舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38 MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用

舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38 MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用谷氨酸是中枢神经系统一种重要的兴奋性神经递质,对维持正常脑功能至关重要,但突触间隙过高浓度的谷氨酸同时具有很强的神经毒性。

脑缺血和再灌注后,谷氨酸的过度释放或谷氨酸转运蛋白对谷氨酸清除不足可导致谷氨酸在突触间隙中堆积,突触间隙过量的谷氨酸作用于神经元突触后膜的离子型和代谢型谷氨酸受体,可引发兴奋性毒性,例如钙超载,钠超载,自由基产生和凋亡等。

脑内细胞外没有代谢谷氨酸的酶,脑内细胞外谷氨酸的清除主要依靠高亲和力兴奋性氨基酸转运体系统(excitatory amino acid transporters,EAATs)来维持。

胶质细胞谷氨酸转运体-1(glial glutamate transporter-1,GLT-1)在清除细胞外谷氨酸中的作用最为重要。

多种证据表明,脑缺血预处理或药物可以通过上调GLT-1的表达及增强GLT-1对谷氨酸的摄取活性,对神经元的缺血损伤发挥保护作用。

Rothstein等报道,在体实验中,β-内酰胺抗生素如头孢曲松可选择性地促进GLT-1在脑内的表达。

体外实验中,头孢曲松可显著激活人胎儿星形胶质细胞或COS7细胞系中的GLT-1启动子,进而促进GLT-1的上调。

但大量使用β-内酰胺抗生素,会带来例如菌群失调和细菌耐药性等多种副作用。

舒巴坦是一种非典型的β-内酰胺抗生素,抗菌能力很弱,临床上常作为其它β-内酰胺类抗生素的增效剂。

我室最近的研究表明,在大鼠全脑缺血模型中,舒巴坦预防性给药,可以通过上调海马CA1区GLT-1的表达减轻锥体神经元的缺血性损伤。

这些发现为应用舒巴斯坦预防和治疗脑缺血损伤的临床研究提供了有益的基础和参考。

然而,在体实验很难证明舒巴坦对星形胶质细胞GLT-1表达的直接作用,因此有必要利用星形胶质细胞培养技术,体外研究舒巴坦对星形胶质细胞GLT-1表达的直接作用。

此外,进一步研究舒巴坦上调GLT-1的信号转导通路,可更好地理解舒巴坦在脑内的作用,促进舒巴坦作为抗脑缺血药物的临床开发和应用研究。

p38丝裂原活化蛋白激酶(p 38 mitogen-activated protein kinases,p 38 mapk)是一种重要的细胞内信号转导系统,参与一系列生理和病理过程,包括细胞死亡和存活。

p38mapk的激活如一把双刃剑,p38mapk的过度激活可促进脑缺血后的神经元死亡,但也有充分证据表明p38mapk的适度激活对缺血组织器官的保护作用。

我室最新研究表明,全脑缺血预处理可诱导大鼠海马ca1区p38mapk适度激活,同时p38mapk的特异性抑制剂sb203580或反义寡核苷酸可抑制全脑缺血预处理诱导的大鼠脑缺血耐受和海马ca1区glt-1上调。

这些研究结果表明,p38mapk的适度激活可能介导glt-1表达的上调,并诱导脑缺血耐受。

因此,本实验旨在研究p38mapk信号通路在舒巴坦诱导的海马星形胶质细胞glt-1表达上调和抗氧葡萄糖剥夺(oxygenglucosedeprivation,ogd)模拟缺血损伤过程中的作用。

第一部分舒巴坦发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡和上调海马星形胶质细胞glt-1表达的作用目的:应用神经元星形胶质细胞共培养技术,观察舒巴坦对ogd引起的海马神经元死亡的影响,探讨舒巴坦的抗ogd引起的神经元损伤作用。

应用单纯星形胶质细胞培养技术,通过观察在ogd状态下,舒巴坦预孵育对星形胶质细胞glt-1表达的影响,证明星形胶质细胞glt-1表达上调在舒巴
坦抗ogd中的作用。

