2023-2024学年全国全部人教版高中生物单元测试(含答案解析)

2023-2024学年人教版全国高中生物单元测试
学校：__________ 班级：__________ 姓名：__________ 考号：__________
注意事项：
1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;
2．请将答案正确填写在答题卡上;
一、选择题（本大题共计15小题，每题3分，共计45分）
1.秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。

为分离分解纤维素的微生物菌种，实现
废物的资源化利用，研究人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑
选菌株”的实验流程。

下列叙述错误的是（）
A. 配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节pH
B. 选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源的培养基
C. 进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作
D. 挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃
【答案】A
【解析】A、配制培养基时，这样可以避免灭菌之后调pH时再造成杂菌污染；
B、为分离分解纤维素的微生物菌种，应用以纤维素为唯一碳源的选择培养基；
C、进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作；
D、挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃。

2.下列与土壤中尿素分解菌的分离与计数相关的叙述，正确的是（）
A. 可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染
B. 对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平板划线法进行接种
C. 统计尿素分解菌的数目时应该选择菌落数多的培养基进行计数
D. 尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH下降
【答案】A
【解析】解：A.该实验需要设置空白对照组，以检验培养基是否受到杂菌污染，A正确；
B.对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用稀释涂布平板法进行接种，B错误；
C.统计尿素分解菌的数目时，以菌落数在30~300以上的平板进行计数，求其平均值，
C错误；
D.尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，D
错误。

故选：A。

3.某同学计划用选择培养基筛选尿素分解菌，关于实验方案下列说法正确的是（）
A. 进行梯度稀释的时候每次吸取的菌液量是随意的
B. 从烧杯取出涂布器在火焰上灼烧后要放回烧杯中进行冷却
C. 选择培养基能允许特定种类微生物生长并抑制其他种类微生物生长
D. 涂布不同稀释倍数菌液的平板的培养时间应随菌液浓度的增大而增加
【答案】C
【解析】A、进行梯度稀释的时候每次吸取的菌液量是计算好的，A错误；
B、从烧杯取出涂布器在火焰上灼烧后不可放回烧杯中，避免引燃杯中酒精，B错误；
C、选择培养基是指在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其
他种类微生物生长的培养基，使用选择培
养基可以富集筛选目的微生物，C正确；
D、涂布不同稀释倍数菌液的平板的培养时间应该一致，D错误。

故选C.
4.用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌，属于二者的共同点的有几项（）
①可以用相同成分的培养基②都要对操作者双手，培养皿等进行灭菌③都要使用接种环进行接种④都需要在酒精灯火焰旁进行接种⑤都可以用来计数活
菌⑥都可以使用液体培养基
A. 1项
B. 2项
C. 3项
D. 4项
【答案】B
【解析】解：①平板划线法和稀释涂布平板法都可以用相同成分的固体培养基，①正确；
②平板划线法和稀释涂布平板法都要对操作者双手，培养皿等进行消毒，而不是灭菌，
②错误；
③平板划线法使用接种环进行接种，稀释涂布平板法使用涂布器进行接种，③错误；
④平板划线法和稀释涂布平板法在接种时都需要在酒精灯火焰旁进行接种，④正确；
⑤稀释涂布平板法可以用来计数活菌，平板划线法不能用于计数，⑤错误；
⑥平板划线法和稀释涂布平板法均是在固体培养基上使用的接种方法，⑥错误。

综上所述：正确的选项为①④。

故选：B。

5.下列说法正确的是（）
A. 绿萝的呼吸作用将有机物分解为无机物，实现了物质循环
B. 实验：“落叶是在土壤微生物作用下腐烂的吗？”中，对照组要放在60℃下恒温灭菌
1h，尽可能排除土壤微生物的作用
C. 预测种群数量的变化的主要依据是年龄组成
D. 稻田里杀灭害虫大大地提高了能量的利用率
【答案】C
【解析】解：A.物质循环指的是构成生物的元素在无机环境和生物之间进行循环，A错误；
B.实验组要放在60℃下恒温灭菌1h，尽可能排除土壤微生物的作用，B错误；
C.预测种群数量的变化的主要依据是年龄组成，C正确；
D.稻田里杀灭害虫不能明显提高能量的利用率，D错误。

