病原微生物标本采集、运送
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病原微生物【2 】磨练标本采集.输送操作规程
精确的标本采集,输送,保存和处理对于微生物磨练工作质量至关重要,为了精确检出病原菌,避免漏检与误诊,临床医护人员和试验室工作人员应控制微生物标本的选择,采集,输送,保存及处理的一般原则.
一.标本采集的一般原则
1.早期采集
采集时光最好在病程早期,急性期,且必须在运用抗菌药物之前采集,确保病原菌的检出.
2.无菌操作
采集标本时应尽量削减或避免沾染部位邻近或皮肤黏膜正常菌群的污染,使病原菌与正常菌群混杂,造成临床误诊.采集的标本应存放在无菌容器内,容器不能运用消毒剂处理,标本中也不能添加防腐剂,以免下降病原菌的检出.
3.适量的标本
标本量过少可能导致假阴性成果.
4.恰当的采集办法
对于厌氧菌,需氧菌或兼性厌氧菌的采集办法是不同的,用于厌氧菌造就的标本应尽量用打针器采集抽取物,室温保存,不能冷藏和冷冻.
5.盛放标本的容器
采集标本应存放在无菌,防漏,应带有螺旋盖的容器内.
二.标本的输送
1.标本采集后立刻送检,如有延迟也应在2小时内送到试验室,不然会影响病原菌的检出,一般性的细菌造就标本若需延迟送检时,应置于4度冰箱保存,且不能超过
24小时.
2.临床标本最佳输送时光取决于标本的量,少量液体(小于1ml)或组织(小于1c m3)应在15~30分钟内送到试验室,较多量的标本置于输送造就基中可放12~24小时,厌氧造就标本原则上是床边接种,如延迟送检,需保消失厌氧输送造就基中,室温保存,不得超过24小时.
三.不同标本的采集,输送
(一)血液标本采集,输送
1.血造就指针征
当患者消失:发烧(大于38度)或低温(小于36度),寒噤,白细胞增多,皮肤黏膜出血,休克,多器官衰竭,血压下降,c反响蛋白升高及呼吸加速,血液病患者消失粒细胞削减,血小板削减等,具备上述一种或几种体征时,临床疑惑菌血症应采集血液标本进行血造就,对入院危重沾染患者应在未运用抗菌药物治疗前,实时做血造就.
2.对疑惑菌血症.真菌血症的患者,在斟酌运用抗菌药物之前,应立刻采集血造就标本.必须同时或距离短时光内采集2套以上血造就标本.成年患者:推举同时采集2-3套(不同部位)血造就标本(即双瓶双臂同时采集血造就标本),采血量每瓶不少于5ml;婴幼儿患者:推举同时采集2次(不同部位)血造就标本,采血量每瓶不少于2ml.(少于病人总血容量的1%).在采取血造就后的2—
5天内,无需反复采取血造就.两个破例:细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症.
3.血标本采集的量是影响检出率的最重要的身分.
检出率与采血量成比例增长,每增长1ml的血液,病原菌的检出率就会响应增
长.儿童患者血液中病原菌浓度较高,血造就量无需等同于成人.采用一对(需氧瓶+厌氧瓶)组合,比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌.肠杆菌科细菌和厌氧菌.采血量不能知足推举的量时,应起首知足需氧瓶的须要.
推举从外周静脉采集血液标本,不推举静脉留置导管,因其常伴有高污染率.假如必须从留置导管内采血,也应同时从外周静脉采集别的一个血造就标本以关心阳性成果的判读.
4.血标本采集的留意事项
在采血之前,血造就瓶的橡皮塞需运用75%酒精消毒并湿润.然后再进行穿刺部位的皮肤消毒.严厉按照“酒精.含碘消毒剂.酒精”的消毒步骤操作,并等待足够的消毒时光.严厉无菌操作,不许可在皮肤消毒后用手接触静脉,除非带有无菌手套.不推举采血和接种血造就瓶改换打针器针头;采集后的血造就瓶应在1小时之内送往试验室,血造就瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻.
(二)痰造就标本采集,输送
1.痰造就指征
上呼吸道沾染包括咽炎,喉炎,会咽炎等都可采集鼻,鼻咽,口咽拭子标本造就.下呼吸道沾染:凡是咳嗽,咳痰,痰呈脓性,粘稠或血性等都可采集痰标本.
2.标本的采集
采集前吩咐病人先用清水漱口,摘去牙托,因唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-
109/ml,去除表面的菌群.教导病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液.在抗生素运用前采集痰标本;标本采集后1~2h内送往试验室进行处理,采集标本进程中要有专业的医务人员指点;无痰可用3%~5%NaCl 5ml雾吸约5min导痰;也可用物理疗
法.体位引流.鼻导管抽吸等办法取痰.
3.正常的痰标本
低倍视野下鳞状上皮细胞小于25个,白细胞大于10个.假如低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个,白细胞小于10个应不做或仅在特别请求时做造就,如做造就,报告中注明“镜检成果表明标本口咽排泄物污染显著”.
4痰造就办法的局限性
多半引起肺炎的病原菌不能造就出,如病毒,军团菌,衣原体等.影响身分许多:如黏液包裹.定植菌污染.建议痰造就同时做血造就和痰涂片镜检.
5.留意事项
常规的痰造就需在2小时内送检,若疑惑嗜血杆菌,肺炎链球菌沾染时必需随留随送;标本中不能混入唾液与鼻咽排泄物等.
