扩增质粒的方法
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扩增质粒的方法
扩增质粒(plasmid amplification)通常使用细菌体外扩增(bacterial in vitro amplification)或大肠杆菌腔体扩增(E. coli phage amplification)方法。
1. 细菌体外扩增
细菌体外扩增法是目前应用最广泛的DNA扩增方法之一,包括PCR,LAMP等技术。扩增质粒时,首先将目标DNA粘贴到特定的启动半导体材料上,再通过PCR等方法进行扩增。该方法的主要优点是高灵敏度、高特异性和快速扩增速度。但该方法也存在一些问题,如需特制启动材料、扩增过程易出现扩增偏差、扩增产物过长等。
2. 大肠杆菌腔体扩增
大肠杆菌腔体扩增法主要用于大规模扩增质粒,主要利用大肠杆菌感染噬菌体并利用噬菌体复制质粒进行扩增。该方法的优点是扩增效率高、简单易行、产量稳定,适用于大规模生产目的。但需要注意,该方法容易出现细菌感染现象,扩增产物的质量应该得到严格把控。