Quattro Micro中文操作手册

Quattro Micro 操作手册
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开启控制软件MassLynx
二、以设定溶液开始质谱调谐，确定质谱仪的状态
三、信号提取
四、查看文件
五、液相色谱操作程序
六、测试送检样品之标准操作程序
七、子离子扫描模式
八、质量校正
九、当长时间停电或移机必须关机时，关闭电源，和泄真空的程序
一、开启控制软件MassLynx：
1. 从桌面以鼠标左键双击MassLynx图示打开文件。

2. 开启后将自动开启的预设页面，如图示：
3. 单击质谱调谐图示（MS Tune）以开启质谱控制页面
4. 开启后质谱调谐页面如下：
5. 该画面即为调谐和信号提取的主要画面。

二、以设定溶液（setup solution）开始质谱调谐，确定质谱仪的状态
1. 在质谱调谐页面（MS Tune）选择扫描模式和扫描离子质量范围：选中全部四
个扫描功能，选择全扫描（MS Scan），设定扫描质量（Mass）为175.1、609.3、1080.8、2034.6，扫描范围（Span）为10（或5）。

2. 以注射针筒抽取设定溶液（setup solution），以直接进样（infusion）的方式连
接注射针和管路，让样品得以被注射针泵推送，直接进入质谱仪分析。

3. 在质谱调谐页面（MS Tune）以鼠标左键单击氮气（API GAS）和注射针的图
示，接着单击开始操作键（Press for Operate），直到原本红灯的图标显示为绿灯（此时该图标所显示的文字为Press for Standby）。

单击注射针图示则注射针泵会开始运作而推送样品；单击氮气会开始供应三方面的氮气：雾化气体（nebulizing gas）、去溶剂气体（desolvation gas）、气帘气体（cone gas），可以确保样品的气化；而单击操作键之后会开始供应电压，使得样品带电形成离子并使离子通过质谱仪分析。

4. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括号内的数值即为设定值：
LM Resolution 1（15.0）、HM Resolution 1（15.0）、Ion Energy 1（0.0）、Entrance（50）、Collision（2）、Exit（50）、LM Resolution 2（15.0）、HM Resolution 2（15.0）、Ion Energy 2（3.0），此为配合质谱扫描的参数。

在此条件下应可看到如图所示的信号，如果有信号而看到的分析峰太高或太低，可调整其放大倍率（Gain）以符合实际需求。

三、信号提取
1. 在质谱调谐页面（MS Tune）直接进样（infusion）时，如要进行信号采集（将
所得到的信号存盘），可以直接单击信号提取的图标，底下以采集设定溶液的信号为例子说明：
2. 单击信号采集图标会出现底下的对话框：
3. 替采集下来的信号文件命名并输入（Data File Name）。

4. 选择适当的扫描功能（Function）：如全扫描选择MS Scan，子离子扫描选择
Daughter Scan，在此选择MS Scan。

5. Data Format可选择Centroid、Continuum、MCA：Centroid的文件在一个质
量只选取一个代表性的点储存，得到的图谱是一根一根棒状的质谱图，优点是文件的数据量较小，较不占硬盘空间；Continuum的文件则每个质量都会储存多的资料点，可以描绘出分析峰的图像；MCA的数据类似Continuum，但会将所采集的每张图谱自动作平均。

6. 在扫描的质量范围（Masses(m/z)）方面，选择开始的质量（Start Mass）和结
束的质量（End Mass）。

7. 输入需要得采集时间（Run Duration），每个扫描所花的时间（Scan Time），
和扫描间距（Inter Scan Delay）。

8. 单击开始键（Start）即可开始采集信号。

四、查看色谱图
1. 要查看已经采集完的信号号，或是正在采集的信号，可以从两个地方来开始查
看：在MassLynx的预设页面，从色谱图（Chromatogram）或是从质谱图（Spectrum）。

色谱图是依据信号强度对时间的做图（即横轴为时间，纵轴为信号强度）；质谱图则为特定时间点的信号强度对质量做图（即横轴为质荷比，纵轴为该质荷比的信号强度）。

2. 以从色谱图来查看文件来说：单击Chromatogram后会出现以下的窗口，单击
图标以开启文件。

3. 选择欲打开的文件，如下图：
4. 打开后显示色谱图：
5. 使用鼠标右键单击其中一个时间，即可显示该时间所采集的质谱图，如欲平均
某一时段之质谱图，则以鼠标右键拉选一范围，则可将所拉选时间范围内所有质谱扫描的信号作平均：
6. 如此可得一张平均质谱图：
7. 以从质谱图来查看文件来说：单击Spectrum后会出现以下的窗口，单击图标
以打开文件。

