油菜叶片总蛋白质双向电泳样品制备方法的改进

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油菜叶片总蛋白质双向电泳样品制备方法的改进
油菜叶片总蛋白质双向电泳样品制备方法的改进
以甘蓝型油菜"扬油6号"的叶片为试验材料,分别采用传统的TCA/Acetone(三氯乙酸/丙酮沉淀法)和改进的PEG(polyethylene glycol)分步提取法提取叶片可溶性总蛋白,并利用条件一致的蛋白质双向电泳体系进行比较.TCA/Acetone法提取的蛋白质双向电泳图谱背景中由于高丰度"housekeeping"结构蛋白的存在,特别是叶片中参与光合作用的Rubisco蛋白的干扰,图谱中低丰度调控蛋白受到了高度覆盖和遮蔽现象,影响双向电泳图谱的质量.而PEG分步提取法提取的蛋白质样品,可以剔除Rubisco蛋白,使获得的双向电泳图谱清晰,无斑点间的遮蔽现象,为油菜叶片蛋白质组定量和定性分析提供了丰富的信息.
作者:孔芳蒋金金吴磊葛才林王幼平作者单位:扬州大学生物科学与技术学院,扬州,225009 刊名:生物技术通报PKU英文刊名:BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年,卷(期):2010 ""(5) 分类号:关键词:油菜叶片总蛋白双向电泳图谱。

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