基因在大肠杆菌中表达的实验流程

为了让一个基因在Escherichia大肠杆菌中做它的事情，我们首先要做的就是创造一个超冷的表达矢量。

这个矢量需要有一个涡轮充电的促
进器来恢复基因的表达，同时需要有一个ribosome绑定的站点（RBS）来确保基因像老板一样被翻译出来。

嘿，我们不能忘记一个
选择标记，像抗生素抗体基因，所以我们可以挑出细菌已经提取了
载体。

塞恩斯是真正有趣的部分——我们利用一些精致的分子克隆技术，把感兴趣的基因弹入载体中，比如用限制酶切开，然后像一个基
因谜题一样将其重新粘合起来。

对于一些细菌生物学刺激来说如何？
将表达矢量组合起来后，要通过变换等过程，将其粘入E。

coli细胞。

你用正确的抗生素将转化出来的细菌生长在藻类板上。

这使得只有
具有表达载体的细菌才能存活。

一旦你选择了细菌，你就抓住一个单
一的聚落，用它开始一个液体培养。

你让培养物生长到有很多细胞，
然后你可以打开你感兴趣的基因。

E。

coli基因表达的诱导是推进基因研究和生物技术创新的关键步骤。

必须根据表达矢量中使用的具体促进器，仔细选择适当的诱导器，因
为各种促导器对不同的诱导器表现出不同的反应。

在加入诱导物后，
培养物会受到指定孵化期的制约，以方便被利益基因编码的蛋白质的
合成。

在诱导过程之后，细菌被收获，通过SDS—PAGE，西部布局，酶活性测定等方法，彻底检查基因表达水平。

这些精心规划和执行的
实验使研究人员能够全面评估E。

大肠杆菌蛋白质产量的定量和定性方
面，从而为遗传工程和工业生物技术领域今后的研究和政策决定提供信息。