高密度脂蛋白胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰分析

高密度脂蛋白胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰分析
摘要】目的探讨全自动生化分析过程中HDL-C试剂对总胆汁酸测定的干扰。

方
法用罗氏P800生化分析系统分别进行各组测定：不同程序清洗试剂针后同时测
定HDL-C和TBA（实验组）与单独测定TBA（对照组），各实验组分别与对照组
比较TBA结果差异。

结果同时测定HDL-C和TBA，TBA结果（44.02±1.510
mmol/L）明显高于单独测定TBA结果（4.05±0.688 mmol/L），两组比较P﹤0.05，差异有统计学意义；加强清洗试剂针1后同时测定HDL-C和TBA，TBA结果
（12.71±1.7888 mmol/L）有明显下降，但与对照组比较，差异依然存在。

结
论 HDL-C试剂1对TBA测定有严重干扰，加强试剂针清洗未能完全消除干扰。

【关键词】高密度脂蛋白胆固醇总胆汁酸试剂针
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 循环酶法测定总
胆汁酸已普遍被应用于全自动生化分析仪，该方法具有高效、灵敏度高等优点，
但在日常样品检测时发现，总胆汁酸时常出现假阳性结果，多个生化项目同时测
定时TBA增高，单独测定TBA时结果正常，追踪发现高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂对总胆汁酸测定有干扰。

为具体研究HDL-C试剂对总胆汁酸测定结果的
干扰，本实验采用新鲜血清同时测定HDL-C和TBA与单独测定TBA的比较，以了
解HDL-C试剂对TBA测定的干扰原因。

1 资料与方法
1.1仪器与试剂
罗氏P800生化分析系统，双模块，TBA和HDL-C测定在同一模块，测定顺序为HDL-C→T BA；TBA循环酶法体液双试剂，广州科方生物技术有限公司生产，批号：131120； HDL-C酶比色法体液双试剂，批号：679020-01，酸性洗液，批
号:672354-01，罗氏诊断产品（上海）有限公司产品；碱性洗液（NaOH：
1.0mol/L，自配）；新鲜正常血清。

1.2实验方法
(1)用新鲜血清单独测定TBA 20次，取TBA平均值为实验对照。

(2)设置仪器程序在完成HDL-C测定后用碱性洗液清洗比色杯，用新鲜血清同
时测定HDL-C和TBA 20次，取TBA平均值。

(3)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂1后用碱性洗液(D1)250μl加强清洗试剂针1，再吸取TBA试剂1，然后重复上述(2)步骤。

(4)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂2后用碱性洗液(D1)250μl加强清洗试剂针2，再吸取TBA试剂2，然后重复上述(2)步骤。

(5)设置仪器程序，在加入HDL-C试剂1后用酸性洗液(D2)250μl加强清洗试剂针1，再吸取TBA试剂1，然后重复上述(2)步骤。

1.3统计分析
数据采用SPSS19.0软件进行分析，计量资料以-x±s表示，组间比较采用t检验，以P﹤0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.1单独测定TBA均值为4.05±0.688mmol/L.
2.2同时测定HDL-C和TBA，TBA均值为44.02±1.5109mmol/L, 与对照组比较
P﹤0.05，差异有统计学意义。

2.3设定不同程序加强清洗试剂针后测定HDL-C和TBA，TBA结果与对照组比
较P值见表1。

表1 不同程序清洗试剂针后HDL-C试剂对TBA测定的影响
3 讨论
全自动生化分析仪的试剂加样结构是，所有项目试剂1、试剂2各使用同一根试剂针吸取试剂，使用同一根搅拌棒，而不同项目间试剂针仅用去离子水常规清洗一次试剂针和搅拌棒，前一个测试项目的试剂可通过试剂针和搅拌棒带到后一个测试中，造成分析项目间交叉污染[1-2]。

环酶法测定TBA，样本中微量的胆汁酸在多次酶循环的过程中被放大，提高了测定的灵敏度，但微小的携带污染也在酶循环中被放大，使测定干扰相应增加。

未设加强试剂针清洗，同时测定HDL-C和TBA， TBA结果明显高于对照组，P﹤0.05，两组比较差异有统计学意义，说明HDL-C试剂对TBA测定有明显干扰。

表1结果表明，设置加强清洗试剂针1后，HDL-C试剂对TBA测定干扰有较大改善，而设置加强清洗试剂针2后，对消除干扰无意义，(2)组和(4)组结果比较P>0.05，差异无统计学意义，说明干扰TBA测定的携带污染主要来自HDL-C试剂1。

有文献报道，试剂中加速终点反应的辅助成分胆酸盐可以干扰TBA的测定，但胆酸盐在多数试剂说明书中未标明。

在设置使用碱性洗液或酸性洗液加强清洗试剂针1后，TBA测定的结果比未加强清洗试剂针1时均有明显下降，但与对照组比较P﹤0.05,差异依然存在，干扰未能完全消除。

这是因为搅拌棒和比色杯也可能携带有部分交叉污染，干扰TBA的测定，本实验生化分析系统无加强清洗搅拌棒的程序，无法消除搅拌棒携带的污染。

因此，在实际工作中，将HDL-C和TBA分设于不同的模块中或改变两者的测定顺序，避免HDL-C试剂对TBA测定的影响。

参考文献
[1] 于嘉屏.全自动生化分析仪及其试剂间化学污染对检测结果的影响[J].中华检验医学杂志，2007，30（11）：1301-1302.
[2] 尚晓私，胡晓丽.日立7600-020型全自动生化分析仪干扰、交叉污染的实验研究[J].中国医学装备，2007，4（11）：17-22.
【文章编号】2095-1752（2014）13-0393-02。