实验室基本实验技术-标准差与标准误的计算-精密度与准确度

具体内容：
（1）顶部装载式（Sartorius MP8型）感量0.01克，最大 称量1600克。随机选取生长 一致的小麦苗4(?)株，洗净， 吸去附着水分，分别称重， 计算单株平均重和标准差 （X±SD） （结论？）。 （2） Sartorius-GMDH: 感量 0.0001克，最大称量160克。 准确称取一定量 （0.6585g??）的铁氰化钾, 配制100ml 0.02mol/L 铁氰 化钾溶液（铁氰化钾的 Mw=329.25）。
• •
（2）调零
• • (1)将拉杆推入最底部 关盖； 将拉杆推入最底部,关盖 将拉杆推入最底部 关盖； (2)按橙色“MODE”键，使“%T”处红灯 按橙色“ 按橙色 键 处红灯 亮； (3)按蓝色“%T”键，显示“0.0”。 按蓝色“ 按蓝色 键 显示“ 。
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（3）调“100%”： 100% ：
实验内容： 实验内容：用紫外吸收法测定细胞内物质的外渗
（1）取生长一致的植物叶片约1克，剪成0.5cm见 方的小块，在蒸馏水中洗涤两次，用滤纸吸干后 备用。 （2）各取0.2克放入4支试管中，其中2支放入冰箱 冷冻室内进行冰冻处理，另2支放在室温下作对照。 2 （3）约0.5小时左右后各加8ml 蒸馏水，轻轻摇匀， 再静置10分钟以上。 （4）取上清液，在264nm 波长下，用紫外/可见分 光光度计测定定外渗液的光密度值。 （5）计算并比较二者膜伤害的程度（结论？）。
实验内容
（1）以水为对照，取 1ml 0.02 mol/L铁氰 化钾溶液于100ml容 量瓶中，定容至 100ml。 （2）用9100型分光光 度计测定该铁氰化钾 溶液的吸收光谱，波 长在420nm，记录结 果。
（三）加液的精密度（或重现性）和准确度检验 加液的精密度（或重现性）
• • 实验原理： 实验原理： 在定量测定试验中，误差是绝对 存在的。它包括系统误差和偶然 误差，前者是由于取材误差、仪 器误差、试剂误差、操作误差等 一些经常性的原因所引起，它直 接影响实验结果的准确度；后者 则是由于一些偶然的外因所造成， 它影响实验结果的精密度（或重 现性）。 准确度是指测量值与真实值符合 的程度，它一般用误差来表示； 精密度是指几次重复测定结果之 间符合的程度，显示其重现性程 度，它用偏差来表示。 因此必须善于利用生物统计学的 有关原理和方法进行统计分析， 以分析和判断实验结果的可靠性 和正确性。实验中，每种处理至 少要设三次重复，定量测定数据 也要有三次重复，否则无法进行 统计分析。
差需要检测不同样品或同一样品的不 同处理之间是否具有显著性差异及其差异水平。 • 一般可用t检验（两者间比较）或多重比较（如最小显著 差数法，即LSD法或最小显著极差法，即LSR法，等等）。 各平均数经多重比较后，常采用标记字母法表示。在平均 数之间，凡有一个相同标记字母的即为差异不显著，凡有 不同标记字母的即为差异显著，其中小写字母a、b、c等 表示α=0.05显著水平，大写字母A、B、C等表示α=0.01 极显著水平。差异显著性也可用标“∗”号的方法表示， 凡达到α＝0.05水平（差异显著）的数据，在其右上角标 一个“∗”号，凡达到α＝0.01水平（差异极显著）的数据， 在其右上角标两个“∗”号，凡未达到α＝0.05水平的数据， 则不予标记。 • 现已有相应专业软件（如SAS、SPSS软件）可完成上述 过程。
（六）规范图表制作的一般要求
• 在科研论文或报告中，不论使用图还是表， 都应能简明、直观地反映作者想说明的问 题。其中图的简明直观性甚于表，但表中 可包括更多的数据内容。 • 现在的期刊、书籍中使用的图表都要求规 范，否则可能会在很大程度上影响文章的 顺利接受和发表。 。
实验内容
（1）用下列不同类型的移液器，取1ml 0.02mol/L的铁氰化 钾溶液至100ml容量瓶 中，混匀后定容。 （2）选择（二）2中铁氰化钾溶液的最大吸收波长(420 nm)， 用721型分光光度计测量其光密度，至少重复3次。 721 3 （3）根据测定结果分别计算其标准差和标准误，制成三线 表，并比较不同类型移液器加液的重现性和准确度（结 论？）。 • • • • 移液器类型：1、普通吸管； 移液器类型： 2、胖肚吸管； 3、加样器(俗称“枪”)； 4、加液器。
• 一、实验目的： 实验目的：
• 以加强植物科学研究 基本功的训练 • 培养科学研究的良好 作风
• 二、实验内容： 实验内容：
