R446.61 【文献标识码 】 A 【文章编号 】 1671 -0800(2006)02 -0127 -02
酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体产生假阳性的原因分析
是由于自主神经功能失 调,小 肠 运 动 能 力 下 降,造 成 肠 菌 群 失 调,肛门括约肌功能 下 降,小 肠 黏 膜 吸 收 功 能 下 降 所 致。 也 有 学 者 认 为 由 于 糖 尿 病 患 者 机 体 糖 代 谢 的 紊 乱 ,致 使 机 体 免 疫 功 能下降,易导致胃肠 功 能 紊 乱,出 现 顽 固 性 腹 泻。 糖 尿 病 性 腹 泻属中医学“泄 泻 ”范 畴,中 医 认 为 糖 尿 病 初 期 病 机 是 阴 虚 燥 热,因此治疗上多采用 苦 寒 降 火 的 药 物 进 行 治 疗,日 久 则 损 伤 脾胃之功能,脾气受损,加之进食生冷油腻、情绪波动及寒邪 外 袭等,更进一步损伤 脾 胃,致 使 脾 胃 气 虚 或 虚 寒,脾 失 健 运,聚 而生湿,湿浊下泻,脾 病 及 肾,肾 关 不 固,肾 阳 衰 微,命 火 不 足, 不能温运脾土,脾失健运,则出现腹泻,甚则五更泻,正如《景 岳 全书·泄泻》篇指出“泄泻之本,无不由于脾胃”,“肾为胃 关,开 窍于二阴,所以二便 之 开 闭,皆 肾 脏 所 主,今 肾 中 阳 气 不 足,则 命 门 火 衰 ,… … 阴 气 极 盛 之 时 ,则 令 人 洞 泄 不 止 也 ”。 3 辨 证 治 疗
酶 会 产 生 非 特 异 性 干 扰 ,从 而 造 成 假 阳 性 结 果 。 1.3 标本处理不当 标 本 抗 凝 不 完 全 或 未 抗 凝 即 离 心 分 离 , 容易 析 出 纤 维 蛋 白,使 洗 板 时 清 洗 不 干 净,而 造 成 A 偏 高,使 本为阴性的标本出现假阳性结果。此外,标本弄错也可造成 假 阳性。 1.4 标本保存不当 在5d内检测的标本可以 放 置 于 4 ℃ 保 存,超过一周测定的标本需低温冷冻保存。反复冻融使抗体 效 价 降 低 ,若 抗 体 的 血 清 需 要 保 存 多 次 检 测 ,宜 分 装 冻 存 。 1.5 操作不当 洗涤过程要严格按照仪器操作规程进 行。 不 能有溢出现象;洗涤时间不能过短;次数不能过少;洗完后板 子 要 扣 干 净 。 否 则 ,易 造 成 假 阳 性 结 果 。 1.6 封膜板的影响 试 验 中 应 该 封 膜 板 而 没 有 封 膜 板,水 分 蒸发后浓度升高可能使结果出现假阳性。 2 试 验 温 度 因 素
三种方法检测梅毒患者阳性率的比较分析
三种方法检测梅毒患者阳性率的比较分析目的:比较梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)三种梅毒检测方法,评价三种方法的临床使用价值。
方法:以TP-ELISA、TPPA做特异性抗体定性检测,RPR做非特异性抗体定性检测。
结果:TP-ELISA法检测出梅毒阳性49例;用TPPA法检测出阳性49例;用RPR检测出阳性为45例;TP-ELISA法检测出一期梅毒(30例)的阳性29例;二期梅毒(17例)的阳性17例。
三期梅毒(3例)阳性为3例。
用TPPA法检测一期(30例)的阳性有28例,阳性率为93.3%,二期(17例)的阳性有17例。
三期梅毒(3例)的阳性为3例,阳性率为100%。
用RPR法检测出一期(30例)的阳性有24例,阳性率為80%,二期(17例)的阳性有17例,阳性检出率为100%。
三期(3例)的阳性为2例,阳性率为66.6%;通过TP-ELISA法检出愈后的全为阳性,TPPA的阳性11例,RPR法的阳性为3例,9例为阴性;结论:对梅毒患者同时采用TP-ELISA 和TPPA或RPR法进行血清学联合检测,可提高阳性检出率和判断疗效。
标签:梅毒螺旋体;酶联免疫吸附试验;梅毒螺旋体明胶凝集试验;快速血浆反应素环状卡片试验【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)09-0563-011 材料与方法1.1材料50例经病史,临床症状,抗原检测及血清学检测试验已确诊而又没有治愈的梅毒患者。