方法:为观察舒巴坦对ogd引起的海马神经元死亡的影响,取24h内新生鼠海马行神经元星型胶质共培养10天后,细胞随机分为4组;为观察舒巴坦预孵育对ogd后星形胶质细胞glt-1表达的影响,取1-2天新生鼠海马行单纯星形胶质细胞培养,并将细胞传至3-4代,最后一代细胞长满瓶底后,将细胞随机分为3组(4组中的前3组),4组如下:(1)对照组:正常培养基培养细胞48h+2h+24h,以上时间段分别对应下面实验分组中实验处理的时间段,48h对应舒巴坦孵育的时间
段,2h对应ogd的时间段,24h对应ogd复氧后至收集细胞的时间段。

(2)ogd组:首先细胞正常培养48h后(对应下一组舒巴坦孵育时间段),进行2h的ogd后,更换为正常培养基继续培养24h。

(3)舒巴坦+ogd组:共培养细胞用加入舒巴坦培养液中孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。

同时设溶剂对照组,用ns代替舒巴坦。

根据舒巴坦的剂量,进一步分为5μm,25μm和125μm3个亚组,以观察其量效关系。

(4)舒巴坦对照组:这一实验组只用于共培养中,观察细胞存活情况。

培养基中加入舒巴坦生理盐溶液(100×),在舒巴坦终浓度为125μm下孵育48小时,换成正常培养基继续培养2h+24h。

共培养的实验各组于ogd复氧后24h 或相应时间点收集细胞,赫克斯特/碘化丙啶(hoechst/propidiumiodide,ho/pi)染色法观察计数神经元死亡百分率,mtt法观察细胞活力,分析舒巴坦对ogd所致的海马神经元死亡及损伤的影响。

单纯星形胶质细胞培养的实验各组于ogd复氧后12h和24h两个时间点或相应时间点收集星形胶质细胞,应用免疫细胞化学和westernblot两种方法观察舒巴坦对ogd后星形胶质细胞glt-1表达的影响。

结果:1ho/pi染色显示,对照组
死亡细胞百分比是9.2±0.5%。

2hogd可以使死亡细胞的百分比增加到71.6±2.4%,与对照组相比,死亡细胞的百分比明显提高;而且明场照片与ho/pi染色荧光图片合成后可以看出,死亡细胞主要为神经元,说明2h的ogd可以使神经元的死亡百分率明显提高。

舒巴坦预孵育可以剂量依赖地降低海马神经元的死亡率,125μm的舒巴坦具有最好的药效,125μm的舒巴坦预孵育可以将死亡细胞的百分比降低至15.6±1.0%。

ns溶剂对照组与ogd组相比,死亡细胞的百分比无明显差异,说明溶剂不能改变ogd引起的海马神经元死亡。

以上结果共同说明,2h的ogd可以明显增加神经元的死亡,而舒巴坦有效的阻止了ogd引起的海马神经元死亡,此效应呈现良好的剂量依赖性。

与对照组相比,舒坦坦对照组中,正常共培养中加入最大浓度125μm的舒巴坦并未引起死亡细胞的百分比的改变,说明最大浓度125μm的舒巴坦无明显损伤作用。

2mtt检测结果显示:与正常对照组相比,2h的ogd可显著降低共培养的细胞活力;而48h的舒巴坦预孵育可以剂量依赖地增加共培养的细胞活力,并呈现明显的剂量依赖性。

舒巴坦对照组的细胞活力与正常对照组相比无明显差异,说明最大浓度125μm的舒巴坦无明显损伤作用。

以上结果表明,舒巴坦可剂量依赖的对抗氧葡萄糖剥夺引起海马神经元死亡和损伤。

3免疫细胞化学结果显示:在对照组,glt-1广泛表达于星形胶质细胞。

与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调,约为正常组的1/2-2/3。

与ogd组相比,舒巴坦预孵育可以显著上调ogd处理后的星形胶质细胞
glt-1的表达,这种上调呈明显的剂量依赖性,最大剂量125μm舒巴坦可使其表
达增加至对照组的1.5-2倍,ogd组的2-3倍,并且这种上调可持续到ogd后24h,这一时间覆盖了ogd后神经元死亡的时间,有利于其发挥神经元保护作用。

