一种无蛋白,无dmso细胞冻存液,应用及其制备方法
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一种无蛋白,无dmso细胞冻存液,应用及其制备方法
一种无蛋白、无DMSO的细胞冻存液通常用于保存易受蛋白质脱性和细胞毒性影响的细胞株。
这种细胞冻存液可以保证细胞在长期保存过程中的生存和复苏。
下面是一种制备无蛋白、无DMSO细胞冻存液的方法:
材料:
- 适量的无菌培养基(如DMEM或MEM)
- 适量的无菌血清(可以是胎牛血清或羊血清)
- 10%无菌甘露醇溶液
- 无菌冷冻管
步骤:
1. 将适量的细胞培养至适当的浓度。
2. 将细胞离心,并用无菌培养基将细胞沉淀洗涤一次。
3. 将细胞沉淀再次离心,去除上清液。
4. 用适量的无菌培养基悬浮细胞。
5. 添加等体积的无菌血清,使终浓度达到细胞株所需的血清浓度。
6. 加入等体积的10%无菌甘露醇溶液,使终浓度达到5%。
7. 将混合液均匀分配到无菌冷冻管中,每支管约200-500 μL。
8. 将冷冻管密封,并将其放入-80℃的冷冻箱中快速冷冻。
9. 冷冻后,将冷冻管转移到液氮箱中长期保存。
应用:
这种无蛋白、无DMSO细胞冻存液可以被用于保存许多类型
的细胞株,如肿瘤细胞、原代细胞、淋巴细胞等。
这种冻存液的应用可用于细胞的长期保存、维持细胞品质以及用于后续的实验活动。