8. 打开文件即可得到最后一个扫描的质谱图，如欲合数个扫描得到一张平均图
谱，则可以从处理图谱（Process）选取结合（combine）：
9. 在平均图谱（Average）的格子内输入所想要平均的图谱数目，如从第一个扫
描到第十个扫描的平均则输入「1:10」，如下图所示：
10. 如此也同样可以得到同样的平均图谱，如下图：
五、液相色谱的操作程序
1. 从主页面单击液相方法（Inlet Method）以打开液相色谱方法设定。

2. 开启后会直接显示进口状态页面（Status），指示器（Indicators）的OK和Ready
的灯号皆显示绿灯即表示液相色谱仪处于可以使用操作的状态。

3. 单击左侧inlet图示则可进入液相色谱的方法设定：在流动相B（Solvent B）
的后方设定其的百分比，如若流动相A和流动相B的比例为70:30则在流动相B后方输入30（%），在流速（Flow）的地方输入流速，单位为ml/min，一般可设定为0.3，在分析时间（Run Time）输入时间，单位为分钟。

设定完流速和流动相比例后，单击水龙头的图示，液相色谱即会依照所设定流动相混合比例和流速开始推送样品（停止流速也是单击同一个图示）。

六、测试送测样品之标准操作程序
1. 配接流动注入进样（Flow Injection Analysis, FIA）的管路：质谱仪上的手动注
射器（即六通阀）连接和液相色谱仪如下：
2. 质谱仪针对特定样品都有其特定的最佳化条件，但针对一般性的质谱分析来
说，以下的调谐参数可以用来测试分析大部分的样品。

大部分的参数一旦设定好之后不需要调整，调整对于信号的影响不大，然而对于部分样品而言，必须调整毛细管电压（Capillary）以增强其灵敏度：
3. 在质谱调谐页面（MS Tune）以鼠标左键单击氮气（API GAS），接着单击开
始操作键（Press for Operate），直到原本红灯的图标显示为绿灯（此时该图标所显示的文字为Press for Standby）。

4. 从预设页面单击进口方法（Inlet Method），再单击左侧进口图示，若流动相A
为水而流动相B为Acetonitrile，可在流动相B设定70（%），流速设为0.3，设定完成后单击水龙头图示。

5. 在质谱仪之手动注射器旁单击进样（Load）钮，以注射针抽取样品后注入样品，
样品槽的容量为10uL，宜注入三到六倍体积的样品以确保样品充满样品槽。

6. 在质谱调谐页面（MS Tune）直接单击信号采集的图标，在对话框中输入文件
名称、选择质谱扫描和Continuum模式，其它的依照信号采集章节依序输入其它设定，输入完毕单击开始键（Start）开始采集信号。

在质谱仪之手动注射器旁单击注入（inject）钮，此时流动相会流过loop环并将样品推送进入质谱分析。

7. 依照查看文件章节从色谱图来查看文件，以鼠标右键拉选色谱图中分析峰的部
分，即可得到此次分析样品的质谱图。

七、子离子扫描模式
1. 子离子扫描是针对质谱扫描（MS Scan）时所看到有兴趣的离子（称为母离子），
也就是分析样品进行碰撞得到其碎片离子（子离子）图谱，其目的是由碰撞该离子所产生的特征碎片离子，进一步的确认分析样品，因此，当质谱扫描发现母离子后才会进行子离子扫描。

2. 如同第二章和第三章的方法采集信号以获得质谱扫描图谱，确定分析样品的分
子量。

如图所示：
3. 在质谱调谐页面（MS Tune）选择子离子扫描（Daughter Scan），在设定质量
（Set）键入母离子的质量，适当的设定扫描质量（Mass）和扫描范围（Span），例如当母离子为1195时可设定扫描质量为750、扫描范围1100，则可以观测分子量从200到1300的范围，不但可以监测大范围的碎片离子，也可以同时监看母离子的状态。