故选：C。

6.下列叙述不正确的是（）
A. 培养细菌时需将培养基的温度调至15~18℃
B. 在进行稀释涂布平板法操作时，首先要将菌液进行一系列的梯度稀释
C. 倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置
D. 大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法
【答案】A
【解析】解：A.不同细菌适宜生存的温度不同，因此需要根据不同的细菌调节不同的
温度，A错误；
B.在进行稀释涂布平板法操作时，首先要将菌液进行一系列的梯度稀释，B正确；
C.倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，防止冷凝水污染培养基，C正确；
D.大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法，D正确。

故选：A。

7.在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于（）
A. 空白对照
B. 标准对照
C. 相互对照
D. 条件对照
【答案】D
【解析】乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。

8.科学家利用营养缺陷型菌株甲、乙，在缺乏甲、乙所需营养物质的培养基上培养，结果如下图所示。

下列叙述错误的是（）
A. 各组实验所用的培养基均需灭菌处理
B. 菌株甲、乙混合后能在上述培养基上生长
C. 推测菌株甲、乙通过接触发生了遗传物质重新组合
D. U型管实验证明菌株甲、乙释放的代谢产物形成了互补
【答案】D
【解析】解：A.微生物培养需要给培养基灭菌，A正确。

B.如图：菌株甲、乙混合后能在上述培养基上长成菌落，B正确。

C.混合培养长成了菌落，但在U型管不能生长，说明可能是菌株甲、乙通过接触发生了遗传物质重新组合，C正确。

D.在U型管不能生长，但代谢产物可以通过滤板，说明菌株甲、乙释放的代谢产物没有形成互补，D错误。

故选：D。

9.微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。

如图是大肠杆菌分离和培养过程中的部分操作和实验结果示意图。

请据图判断下列说法，错误的是（）
A. 制备固体培养基的基本步骤包括计算、称量、溶化、调pH、灭菌和倒平板，其中图甲所示的操作是倒平板
B. 将未接种的培养基在恒温箱中放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生是接种前需要检测培养基是否被污染的常用方法
C. 图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是a→b→g→c→e→f→d→h
D. 图乙中错误的操作是c，其中c的正确操作是在酒精灯旁进行
【答案】C
【解析】A项，制备固体培养基的基本步骤包括计算、称量、溶化、调pH、灭菌和倒平板，倒平板操作如图甲所示，A正确；
B项，接种前检测培养基是否被污染的常用方法是将未接种的培养基在恒温箱中放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，B正确；
C项，图乙是平板划线法接种操作示意图，a为灼烧接种环进行灭菌b、g、f为在酒精灯火焰附近取一环菌液，e是塞上棉塞，c、d、h是连续平板划线及细菌生长的结果，正确的操作顺序是a→b→g→f→e→c→d→h，C错误；
D项，图乙中c划线时需在酒精灯附近进行，D正确。

故选C。

10.关于“纤维素分解菌的筛选”实验，下列说法错误的是（）
A. 运用刚果红染色法时加入NaCl溶液的作用是洗去与纤维素结合不牢的刚果红
B. 用以纤维素为唯一氮源的固体培养基对纤维素分解菌进行选择培养
C. 运用刚果红染色法时以菌落周围透明圈的大小来确定纤维素分解菌分解纤维素的能力
D. 纤维素酶的测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定【答案】B
【解析】解：A.刚果红染色法之所以加氯化钠是为了把结合不牢的刚果红洗去，刚果红是结合到培养基的多糖底物，但分解纤维素的细菌可以产纤维素酶，能分解这个多糖底物成为寡糖，这样刚果红就不能结合上去了，氯化钠就可以使结合不牢的刚果红洗去，A正确。

B.要分离能分解纤维素的细菌常采用以纤维素为唯一碳源，然后在培养基上加入刚果红染液，会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，B错误。

