非梗阻性无精子症与弱精子症患者精浆中miR-141-5p表达以及精液质量参数差异分析

DOI：10.19368/ki.2096-1782.2023.24.063
非梗阻性无精子症与弱精子症患者精浆中miR-141-5p表达以及精液质量参数差异分析
陈学磊1，黄健1，周奇1，沈强华2
1.苏州大学附属第一医院生殖医学中心，江苏苏州215006；
2.苏州市独墅湖医院生殖医学中心，江苏苏州215006
[摘要]目的探究非梗阻性无精子症、弱精子症患者精浆中的miR-141-5p表达差异性。

方法选取2021年2月—2023年6月苏州大学附属第一医院收治的86例非梗阻性无精症患者为非梗阻性无精子症组、94例弱精子症患者为弱精子症组以及同期选取100名健康人为对照组。

对比3组的精浆miR-141-5p表达差异性。

结果对比3组的精浆miR-141-5p表达水平（3.46±1.42）、（3.39±1.57）、（2.75±0.93），差异有统计学意义（F= 3.560，P<0.05）；而非梗阻性无精子症组与弱精子症组miR-141-5p对比，差异无统计学意义（P>0.05）。

3组
精液量对比，差异无统计学意义（P>0.05）；弱精子症组在精子总数、精子浓度、精子前向运动率均低于对照组，差异有统计学意义（P均<0.05）。

结论非梗阻性无精子症、弱精子症患者的精浆miR-141-5p水平的表达低于正常健康男性水平，但精液量差异较小。

[关键词]非梗阻性无精子症；弱精子症；精浆；miR-141-5p；表达差异
[中图分类号]R698.2 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782（2023）12(b)-0063-04
Differential Analysis of miR-141-5p Expression and Semen Quality Pa⁃rameters in Seminal Plasma of Patients with Non-obstructive Azoospermia and Asthenospermia
Chen Xuelei1, HUANG Jian1, ZHOU Qi1, SHEN Qianghua2
1.Reproductive Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou, Jiangsu Province, 215006 China;
2.Reproductive Medicine Center, Dushu Lake Hospital, Suzhou, Jiangsu Province, 215006 China
[Abstract] Objective To investigate the differences in miR-141-5p expression in seminal plasma of patients with non-obstructive azoospermia and asthenospermia. Methods A total of 86 patients with non-obstructive azoospermia (non-obstructive azoospermia group), 94 patients with asthenospermia (asthenospermia group) and 100 healthy people (control group) admitted to the First Affiliated Hospital of Soochow University from February 2021 to June 2023 were selected. The expression of miR-141-5p in the seminal plasma of the three groups was compared. Results The expres⁃sion levels of miR-141-5p in the seminal plasma of the three groups were (3.46±1.42), (3.39±1.57), (2.75±0.93), and the difference was statistically significant (F=3.560, P<0.05). There was no significant difference in miR-141-5p ex⁃pression between the non-obstructive azoospermia group and the asthenospermia group (P>0.05). There was no signifi⁃cant difference in semen volume among the three groups (P>0.05). The total sperm count, sperm concentration and progressive sperm motility in the asthenospermia group were lower than those in the control group, and the differences were statistically significant (all P<0.05). Conclusion The expression of seminal plasma miR-141-5p level in patients with non-obstructive azoospermia and asthenospermia was lower than the level of normal healthy men, but the differ⁃ence in semen volume was smaller.
[Key words] Non-obstructive azoospermia; Asthenospermia; Seminal plasma; miR-141-5p; Expression difference
无精子症是男性不育中最为严重的一种，按照有无梗阻可将其划分为梗阻性无精子症和非梗阻[作者简介] 陈学磊（1933-），男，硕士，住院医师，研究方向为男性不育症。

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SYSTEMS MEDICINE 系统医学
性无精子症，其中非梗阻性无精子症是指睾丸组织
本身没有制造精子的能力，以致精液检查时呈现没
有精子的状态；而弱精子症主要表现为精子的运动
能力较差[1-3]。

目前，国际上对男性不育症的诊断主要依赖于精液参数及睾丸活检诊断，但其灵敏
度、特异度较低，故探索男性不育的发生机制并寻
找无创的分子标记物，对提高临床治疗效果具有重
大意义[4-5]。

miRNA是一类具有转录后水平调控基因表达功能的小RNA分子，它可以自由地存在于体
液中，其在生殖遗传学及疾病病因研究中具有重要
作用[6-7]。

经查阅相关文献发现，精浆miR-141-5p 表达与精子的发生和形成有关[8]。

但因临床对于精浆miR-141-5p表达在非梗阻性无精症与弱精子症
中的参考文献较少，故本研究选取2021年2月—2023年6月苏州大学附属第一医院收治的86例非梗阻性无精子症患者、94例弱精子症患者以及同期
选取100名健康人为研究对象，探究精浆miR-141-5p表达在疾病中的差异性，为疾病治疗提供参考意义，现报道如下。

1 资料与方法
1.1一般资料
选取本院收治的86例非梗阻性无精子症患者
为非梗阻性无精子症组、94例弱精子症患者为弱精
子症组以及同期选取100名健康人为对照组。

其
中，非梗阻性无精子症组患者年龄25~39岁，平均
（32.69±2.73）岁；体质指数20~28 kg/m2，平均（26.52±0.67）kg/m2。

弱精子症患者患者年龄26~38岁，平均（32.31±2.64）岁；体质指数21~29 kg/m2，平均（26.75±0.09）kg/m2。

对照组患者年龄27~40岁，平均（32.46±2.57）岁；体质指数21~28 kg/m2，平均（26.14±0.61）kg/m2。

3组患者一般资料对比，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

本研究经本院医学伦理委员会审查批准。

1.2纳入与排除标准
纳入标准：①非梗阻性无精子症组、弱精子症
组的研究对象均符合临床疾病诊断标准[9]；②非梗阻性无精子症组、弱精子症组均在未采用避孕措施情况下2年内未能生育；③配偶经检查一切正常；
④患者对研究进展知情，并自愿签署知情同意书；
⑤临床资料完整。

