生工一班酶工程试题

一、选择
1.酶工程技术是（C）的技术过程
A.利用酶的催化作用将底物转化为产物
B.通过发酵生产和分离纯化获得所需酶
C.酶的生产与应用
D.酶在工业上的大规模应用
2.核酸类酶是（D）
A.催化RNA进行水解反应的一类酶
B.催化RNA进行剪接反应的一类酶
C.由RNA组成的一类酶
D.分子中起催化作用的主要成分是RNA的一类酶
3.RNA剪切酶是（B）
A.催化其他RNA分子进行反应的酶
B.催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶
C.催化本身RNA分子进行剪切反应的R酶
D.催化本身RNA分子进行剪接反应的R酶
4.酶的改性是指通过各种方法（A）的技术
A.改进酶的催化特性
B.改变酶的催化特性
C.提高酶的催化效率
D.提高酶的稳定性
5.酶的转换数是指（C）
A.酶催化底物转化为产物的数量
B.每个酶分子催化底物转化为产物的分子数
C.每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数
D.每摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数
6.酶的固定化常用的固定方式不包括（D）
A.吸附
B.包埋
C.连接
D.将酶加工成固体
7.通过酶工程生产的酶制剂中酶的化学本质是（B）
A.蛋白质
B.有机物
C.RNA
D. 核酸
8.当前生产酶制剂所需的酶主要的来自（C）
A.动物组织和器官
B.植物组织和器官
C.微生物
D.基因工程
二、名词解释
酶的提取：指在一定的条件下，用适当的溶剂或溶液处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。

酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。

固定化酶：通过物理的或化学的手段，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚在一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶充分发挥催化作用；曾称其为水不溶酶或固相酶。

包埋法：将酶或含酶菌体包埋在各种多孔载体中，使酶固定化的方法称为包埋法。

核酶（ribozyme）：具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂。

又称核酸类酶、酶RNA、核酶类酶RNA。

多药耐药性( MDR)：是指肿瘤细胞对一种化疗药物表现出耐药性，同时对其他许多结构不同、作用靶点亦不相同的化疗药物也表现出交叉耐药的现象，是通过化疗药物治疗肿瘤急需突破的一大难题。

三、简答
A.酶的主要提取方法有哪些？
1、盐溶液提取0.02～0.5mol/L的盐溶液用于提取在低浓度盐溶液中溶解度较大的酶
2、酸溶液提取pH2～6的水溶液用于提取在稀酸溶液中溶解度大，且稳定性较好的酶
3、碱溶液提取pH8～12的水溶液用于提取在稀碱溶液中溶解度大且稳定性较好的酶
4、有机溶剂提取可与水混溶的有机溶剂用于提取那些与脂质结合牢固或含有较多非极性基团的酶
B.酶的分离方法有哪些？
1、沉淀分离
2、离心分离
3、过滤与膜分离
4、层析分离
5、电泳分离
6、萃取分离
C.酶分子修饰的意义有哪些？
1、提高酶的活力
2、增强酶的稳定性
3、降低或消除酶的抗原性
4、研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响
D.酶定向进化的意义？
1、酶作为生物催化剂其专一性和高效性是一般催化剂所不能比拟的，但是天然酶的许多性质不适应工业生产的条件。

2、选择特殊环境，利用酶定向进化技术重新设计及改进酶分子的结构和性质，可以逐步接近和满足将酶催化用于工业生产的需要。

E.酶联免疫吸附分析（ELISA）原理是什么？
酶作为标记物质，使之和抗原（或抗体）结合形成酶与抗原（或抗体）复合物，然后再根据待测抗体（或抗原）与复合物专一且定量的结合关系，通过测定待测抗体（或抗原）结合的标记酶活力，从而计算出抗原或抗体的量。

F.脱氧核酶的催化特性有哪些？
1、稳定性高
2、催化作用高效
3、活性依赖金属离子
4、特异性强
5、容易获得
四、论述
A.试具体论述一下吸附层析分离的原理及方法。

吸附层析是利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中各组分分离的方法。

吸附层析通常采用柱型装置，将吸附剂装在吸附柱中，装置成吸附层析柱。

层析时，欲分离的混合溶液自柱顶加入，当样品液全部进入吸附层析柱后，再加入洗脱剂解吸洗脱。

在洗脱时，层析柱内不断发生解吸、吸附、再解吸、再吸附的过程。

B.试论述固定化酶的优缺点。

固定化酶的优点
1、极易将固定化酶与底物、产物分开；产物溶液中没有酶残留，简化了提纯工艺。

2、可以在较长时间内反复使用，有利于工艺的连续化、管道化。

3、酶反应过程可以严格控制，有利于工艺自动化和微电脑化。

4、在绝大多数情况下提高了酶的稳定性。

5、酶的使用效率提高，产物得率提高，产品质量有保障，成本低。

固定化酶的缺点
1、酶固定化时酶的活力有所损失。

同时也增加了固定化的成本，
使工厂开始投资大。

2、比较适应水溶性底物和小分子底物。

3、与完整细胞比较，不适于多酶反应，特别是需要辅因子的反
应，同时对胞内酶需经分离后才能固定化。

C.什么叫体外随机引发重组法(random-primingin vitrorecombination, RPR)
以单链DNA为模板，配合一套随机序列引物，先产生大量互补于模板不同位点的短DNA片段，由于碱基的错配和错误引发，这些短DNA片段中也会有少量的点突变，在随后的PCR反应中，它们互为引物进行合成，伴随组合，再组装成完整的基因长度。

反复进行上述过程，直到获得满意的进化酶性质。

D.简要介绍一下六大类酶
(1) 氧化还原酶（Oxidoreductase）：氧化-还原酶催化氧化-还原反应。

主要包括脱氢酶(dehydrogenase)和氧化酶(Oxidase)。

如乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。

(2)转移酶（Transferase）：转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。

例如，谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。

(3)水解酶（hydrolase）：水解酶催化底物的加水分解反应。

主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。

例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应。

(4)裂合酶（Lyase）：裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。

主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。

例如：延胡索酸水合酶催化的反应。

(5)异构酶（Isomerase）：异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。

例如：6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。

(6)合成酶（Ligase or Synthetase）：合成酶，又称为连接酶，能够催化C-C、C-O、
C-N 以及C-S 键的形成反应。

这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。