与ogd 组相比,舒巴坦的溶剂对照组glt-1的表达无明显变化。

4westernblot结果显示:对照组glt-1有一定的基础表达。

与对照组相
比,ogd组的glt-1表达明显下调。

与ogd组相比,舒巴坦+ogd组glt-1的表达明显上调,呈剂量依赖性,且表达上调时间可持续到到ogd复氧后24h。

与ogd组相比,舒巴坦的溶剂对照组glt-1的表达无明显变化。

小结:舒巴坦可剂量依赖的引起星形胶质细胞的glt-1表达的持续上调,这种上调可能是共培养中舒巴坦对抗ogd引起神经元死亡的机制之一。

第二部分舒巴坦序列上调星形胶质细胞p-p38mapk和glt-1的表达目的:1观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1、p-p38mapk和总p38mapk表达的影响。

2比较舒巴坦上调正常星形胶质细胞glt-1和p-p38mapk蛋白表达的时间进程。

方法:行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验。

1为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的剂量依赖性,用终浓度为5μm,25μm和125μm的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于孵育48h后收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞glt-1
表达的影响。

同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。

2为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程,用终浓度为125μm舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于舒巴坦孵育1h,3h,6h,12h,24h,48h和
72h时收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察舒巴坦的不同孵育时间对
星形胶质细胞glt-1表达的影响。

同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。

3为观察舒巴坦对正常星形胶质细胞p-p38mapk表达的剂量依赖性,用终浓度为5μm,25μm和125μm的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于孵育48h后收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞p-p38mapk表达的影响;于孵育24h后收集细胞,观察不同剂量的舒巴坦对星形胶质细胞总p38mapk表达的影响。

同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。

4观察舒巴坦对正常星形胶质细胞p-p38mapk表达的时间进程,用终浓度为125μm舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,于舒巴坦孵育1h,3h,6h,12h,24h,48h 和72h时收集细胞,免疫细胞化学和westernblot法观察舒巴坦的不同孵育时间对星形胶质细胞p-p38mapk和总p38mapk表达的影响。

同时设溶剂对照组,培养液中只加入舒巴坦的溶剂ns。

结果:1在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的剂量依赖性实验中,免疫细胞化学结果显示:在溶剂对照组,glt-1广泛表达于培养的星形胶质细胞。

应用舒巴坦孵育星形胶质细胞48h,与对照组相比,5μm,25μm和125μm的舒巴坦显著增加glt-1的表达,这种上调呈剂量依赖性。

westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。

2在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程实验中,免疫细胞化学结果显示:在125μm的舒巴坦孵育后,与溶剂对照组相比,glt-1的表达从舒巴坦孵育12h开始增加,48h 达到高峰,72h仍维持在与较高水平。

westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。

3在观察舒巴坦对正常星
形胶质细胞p-p38mapk表达的剂量依赖性实验中,免疫细胞化学结果显示,在溶剂对照组,p-p38mapk主要表达于培养的星形胶质细胞细胞核,细胞浆也有少量
表达,主要存在于细胞核周围,且染色较浅,表达量较少;p38主要表达于星形胶
质细胞的细胞浆,并有大量表达。

免疫细胞化学和westernblot法检测均显示:应用舒巴坦孵育星形胶质细胞3h,与对照组相比,5μm,25μm和125μm的舒巴坦均显著增加p-p38mapk的表达,且这种上调呈剂量依赖性。