C.在刚果红培养基上，在分解纤维素的菌的周围会出现透明圈，透明圈越大，说明纤维素分解菌的纤维素酶活性或合成纤维素酶的能力越强，C正确。

D.筛选分离得到的纤维素分解菌还需要进行发酵产纤维素酶的实验，测定的方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的葡萄糖量进行定量的测定，D正确。

故选：B。

11.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的（）
A. 将土壤用无菌水稀释，制备10^-3sim 1O^-5土壤稀释液
B. 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
【答案】C
【解析】解：A、将土壤用无菌水稀释，然后经过系列稀释，制备10^-3\sim 1O^-5土壤稀释液；A正确．
B、将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上；B正确．
C 、用加入酚红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌，刚果红指示剂是用于分离分解纤维素的菌；C错误．
D、分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，氨气能使酚红指示剂显红色，从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株；D正确．
故应选C．
12.据报道，在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。

食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动，在该餐馆采集样本，并进行培养，检测鉴定，最终发现该餐馆使用的筷子未经严格消毒，大肠杆菌等多种细菌数量严重超标。

据此判断，工作人员选用的培养基按功能分，应属于（）
A. 选择培养基
B. 液体培养基
C. 固体培养基
D. 鉴别培养基
【答案】D
【解析】解：培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基，本题所用培养基主要用于判定被污染程度，属于鉴别培养基。

故选：D。

13.下列与土壤中尿素分解菌的分离与计数相关的叙述，正确的是（）
A. 可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染
B. 对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用平板划线法进行接种
C. 统计尿素分解菌的数目时应该选择菌落数多的培养基进行计数
D. 尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH下降
【答案】A
【解析】A、可以通过设置空白对照组来检验培养基是否受到了杂菌的污染，A正确；
B、对样品中的尿素分解菌进行计数时可采用吸水涂布平板法和显微镜计数法，平板划线法不能用于菌落计数，B错误；
C、统计尿素分解菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，C错误；
D、尿素分解菌合成的脲酶将尿素分解成氨后会使培养基pH上升，D错误。

14.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10^6培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．A同学的结果产生原因不可能有（）
A. 由于土样不同
B. 由于培养基污染
C. 由于操作失误
D. 没有设置对照
【答案】D
【解析】解：根据以上分析已知A同学的实验结果可能是培养基污染造成的，还可能
是A同学实验操作过程中污染造成的，也可能是与其他同学所取土壤样品不同造成的，关键是设法排除影响结果的因素．实验应该设计对照组，但是实验结果的出现并不是
没有设置对照组导致的．
故选：D．
15.如图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。

下列有关叙述错误的是（）
A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源
B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
C. ①﹣③过程是梯度稀释，稀释溶剂是无菌水
D. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈
【答案】C
【解析】A、尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解，从而能利用尿素，其它微生物不能，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，A正确；
B、对培养基的灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，B正确；
C、①﹣③过程是梯度稀释，该过程用来选择培养尿素分解菌，因此稀释溶剂应该是
含有尿素为唯一氮源的培养基，而不是无菌水，C错误；
D、分解尿素的菌能将尿素转化成氨气，使培养基碱性增强，PH升高，酚红指示剂会
变红，因此可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈来鉴定，D正确。

二、多选题（本大题共计5小题，每题3分，共计15分）
16.屠宰场废弃血污不经过处理直接排放，会对环境造成污染。

传统的处理方法有填埋
法和焚烧法等。

填埋法易造成地表环境、地下水资源污染。

焚烧法处理也会造成大气
污染，且废弃物中所含的蛋白资源不能得到有效利用。

研究人员以屠宰场血污堆积土
壤为分离基质，利用血平板培养基（添加了动物血液），分离出了高效降血红蛋白的菌株，并初步用于降解废弃血液、生产氨基酸液态肥料。

下列叙述正确的是（）
A. 上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平板划线法
B. 对分离纯化得到的菌株培养后进行计数，只能采用稀释涂布平板法
C. 血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高
D. 利用该菌株降解废弃血液可在保护环境的同时实现资源的可持续利用
【答案】A, C, D
【解析】解：A.分析题图可知，上述菌株分离纯化过程中用到了稀释涂布平板法和平
板划线法，A正确。

