肝素钠生产过程中对重金属的处理

肝素钠生产过程中对重金属的处理
丁建文　胡嘉俊
摘　要　目的:消除肝素钠产品生产中重金属离子。

方法:在肝素钠纯化前的处理结束后,加入EDTA或螯合树脂,分别测定样品中的重金属含量。

结果:产品中的重金属含量主要来自粗品肝素(60～90ppm),未经EDTA或螯合树脂处理的肝素钠样品,其重金属含量为47ppm,经过EDTA、EDTA加螯合树脂和螯合树脂处理的肝素钠样品,重金属含量分别为21、13和14ppm。

结论:EDTA和螯合树脂在肝素钠精品生产中均能去除肝素钠产品中的重金属,螯合树脂的效果比EDTA好。

关键词　肝素钠,重金属,螯合树脂
中图分类号　R927.12
Elimination of H eavy Metals in H eparin Sodium Processing
Ding Jianwen,Hu Jiajun
Changz hou Techpool B iochem Pharm acy Factory(Changz hou213161)
各国药典对注射级肝素钠的重金属含量要求小于30ppm。

我们在生产中发现如果不做任何处理,不能保证每批产品都合格。

针对这一情况,我们使用螯合树脂与ED TA做了一些尝试,现报道如下。

1　材　料
ED TA,分析纯,上海试剂一厂;D2412大孔氨基膦酸型螯合树脂,天津南开大学树脂厂。

肝素钠粗品,收购于江苏省如皋地区的数十个粗品点。

2　方法和结果
2.1　原辅料重金属的测定[1]
抽取5批来源不同的肝素钠粗品,测定重金属,结果分别为:≤30ppm、60～90ppm、≥120ppm、30～60ppm和30～60ppm。

投料完全溶解后再次取样并折算成固体测定为重金属60～90ppm。

辅料经送样测定,各种辅料的重金属含量均低于5ppm。

2.2　树脂预处理
精密称取D2412大孔氨基膦酸型螯合树脂10 g,先用5%盐酸在45℃～50℃漂洗1h,用纯水洗至中性,再用5%氢氧化钠在45℃～50℃漂洗1h,
作者单位　213161　常州,天普生物化学制药厂
收稿日期　2000206216　修回日期　2000207212用纯水洗至中性备用。

2.3　处理
取4份氧化后的肝素钠溶液各1L,分别加入ED TA1g,然后分别进行超滤,超滤完成后取其中两份各加入1.2倍酒精沉淀,冷冻干燥,测得重金属含量为21ppm。

另外两份超滤后各加入经预处理的上述树脂10g,调p H(10.0±0.2),温度45℃～50℃,搅拌1h,滤出树脂,各加入1.2倍酒精沉淀,冷冻干燥,测得重金属含量为13ppm。

取超滤工序结束后样品两份各1L,各加入10g经预处理树脂,调p H(10.0±0.2),温度45℃～50℃,搅拌1h,滤出树脂,酒沉,冻干,测定重金属结果为14ppm。

而未经任何处理的肝素钠粗品经测定其重金属含量为47ppm。

3　讨　论
从以上结果可以看出成品肝素中重金属主要来自粗品肝素,笔者所知的部分肝素钠粗品厂家生产所用的工具、器皿比较简单,多为铁制品,所用试剂基本为工业级,这可能引入大量重金属,就目前的肝素钠市场而言,想通过选择重金属含量较低的粗品的方法使产品达标是不太现实的。

常规的肝素纯化方法只是在除去其它杂质的同时也除去了部分重金属,这不能保证重金属合格,加入适量的ED TA或过量树脂与重金属螯合在一起,ED TA可以透过超
292中国生化药物杂志Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics2000年第21卷第6期
滤膜,与重金属一道除去,树脂与重金属则由过滤除去。

从测定结果看,螯合树脂的方法要优于ED TA,这两种方法联用与单独使用螯合树脂差不多。

从实际操作看,单独使用ED TA比较简单,而树脂会吸附肝素钠,相关的处理步骤比较多。

实际生产中应根据具体情况作相应调整。

参考文献
1　国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部).1995(附录Ⅶ)∶54
比色法测定胱氨酸片的含量
王万岭
摘　要　目的:用比色法快速测定胱氨酸的含量。

方法:胱氨酸可将Fe3+还原成Fe2+,后者可与邻二氮菲形成稳定的三元络合物,采用比色法直接测定胱氨酸含量。

结果:胱氨酸浓度在0.25～2.5μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率99.90%,RSD=0.58%。

结论:比色法简便快速,结果准确可靠,适于生产厂家质量控制。

关键词　胱氨酸,邻二氮菲,比色法
中图分类号　R927.2
Determination of Cystine T ablets by Colorimetry
Wang Wanling
X uz hou Instit ute f or D rug Cont rol(X uz hou221006)
胱氨酸系氨基酸类药,用于慢性肝炎、病后或产后继发性脱发等的治疗。

胱氨酸的含量测定,中国药典1998年增补本采用凯氏定氮法[1],其片剂含量测定用溴量法[2]。

本文依据胱氨酸能将Fe3+还原成Fe2+,后者与邻二氮菲形成稳定的三元络合物,在波长512nm处有最大吸收的原理[3,4],用比色法直接测定胱氨酸片含量,取得了比较理想的结果。

1　材　料
胱氨酸对照品(G B1296227),上海康达氨基酸厂;胱氨酸片,扬州第二制药厂,批号:990505、990607、990112。

4mmol/L硫酸铁铵溶液(试液A):取硫酸铁铵[FeN H4(SO4)2・12H2O]0.192g,加少量水溶解后,加盐酸1ml,再加水稀释至100ml,避光保存;
0.25%1,102邻二氮菲溶解(试液B):取邻二氮菲0.25g加温水适量使溶解,冷却,再加水至100ml,
作者单位　221006　徐州市药品检验所
收稿日期　2000203229　修回日期　2000205222避光保存。

UV2260型紫外分光光度计,日本岛津。

2　方法和结果
2.1　标准曲线绘制
精密称取胱氨酸对照品适量至50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,分别吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0ml置25ml量瓶中,加试液A6.0ml,试液B2.5ml,于沸水浴20 min后取出冷却至室温并加水稀释至刻度。

同法以试剂作空白对照,在400～600nm浓长范围内扫描,结果在511.8nm波长处有最大吸收,与文献报道[4]一致。

在波长511.8nm处,分别测定各浓度(C)样品的吸收度(A),进行线性回归得回归方程A=0.0486C-0.0245,r=0.9999(n=10)。

结果表明胱氨酸在0.25～2.5μg/ml浓度范围内,浓度与吸收度呈良好线性关系。

2.2　稳定性试验
取2.1项下的溶液在6h内每隔1h测定一次
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中国生化药物杂志Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics2000年第21卷第6期。