在舒巴坦组,应用5μm,25μm和125μm舒巴坦孵育星形胶质细胞24h后,p38的表达与溶剂对照组相比无明显差异。

westernblot分析显示与免疫细胞化学结果相同。

4在观察舒巴坦对正常星形胶质细胞glt-1表达的时间进程实验中,免疫细胞化学和westernblot法检测结果均显示,在溶剂对照组,p-p38mapk有少量的表达;在舒巴坦组,应用125μm 的舒巴坦孵育正常的星形胶质细胞,与溶剂对照组相比,p-p38mapk的表达从舒
巴坦孵育1h开始增加,3h达到高峰,24h恢复到对照基础水平。

在舒巴坦组,应用125μm的舒巴坦孵育正常星形胶质细胞,总p38mapk的表达在任何时间点与溶剂对照组相比均无显著性差异。

小结:1舒巴坦可上调正常星形胶质细胞的glt-1表达,这种上调具有剂量依赖性和时间依赖性,舒巴坦孵育12h开始增加,48h达到高峰,72h仍维持在与较高水平。

2舒巴坦可上调正常星形胶质细胞的p-p38mapk表达,这种上调具有剂量依赖性和时间依赖性,且舒巴坦对总p38mapk的表达无影响,p-p38mapk的上调为
p38mapk的磷酸化激活所致。

p-p38mapk的上调从舒巴坦孵育1h开始增加,3h达到高峰,24h恢复到对照基础水平。

第三部分抑制p38mapk通路阻断舒巴坦引起的正常和ogd-处理的星形胶质
细胞glt-1的表达目的:应用单纯星形胶质细胞培养技术,观察p-p38mapk抑制剂sb203580对正常和ogd-处理的星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1上调的影响,探讨p-p38mapk通路是否参与正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1的上调。

方法:1行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验,将细胞随机分为以下4组:(1)对照组:正常的星形胶质细胞在正常的培养基中孵育1h+48h,相当于sb203580与舒巴坦的共同孵育时间。

(2)舒巴坦组:在正常的培养基中孵育1h后,换成终浓度为125μm舒巴坦的培养液中孵育48h。

(3)sb203580+舒巴坦组:首先正常星形胶质细胞的培养基中加入sb203580孵育1h,再加入终浓度为125μm的舒巴坦与sb203580共同孵育48h,根据sb203580的不同剂量分为2.5μm,5μm和10μm三个亚组。

同时设溶剂对照组,用dmso代替sb203580。

(4)sb203580对照组:用终浓度为10μm的sb203580孵育正常星形胶质细胞1h+48h。

收集以上各组的星形胶质细胞后,应用免疫细胞化学和westernblot两种方法观察各组glt-1的表达,分析抑制p-p38mapk通路对正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1上调的影响。

2行星形胶质细胞培养,纯化并传至3-4代,最后1代细胞布满瓶底时用于实验,将细胞随机分为以下4组:(1)对照组:正常星形胶质细胞在正常的培养基中孵育1h+48h+2h,(相当于sb203580先单独孵育1h、舒巴坦和sb203580共同孵育时间48h和ogd的时间2h),换成正常培养基继续培养12h或24h收集细胞。

(2)ogd组:首先星形胶质细胞正常培养1h+48h后,进行2h的ogd后,换成正常培养基继续培养12h或24h收集细胞。

(3)舒巴坦+ogd组:星形胶质细胞在正常的培养基中培养1h,加入终浓度为125μm舒巴坦培养液中孵育48h,其余步骤
同ogd组。

(4)sb203580+舒巴坦+ogd组:正常星形胶质细胞首先在终浓度为2.5μm,5μm和10μm的sb203580的培养基中孵育1h,再加入舒巴坦使其终浓度为125μm,并与sb203580共同孵育48h,其余步骤同ogd组,同时设溶剂对照组,用dmso 代替sb203580。

实验各组于ogd复氧后12h或24h两个时间点及对照组相应时间点收集细胞,应用免疫细胞化学和westernblot法,观察各组glt-1的表达,分析抑制p-p38mapk通路对舒巴坦预孵育诱导ogd处理后的星形胶质细胞的glt-1上调的影响。

