5-羟色胺对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移及α-平滑肌肌动蛋

肺 动脉高压 （ Ｐ Ａ Ｈ） 是 以肺血 管 阻力 进行 性 升高 为特 征 的一组 疾 病 ， 最 终 可导致 右 心 衰竭 和 死亡 。 肺血 管重构 是 Ｐ Ａ Ｈ 特 征性 的病理 改 变之 一 ， 主要 表 现 为 血 管 内皮 细 胞 增 生 、 血 管 平 滑 肌细 胞 增 殖 和迁
（ ６ ３ ． ６± ６ ． ０ ） 、 （ ５ ０ ． ４± ６ ． ０ ） 个 。０ Ｄ ４ ９ ０ 值、 穿 膜细胞数 ： ５组 ＞４组 ＞ ３组 ＞２组 ＞１组 ， Ｐ均 ＜０ ． ０ ５ ； ５ 、 ６组 Ｏ Ｄ ４ ９ ０ 值、
穿 膜 细 胞 数 比较 ， Ｐ均 ＞ ０ ． ０ ５ 。１～ ６组 细 胞 — Ｓ ＭＡ 相 对 表 达 量 分 别 为 １ ． Ｏ １± ０ ． ２ １ 、 １ ． １ ８±０ ． ３ ５ 、 １ ． ９ １ ±０ ． ２ ８ 、 ２ ． ３ ７ ± ０ ． ４ ２ 、 ２ ． ７ ８± ０ ． ３ ３ 、 ２ ． １ ３± ０ ． ４ ０ 。细 胞 － Ｓ ＭＡ相 对 表 达量 ： ５组 ＞ ４组 ＞ ３组 ＞ ２组 ＞１ 组， Ｐ均 ＜０ ． ０ ５ ； ６组 低 于 ５
ｄ ｏ ｉ ：１ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２ — ２ ６ ６ Ｘ ． ２ ０ １ ７ ． ２ ４ ． ０ １ ４
中 图分 类号文章编号 ： １ ０ ０ ２ ￣６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ７ ） ２ ４ － ０ ０ ４ ６ ￣ ３
入ｌ Ｏ 、 ｌ ０ 一、 １ ０～、 １ Ｏ ～、 １ ０ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ５ ． Ｈ Ｔ， １组 加
移、 血管外 间质异常沉积 等 。 目前 ， 关于 Ｐ Ａ Ｈ肺血
管重构 的研究 主要涉 及 血管 中膜 肥厚 和 内膜 血 管形 成， 有关 外 膜 在 Ｐ Ａ Ｈ血 管 重 构 中作 用 的研 究 较 少 。
组， ２— ６组 分 别 加 入 １ ０ 一、 １ ０ 一、 １ ０ ～、 １ ０ ～、 １ ０ ～ｍ ０ Ｌ ／ Ｌ ５ － Ｈ Ｔ， １组 加 等 量 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ培养基 ， 继续培养 ２ ４ ｈ 。采 用 ＭＴ ｒ 法观察各组细胞增殖情况 （ Ｏ Ｄ 。 值） ， 采用 Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ 小室实 验观察各组 细胞迁移 能力 （ 穿膜细胞 数 ） ， 采 用 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｎ ｒ
研究发现 ， 血 管外膜对 血管压力升 高 的反 应较 内膜 和
中膜更 为敏感 ， 是 最早 发 生病 理 变化 的血管 结 构 。
研究显示 ， 在损 伤和 细胞 因子 等 病 理 因素剌 激 下 ， 作
