手足口病病原学监测方案

手足口病病原学监测方案
一、背景
手足口病（Hand ,Foot and Mouth Disease）是肠道病毒引起的常见传染病之一，多发生在5岁以下婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡及个别患者可并发心肌炎，肺水肿、无菌性脑膜炎等致命性并发症。

手足口病的病原种类繁多、分布广泛，传播途径多样，传染性强，传播机制极易实现。

2008年3月以来，安徽省阜阳市发生肠道病毒71型（EV71）引起的手足口病暴发流行，同时全国其他部分地区也出现不同程度的手足口病疫情。

卫生部于2008年5月2日将手足口病纳入丙类传染病管理。

根据卫生部《手足口病预防控制指南（2009版）》及《杭州市手足口病监测方案（2010版）》等文件要求，制定本监测方案。

二、监测内容
（一）病原学监测
（1）监测点设臵
（2）监测内容
3、实验室检测
样品采集粪便、咽、肛拭子标本为主，亦可按要求采集其它标本，需妥善保存标本运送至区疾控中心,要求每月22日前上送当月采集标本。

附表1 市医院手足口病病例临床标本采样／送检登记表
采样单位: 填表人：填报日期：联系方式：
2
附件1 手足口病标本采集及送检要求
一、采集标本的种类、保存和运输
（一）粪便标本。

采集病人发病3日内的粪便标本，用于病原检测。

粪便标本采集量5-8g/份，采集后立即放入无菌采便管内，外表贴上带有唯一识别号码的标签（注意用油性标识笔，下同），4℃暂存12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（二）咽拭子标本。

采集病人发病3日内的咽拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的15ml外螺旋盖采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

4℃暂存并在12小时内送达实验室，-20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于-70℃冰箱。

（三）血清标本。

各省（区、市）在手足口病流行年份中均应采集EV71 和CVA16感染的手足口病患儿的双份血清。

采集急性期（发病0-7d）和恢复期（发病14-30d）双份配对血清用于阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化，评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。

静脉采集3-5ml全血，臵于真空无菌采血管中，自凝后，分离血清，将血清移到2ml外螺旋的血清保存管中，外表贴上带有唯一识别号码的标签。

将血清臵于-20℃以下冰箱中冷冻保存。

（四）疱疹液。

在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液中分离到病毒即可确诊该病毒为病因，可同时采集多个疱疹作为一份标本。

先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒，然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液，迅速将棉签放入内装有3-5ml保存液（含5%牛血清维持液或生理盐水，推荐使用维持液）的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

所采集标本4℃暂存立即（12h内）送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。

（五）肛拭子标本。

采集病人发病3日内的肛拭子标本，用于病原检测。

用专用采样棉签，从患儿肛门轻轻插入，适度用力弧型左右擦拭数下，拔出后,迅速将棉签放入装有3－5ml保存液（含5%牛血清细胞维持液）的15ml外螺旋的采样管中，采样管外表贴上带有唯一
识别号码的标签。

在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖，并密封，以防干燥。

（六）尸检标本。

采集脑、肺和肠淋巴结等重要组织标本，每一采集部位分别使用单独的消毒器械。

每种组织应多部位取材，每部位应取2-3份约5-10g的组织，淋巴结2个，分别臵于15ml-50ml无菌的有外螺旋盖的冻存管中，采样管外表贴上带有唯一识别号码的标签。