• 掌握植物科学常规精 密仪器的操作方法 • 一般的生物数据统计 及图表制作技术
具体实验内容
（一）电子显示天平的使用 （二）可见分光光度计的使用 加液的重现性（或精密度） （三）加液的重现性（或精密度）和准确度 检验 （四）pH计的使用 计的使用 （五）紫外分光光度计的使用 （六）科研论文中规范图表制作的一般要求
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补充资料
• 精密度（precision）和准确度 准确度（accuracy）不一样，回收 准确度 回收 准确度也不一样。 率（recovery）与准确度 准确度 • 以前曾经有把准确度 准确度叫做相对回收率 回收率的这种提法，但是现 准确度 回收率 在准确度 回收率 准确度和回收率 准确度 回收率是分开算的。 • 精密度通常包括批（batch）内和批间，主要是指重复处 理样品测定的重现性，以RSD考察。 重现性 （若确要区分二者：精密度通常指批（batch）内，重现 性通常指批间的，都要求5次以上的重复，以RSD考察） • 准确度 准确度是加标样品通过标准曲线回算的浓度与实际加标量 的偏差来考察。 • 回收率 回收率是以加标样品与同浓度的标准品的响应信号 （response，即峰面积）的比值来考察。
现代植物学研究技术
• 实验分组：周一至周五（五组）、人员固定、位 置固定。 • 内容：共12个实验，内容涉及植物学（组织切片、 组培）、植物生理学（光合、营养、激素、逆境 等）、细胞生物学，由多名教师执教。 • 考核：平时表现（务必本人签名）+实验报告（务 必写清组别、单独记分）。
实验一 实验室基础技术
• 供试型号： 供试型号： • 雷磁PHS-3C型酸度计（左） • 雷磁PHSJ-4型pH计（右）
• 实验内容： 实验内容：
• 用上述两种仪器测定两种未知 溶液的pH值，作记录，将结果 列于表中，并加以比较。
上海仪器厂754型
（五）紫外/可见分光 紫外/ 光度计的使用
北京瑞利仪器厂 UV-9100型
（一）电子显示天平的使用
（4）药品不能直接与天平称 • 使用规则 ： 盘接触，应选用专用称量纸或 （1）天平在使用前应调节底座螺丝 干净烧杯等。 使其保持水平，并不要随便移动 （5）称量后应及时把结果记 天平。 录在科研专用本子上，并关闭 （2）看清天平的最大称量，对待称 电源，清扫天平内外，将所用 物品最好先粗称，使其重量不要 药品放回原处。 超过最大称量，以免损坏天平。 至此，一次称量过程才算 （3）根据称量要求选择合适天平。 结束。
（1）开机准备
• (1)开启仪器右侧的电源开关 右侧),打开样 开启仪器右侧的电源开关( 开启仪器右侧的电源开关 打开样 品室盖预热10分钟以上 若测紫外光,将 分钟以上； 品室盖预热 分钟以上；若测紫外光 将 背面光源拉杆推至UV档 并打开氘灯开关 背面光源拉杆推至 档,并打开氘灯开关 (左侧); (2)调节仪器上方转盘，选择所需波长 调节仪器上方转盘， 调节仪器上方转盘 选择所需波长; (3)推开样品室盖， 将空白液及待测液依 推开样品室盖， 推开样品室盖 次插入1（ ）、2、 、 格中 格中。 次插入 （由近及远）、 、3、4格中。
以加强植物科学研究基本功的训练培养科学研究的良好作风掌握植物科学常规精密仪器的操作方法一般的生物数据统计及图表制作技术一电子显示天平的使用二可见分光光度计的使用三加液的重现性或精密度和准确度检验四ph计的使用五紫外分光光度计的使用六科研论文中规范图表制作的一般要求1天平在使用前应调节底座螺丝使其保持水平并不要随便移动天平
（4）测定： 测定：
• (1)再拉出样品座，使光路对准各个待测液； 再拉出样品座，使光路对准各个待测液； 再拉出样品座 • (2)仪器显示的数值即为待测液的 值,记录。 仪器显示的数值即为待测液的A 记录。 仪器显示的数值即为待测液的 记录
（5）结束： 结束：
(1)比色皿取出清洗，倒置于桌面（垫吸水纸） 凉 比色皿取出清洗，倒置于桌面（ 比色皿取出清洗 干后收于专用盒内。 干后收于专用盒内。 (2)推样品座至最底部 使光路对准挡光板。 推样品座至最底部,使光路对准挡光板 推样品座至最底部 使光路对准挡光板。 (3)关闭样品室盖，关掉电源(如使用氘灯,先关氘灯 关闭样品室盖，关掉电源 关闭样品室盖 后，再关电源)。 。 (4)作好使用记录。
简单的统计学计算公式如下：
(6) 标准误
其中（4）、（5）较常用。
• RSD即Relative Standard Deviation.叫相对标准偏差,也称 变异系数(CV). • RSD=标准差/平均值*100% 常用它表示精密度. . . .