为血管外膜 最主要 的细胞成分 ， 外 膜成 纤维 细胞可 被 激活 。激 活的成纤维 细胞增殖 和迁移 能力增 强 ， 并 发 生表型 变化而分化 为肌成纤维 细胞 ， 发 生表 型变化 的 特征是 表达 仅 ． 平 滑 肌 肌 动蛋 白（ 一 Ｓ Ｍ Ａ） ， 并 释 放 细 胞外 基 质 ， 促 进 新 生外 膜 形 成 ， 导 致 血 管 外 膜 重 构＿ ４ ＇ ５ Ｊ 。５ ． 羟色胺 （ ５ ． Ｈ Ｔ ） 是参与 Ｐ Ａ Ｈ 形成 和 发展 的 重要分 子 ， 与Ｐ Ａ Ｈ 的肺 血 管重 构关 系密 切 。但 关 于
摘要 ： 目的
探讨 ５ 一 羟色胺 （ ５ － Ｈ Ｔ ） 对 大 鼠肺 动 脉 外 膜 成 纤 维 细 胞 增 殖 、 迁移和 ０ １ ． 平滑肌 肌动蛋 白（ ｏ 【 ． Ｓ ＭＡ） 表
达的影响。方法
分离并培养大 鼠肺动脉外膜成纤维 细胞 。将体外 培养 的大 鼠肺动脉外 膜成纤维 细胞分 为 １—６
山东 医 药 ２ ０ １ ７年第 ５ ７卷 第 ２ ４期
５ 一 羟 色 胺 对 大 鼠肺 动 脉 外 膜 成 纤 维 细 胞 增 殖 、 迁移及 Ｏ Ｌ 一 平 滑 肌 肌 动 蛋 白表 达 的影 响
韩 新 源 ， 陈春燕 ， 范 粉灵 ， 解 翠 。 李 秀红 ， 田红 燕
（ １陕 西省人 民 医院 ， 西安 ７ １ ０ ０ ６ ８ ； ２西安 交通 大学 第一 附属 医院 ）
组， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ 。结论 １ ０ 一 ～１ ０ Ｉ ¨ ｍ ｏ Ｌ ／ Ｌ ５ － Ｈ Ｔ可呈剂量依赖性促进大 鼠肺动脉外膜成纤维 细胞 增殖 、 迁移 和 ． Ｓ ＭＡ
表达 。
关键词 ： 血管重构 ； ５ － 羟色胺 ； 肺 动 脉外 模 ； 成纤维细胞 ； 细胞增殖 ； 细胞 侵袭 ； ０ 【 一 平 滑肌肌动蛋 白； 大 鼠
ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ 法检 测各 组细胞 ０ 【 一 Ｓ ＭＡ表达 。结果
１～６组 细胞 ０ Ｄ ４ ９ ０ 值分别 为 ０ ． ７ ２±０ ． ０ ４ 、 ０ ． ７ ９± ０ ． ０ ４ 、 ０ ． ８ ４± ０ ． ０ ５ 、
０ ． ８ ７± ０ ． ０ ４ 、 ０ ． ９ ３±０ ． ０ ３ 、 ０ ． ９ ４± ０ ． ０ ３ ， 穿膜细胞数分别 为（ ９ ． ２±１ ． ６ ） 、 （ １ ７ ． ２±１ ． ７ ） 、 （ ２ ６ ． ０± ２ ． ９ ） 、 （ ３ ４ ． ４± ２ ． ５ ） 、
维 细胞 （ Ｐ Ａ Ｆ ｓ ） 增殖、 迁移 和 ． Ｓ ＭＡ表 达 的影 响。
１ 材料 与方 法
１ ． １ 材料
Ｐ Ａ Ｆ ｓ 参 照 Ｗｅ ｌ ｓ ｈ等 的血 管 成纤 维 细
胞 分离 方法 分离 ， 于３ ７℃ 、 ５ ％ Ｃ Ｏ 培养 箱 中培 养 ， 培养基 为 Ｄ ＭＥ Ｍ 培养 基 。５ － Ｈ Ｔ购 自英 国 Ｔ ｏ ｃ ｉ ｆ ｓ 公 司， ＭＴ Ｉ ＂ 、 二 甲基 亚砜 购 自美 国 Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ 公 司， Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ 迁移小 室 购 自美 国 Ｃ ｏ ｍｉ ｎ ｇ公 司 ， ０ 【 ． Ｓ ＭＡ兔 抗 大 鼠 多克 隆抗 体购 自美 国 Ａ ｂ ｅ ａ ｍ公 司 。 １ ． ２ Ｐ Ａ Ｆ ｓ 分组及 ５ － ＨＴ干 预 将 Ｐ Ａ Ｆ ｓ接种 于 ９ ６ 孑 Ｌ 板， 随 机分 为 １— ６组 ， 每 组 ５孔 。２— ６组 分别 加