血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
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血型抗体)或在所有孔中分别加入50 l标准O型0.5-0.8%工细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体);
5)37°C孵育15分钟;
6 )离心5分钟(9rpm2分钟,15rpm3分钟);
7)肉眼观察结果。
结果判定:
阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存,如若长期放在4C冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
页码:第1页,共1页
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验,也可称之微柱凝胶血凝试验(MicrocolumnGel Heamagglutination As,aMGHA )。
试剂材料:
1、DTT (或2-Me)应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果:红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,为阴性反应。
反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面,为强阳性反应;复合物在胶中,为弱阳性反映;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞,液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部,液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本:血清标本必须充分去除纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍红细胞沉淀,呈假阳性反应。
2、父亲红细胞标本也可用与其同型的A型或B型红细胞代替。
3、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
4、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
操作步骤:
1)在试管中分别加入2 l母体血清和2 l DTT(或2-Me)应用液,然后置于37P水浴30-60
分钟。以充分破坏血清中IgM类抗体;
2)取6只干净试管,分别做好标记。将处理后的血清做倍比稀释;
3)将准备好的母体IgG抗体效价检测卡做好标记,依次将50 l倍比稀释血清分别加入标记卡中;
4)在所有孔中分别加入50 l父亲(或父亲同型)的0.5-0.8%工细胞悬液(ABO血型系统IgG
5)37°C孵育15分钟;
6 )离心5分钟(9rpm2分钟,15rpm3分钟);
7)肉眼观察结果。
结果判定:
阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存,如若长期放在4C冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
页码:第1页,共1页
反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验,也可称之微柱凝胶血凝试验(MicrocolumnGel Heamagglutination As,aMGHA )。
试剂材料:
1、DTT (或2-Me)应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果:红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的尖底部,为阴性反应。
反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面,为强阳性反应;复合物在胶中,为弱阳性反映;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞,液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部,液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本:血清标本必须充分去除纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍红细胞沉淀,呈假阳性反应。
2、父亲红细胞标本也可用与其同型的A型或B型红细胞代替。
3、每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
4、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
操作步骤:
1)在试管中分别加入2 l母体血清和2 l DTT(或2-Me)应用液,然后置于37P水浴30-60
分钟。以充分破坏血清中IgM类抗体;
2)取6只干净试管,分别做好标记。将处理后的血清做倍比稀释;
3)将准备好的母体IgG抗体效价检测卡做好标记,依次将50 l倍比稀释血清分别加入标记卡中;
4)在所有孔中分别加入50 l父亲(或父亲同型)的0.5-0.8%工细胞悬液(ABO血型系统IgG