一测多评法同时测定连翘和连翘叶中多种成分

2.
4.
1 线性关系考察
精密吸取 2.
2 节中混合对照品溶液适量,加入到
2.
4.
4 重复性
精密称取同一批号的青 翘 样 品(
Q1)约 0.
25g,
41~50
42~53
58~47
5mL 棕色容量瓶中并用甲醇稀释溶解,即得一系列
不同浓度梯度 的 溶 液,分 别 编 号 为Ⅰ、
Ⅱ、
Ⅲ、Ⅳ、
Ⅴ、Ⅵ、
Ⅶ。按2.
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β
翘酯素 7 种成分的一测多评(
QAMS)方法。方法:采用 HPLC 法,以 连 翘 苷 为 内 参 物,分 别 建 立 连 翘 苷 与 其 余 6 种 成 分
的相对校正因子(
RCF),并计算含量,实现一测多评;同时采 用 外 标 法 测 定 该 7 种 成 分 的 含 量,比 较 两 种 方 法 的 差 异,验
通信作者,E
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7206@163.
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河南大学学报(医学版),
2024,
43(
2)
· 97 ·
DST190906
021,纯 度 ≥ 98% )、芦 丁 (批 号:
DST190901
017,纯 度 ≥99% )、连 翘 酯 苷 B(批 号:
学成分 与 连 翘 相 似,有 些 成 分 的 含 量 甚 至 高 于 连
翘
。文献
[
2
4]
,表 明 连 翘 叶 具 有 抗 菌、抗 氧 化、抗
[
5
8]
DST170210
050,纯 度 ≥98% )、松 脂 醇-D-葡 萄 糖
β
苷(批 号:
DST170210
024,纯 度 ≥98% )、连 翘 酯 素
炎、保肝和减肥等作用。近年来,由于各种病毒的爆
发,连翘用药量大,连翘叶可以作为连翘的补充。
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4.
6
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柱
mm×150 mm 5μm Ag
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-C18
4.
6
然后精密加入体积分数为 80% 的甲醇 25 mL,摇 匀
后称定重量,超声(
250 W,
40kHz)
40 mi
n,放冷,再
称定重量,用体积分数为 80% 的 甲 醇 补 足 减 失 的 重
叶。样品粉碎后过 80 目筛,置干燥器中备用。样品
2 方法与结果
2.
1 供试品溶液的制备
1 仪器与材料
精 密 称 取 青 翘 和 连 翘 叶 粉 末 约 0.
25g,老 翘 粉
1.
1 仪器
末约0.
50g(过80 目筛),置100mL 具塞锥形瓶中,
高效液相色谱仪(
Ag
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t1220);高效液相色谱
精密称取绿 原 酸 0.
40 mg、芦 丁 4.
20 mg、连 翘
酯苷 B0.
98mg、连翘酯苷 A26.
00mg、松脂醇-Dβ
1.
2 材料
连 翘 酯 苷 A (批 号:111810
202108,纯 度 ≥
98% )、连 翘 苷 (批 号:
110821
202117,纯 度 ≥98% )
均购自 中 国 食 品 药 品 鉴 定 研 究 院;绿 原 酸 (批 号:
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吡喃葡萄 糖 苷 1.
80 mg、连 翘 苷 8.
00 mg、连 翘 酯 素
2.
30 mg 置 10 mL 棕 色 容 量 瓶 中,加 甲 醇 至 刻 度 并
超声使其溶解,即得对照品储备液,至4 ℃ 冰箱中保
存备用。
表 1 从连翘主产地收集样品的详细信息
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
名称
青翘(
10μL;流动相:乙腈(
A)
0.
2% 冰醋
)
。梯度洗脱程序见表
。
酸水溶液(
种混合对照
B
2 7
品以及青翘、老翘、连翘叶的色谱图见图 1。
表 2 连翘样品的梯度洗脱条件
时间/mi
n
流动相 A/%
流动相 B/%
10~24
14~16
86~84
0~10
河南大学学报 医学版
24~31
31~41
10~14
16~22
连翘苷、连翘酯素)的 一 测 多 评 方 法,同 时 还 对 青 翘
信息见表 1。
[
12]
丁、连翘酯苷 B、连翘酯苷 A、松脂醇-D-葡萄糖苷、
β
和老翘进行了测定,为青翘、老翘和连翘叶的质量控
制提供依据,也为连翘叶的深度开发利用提供依据。
俊教授鉴 定 为 木 犀 科 植 物 连 翘 的 干 燥 果 实 和 干 燥
· 96 ·
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e 2024 43 2
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·药学研究·
一测多评法同时测定连翘和连翘叶中多种成分
田淑芳,韩旭,谭奥飞,王安,周园园,王梦夕,孟晨晨,程铁峰
河南大学 药学院,河南 开封 475004
摘要
河南大学学报 医学版
目的:建立同时测定连翘和连翘叶中绿原酸、芦 丁、连 翘 酯 苷 B、连 翘 酯 苷 A、松 脂 醇-D-葡 萄 糖 苷、连 翘 苷 和 连
β
RSD 分别为 0.