（七）脑脊液标本。

出现神经系统症状的病例，可采集脑脊液标本，进行病毒分离或核酸检测。

采集时间为出现神经系统症状后3天内，采集量为1.0-2.0ml。

采集后立即装入无菌带垫圈的冻存管中，4℃暂存立即(12h内)送达实验室，－20℃以下低温冷冻保藏，需长期保存的标本存于－70℃冰箱。

但EV71感染神经系统时，很难在脑脊液中检测到EV71病原。

临床标本在运输和贮存过程中要避免反复冻融。

标本采集后要全程冷藏或冷冻保存和运输，12小时内送达实验室。

依照《人间传染的病原微生物名录》，肠道病毒或潜在含有肠道病毒的标本按B类包装，臵于冷藏保存盒内运输，尽量缩短运输时间。

可采用陆路或航空等多种运输方式，但在运输过程中应采取保护措施，避免强烈震动、重力挤压等现象。

在送到省、地、市级CDC实验室时，包装盒内应带冰且包装完整。

在上送标本的同时，需附带相关的《手足口病病例临床标本采样登记表》。

二、标本采集注意事项
在手足口病的实验室诊断中，从疱疹液或脑脊液中分离到病毒即可诊断该病毒为病因。

用于采集咽拭子的无菌拭子要放在标本保存液中，如含5%牛血清维持液。

用于分子生物学诊断的标本采集与病毒分离标本的采集方法一样。

为了保证检测结果的准确性和有效性，标本应在病例发病后尽早采集，尽快检测。

不能立即检测的标本应冷冻保存。

对于血清学诊断，急性期血清应该在发病后尽早采集，恢复期血清在发病两周后采集。

标本保存液的配臵见下表：
保存液
Eagle`s液(MEM) 80.5ml
3%L-谷氨酰胺200mM 1.0ml
胎牛血清 5.0ml
溶液 3.5ml
7.5%NaHCO
3
青、链霉素
10ml
（各10000U/ml）
附表2 手足口病个案调查表
报告卡编号：（填写该病例疾病监测信息系统的卡片ID号）
调查单位：_______
一、一般情况
患者姓名性别出生日期年月日
职业：散居儿童□ 幼托儿童□ 学生□ 其他；身高cm 体重kg
工作单位（就读学校或托幼机构）
家长姓名联系电话：
家庭同住人口数；家庭14岁以下儿童人数
家庭现住址市县（区）乡（镇、街办）村（居）号
户口类型：⑴常住人口⑵流动人口；现住地居住时间：年月
现住地类型：⑴农村⑵城乡结合部⑶城市
家庭人均居住面积 m2 是否有医保：（1）是（2）否（3）不详
二、发病及诊疗情况
1．发病日期年月日
2．是否就诊：（1）否，未就诊原因：①症状轻，无需就诊②就诊费用高③交通不便
④不信任医生⑤医疗设施环境差⑥自我处理
（2）是，初诊日期年月日；
初诊单位（省级/市级/县级/乡级/村级）初步诊断：________________
3．是否转诊：（1）否（2）是，转诊医院____转诊时间_____（多家医院时按转诊顺序填写）4．住院治疗：（1）否（2）是，如住院，则：所住医院____________________ 入院日期年月日，入院诊断
出院日期年月日，出院诊断
病程天
5．是否重症病例：否□；是□，开始时间年月日
6．是否使用抗生素：（1）是，名称使用时间年月日，
单次使用剂量，使用次数，给药途径（2）否（3）不清楚
7．是否使用抗病毒药：：（1）是，名称使用时间年月日，
单次使用剂量，使用次数，给药途径（2）否（3）不清楚
8．是否使用解热镇痛药：（1）是，名称使用时间年月日，
单次使用剂量，使用次数，给药途径（2）否（3）不清楚
9．是否使用激素类药物：：（1）是，名称使用时间年月日，
单次使用剂量，使用次数，给药途径（2）否（3）不清楚
10．预后：(1)痊愈(2)好转(3)未愈(4)死亡,死亡日期年月日；
11.后遗症:(1)有，；(2)无
三、临床情况
（一）临床症状
1．发热：无□；有□，最高温度℃，发热持续时间天
2．皮疹：无□；有□，主要部位：手□ 足□ 臀□ 肛周□ 膝□ 肘□其他部位
皮疹形态：斑丘疹□ 疱疹□ 丘疹□ 溃疡□其他
3．口腔炎：无□；有□，疱疹□ 溃疡□
4．呼吸系统：无□；有□，流涕□ 咳嗽□ 咽痛□其他_____________
5．消化系统：无□；有□，食欲差□ 恶心□ 呕吐□ 腹痛□ 腹泻□ 其他______ 6．循环系统：无□；有□，心律失常□面色苍白□ 口唇紫绀□ 四肢冰冷□ 全身冷汗□其他7．神经系统：无□；有□，头痛□ 喷射状呕吐□ 易激惹□ 精神差□ 嗜睡□ 昏迷□ 全身无力□ 肢体麻木□ 抽搐□ 肢体颤抖□
（二）体征
1．呼吸（最高）次/分，心律（最高）次/分，舒张压mm/Hg/，收缩压mm/Hg 2．颈项强直：有□ 无□ 巴氏症：有□ 无□
克氏症：有□ 无□ 布氏症：有□ 无□
3．腱反射：正常□ 亢进□ 减弱□
肌张力：正常□ 亢进□ 减弱□
（三）辅助检查
1．血象：无□；有□，WBC（×109/L），N（%），L（%），Hb (g/L)
2．脑脊液：无□；有□，压力（Pa），外观（正常/异常），细胞记数（×106/L）
蛋白（）糖含量（）
3．X线检查结果：无□；有□，表现为
4．心肌酶谱：无□；有□，肌钙蛋白酶肌红蛋白酶
5．血糖mmol/L；6.血氧分压7．血液PH值
8.血钾mmol/L ；9.血钠mmol/L ；10肌酐mmol/L ;11.BUN mmol/L （四）并发症
无□；有□，肺水肿□ 肺出血□ 心包炎□ 心肌炎□ 无菌性脑膜炎□ 脑干脑炎□ 脑膜脑炎□ AFP□ 其他
四、流行病学资料
（一）患者接触史（填写病例发病前7天内与手足口病、疱疹性咽峡炎、病毒脑、病毒心肌炎、肺
2. 临床诊断填写：手足口病、疱疹性咽峡炎、病毒脑、病毒心肌炎、肺水肿等。

