迈瑞五分类血球仪5300.doc

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迈瑞五分类血球仪5300
血球迈瑞迈瑞五分类血球仪速度迈瑞三分类血球仪3000 迈瑞bc 一3os血球仪篇一:迈瑞血细胞分析仪BC-3000PLUS血细胞分析仪工作原理及故障分析摘要:本文主要介绍了BC-3000PLUS血细胞分析仪的工作原理和其常见的一些故障分析与处理方法。

前言目前我国大型医院在血常规检查时多采用五分类血球仪,但其机器及试剂成本过高,在医院大型体检和乡镇医院,三分类的血细胞分析仪任占有不可取代的地位,迈瑞BC-3000PLUS血细胞分析仪以其价格合理,性能稳定,重复性好等优势,成为市场上占有率最高的三分类血球仪。

现将其工作原理和使用过程中可能遇到的问题与分享,介绍如下。

工作原理:该仪器采用库尔特.贝克曼原理对血液中的A TOL YSER-4DL试剂中的表面活性剂可以溶解掉标本中的红细胞和血小板,并在白细胞膜上打出小孔;然后第二种试剂STROMA TOL YSER-4DS中的聚次甲基染料通过这个小孔进入白细胞中,与细胞核的核酸和细胞器结合,在经过波长633nm的激光照射,产生的荧光强度与细胞的核酸含量成正比。

STROMA TOL YSER -4DL试剂还具有与嗜酸性颗粒特异性结合的能力,可根据侧向散射光信号强度,将嗜酸性粒细胞从中性粒细胞中分离出来。

这样可以将中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞清楚的分离开。

在DIFF散射图当中可以得到白细胞的四个分群(LMNE)。

A TOL YSER –FB是一种酸性试剂,可将红细胞和血小板形成淡影化,将除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成裸核形态,然后采用前向散射光(FSC)信号和侧向散射光(SSC)信号使嗜碱性粒细胞从其它细胞中分离出来。

前向散射光与细胞体积测定相关,侧向散射光与裸核后的细胞结构复杂性有关。

在这个通道中可以获得白细胞总数和嗜碱性粒细胞的数量。

图4 Sysmex XE-2100白细胞分类散点图仪器在幼稚粒细胞分析上有特殊的IMI通道,在IMI检测通道中主要应用射频(RF)技术和直流电阻抗法(DC)。

这个测定通道根据幼稚细胞膜表面比成熟细胞膜表面含有脂质少的现象,在稀释液中加入硫化氨基酸(IM试剂),由于占位不同,结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多,对溶血剂有抵抗作用,对幼稚细胞具有保护作用。

当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解掉,而幼稚细胞不易被溶解破坏,可通过电阻法检测出来。

射频技术用于测量细胞核的大小和颗粒的多少,而直流电信号可反应出细胞体积的大小。

在有核红细胞计数上通过专门的有核红细胞检测程序和专用通道-NRBC通道,在处理标本时加入STROMA TOL YSER-NR专用试剂,它能使成熟红细胞溶解又可保持有核红细胞的核结构,同时也将白细胞保持完好。

STROMA TOL YSER-NR试剂中的聚次甲基荧光染料可渗透进
入白细胞膜内,将白细胞和有核红细胞的核染色。

通过检测荧光强度得到:白细胞核大荧光强度高,有核红细胞核小,荧光强度低,正常红细胞无细胞核和破碎,荧光强度极低。

根据荧光强度差和前向散射光信号测定的细胞体积差,可将有核红细胞从其他细胞群中区分出来。

图5 Sysmex XE-2100 的幼稚细胞通道和有核红细胞通道散点图该仪器在红细胞和血小板的计数和分析上仍然沿用了经典的电阻抗方法,在血红蛋白测定上采用了无剧毒物质的SLS溶血剂比色法。

很多时候,大家都会使用仪器,但是很少有人会仔细研究仪器。

掌握散点图,有助于大家掌握更多的血液信息,比如异淋,传单,血小板体积,幼稚细胞等等。

希望这些材料对大家的工作有所帮助。

篇三:五分类血球仪检测原理MEK7222/8222 白细胞分类的测定原理MEK-7222/8222,计数原理是plexity)、与激光直进方向相对垂直的方向的散射光(以下称为Granularity)为参数的散点图,可以对淋巴细胞、单核细胞、嗜中性白细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞进行分类。