健康体检者50例作为正常对照。
50例梅毒患者中经一段时间治疗后治愈的人共12例。
1.2 方法50例已确诊梅毒患者与50例健康体检者抽血检测,分离血清后置4℃保存,当天内检测。
检测时,每一份标本分别同时用TP-ELISA、TPPA、RPR三种方法进行。
2 结果2.1 三种不同方法检测所有标本阳性结果2.3 三种方法检测50例患者中经治愈者共12例血清结果2.4 统计学结果分析由此可以看出,采用TPPA和TP—ELlSA检测所有梅毒标本的阳性率高于RPR,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05),在健康体检者标本中,RPR 的假阳性率高于TPPA和TP-ELISA,差异有统计学意义(P<0.05),而采用TPPA 和TP—ELlSA检测一期、三期梅毒的阳性率也高于RPR,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05),但在二期梅毒,三种方法检测的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);但是TP-ELISA和TPPA在梅毒患者各期和健康体检者中所检测的阳性率基本接近。
ELISA法检测梅毒假阳性结果分析
ELISA法检测梅毒假阳性结果分析目的对梅毒酶联免疫吸附测定(TP-EIISA)法假阳性结果进行分析。
方法采用TP-ELISA法对2924例标本进行梅毒特异性抗体检测。
阳性标本分为吸光度/临界值比值低值组(1~2)和S/CO(>2)高值组;同时所有标本用TPPA法复检,对结果进行对比分析。
结果TP-ELISA法与TPPA法2种方法梅毒抗体检测结果无显著差别,但S/CO低值组与高值组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论TP-ELISA检测梅毒特异抗体可行;但对于S/CO低值标本应加用TPPA方法以排除假阳性。
标签:梅毒;假阳性;分析梅毒的血清学检测是诊断梅毒的重要依据之一,它在梅毒的诊断、治疗及研究方面均有重要意义[1]。
目前检测梅毒螺旋体感染的血清学方法主要是酶联免疫吸附实验(ELISA),但常常遇到出现假阳性。
梅毒螺旋体明胶凝集试验(treponema pallidum particle assay,TPPA)特异性好、灵敏度高,是日前公认的梅毒血清确证试验[2]。
本研究通过以TPPA法与EIISA结果对比,试图对ELISA 检测假阳性结果进行分析。
1资料与方法1.1一般资料2012年1月~2014年12月在兵团第七师人民医院住院做输血前筛查的患者血清标本2924例,其中男1778例,女1146例,年龄17~75岁。
均采用常规静脉采血。
1.2 仪器和试剂TP-ELISA试剂由珠海丽珠试剂有限公司提供,TPPA试剂为日本富士株式会社产品。
酶标仪,Anthos 2010型(奥地利生产)。
洗板机,Anthos fluido 24200型(奥地利生产)。
试剂检测临界值(cutoff)为0.20+阴性对照平均吸光度值,使用Wellscan MK3酶标仪读取吸光度值,以吸光度/临界值比值[吸光度/临界值(absorbance of sample/cut-off rate,S/CO)]为判定标准,S/CO≥1为阳性,S/C00.05),见表1。
2种方法检测梅毒螺旋体结果分析
的输血传播。只有两种方法联合使用,才能杜绝一
些带有病理因素的血液输给患者,确保受血者的
安全。
1'PPA是目前较好的梅毒螺旋体抗体确认方
法,具有很高的敏感性和很强的特异性,为了无偿
确认阳性的340份标本中,TRUST法阳性而ELISA 法阴性的标本无一例阳性。一些病理因素,如风疹、 水痘、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等也可造成假
阳性。在ELISA法阳性而TRUST阴性的228份标本
献血的健康发展和对献血者负责,也让献血者对血