（三）发病前7天内活动情况
1．是否参加/前往：⑴集体活动□⑵游乐场所□⑶商场□ ⑷公园□ ⑸游泳馆□
⑹儿童乐园□⑺其他
2．是否儿童预防接种：(1)有，疫苗名称接种时间（2）无（3）不详
3．医院/诊所：（1）有（2）无（3）不详
4．孩子近一周在家主要由谁照看：（1）父母（2）（外）祖父母（3）亲属（4）保姆（5）其他5.照看人文化程度：（1）文盲（2）小学（3）初中（4）高中/中专（5）大专及以上
家人是否到过医院：（1）有（2）无（3）不详
6. 近一周是否饮用生水：（1）有（2）无（3）不详
7. 近一周大小便是否使用卫生厕所：（1）每次大小便都用（2）只小便用（3）只大便用
（4）有时用（5）从不用
8.近一周患者饮食用具是否消毒：（1）每次都消毒（2）有时消毒（3）不消毒
9.消毒方式：（1）开水烫洗（2）蒸煮（3）微波炉（4）其他
（四）生活行为习惯
1.出生时体重 g
2.是否早产（1）否（2）是
3.胎次：第胎第产
4.分娩方式：(1)剖宫产(2)自然分娩
5.喂养方式： (1)母乳 (2)混合 (3)奶粉 (4)其它
6.有无营养不良：(1)有(2)无(3)不详
7.是否有先天性疾病：(1)否 (2)是，疾病名称_________________
8.大小便是否能自理：(1)是 (2)否
9.洗手习惯（或喂养者）：①只在饭前洗②只在便后洗③饭前便后都洗④饭前便后都不洗
10.室内是否有卫生厕所：(1)是（2）否
11.饮食用水：（1）自来水（2）井水（3）地表水（4）纯净水或矿泉水（5）其他水
调查人_______________ 调查日期：年月日。