B.对分离纯化得到的菌株培养后进行计数，可以采用稀释涂布平板法和显微计数法等，B错误。

C.血平板培养基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往较高，C正确。

D.废弃血液被菌种降解可以制作化肥，实现资源的可持续利用，D正确。

故选：ACD。

17.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐，释放的能量可用于将二氧化
碳和水转化成有机物。

下图为从土壤中分离硝化细菌菌株的过程示意图。

有关说法正
确的是（）
A. Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基
B. 制作该固体培养基时应先灭菌再调pH
C. 要筛选硝化细菌，Ⅰ号培养基的成分应不含C源、N源
D. 接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养
【答案】A, D
【解析】解：A.Ⅰ号培养基在功能上属于选择培养基，可通过选择培养基增加硝化细
菌的浓度，A正确。

B.为了防止杂菌污染，配置培养基时，应该先调节pH，然后灭菌，B错误。

C.硝化细菌可将氨或铵盐氧化为易被植物吸收的硝酸盐，所以要筛选硝化细菌，Ⅰ号
培养基中应含N源，使硝化细菌利用氧化N盐获得化学能合成有机物，C错误。

D.接种后的Ⅱ号培养基在恒温箱中通常需要倒置培养，平板倒置的目的是防止皿盖上
的水珠落入培养基对其造成污染，而且可以使培养基表面的水分更好的挥发，D正确。

故选：AD。

18.某种物质X（一种含有C、H、O、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只
有某些细菌能降解X。

研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解X的
细菌菌株。

实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和X，乙的组
分为无机盐、水、X和Y。

下列相关叙述中正确的是（）
A. 甲、乙培养基均属于选择培养基，乙培养基组分中的Y物质是琼脂
B. 若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源
C. 步骤⑤的筛选过程中，各培养瓶中的X溶液的浓度不同
D. 步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高，某菌株对X的降解量可能下降
【答案】A, B, D
【解析】解：A.甲、乙培养基均以X为唯一碳源和氮源，属于选择培养基，其中乙培
养基为固体培养基，因此其组分中的Y物质是琼脂，A正确；
B.若要筛选高效降解X的细菌菌株，甲、乙培养基中X是唯一的碳源和氮源，B正确；
C.步骤⑤的筛选过程中，各培养瓶中的X溶液的浓度要相同，C错误；
D.步骤⑤的筛选过程中，若培养基中的X浓度过高时，可能会导致细菌细胞失水过多
而失
活，因此对X的降解量可能下降，D正确。

故选：ABD。

19.高通量筛选是获得高性能微生物菌种的重要途径。

其生产流程简图如下，下列说法
错误的是（）
A. 对出发菌株的选育也可以借助于基因工程等技术实现
B. 将配置好的培养基倒人锥形瓶中，宜采用干热灭菌法进行灭菌
C. 图中的单菌落一定是微生物繁殖形成的纯培养物
D. 多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测
【答案】B, C
【解析】解：A.对出发菌株的选育可以借助于基因工程等技术实现，A正确。

B.将配置好的培养基倒人锥形瓶中，宜采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，B错误。

C.涂平板时，可能不同种的细菌会重合在一起，形成的单菌落，不属于纯培养物，C错误。

D.多孔板上要对菌体进行单克隆的识别和挑选、微生物及其代谢物的分析和检测，D
正确。

故选：BC。

20.在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。

平板划
线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。

下列说法不正确的是（）
A. 两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B. 用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所得数据往往比实际数据偏大
C. 通常对接种室用紫外线照射30min后，再适量喷洒石炭酸等消毒液来增强消毒效果
D. 接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，但两种处理方法不同【答案】B, C
【解析】A、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，保证培养物的纯度；
B、因为当两个或多个细胞连在一起时，因此用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，B错误；
C、通常对接种室用紫外线照射30min，C错误；
D、接种环可用灼烧灭菌，D正确。

