高效液相色谱法测定静血颗粒中芍药苷的含量

高效液相色谱法测定静血颗粒中芍药苷的含量
目的：应用高效液相色谱法测定静血颗粒中光芍药苷的含量。

方法：ODS 柱（6.0 ×150mm），流动相为乙腈-0.025ml/L磷酸溶液（1：4），流速为1ml/min，检测波长为230nm。

结果：线性范围为0.087μg～1.131μg，y = 1025963.67x –587.6，R? = 0.9999，回收率=96.5%，RSD=1.64%。

结论：该方法可用于静血颗粒中芍药苷含量的测定，且该方法简便、可靠、准确，可用于该直接的质量控制。

标签：高效液相色谱法；芍药苷；静血颗粒
靜血颗粒由煅牡蛎、白芍、生地、三七、阿胶、大青叶、蒲黄炭、乌贼骨、椿皮、香附组成，具有抗宫缩、收涩止血、清热、消炎、镇痛的功效。

用于治疗阴虚血热所致的月经过多，经期延长，阴道不规则出血等。

本实验采用白芍作为含量测定的成分，通过HPLC法测定白芍中芍药苷的含量，为建立该制剂科学合理的控制方法提供了依据。

1 仪器与试药
日本岛津LC-6A高效液相色谱仪、CR-3A记录仪、SPD-6A紫外可见检测器；芍药苷标准品（中国药品生物制品检定所）；其余试剂均为色谱纯。

2方法与结果
2.1测定条件色谱柱：ODS柱（6.0 ×150mm）；柱温：常温；流动相为乙腈-0.025ml/L磷酸溶液（即1.7ml磷酸用水稀释至1000ml，用三乙胺1.8ml调节至PH至
3.0±0.1）（1：4）；流速：1ml/min；检测波长为230nm；纸速0.5cm/min。

2.2供试品溶液的制备取供试品，研细，精密称取约0.5g，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声振荡提取1.5小时，取出，放冷，加水稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.3对照品溶的制备取在80℃干燥至恒重的芍药苷对照品约2.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4阴性对照液的制备按静血颗粒剂处方和工艺制备缺白芍的阴性对照颗粒剂，再按上述供试品溶液的制备方法制备阴性对照液。

2.5 线性关系考察精密吸取对照品溶液1，3，5，7，9，11，13μl，注入液相色谱仪中，按前述色谱条件测定。

以进样量（μg）为横坐标对色谱峰面积积分值A作线性回归，得到的回归方程为∶y = 102596
3.67x – 587.6，R? = 0.9999，结果表明，芍药苷进样量在0.087μg～1.131μg范围内与峰面积线性关系良好。

2.6空白干扰试验精密吸取对照品溶液，供试品溶液和阴性液各2μl注入液
相仪中，按前述色谱条件测定，绘制液相色谱图。

由色谱图可见，在与对照品色谱峰相应的位置，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无干扰。

2.7 精密度试验精密吸取同一供试液，连续进样5次，所得峰面积的RSD 为1.64%。

结果表明仪器的精密度良好。

2.8 稳定性试验取供试品溶液，在1～6小时内每隔1小时进行含量测定。

结果芍药苷含量的峰面积的RSD为1.0%。

结果表明，供试品溶液的化学性质比较稳定，在制备后6小时内进行测定，色谱峰面积无明显变化。

2.9重复性试验精密称取同一批号样品6份，按照供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，依法测定，峰面积的RSD为1.58%。

结果表明，供试品溶液的芍药苷含量测定重现性良好。

2.10加样回收率试验取已知准确含量的样品适量，精密称取5份，每份加入一定量已知含量的芍药苷对照品，按照供试品溶液的制备方法制备、进样，测定样品中的芍药苷含量，计算，结果见表1。

参考文献：
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