另外,Size表示血细胞的大小、Complexity表示血细胞的复杂度、Granularity表示血细胞的颗粒的程度。

这种方法提供了三个散射图,MAIN散点图NE-EO散点图MO-BA散点图4、双鞘流(DHSS)分类计数,整个过程如下,血液标本进入LMNE混合池试剂混合形成混合溶液,孵育时间为12秒,这时RBC/PL T/BAS细胞已经被试剂破坏掉,在鞘流泵作用下进鞘流池进行双鞘流计数,首先经过红宝石孔进行电阻法计数,判断细胞体积,然后在200ms之内通过鞘流直径为42um的鞘流通道进行光吸收测定判断细胞内容物,整个计数时间为12秒。

这样形成分类散射图,并提供lym,gra,mon,eo,lic,aly的绝对值和百分比。

双鞘流计数是abx的专利技术,详细原理如下:根据上图可以看到,在进行双鞘流计数的时候,首先进行的是鞘流电阻计数,对细胞进行体积测定,然后再进行光吸收比率测定,对细胞内容物进行测定,最终将这个细胞在散射涂上标注出来,在双鞘流的上下两端分别加上恒流电源,以保证电阻法测量,孵育后的溶液在右侧鞘流泵的作用下经过6号口进入鞘流池从1号口流出,为了保证这些检测细胞能够正确的通过计数孔和鞘流通道,需要利用外来鞘流来进行矫正,这样,在5,7号口通过左侧鞘流泵注入稀释液来形成第一股鞘流,保护所测混合溶液能够直接通过计数孔并且保证其不发生偏移和扭曲,保证结果准确,混合溶液通过计数孔后,2,4口通过中间鞘流泵注入稀释液形成第二股鞘流,来保证吸光度测量的正常。

五、图形及其界标范围的设定:分类图形及界标设定上图是一个标准的分类散射图的样本,清晰的标明了各个细胞形态所处的范围和位置。

因此,PENTRA 的双鞘流可以理解为电阻法加光吸收
度测定,电阻法类似上面所讲的小角度激光测定体积,光吸收度测定就是测定形态,根据细胞染色原理,不同的白细胞染色后,细胞质和细胞核所形成的颜色不同,那么测定其通过去的光的波长可以知道其本身的颜色,因此这种方法一经问世,立即引起全世界范围的关注,特别是库尔特,库尔特认为这种方法如此简单成本和实现起来均好于库尔特本身的VCS技术,因此洽谈购买,但是ABX宁可自己实现起来结构不尽合理也不愿意出卖,因此就有了双方妥协的产物BACKMAN-COUL TER ACT 5DIFF这个OEM ABX的五分类产品。

在这一个电阻体积,一个吸光度测定的实现中,成功的分出了4项分群,LMNE既淋巴、单核、中性和嗜酸,并且还有两个附属分群,LIC和AL Y既巨大不成熟细胞和异常淋巴细胞,在仪器状态良好和试剂过关的情况下,这6项分群及提示可靠性极高;由于细胞染色后单核和嗜碱很难被区分,所以,就有了前面的差别溶解技术的EX的计数分类原理以XT1800/2000为例RBC/PL T计数采用电阻法。

LMNE和WBC/BASO均采用激光鞘流测定方式,下面解释这种方式,上图是测试原理图示,官方的解释如下:在小角度散射光测定中,可以得到细胞的体积(外径),作为散射光,并非从一点开始,而是细胞的全体,一定角度的散射光会重合,而另一部分没有重合的相对信号较弱,因此重合的散射光可以得到很强的信噪比,从而得到细胞体积的信息,经过反复试验,入射角度在1-6度为最佳,因为小细胞遇到的光散射小,大细胞散射光多,因此来区分的。

在大角度散射光测定中,光线照射在细胞核上发生散射,在一定角度下可以测的细胞核的信息,因此选定8-20度最佳角度可以得到细胞核信号的最佳信噪比,淋巴单核的细胞核较小,因此得到较少的散射光,中性粒细胞的细胞核比较大也比较多,因此得到的光散射也较多,因此来区分。

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