站的检验结果信任,建议在TRUST和ELISA两种
方法检出阳性后用TPPA确认,给献血者一个满意
的回答。 参考文献
季阳.输血相关梅毒的检测[M]//王培华.输血技术学.2版.北 京:人民卫生出版社,2002:113—116. [2] 王露楠,邓巍,李金明.梅毒螺旋体感染不同血清学诊断方法的 临床评价[J].中华检验医学杂志,2002,11,25(6):353-355. [3]刘明,张小华.ELISA法与TRUST法检测梅毒结果的分析[J]. 中国输血杂志,2002,15(2):122—123. [4] 崔益祥,吉飞跃.不同梅毒抗体的检测方法在血液筛查中的应 用评价[J].现代医药卫生,2005,21(22):3130—3132. 收稿日期:2008-02.17 修回日期:2008-05;-24 [1]
2.2
本进行了不同确认阳性的 340份标本中,TRUST法检出153份,占45.0% (153/340),ELISA法检出340份,占100%(340/ 340),结果见表2。
裹2 TPPA法确认梅毒检测结果340份 (例)
1.1资料选取广西壮族自治区北海市中心血站 2002至2007年共47 555人次的无偿献血者血液标 本梅毒检测资料进行分析。 1.2方法首先采用TRUST和TP—EHSA分别进行
酶联免疫检测结果假阳性原因分析
酶联免疫检测结果假阳性原因分析标签:酶联免疫;检测;全自动仪器本站在使用全自动仪器检测血液标本后,大大提高了检测效率和精确性,降低了临床经输血传播疾病的危险。
但笔者在检测过程中发现,由于加样器钢针的污染、酶免分析仪清洗单元的堵孔以及试剂盒灵敏度的不同,会造成样本检测结果的假阳性,现报告如下。
1材料与方法1.1 仪器加样仪和酶免分析仪分别为Microlab STAR和Microlab FAME(瑞士HAMILTON 公司)。
1.2试剂HBsAg、TP检测采用北京万泰和厦门新创有限公司试剂;抗-HCV检测采用北京金豪和珠海丽珠有限公司试剂;抗-HIV检测采用珠海丽珠和荷兰生物梅里埃有限公司试剂。
均按试剂说明书严格操作。
1.3 标本与方法2007年1~10月的血站初复检标本由STAR同时加样,检测时使用1台FAME 处理系统。
对其中12例检测有阳性或弱阳性且存在于强阳性间隔2排后的同行孔位的标本,均采用手工和全自动仪器重新检测。
2结果初检结果中为假阳性的是1的A9、2的B8、3的D7、5的D9、6的E12、7的A8、8的E6、9的D1 1、10的A6和A9、11的H11、12的A7和A10;复检结果为假阳性的是4的H11、5的D9、6的E12、7的A8和A11、9的D11、10的A6、11的H11、12的A7和A10。
详见表1。
3讨论以上假阳性结果存在于强阳性间隔2排至5排后的同行孔位的现象,主要与仪器有关。
首先,Microlab STAR加样器是由3组加样钢针通过采用轮换每组钢针模式而实现样本的批处理,当STAR的一组加样钢针中的1根被强阳性标本污染后,经洗站洗涤、烘干,在随后吸取正常样本时发生了污染[1],造成表1中第5例的D9、第6例的E12、第7例的A8、第9 例的D11、第10例的A6、第11例的H11以及第12例的A7和A10初复检都是阳性。
针对永久性钢针的STAR 加样仪所引起的拖带现象应调整相关系数[1],加大洗站洗涤时间和洗涤量,把残留在加样钢针中的标本量降到最低水平;每周把加样钢针拆下用75%酒精浸泡,再用蒸馏水冲洗干净;每周用55℃左右的蒸馏水冲洗管道。
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨发表时间:2018-03-01T15:54:05.010Z 来源:《中国蒙医药》2017年第17期作者:贺安[导读] 为了提高梅毒检测的准确性,采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本,并进一步证实WB方法的结果。
郴州市第一人民医院湖南郴州 423000【摘要】目的:采用ELISA法检测梅毒抗体的假阳性结果,提高梅毒检测的准确性。