三、解答题（本大题共计5小题，每题10分，共计50分）
21.（1）土壤中的有些细菌能分解尿素，是因为其能合成________________。

21.（2）分离尿素分解菌时，需要配制以____________为唯一氮源的培养基。

21.（3）选取10g土样后进行一系列稀释，分别吸取0.1mL的 10^4、 10^5、 10^6倍
稀释的菌液在灭菌板上进行_______________接种，采用该种接种方法的目的是
_______________________________________。

该实验过程中，还设置了一个空白平板，
空白平板可起___________作用。

实验结果显示： 10^6倍稀释的菌液对应平板上的菌
落数为123、119、130，则每克土样中的活菌数为________个。

21.（4）为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在该培养基中加入酚红指
示剂，根据颜色是否变_________来鉴定。

【答案】（1）脲酶
【解析】解：（1）土壤中的有些细菌能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。

【答案】（2）尿素
【解析】（2）分解尿素的细菌都能合成脲酶，因此可以选用以尿素为唯一氮源的选择
培养基来分离细菌，这样就尽可能的使培养基中只含有尿素这一种含氮化合物，有利
于对这种细菌的筛选。

【答案】（3）涂布, 将聚集的细菌分散成单个细胞，从而获得单个的菌落, 对照, 1.24×\ 10^9
【解析】（3）吸取不同浓度梯度的菌液在灭菌板上进行涂布接种，采用该种接种方法
的目的是将聚集的细菌分散成单个细胞，从而获得单个的菌落。

实验过程中的空白平
板起对照作用。

根据公式：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C为某一稀释度下
平板上生长的平均菌落数，V为涂布平板是所用的稀释液的体积（mL），M为稀释倍数。

计算可得每克土样中的活菌数为1.24× 10^9个。

【答案】（4）红
【解析】（4）在该培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红色，可以初步鉴定该种细
菌能够分解尿素。

22.（1）为了获得酿造甘蔗醋的高产菌株，以自然发酵的甘蔗渣为材料进行筛选。

首
先配制醋酸菌选择培养基：将适量的葡萄糖、 KH_2PO_4、 MgSO_4溶解并定容，调节pH，再高压蒸汽灭菌，经________后加入3%体积的无水乙醇。

然后将10g自然发酵的甘蔗渣加入选择培养基，震荡培养24h。

用________将少量上述培养液涂布到含
CaCO_3的分离培养基上，在30℃培养48h。

再挑取分离培养基上具有
________________的单菌落若干，分别接种到与分离培养基成分相同的________培养
基上培养24h后，置于4℃冰箱中保存。

22.（2）优良产酸菌种筛选。

将冰箱保存的菌种分别接入选择培养基，培养一段时间后，取合适接种量的菌液在30℃、150r/min条件下震荡培养。

持续培养至培养液中醋
酸浓度不再上升，或者培养液中________含量达到最低时，发酵结束。

筛选得到的优
良菌种除了产酸量高外，还应有________________________________（答出2点即可）等特点。

22.（3）制醋过程中，可将甘蔗渣制作成固定化介质，经________后用于发酵。

其固
定化方法为________。

22.（二）斑马鱼是一种模式动物，体外受精发育，胚胎透明、便于观察，可用于水质
监测，基因功能分析以及药物毒性与安全性评价等。

（1）由于人类活动产生的生活污水日益增多，大量未经处理的污水直接排入河流、湖
泊会引起水体________，导致藻类大量繁殖形成水华。

取水样喂养斑马鱼，可用斑马
鱼每周的体重和死亡率等指标监测水体污染程度。

22.（2）为了研究某基因在斑马鱼血管发育过程中的分子调控机制，用DNA连接酶将
该基因连接到质粒载体形成________________，导入到大肠杆菌菌株DHSa中。

为了能够连接上该目的基因、并有利于获得含该目的基因的DHSa阳性细胞克隆，质粒载体应含有________________________________________________（答出2点即可）。