(三)尿造就标本采集,输送
1.尿造就指征
尿路沾染,肾结核,泌尿系结石,膀胱排空功效受损或前列腺增生等患者,消失尿频,尿急,尿痛等膀胱刺激症状,肉眼脓尿或血尿,尿常规检讨有白细胞或亚硝酸盐阳性,,不明原因的发烧,尿道口有脓性排泄物等症状,需采集尿造就标本送检.
2.标本的采集
干净中段尿液,吩咐患者用番笕水清洗,弃去开端流出的尿液,以冲刷尿道口的细菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿;导尿管尿液,留置导管尿液标本常经由过程专门的采样端口采集,不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液,采样端口用酒精消毒;必要时,可先夹住导尿管但不能超过30分钟;将打针器针头插入采样端口,抽吸出尿液;注入无菌杯或试管中.膀胱穿刺尿,无菌操作,用无菌打针器刺入膀胱
抽取5—
10ml尿液送检,重要用于厌氧菌的造就或留取标本艰苦的婴幼儿标本的采集,此法可避免尿液标本的污染.
3.标本的采集量
一般成人采集10-
15ml,婴幼儿不得少于1ml.诊断症状显著的病人(如尿急.尿频.尿痛),一份标本就已足够,治疗48-72小时后再采集第二份标本.对于症状不显著的病人,需采集2-3份标本.疑惑肾结核时,应持续3天采集晨尿.
4.室温都有利于病原菌和污染菌发展滋生,标本采集后立刻送检和接种,室温下存放不能超过2小时,(夏日保存时光应恰当缩短或冷藏),4-
8度冷藏保存时光也不能超过24小时,冷藏的尿液不能用于淋球菌的造就.
5.留意事项
必须无菌操作,采用带盖防渗漏的无菌杯收集,多次收集或24小时尿不能用作造就.集尿袋内的尿液不能用作造就.导尿管末尾的尿液也不能用于造就,很难避免没有尿道菌群污染.在运用抗菌药物前留取标本,尿液中不能加任何防腐剂或消毒剂,克制细菌的发展.
(四)粪便标本采集,输送
1.送检指征
当患者消失腹泻,大便天天大于或等于3次,粪便的性状平常,可为稀便,水样便,粘液便,脓血便或血便,伴有恶心,吐逆,食欲不振,发烧,腹痛及全身不适等,大便镜检白细胞大于等于5个每高倍视野,抗菌药物治疗后的腹泻等.
2.标本的采集办法,时光与量
尽可能在发病早期(急性期)或运用抗菌药物治疗之前,采集新颖的粪便,疑惑沙门菌沾染时,应在发病2周今后采集.天然排便法,排便后,挑取有脓血或粘液部位的大便,液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内;直肠拭子采集法,用于排便艰苦的患者或婴幼儿.一般用拭子采集大于2g的标本送检,若标本为水样,采集大于2ml 的标本于无菌容器中送检.
3.标本的输送与保存
标本采集后应尽快送检,室温前提下不能超过2小时,如不能实时送检可参加p h7.0磷酸盐甘油缓冲保存液中或专门的大便输送造就基中置4度冰箱保存,但不能超过24小时.高度疑惑霍乱弧菌沾染的标本必须相符特别标本的安全请求.
4.留意事项
最好在用药前,采集新颖的标本盛装在无菌容器内,立刻送检,进步阳性检测成果.厌氧菌的造就尽量避免与空气接触和正常的菌群污染.
(五)脓液及创伤沾染排泄物标本的采集及输送
1.送检指征
凡是当患者有外伤沾染,术后瘦语沾染,导管沾染,脐带残端沾染,有脓液和排泄物时,应采集标本造就.
2.标本的采集时光和办法
在运用抗生素前或停用药1—
2天今后,或运用下一次抗生素前采集,对脓肿性排泄物应先用心理盐水或75%的酒精冲洗溃疡表面渗出物,尽可能抽取脓液于无菌杯内送检.对于关闭性脓肿时,应无菌操作抽取脓液3—
10ml于无菌试管内或血造就瓶内送检,疑惑厌氧菌沾染时,应做床旁接种或注入厌
氧瓶内(3—10ml)送检,最佳办法是采集组织送检.
3.标本的输送
标本采集后应于2小时内送微生物试验室进行处理,若不能实时送检,需氧造就的标本除对情形迟钝的淋病奈瑟菌,脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌外,可保消失4度冰箱中,但保存时光不能超过24小时;厌氧造就时,需用厌氧瓶或厌氧袋在室温下保存,但不能超过24小时.
4.留意事项
尽可能在用抗生素前采集,若患者也用药,应在磨练单上注明抗菌药名,并鄙人次用药前采集;对于凋谢性的伤口,采集前应先除去表面污染菌,以防带入与沾染无关的皮肤定值菌.湿润结痂的标本一般不做造就,除非有渗出物.采集标本时应无菌操作.
(六)穿刺液标本的采集与输送
穿刺液重要包括脑脊液,胸腹水,心包液,胆汁,关节液及鞘膜液,在正常标本中,上述液体是无菌的,在消除污染的情形下,一旦检出细菌均视为病原菌.
在相干的部位有响应的临床症状时,应无菌操作采集响应的标本于无菌容器内送检,标本采集后应立刻送往试验室处理.脑脊液采集后应在15分钟内送到试验室,若不能,应室温保存,不得超过2小时,不能冷冻或冷藏留意事项:标本的采集严厉履行无菌操作,最好在用抗菌药物前采集.防止标本凝固,可事先在容器内参加抗凝剂,(脑脊液标本时不需加抗凝剂),也可直接参加血造就瓶内.。