标准偏差（SD）和标准误(SE)的区别联系
• 两者都是变异指标，但两者反 映的总体不同。 • 标准偏差反映的是个体观察值 间的变异， • 标准误反映的是样本均数之间 的变异（即样本均数的标准差， 是描述均数抽样分布的离散程 度及衡量均数抽样误差大小的 尺度。
（二）可见分光光度计的使用
• 使用方法： 使用方法： （6）测定时，应先检查比色皿是否 （1）使用本仪器前，使用者应首先了解本仪器的 配套和洁净，杯间误差应尽量小，比 基本结构和工作原理以及各操作旋钮的功能， 色杯装液一般为杯体积的3/4-4/5，过 在未接通电源之前，应检查电源线接线是否 多会溅出来，污染仪器，过少会影响 牢固，通地是否良好，各旋钮的位置是否正 测定数值。 确，同时检查仪器底部的放大器和单色器的 二个矽胶干燥筒，如受潮变色，应更换干燥 （7）如果大幅度改变测试波长时， 的蓝色矽胶或倒出原矽胶，烘干后再用。 在调整“0”和“100%”后稍等片刻 （2）在仪器尚未接通电源前，电表的指针必须位 （因钨灯在急剧改变亮度后需要一段 于“0”刻线上。 （3）将仪器的电源开关接通，打开比色皿暗厢盖。 热平衡时间），当指针稳定后重新调 整“0”和“100%”后即可工作。 选择需用的单色光波长，调节“0”电位器使 电表指“0”，然后将比色皿暗厢盖合上，比 色皿处于蒸馏水校正位置，使光电管受光， 调节“100%”电位器使电表指针到满刻度附 近，仪器预热20分钟左右。 （4）放大器灵敏度有5档，是逐步增加的，“1” 最低，其选择原则是保证能使空白档良好调 到“100%”的情况下尽可能采用灵敏度较低 档，这样仪器有更高的稳定性。所以，使用 时一般置“1”档。灵敏度不够时再逐级升高， 但改灵敏度后须按（3）重新调“0”和 “100%”。 （5）预热后，按（3）连续几次调整“0”和 “100%”，仪器即可进行测定工作。
如要称量植株幼苗的鲜重，选用 感量为0.0001克的电子天平，因 材料不断蒸发，很难称准，应选 感量大的，如感量为 0.01克的电 子天平；而制作标准曲线要称取 标准药品时则应选取感量较小的， 如感量为0.0001或感量为0.001克 的电子天平。
实验规范训练－ 实验规范训练－量程的选择
天平 烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格 烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格 －－
（四）pH计的使用 pH计的使用
• 适用于测定溶液pH的仪器类型较多，这里 pH 仅介绍雷磁25型酸度计和雷磁PHSJ-4型pH 计。
pH计使用三步骤： pH计使用三步骤： 计使用三步骤
安装电极
校正
测量
（4）注意事项 ）
• ①清洗电极后,不要用滤纸擦拭玻璃膜,而应 用滤纸吸干,避免损坏玻璃薄膜、防止交叉 污染,影响测量精度。 • ②电极不能用于强酸、强碱或其他腐蚀性 溶液,严禁在纯水或脱水性介质如无水乙醇、 重铬酸钾等中使用。
• (1)拉出样品座一格（适当回推，听咔哒 拉出样品座一格（适当回推， 拉出样品座一格 声），光路对准空白液； ），光路对准空白液 光路对准空白液； • (2)按“MODE”键，“ABS”处红灯亮，按 按 处红灯亮， 键 处红灯亮 蓝色“ 蓝色“100%T/ABS 0”键，显示 键 显示0.000（仪 （ 器已将空白液作为A=0，T=100%记忆）。 记忆）。 器已将空白液作为 ， 记忆