方法:酶联免疫吸附剂(ELISA)检测患者血清,通过梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和westernblot(WB)试验验证阳性标本,制定出消除假阳性结果的措施。
结果:ELISA发现313例阳性病例,193例为老年人(60岁以上),120例为中青年(20岁到60岁)。
在老年组,TPPA方法确诊186例阳性病例,假阳性率为3.63%(7/193)。
WB方法确认181例阳性,假阳性率为6.22%(12/193),WB法与TPPA法无统计学差异。
在中青年组,TPPA确认了117例阳性病例,假阳性率为2.5%(3/120)。
WB确认113阳性,假阳性率为5.83%(7/120),WB法与TPPA法无统计学差异。
结论:为了提高梅毒检测的准确性,采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本,并进一步证实WB方法的结果。
【关键词】酶联免疫吸附法;检测梅毒抗体假阳性;原因探析梅毒是梅毒螺旋体亚种之一,是一种古老的、性传播的疾病,但对全身各脏器有伤害,会造成人体组织损伤和病理改变,导致功能紊乱。
近年来,梅毒发病率呈上升趋势。
梅毒血清检测呈阳性,有些是梅毒感染,但有一部分没有诊断梅毒的依据。
据报道,梅毒血清学检测的假阳性率为3.08%。
梅毒检测结果正确与否是一个非常敏感的医学和社会问题,对患者及其家庭的稳定性有很大的影响。
梅毒的临床诊断主要根据临床症状和梅毒血清学试验。
梅毒螺旋体抗体血清学试验分为两大类型,一大类型为非特异性检测梅毒螺旋体抗体,如快速血浆反应素试验(RPR),甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等等,主要用于梅毒筛查和治疗效果;另一大类型为特异性检测梅毒螺旋体抗体,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和免疫印迹试验,荧光抗体的梅毒测试(FTA-ABS)吸收。
酶联免疫吸附试验检测750例梅毒抗体假阳性的原因研究
酶联免疫吸附试验检测750例梅毒抗体假阳性的原因研究【摘要】目的:分析酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因。
方法:选取前往我院行梅毒血清检查的梅毒患者750例作为观察组,并且将同期前往我院行梅毒血清检查的750例健康体检者设为对照组,两组均给予酶联免疫吸附试验检测,并给予PA确诊,比较两组的假阳性率。
结果:观察组假阳性率4.67%(35/750),对照组假阳性率0.95%(7/750)对比有明显差异(p<0.05)。
结论:酶联免疫吸附试验检测后再进行PA检测,能明显提高梅毒患者血清梅毒抗体检测的准确性,值得推广。
【关键词】酶联免疫吸附试验检测;梅毒抗体假阳性;原因临床常见性病传播疾病类型中,梅毒是发病率极高的一种,该病的病原体主要为梅毒螺旋体,并且临床表现呈多样化,病情十分复杂。
目前,我国梅毒患者人数越来越多,以及成为临床医学迫在眉睫需要解决的问题[1]。
临床诊断梅毒时主要依靠患者的临床症状及血清检查,而梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(ELISA)以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(PA)则为常用方法,其中PA已得到认可,并且成为美国疾控中心检测梅毒的标准方法。
ELISA因为操作难度低、结果准确性高以及成本低,当前在我国得到普遍的应用,但是不少临床研究报道指出,ELISA检测梅毒抗体会出现各种程度的假阳性,影响较为严重[2]。
为了分析ELISA检测梅毒抗体假阳性的原因,本文对前往我院进行梅毒血清检查的750例梅毒患者作出研究,现将结果报道如下。
1.资料与方法1.1一般资料选取2014年2月至2016年9月前往我院行梅毒血清检查的梅毒患者750例作为观察组,其中男350例,女400例;年龄21-79岁,平均年龄(41.28±4.24)岁。
