小鼠血小板聚集试验方法
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小鼠血小板聚集试验方法
小鼠血小板聚集试验方法如下:
1. 预热血小板聚集仪,取一聚集管加入约1mL的Tyrode's Buffer溶液,并置于反应仪器的对照孔。
2. 吸取洗涤的小鼠血小板悬液25μ0L于聚集管中,放入检测孔,搅拌转速设置为1200rpm。
3. 加入1mMCaCl2溶液,启动检测按钮,并加入Thrombin或者CRP刺激剂,刺激血小板活化,检测血小板聚集情况,记录相应曲线。
4. 每个检测时间设置为5min。
5. 使用双通道血小板聚集仪(美国Chrono-Log公司产品),利用化学发光法检测活化血小板表面致密颗粒的释放情况。
6. 吸取洗涤的小鼠血小板悬液290μL于聚集管中,放入检测孔,依次加入1mMCaCl2溶液和10μL的ATP底物(CHRONO-LUME),启动检测按钮。
7. 加入Thrombin或者CRP刺激剂,刺激血小板活化,同时检测血小板聚集情况和ATP释放情况。
以上步骤仅供参考,建议咨询专业的生物科学领域研究人员获取具体步骤和注意事项。