沙眼衣原体检测
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(3)衣原体抗原检测法:简称C-C 快速法。用试剂盒 检测,按试剂盒说明书规定进行操作,方便简单、快 速,特异性高。
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(4)免疫荧光法:将标本涂于玻片凹孔或圆圈中,自 然干燥后,丙酮或无水甲醛固定5min,漂洗,再干燥, 加入30μl荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体试剂 覆盖凹孔,玻片置湿盒中于室温或37℃下作用15min, 去掉多余试剂,用蒸馏水淋洗涂片,自然干燥,加一 滴封固液,再加盖玻片,置显微镜下检测。
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2.检测方法
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(1)直接涂片染色法:标本涂片,待自然干燥,甲醛 固定5~10s后,用当日配制的姬姆萨溶液染色1h,再 用95%乙醇淋洗涂片、干燥。
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(2)细胞培养法:将每份标本接种于3个培养瓶中, 置37℃吸附2h后,以维持液洗涤2~3次,最后加入生 长液,37℃培养3~4d,取出盖玻片,经姬姆萨染色 或直接荧光染色后镜检,查包涵体。
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(4)免疫荧光法:阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞 内的衣原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧 光。在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构, 也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。
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4.注意事项 (1)男性病人在采集标本前应禁尿至少1h,取材时 适度用力以确保取得足够的上皮细胞。 (2)女性病人取材的拭子不要碰到阴道壁,以免影响 结果。 (3)男性尿道的脓性分泌物不应用于培养。
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谢谢大家!
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3.结果判定
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(1)直接涂片染色法:油镜下阳性标本可在上皮细胞 质内找到1~3个或更多个呈蓝色、深蓝色或暗紫色的 包涵体。
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(2)细胞培养法:阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色, 姬姆萨染色呈红色。
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(3)衣原体抗原检测法:质控窗和结果窗均显示一条 蓝带为阳性结果,阴性则结果窗无变化。阳性结果结 合临床可确定沙眼衣原体感染,但阴性时也不能完全 排除,可以细胞培养法再予确定。
沙眼衣原体检测
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1.标本的采集 男性病人需用尿道拭子插入尿道2~4cm,稍用力旋转数周, 停留1~2s后拔出;女性病人取材时,先用鸭嘴器暴露宫颈 管1cm(柱状上皮或柱状上皮-鳞状上皮移行处),用力转动 数周并停留10~20s,让棉拭子充分吸附分泌物以取得足够 量的上皮细胞,拔出拭子。取样前应憋尿1h以上,以避免排 尿过程冲走衣原体感染的尿道柱状细胞。
(3)衣原体抗原检测法:简称C-C 快速法。用试剂盒 检测,按试剂盒说明书规定进行操作,方便简单、快 速,特异性高。
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(4)免疫荧光法:将标本涂于玻片凹孔或圆圈中,自 然干燥后,丙酮或无水甲醛固定5min,漂洗,再干燥, 加入30μl荧光素标记的抗沙眼衣原体单克隆抗体试剂 覆盖凹孔,玻片置湿盒中于室温或37℃下作用15min, 去掉多余试剂,用蒸馏水淋洗涂片,自然干燥,加一 滴封固液,再加盖玻片,置显微镜下检测。
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2.检测方法
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(1)直接涂片染色法:标本涂片,待自然干燥,甲醛 固定5~10s后,用当日配制的姬姆萨溶液染色1h,再 用95%乙醇淋洗涂片、干燥。
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(2)细胞培养法:将每份标本接种于3个培养瓶中, 置37℃吸附2h后,以维持液洗涤2~3次,最后加入生 长液,37℃培养3~4d,取出盖玻片,经姬姆萨染色 或直接荧光染色后镜检,查包涵体。
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(4)免疫荧光法:阳性标本在高倍镜下可见上皮细胞 内的衣原体颗粒,为单一、针尖大小、明亮的绿色荧 光。在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构, 也可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。
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4.注意事项 (1)男性病人在采集标本前应禁尿至少1h,取材时 适度用力以确保取得足够的上皮细胞。 (2)女性病人取材的拭子不要碰到阴道壁,以免影响 结果。 (3)男性尿道的脓性分泌物不应用于培养。
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谢谢大家!
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3.结果判定
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(1)直接涂片染色法:油镜下阳性标本可在上皮细胞 质内找到1~3个或更多个呈蓝色、深蓝色或暗紫色的 包涵体。
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(2)细胞培养法:阳性标本碘染色包涵体呈棕黑色, 姬姆萨染色呈红色。
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(3)衣原体抗原检测法:质控窗和结果窗均显示一条 蓝带为阳性结果,阴性则结果窗无变化。阳性结果结 合临床可确定沙眼衣原体感染,但阴性时也不能完全 排除,可以细胞培养法再予确定。
沙眼衣原体检测
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1.标本的采集 男性病人需用尿道拭子插入尿道2~4cm,稍用力旋转数周, 停留1~2s后拔出;女性病人取材时,先用鸭嘴器暴露宫颈 管1cm(柱状上皮或柱状上皮-鳞状上皮移行处),用力转动 数周并停留10~20s,让棉拭子充分吸附分泌物以取得足够 量的上皮细胞,拔出拭子。取样前应憋尿1h以上,以避免排 尿过程冲走衣原体感染的尿道柱状细胞。