同时选择同期前往我院行梅毒血清检查的750例健康体检者设为对照组,其中男352例,女398例;年龄20-78岁,平均年龄(41.47±4.35)岁。
梅毒血清学检验结果假阳性的相关因素分析
梅毒血清学检验结果假阳性的相关因素分析赵振【摘要】目的分析梅毒血清学检验结果假阳性的相关因素.方法收集本院2015年1月至2016年12月期间的梅毒血清学检验标本,所有标本均进行快速血浆反应素(RPR)环状卡片卡试验和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TRPA),对检验结果进行分析,探讨影响假阳性结果的相关因素.结果 2015年1月至2016年12月期间我院共采集梅毒血清学检验标本8554例,RPR检验的假阳性率0.33%,经分析假阳性结果受到血清标本、实验室操作、试剂、检验方法以及病理生理等因素的影响.结论梅毒血清学检验可受到多种因素的影响产生假阳性,在临床的检验过程中,要加强标本的质控管理,选择合理的检验方法,以提高检验结果的准确性.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2018(016)012【总页数】1页(P109)【关键词】梅毒血清学检验;假阳性;相关因素【作者】赵振【作者单位】大庆市疾病预防控制中心,黑龙江大庆 163711【正文语种】中文【中图分类】R446.11;R759.1梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病,主要通过性交传染,发病后其症状体征比较多样,可累全身各个脏器,与肺结核、麻风并列为世界第三大慢性传染病[1]。
在梅毒的筛查和诊断过程中,梅毒血清学检验是一项必不可少的手段,随着血清学检验方法的不断提升,梅毒的筛查率有所提高,但是仍会出现假阳性的结果,在本次的研究中将对影响梅毒血清学检验结果假阳性的相关因素进行分析,旨在提高梅毒血清学检验结果的准确性,结果如下。
1 资料与方法1.1 一般资料:选择我院2015年1月至2016年12月期间的梅毒血清筛查标本,排除相关资料不完整者,最终收集8554份标本资料,筛查标本年龄0~80岁,平均年龄(45.6±20.3)岁,其中女性4050例,男性4504例。
1.2 方法:所选择血液标本均为清晨空腹肘静脉血3 mL,经常规离心后收集上层血清,进行梅毒螺旋体检查和梅毒血清反应检查,分别使用血浆反应素(RPR)环装卡片试验和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA),所使用试剂均由上海荣盛生物制品有限公司提供,所有试剂操作均严格按照说明书要求操作。
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・
医学检 验 ・
新 生 儿 血 清 梅 毒 抗 体 酶 联 免 疫 吸 附试 验 检 测 假 阳性 结 果 分 析
学 分析 , 率 的 比较 采用 检 验 , P< O . 0 5为 差异 有
统 计学 意义 。
2 结 果
表 1 2组 假 阳性 率 对 比
2组假 阳性 率对 比见 表 1 。
3 讨
论
试验 ( EL I S A) , P A 已经 确定 为 美 国疾 病 预 防 控 制
中心 的 标 准 方 法 ] 。E L I S A 因其 操 作 方 便 , 结 果 较 为 准确 , 价 格低廉 , 在 国 内还 在 广 泛使 用 , 是 手术 前 和 输 血 梅 毒 筛 查 以 及 献 血 员 筛 查 的 理 想 方 法 ] 。在 长期 的 临 床 工 作 中 , 笔 者 发 现 无 临床 症 状 和 疾病 接触 史 者 可 出 现假 阳 性 , 因此 , 我 们 总结 了我 院 7 1 2例 新 生 儿 ( 0 ~1 8 d ) 梅 毒 血 清 检 查 结
溶血, 细 胞 内液 的各种 活性 酶及 具 有酶 样 活性 的物
1 . 2 仪 器 和试 剂 : 仪 器 为 TE C AN一 1 5 0 4全 自动 酶
