细胞支原体污染怎么办?该怎么处理?

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甲:细胞里突然出现小黑点,问君能有几多愁?
乙:珍贵的细胞萎靡不振,扔了重买?相顾无言,惟有泪千行。

丙:细胞转染效率极低,实验结果遥遥无期,我的课题前功尽弃!但见泪恨湿,不知心恨谁!
细胞培养中,最怕的就是生物污染,支原体污染就是其中的一种。

支原体这种微小的微生物,是细胞培养中令人头疼的大问题。

支原体结构也比较简单,多数呈球形,没有细胞壁,只有三层结构的细胞膜,故具有较大的可变性。

支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者,会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。

支原体感染不易察觉,因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。

污染实验室培养细胞的支原体主要有八种,但还没有哪种检测方法能够单枪匹马把这八种支原体都检测出来。

支原体非常顽强,通常用于细胞培养的绝大多数抗生素都对其无效。

例如青霉素主要作用于细菌细胞壁,但支原体没有细胞壁因此就不受影响。

无懈可击的细胞培养技术始终是预防支原体感染的最佳方式,另外及时找出受到支原体感染的培养物也很重要,这样才能在感染扩散前快速采取有效措施。

支原体污染在细胞培养中实际上是比较常见的,可达30%甚至更高。

支原体污染时细胞表现为长得不好,也不死亡,同时,培养基又是清亮的,时间长达一周也没有什么变化,这时基本上可以判断出是支原体污染了。

定期检测
支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎,因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。

一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。

将定期支原体检测常规化坚持下去,是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。

预防支原体污染的建议:
细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:
控制环境污染;
严格实验操作;
细胞培养基和器材要保证无菌;
在细胞培养基中加入适量的抗生素。

支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有:抗生素处理
抗血清处理
抗生素加抗血清和补体联合处理
支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。

对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。

细胞已经被支原体污染了怎么办?怎么挽救?
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