提取质
粒后，采用________________法，将该基因导入到斑马鱼受精卵细胞中，培养并观察
转基因斑马鱼胚胎血管的发育情况。

22.（3）为了获取大量斑马鱼胚胎细胞用于药物筛选，可用________分散斑马鱼囊胚
的内细胞团，取分散细胞作为初始材料进行________培养。

培养瓶中添加成纤维细胞
作为________，以提高斑马鱼胚胎细胞克隆的形成率。

【答案】（一）（1）冷却, 玻璃刮刀, 较大透明圈, 斜面
【解析】解：（一）（1）高压蒸汽灭菌后需冷却后再加入无水乙醇，以免温度过高使乙
醇挥发；涂布平板法的步骤是：首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释
液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂
布在培养基表面上；醋酸菌产生的醋酸会与培养基中的碳酸钙反应形成透明圈，因此
需挑取分离培养基上具有较大透明圈的单菌落若干；菌种的临时保藏一般使用的是将
菌种接种到固体斜面培养基上，在合适的温度下长成菌落后在4℃冰箱中保藏。

【答案】（2）乙醇, 耐酒精度高、耐酸高
【解析】（2）醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，因此当培养液中乙醇含量
达到最低时，发酵结束；优良菌种应具有产酸量高、耐酒精度高、耐酸高等优点。

【答案】（3）灭菌, 吸附法
【解析】（3）将甘蔗渣制作成固定化介质需经灭菌后才能用于发酵，以免杂菌的污染
影响实验结果；因为甘蔗渣具有很好的吸附性，因此常采用吸附法来进行固定化。

【答案】（二）（1）富营养化
【解析】（二）（1）未经处理的污水中含有大量磷元素，排入河流、湖泊会引起水体的
富营养化。

【答案】（2）重组DNA分子, 限制性核酸内切酶的识别序列、抗生素抗性基因, 显微注
射
【解析】（2）重组DNA是将目的基因（外源DNA分子）用DNA连接酶在体外连接到
适当的载体上，即DNA分子的体外重组，这种重新组合的DNA称为重组DNA；质粒
载体应含有限制性核酸内切酶的识别序列，以便目的基因能成功插入到运载体上，质
粒载体还应含有抗生素抗性基因，以便检验目的基因是否表达；将目的基因导入动物
细胞常用的方法是显微注射法。

【答案】（3）胰蛋白酶, 饲养层细胞
【解析】（3）胰蛋白酶可以消化细胞间产生的黏连蛋白，从而使细胞分散；原代培养
是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养，因此取分散细胞作为初始材
料进行培养属于原代培养；干细胞培养时，饲养层细胞可作为提供干细胞分裂、增殖
的营养细胞。

因此培养瓶中添加的成纤维细胞是作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎
细胞克隆的形成率。

23.（1）将采集到的样品接种培养时，多氯联苯的用量应随转接次数的增加而逐渐
________，以达到富集多氯联苯降解菌的目的。

若图示平板中菌落过于密集，应进一
步________，以便于菌落计数与分离。

23.（2）统计菌落数目时，一般选择菌落数在________的平板进行计数。

每隔24小时
统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止________。

若在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2mL，稀释倍
数为 10^5，则每毫升样品中的菌落数为________。

与血细胞计数板计数法相比，上述
计数方法测得的细菌数较________。

23.（3）获得的多氯联苯高效降解菌可以采用________的方法长期保存。

【答案】（1）增加, 稀释涂布
【解析】解：（1）在接种培养时，随转接次数的增加，应逐渐增加培养基中苯酚（碳源）的含量，从而提供充足的碳源，以达到富集酚降解菌的目的。

若接种培养后平板
中菌落过于密集，应继续稀释涂布，以降低平板上菌落密度，方便菌落计数与分离。

【答案】（2）30~300, 因培养时间不足导致遗漏细菌菌落数目, 2.5×\ 10^7, 少
【解析】（2）统计菌落数目时，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。

每隔24。