结果:1免疫细胞化学结果显示,在对照组,glt-1广泛表达于培养的单纯星形胶质细胞。

与对照组相比,舒巴坦组应用125μm舒巴坦孵育星形胶质细胞后,glt-1的表达显著上调。

与舒巴坦组相比,sb203580+舒巴坦组中应用2.5μm,5μm,10μm的
sb203580孵育,glt-1的表达明显下调,且这种下调呈显著的剂量依赖性。

溶剂对照组,与舒巴坦组相比glt-1的表达无明显改变。

与对照组相比,sb203580对照组中,用10μm的sb203580孵育正常星形胶质细胞,glt-1的基础表达无明显改变。

2westernblot的结果与免疫细胞化学结果一致。

与对照组相比,舒巴坦组的glt-1表达显著上调。

与舒巴坦组相
比,sb203580+舒巴坦组的glt-1表达剂量依赖性的显著下调。

在sb203580的溶剂对照组,sb203580的溶剂对舒巴坦诱导的glt-1上调无影响。

在sb203580对照组中,10μm的sb203580对基础表达的glt-1无明显影响。

westernblot和免疫细胞化学的结果共同说明,sb203580剂量依赖的抑制舒巴坦诱导的正常星形胶质细胞的glt-1的上调。

3免疫细胞化学结果显示:在对照组,glt-1广泛表达于培养的星形胶质细胞。

与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调,约为正常对照组的1/2-2/3。

在舒巴坦+ogd组,与ogd组相比,125μm的舒巴坦预孵育48h后,可以显著上调星形胶质细胞的glt-1表达,其表达是正常水平的1.5-2倍。

在sb203580+舒巴坦+ogd组,与舒巴坦+ogd组相比,2.5μm,5μm和10μm 的sb203580可以显著抑制舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调,这种抑制作用呈剂量依赖性,10μm的sb203580表现出最好的抑制效果。

单独加入sb203580的溶剂对舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调无影响。

4westernblot法检测结果与免疫细胞化学结果相一致,结果显示:与对照组相比,ogd组的glt-1表达明显下调。

在舒巴坦+ogd组,与ogd组相比,舒巴坦可以显著上调星形胶质细胞glt-1的表达;与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组的glt-1的表达上调被显著抑制,这种抑制呈剂量依赖性。

sb203580的溶剂对舒巴坦预孵育诱导的glt-1上调无影响。

westernblot 和免疫细胞化学的结果共同说明,sb203580可剂量依赖的抑制舒巴坦预孵育诱导的星形胶质细胞glt-1的上调。

小结:1抑制p38mapk通路阻断了舒巴坦诱导的正常星形胶质细胞的glt-1的上调,p38mapk通路参与了正常星形胶质细胞中舒巴坦诱导的glt-1的上调。

2抑制p38mapk通路阻断舒巴坦引起的ogd处理后的星形胶质细胞glt-1的表达,p38mapk通路参与了舒巴坦预孵育诱导的ogd后星形胶质细胞glt-1的表达上调。

第四部分抑制p38mapk通路阻断舒巴坦介导的海马神经元抗ogd作用目的:应用神经元星形胶质细胞共培养技术,观察p38mapk抑制剂sb203580对舒巴坦抗海马神经元ogd作用的影响,探讨p38mapk通路是否参与舒巴坦诱导的抗ogd损伤的神经元保护作用。

方法:取24h内新生鼠进行海马神经元星形胶质细胞共培养10天后,将细胞随机分为以下6组:(1)对照组:正常培养基培养海马神经元星形胶质细胞1h+48h+2h+24h,以上时间段分别对应下面实验分组中实验处理的时间段,1h+48h对应sb203580孵育时间段,48h对应舒巴坦孵育的时间段,2h对应ogd的时间段,24h对应ogd复氧后至收集细胞的时间段。

(2)ogd组:首先共培养细胞正常培养1+48h后(对应sb203580孵育时间段),进行2h氧葡萄糖剥夺后换成正常培养基继续培养24h。

(3)舒巴坦+ogd组:共培养细胞先正常培养1h,加入舒巴坦培养液中孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。