4. 因为在第一段质谱选择单一质量母离子而在第二段扫描一段质量范围，所以在
质量分析器页面（Analyzer）应使用配合适合第二段质谱扫描的参数，也就是LM Resolution 1（15.0）、HM Resolution 1（15.0）、Ion Energy 1（3.0）、Entrance（2）、Collision（2）、Exit（2）、LM Resolution 2（15.0）、HM Resolution 2（15.0）、Ion Energy 2（0.0）。

5. 要进行子离子扫描，光只是调整参数还不够，必须要撞碎母离子产生碎片离子
才行，因此必须要加入碰撞气体和提高碰撞能量，单击碰撞气体并调整碰撞能量（Collision）直到产生足够的碎片离子。

6. 依照第三章进行采集信号，于设定参数时选取子离子扫描（Daughter Scan），
在 Set Mass 设定母离子质量，子离子扫描范围同样设定于 Start Mass 和End Mass ，设定完成后单击 Start 开始信号采集：
7. 依照查看文件的方式打开质谱图。

八、质量校正
1. 如同第二章的方式注入校正溶液，在此以碘化钠铯为例，在质谱调谐页面（MS
Tune）监看四个扫描质量172.8840、622.5667、1072.2494、1971.6149，确认信号良好及注射针内样品量充足。

2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括号内的数值即为设定值：
LM Resolution 1（15.0）、HM Resolution 1（15.0）、Ion Energy 1（0.5）、Entrance（50）、Collision（2）、Exit（50）、LM Resolution 2（15.0）、HM Resolution 2（15.0）、Ion Energy 2（0.5），此为第一段和第二段扫描模式妥协参数。

这是因为在进行质量校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式的缘故。

3. 在质谱调谐页面（MS Tune）选择校正仪器以开启的质量校正页面。

4. 开启的质量校正页面后，质量校正前请先确定目前仪器处于未校正的状态，所
有六种校正都为未校正（No Calibration），若不然则开启一个预设（Default.cal）或未校正（Uncal.cal）的文件。

5. 从下拉式选单选择适当的参考文件，如以碘化钠铯，从下拉式选单选择适当的
参考文件，如以碘化钠铯校正质量范围两千以内可选择 Naics2 。

确认后按开始键。

6. 按开始键后会跳出自动校正选单，请选中所有种类（Type），处理程序部分选
择信号采集和校正（Acquire & Calibrate），可选择打印报告（Print Report）。

勾选完成后单击采集参数（Acquisition Parameters），注意，在设定采集参数前请不要按OK键。

7. 设定采集参数：选择适当的校正质量范围，例如，我们校正大范围的全质量从
22校正到2000，其余的参数可以使用预设参数即可，设定完后按OK键。

8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时按此页面OK键就会开始进行
质量校正。

9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起来，从质量校正页面的文件（File）
选取另存新档（Save As）。

输入所欲储存之文件名称后按OK即可。

10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可，确认所有的扫描模式都已经被校正。

九、当长时间停电或是移机必须关机时，关闭电源，和泄真空的程序：
1. 泄真空：在质谱调谐页面（MS Tune）的选项（Options）选择泄真空（Vent）。

2. 待所有的真空泵停止运转后，关闭MassLynx软件。

3. 关闭Quattro Micro电源。

4. 关闭计算机电源。

当关机后要重新开启电源，和抽真空的程序和关机程序完全相反：
5. 开启计算机电源
6. 开启电源，此时仪器内建式计算机（Embedded PC, EPC）会自动开启并与计
算机主机（Host PC）联机。

7. 开启MassLynx软件，此时MassLynx将自动侦测是否有仪器，即Quattro Micro
联机上，有的话才可以控制仪器，不然，在监测不到仪器的状态下将维持只有软件单独使用的状态。

8. 在质谱调谐页面（MS Tune）的选项（Options）选择抽真空（Pump），当真
空够好的时候始可开始做实验。

9. 真空的好坏可以从三个地方来看，一是从真空计的读值判断，单击真空
（Vacuum）的图示：即显示真空计，如欲恢复原扫描分析峰设定，则单击其左侧分析峰（Peaks）图示
10. 从仪器诊断页面（diagnostics）看真空泵的转速，如转速为98到100之间跳
动即为正常，若如图所示为0实则表示仪器正处于完全泄真空尚未启动真空泵的状态。

11. 从仪器面版上察看，下图中所圈起来的灯号如为固定黄灯，则真空度为正常，
如为闪灯或为橘灯则表示真空度较差。