排除标准：①存在严重的慢性疾病者；②存在
精神、语言障碍者；③存在泌尿系统感染现象者；④研究患者依从性较差者。

1.3方法
叮嘱患者样本采集前1周禁止性生活，并取精液放置于无菌取精杯中，静置30 min后进行以1 500 r/min离心10 min后取精浆2~3 mL，-80℃保存备用。

（1）常规精液质量检查：采用北昂S3-3精子分析仪进行精液质量检测，包括精子总数、精子浓度、精子前向运动率。

（2）精浆miR-141-5p表达水平检测：①取200 μL预处理的精浆样本，加入1 mL Trizol混匀，倒入装有氯仿、异丙醇和95%乙醇的离心管中，获得RNA；②使用cDNA合成试剂盒进行反转录，合成cDNA，加入SYBR PremixExTap，使用MA-6000实时荧光定量聚合酶链反应仪进行聚合酶链反应。

1.4观察指标
对比3组的精浆miR-141-5p表达水平；对比3组的精液质量参数。

1.5统计方法
采用SPSS 26.0统计学软件处理数据，精浆miR-141-5p表达水平、精液质量参数属于计量资料，符合正态分布，以（xˉ±s）表示，行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果
2.13组精浆miR-141-5p表达水平对比
非梗阻性无精子症组、弱精子症组的miR-141-5p表达水平均低于对照组，差异有统计学意义（P< 0.05）；而非梗阻性无精子症组与弱精子症组对比，差异无统计学意义（P>0.05）。

见表1。

2.23组精液质量参数对比
3组的精液量对比，差异无统计学意义（P> 0.05）；弱精子症组精子总数、精子浓度、精子向前运动率均低于对照组，差异有统计学意义（P均< 0.05）。

见表2。

表1　3组精浆miR-141-5p表达水平对比(xˉ±s)
组别
非梗阻性无精子症组（n=86）
弱精子症组（n=94）
对照组（n=100）
F值
P值
miR-141-5p
（3.46±1.42）*
（3.39±1.57）*
2.75±0.93
3.560
0.030
注：与对照组相比，*P<0.05。

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系统医学 SYSTEMS MEDICINE
3 讨论
无精子症、弱精子症均为男性不育的常见原
因，并多发于精索静脉曲张、生殖道感染等疾病
中，该类疾病的患者均存在精子总数、精子浓度、
精子活力等降低的情况，从而对患者及家庭造成
严重的影响[10-11]。

随着近年来医疗技术的不断发展，国内外学者及临床医师开始在分子水平上探
讨男性不育的问题，并取得了一些成果。

miR-141
作为miR-200家族的一员，在肿瘤增殖、迁移、侵
袭和耐药性等方面发挥着重要的作用，而miR-141-5p是miR-141-5家族的成员之一，能够参与调节细胞的周期和凋亡，并与精子发生发展具有
密切的联系[12-14]。

研究结果表明，对比非梗阻性无精子症组、弱
精子症组以及对照组的精浆miR-141-5p表达水平
（3.46±1.42）、（3.39±1.57）、（2.75±0.93），差异有统计
学意义（F=3.560，P<0.05）；而非梗阻性无精子症组
与弱精子症组miR-141-5p表达水平对比，差异无
统计学意义（P>0.05）。

3组精液量对比，差异无统
计学意义（P>0.05）；弱精子症组精子总数、精子浓
度、精子向前运动率均低于对照组（P均<0.05）。

其
说明了miR-141-5p在非梗阻性无精子症组、弱精
子症组与正常的男性人群进行对比具有差异性，患
者的精子量较正常水平减少。

该研究结果与王辉
等[3]的研究结果对比非梗阻性无精子症组、弱精子症组以及对照组的精浆miR-141-5p表达水平
（5.44±1.41）、（8.12±1.08）、（2.72±0.91），差异有统计
学意义（P<0.05）具有相似性，证实了少精子症、弱
精子症患者精浆中miR-141-5p显著下调，推测miR-141-5p可能参与非梗阻性无精子症、弱精子症的病理过程。

说明了miR-141-5p表达水平与非
梗阻性无精子症、弱精子症患者的精液质量存在紧
密联系，能够参与影响生精细胞的凋亡、精母细胞
的分裂等过程[15]。

然而，由于该研究纳入的病例数较少，需要进一步扩大样本量对miR-141-5p在精子发生过程中的作用进行深入探讨，从而为非梗阻性无精子症、弱精子症患者的诊治提供新的思路。

综上所述，非梗阻性无精子症、弱精子症患者
的精浆miR-141-5p水平的表达低于正常健康男性
水平，但精液量差异较小。

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表2　3组精液质量参数对比(xˉ±s)
组别
非梗阻性无精子症组（n=86）弱精子症组（n=94）
对照组（n=100）
F/t值
P值精液量（mL）
3.26±0.94
3.39±0.57
3.75±1.69
0.361
0.697
精子总数（×106个）
（40.29±1.96）*
52.96±10.73
11.271
<0.001
精子浓度（×106/mL）
（12.45±3.74）*
89.76±21.95
33.686
<0.001
精子前向运动率（%）
（43.36±9.37）*
51.48±11.52
5.352
<0.001
注：与对照组相比，*P<0.05。

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