(4)sb203580+舒巴坦+ogd组:在含2%b27的nb培养基中,先加入sb203580孵育1h,培养液中加入终浓度为125μm的舒巴坦与sb203580继续共同孵育48h,之后行ogd,方法同ogd组。

根据sb203580的剂量进一步分为2.5μm,5μm和10μm3个亚组,以观察其量效关系。

(5)舒巴坦对照组:先正常培养1h,再加入终浓度为125μm的舒巴坦孵育48小时,换成正常培养基继续培养2h+24h。

(6)sb203580对照组:在正常培养的海马神经元星形胶质细胞培养基中加入10μm的sb203580孵育1+48h,换成正常培养基继续培养2h+24h。

实验各组于ogd复氧后24h或相应时间点收集细胞,ho/pi染色观察计数神经元死亡百分率;mtt法观察细胞活力,观察p38mapk抑制剂sb203580对舒巴坦抗ogd发挥神经元保护作用的影响。

结果:1ho/pi双重染色显示,与对照组相
比,125μm的舒巴坦单独处理正常的共培养细胞对细胞的死亡率无影响,2h的ogd可以显著增加细胞死亡率,而125μm的舒巴坦预孵育48h可以显著降低由ogd引起的海马神经元死亡。

与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组应用2.5μm,5μm和10μm 的sb203580后,细胞死亡率又明显升高,这种效应呈明显的剂量依赖性;在
sb203580的溶剂对照组,共培养的细胞死亡率与舒巴坦+ogd组相比无明显差异,说明溶剂对舒巴坦预孵育对抗ogd而产生的神经元保护作用无影响。

此外,在
sb203580对照组,与对照组相比,细胞死亡率无明显改变,说明10μm的sb203580对正常的神经元无损伤致死作用。

2mtt的结果显示,与对照组相比,2h的ogd可以显著降低共培养细胞的细胞活力,而舒巴坦可以显著增加由ogd引起的共培养细胞的细胞活力降低。

与舒巴坦+ogd组相比,sb203580+舒巴坦+ogd组中sb203580明显降低共培养的细胞活力,且具有剂量依赖性。

在sb203580的溶剂对照组,共培养的细胞活力与舒巴坦+ogd组相比无明显差异。

在sb203580对照组,与对照组相比,细胞活力无明显改变。

以上结果结合ho/pi结果,说明sb203580可以剂量依赖的抑制舒巴坦预孵育对抗ogd而产生的神经元保护作用,p-p38mapk通路参与了海马神经元胶质细胞共培养中舒巴坦对抗氧葡萄糖剥夺发挥的神经元保护作用。

小结:在神经元-星形胶质细胞共培养体系中,抑制p38mapk通路阻断舒巴坦介导的海马神经元抗ogd 作用。

结论:1舒巴坦预孵育可剂量依赖性的对抗ogd引起的海马神经元死亡,并可上调ogd后星形胶质细胞glt-1表达,同时维持glt-1的高表达直至ogd复氧后
24h,表明舒巴坦预孵育可能通过上调并维持星形胶质细胞的glt-1的表达对抗ogd引起的海马神经元死亡。

2舒巴坦可剂量和时间依赖性的上调正常星形胶质细胞p-p38mapk和glt-1表达,且p38的磷酸化活化明显早于glt-1表达上调。

3抑制p-p38 MAPK阻断舒巴坦诱导的正常和OGD后星形胶质细胞的GLT-1的上调,p38 MAPK通路参与了舒巴坦预孵育诱导的正常和OGD后星形胶质细胞GLT-1的表达上调。

4抑制p-p38 MAPK阻断舒巴坦预孵育对抗OGD发挥的海马神经元保护作用。

5以上表明,舒巴坦通过激活星形胶质细胞p38 MAPK通路上调GLT-1的表达发挥抗氧葡萄糖剥夺引起的海马神经元死亡的作用。