45% 、
0.
37% 、
0.
20% 、
0.
16% 、
0.
20% 、
0.
19% 、
0.
25% ,表明仪器精密度良好。
2.
4.
3 稳定性
精密称取同一批青翘 样 品(
Q1),按 2.
1节中方
法制备供试品溶液,于室温下 放 置 0、
2、
4、
8、
12、
24、
48h 后,按上述 色 谱 条 件 进 样 10μL,测 定 峰 面 积,
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同,可分为“青翘”和“老 翘”,具 有 清 热 解 毒、消 肿 散
结的功效 [1]。连翘 叶 为 连 翘 的 干 燥 叶,连 翘 叶 的 化
收稿日期:
2023
10
21
基金项目:国家中医药管理局中药标准化(
ZYBZH-Y-HEN19)
作者简介:田淑芳(
1992- ),女,硕士研究生。研究方向:中药质量控制与研究。
22~42
90~86
84~78
78~58
2.
4.
2 精密度
精密吸取同 一 浓 度 的 混 合 对 照 品 溶 液 10μL,
连续进 样 6 次,测 定 其 峰 面 积,计 算 RSD。 结 果 表
明,绿原酸、芦丁、连翘酯 苷 B、连 翘 酯 苷 A、松 脂 醇-
-D-吡喃葡 萄 糖 苷、连 翘 苷、连 翘 酯 素 的 峰 面 积 的
Q1)
青翘(
Q2)
青翘(
Q3)
青翘(
Q4)
青翘(
Q5)
老翘(
L1)
老翘(
L2)
老翘(
L3)
老翘(
L4)
连翘叶(
Y1)
连翘叶(
Y2)
连翘叶(
Y3)
连翘叶(
Y4)
采收日期
2020 年 7 月中旬
产地
山西运城
2020 年 8 月
陕西洛南高耀西塬村
2020 年 7 月底
河北涉县
2020 年 11 月中初
山东省青州市
献 [9-11]报道,而连翘叶的 QAMS 仅 测 定 了 连 翘 酯 苷
试剂均为分析纯。
从连翘主 产 地 共 收 集 13 批 样 品,其 中 青 翘 5
A 和连翘 苷 两 种 成 分 的 含 量 。 本 实 验 以 连 翘 叶
为研究对象,建立了 连 翘 叶 中 7 种 成 分 (绿 原 酸、芦
批、老翘 4 批、连翘 叶 4 批,经 河 南 大 学 药 学 院 袁 王
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证 QAMS 的准确性和可行性。结果:在不同实验条件下,
RCF 重 现 性 良 好,
13 批 样 品 中 该 7 种 成 分 的 一 测 多 评 值 和 外
标法测定值无显著差异。结论:QAMS 法可用于连翘和连翘叶的定量分析。
关键词
一测多评法;连翘;连翘叶;相对校正因子
中图分类号
R927.
2
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(批号:
DST191104
027,纯度 ≥98% )均 购 自 成 都 德
思特生物技术有限公司。乙腈、甲醇为色谱纯,其他
连翘和连翘叶的质量评价主要以外标法测定连
翘酯苷 A 和 连 翘 苷 的 含 量 为 主。 关 于 连 翘 用 一 测
多评法(QAMS)做 多 种 成 分 含 量 测 定 已 有 相 关 文
mm×150 mm,
5μm);超 声 波 清 洗 器 (
KQ300,昆
山市超声仪器 有 限 公 司);电 子 天 平 (
AX224ZH,奥
量,摇匀,过 0.
22μm 滤膜,取续滤液,即得。
2.
2 混合对照品溶液的制备
豪斯仪器有限公司);多 功 能 研 磨 机 (北 京 利 仁 科 技
股份有限公司)。
3 节中条件进样,每个浓度进样3 次,取平均
值。以对照品浓度(
Χ)为横坐标,色谱峰面 积(
Y)为
纵坐标,进 行 线 性 回 归,见 表 3。表 明 各 对 照 品 的 进
2020 年 8 月初
2020 年 9 月初
2019 年 12 月中旬
2019 年 11 月 10 日
2020 年 11 月初
2020 年 6—9 月份
2020 年 8 月份
2020 年 5 月 20 日
2020 年 6 月中旬
三门峡灵宝
中国江苏
山西省屯留县八泉村
山西晋城
三门峡灵宝
山西运城降县
新乡辉县
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