免仪 , E L I S A和 P A 试 剂盒 购 自珠海 丽珠 试剂 股份
有 限 公 司和 E l 本 富士瑞 欧株 式会 社 。 1 . 3 方法 : 所有 试 验均 严 格按 试剂 盒 说 明书 操作 ,
一
1 . 1 一般 资 料 : 选取 2 0 1 4年 1月 至 6月在 我 院行
梅 毒 血清 检查 的新 生儿 3 5 6例 , 其 中男 性 1 8 3例 ,
女性 1 7 3例 , 出生 天 数 0 ~1 8 d 。选 取 同期 体 检儿 童患者 4 6 8名 为对 照 , 年龄 3 ~ 5岁 。2组 受检 测者 例数 、 性别 对 比差 异 均 无 统 计 学 意 义 ( P> 0 . 0 5 ),
用P A 进行 确诊 。
1 . 4 统计 学 处理 : 采用 S P S S 1 7 . 0软 件 进 行 统 计
张 龙 黄 淑伟 张朝 云 刘继 勇 武 彩虹
梅毒 是 临床 常见性 传 播疾 病 之 一 , 其病 原 体 为 梅 毒 螺旋 体 ( T r e p o n e ma P a l l i d u m), 又 叫苍 白螺 旋 体[ 1 3 。我 国 2 0世 纪 6 O年代 已基 本 消灭 梅 毒 , 但 近 年 来 梅毒 的发 病率 有上 升 趋 势[ 2 ] 。 临床 表 现 多样 , 病 情 复杂 , 已成为 重要 的 临床 医 学 问题 。血 清 梅 毒 抗 体 是诊 断梅 毒 的重要 参 考依 据 , 在 梅 毒 的诊 断 和 治疗 中具 有 着 重 要 的 临床 意义 [ 3 ] 。梅 毒 的诊 断 主 要 靠 临床 症状 和血 清检 查 , 常 见 的是 梅 毒螺 旋 体 明 胶 颗 粒凝 集试 验 ( P A)和梅 毒 螺旋体 酶 联免 疫 吸附
果,
3 . 1 生 物 因 素 与标 本 因素 : 丙 种 球 蛋 白是 从 健 康 人 血 中提取 的丙种 球蛋 白制 剂 , 含 有人 血 中存 在 的 多 种抗体 , 由于 E L I S A 试 剂包 被 的 抗 原 主 要 是 梅 毒 螺旋体 外 膜 的脂 蛋 白 4 7 0 0 0 、 1 7 0 0 0 、 1 5 0 0 0分 子, 用基 因重 组 表达 和 B O C 氨 基 固相 法 得 到 多 肽 抗原, 为 使 小 分子 多 肽 有 较 好 的 吸 附性 , 再 用 人 血 清 白蛋 白与 之连接 , 而 且合 成后 的多肽 一 般不 做 提 纯, 直 接 作 为试 剂 抗 原 使 用 , 抗 原 不 纯 和使 用 了人 血 清 白蛋 白 , 这 样 就 增 加 了 假 阳性 抗 原 位 点 的 可 能 。丙种 球 蛋 白中一 些 特 殊 蛋 白抗 体 可 能 会 跟 这 些假 阳性 抗 原 位 点 结 合 , 造 成 弱 阳性 反 应 。此 外 , 严重 感染 、 败血症 、 感染性肺炎等 , 细 菌进 人 血 液 ,
所 有受 检测 者 先 采 用 E L I S A法检测 , 阳性 者 再 采
质 可与底 物 非特异 性结 合 ; 血 红蛋 白具 有 类 过氧 化 物酶 的活 性 , 其 效 应 与 辣 根 过 氧化 物 酶 类 似 , 溶 血 后反 应孔 非 特 异 性 吸 附 血 红 蛋 白 , 洗 涤 时不 易 洗 去, 催 化底 物产 生 一 定 程 度 的显 色 , 使本 底 吸光 度 值升 高 而造 成 假 阳性n ] 。标 本 采 集 后及 分 离 血 清 时应 避免 细菌 污染 [ 2 ] , 一些 细菌体 内可 能 含有 内源 性辣 根过 氧化 物酶 , 会对 用 相应 酶 作标 记 的测 定 方 法产 生非 特异 性干 扰 , 造 成 弱 的假 阳性 结 果 。母 体
具 有 可 比性 。
些 细菌 体 内可能 含有 内源 性 辣根 过 氧 化物 酶 , 会
对 用相应 酶作 标记 的测 定方 法 产 生非 特 异性 干 扰 , 造 成弱 的假 阳性 结 果 。其 他 螺 旋 体 感 染 可 能 会 产 生类 似梅 毒螺 旋体 抗体 , 而 产生假 阳性 结果 。 由于新生 儿 的红 细胞膜 渗 透脆 性 大 , 标本 容 易