高中生物 微生物的实验室培养双基限时练 新人教版选修

微生物的实验室培养
一、选择题
1．有关微生物营养物质的叙述中，正确的是( )
A．是碳源的物质不可能同时是氮源
B．凡是碳源均提供能量
C．除水以外的无机物只提供无机盐
D．无机氮源也能提供能量
解析对于异养微生物而言，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源又是氮源；CO2是自养细菌的碳源但并不提供能量；CO2和N2是无机物可作为微生物的碳源和氮源；硝化细菌的氮源是氨，同时氨氧化也是硝化细菌的能量来源。

答案 D
2．不同微生物对营养物质的需要各不相同。

下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养描述中不正确的是( )
A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B．碳源物质也是该微生物的能源物质
C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D．水是该微生物的营养要素之一
解析自养微生物碳源为无机物，不能作为能源，能源应是光能(如光合细菌)或氧化无机物释放的化学能(如硝化细菌)。

答案 B
3．下列操作与灭菌无关的是( )
A．接种前用火焰灼烧接种环
B．接种前用酒精擦拭双手
C．培养基在50 ℃时搁置斜面
D．接种在酒精灯的火焰旁完成
解析接种用具、器皿、空气、及操作者手上、衣服等都带有微生物，都有污染的可能，都要进行消毒与灭菌。

培养基在50 ℃时搁置斜面，目的是扩大接种面积，与灭菌无关。

答案 C
4．对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )
①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌
⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法
A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥
C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤
解析培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法。

答案 A
5．获得纯净培养物的关键是( )
A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
B．用平板划线法或稀释涂布平板法接种菌种
C．适宜条件下培养
D．防止外来杂菌的污染
解析获得纯净培养物的关键是无菌技术，以防止外来杂菌的污染；灭菌只是无菌技术的一个方面；接种方法和培养不能防止杂菌的污染。

答案 D
6．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( )
A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C．适宜条件下培养
D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落
解析用不同稀释度的菌液接种，形成菌落情况不同，只有稀释度足够大，聚集在一起的微生物被分散为单个个体时，才能在培养基上形成单个菌落。

答案 D
7．有关倒平板操作错误的是( )
A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上
D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置
解析整个倒平板过程要防止外来杂菌的影响，因此，灭过菌的培养皿放在火焰旁，打开的锥形瓶口要迅速通过火焰，培养皿不能完全打开，只能打开一条稍大于瓶口的缝，等平板冷却冷凝后才可以倒过来放置。

答案 C
8．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37 ℃恒温箱的目的是( )
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
解析实验中要注意设置对照组，未接种的培养基放入恒温箱，通过观察是否有菌落来检验其是否被杂菌污染或灭菌是否彻底。

答案 B
9．急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的，因此检测饮用水中的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。

检测水中大肠杆菌的含量时，通常将水样进行系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为( )
A．稀释涂布平板法 B．平板划线法
C．显微镜直接观察法D．目测估计法
解析稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

答案 A
10．金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是( )
A．对接种环进行灼烧处理
B．带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉
C．带菌培养基必须经加热后才能倒掉
D．接种后双手必须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦拭
解析带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉，不能通过简单的加热后就倒掉，这样达不到灭菌效果。

答案 C
11．下表是关于四种生物能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述。

下列描述正确的一组生
A.硝化细菌和乳酸菌B．乳酸菌与根瘤菌
C．根瘤菌与衣藻D．硝化细菌与衣藻
解析乳酸菌不能直接利用N2，且能量来源为葡萄糖，产生乳酸，根瘤菌进行生命活动所需能量来自糖类等的分解。

答案 D
12．若在牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，对这一说法不正确的是( ) A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B．在微生物生长温度范围内保持固体状态
C．琼脂凝固点温度低，利于微生物的生长
D．凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
解析理想的凝固剂应具备以下条件：不被所培养的微生物分解利用，在微生物生长的温度范围内保持固体状态，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，如琼脂凝固点为40 ℃，对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏，透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉。

常用凝固剂有琼脂、明胶。

答案 C
13．关于灭菌和消毒的不正确理解是( )
A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．二者实质上是相同的
C．接种环用灼烧法灭菌
D．常用灭菌法有加热法、紫外线法、化学药品法等
解析灭菌是彻底消灭该环境中一切微生物，而消毒只是对某些微生物进行消灭，二者实质上有很大不同。

答案 B
14．为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是( )
A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上
C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D．对于需要长期保存的菌种，可以采用－4 ℃低温保藏的方法
解析对于频繁使用的菌种，可采用临时保藏的方法，首先接种到试管固体斜面培养基上，在合适温度下培养，菌落长成后，置于4 ℃冰箱中保藏。

该方法保存时间不长，易被污染和变异。

对于需长期保存的菌种，在－20 ℃采用甘油管藏的方法保存。

答案 D
15.
如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。

下列操作方法正确的是( ) A．操作前不用做任何处理
B．划线操作必须在火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
解析每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目减少，以便得到菌落。

划线后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

答案 D
二、非选择题
16
(1)蛋白胨在培养基中的作用是___________________ _____________________________________________________。

(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是________，如________。

(3)表中各成分含量确定的原则是_____________________ ___________________________________________________。

(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是________。

(5)从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌污染的方法是________________________________________________________ ________________。

(6)在培养基凝固前要搁置斜面，目的是________________________________________________________________________。

解析蛋白胨中含大量蛋白质降解而成的多肽类物质等，因而它提供了碳源、氮源和生长因子，细菌的菌落是在固体培养基上形成的，因此需要加凝固剂，在各个环节中都需要无菌操作，分装前要调整pH，以满足微生物生长繁殖的需要。

答案 (1)提供碳源、氮源、生长因子
(2)凝固剂琼脂
(3)所培养的微生物对各营养成分的需求
(4)调pH
(5)高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉球擦手、在火焰旁接种、棉塞塞试管口
(6)扩大接种面积
17．在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。

为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。

)
(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是________。

(3)在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

(4)在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是________，有透明带菌落利用的氮源主要是________，据此可筛选出目的菌。

(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，
在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是___________________________ _______________________________________________________________________________ ______________________________________。

解析 (1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。

(2)从物理性质方面来看，题图培养皿中培养基属于固体培养基，从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基，该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以除草剂为氮源。

故该培养基中除加入除草剂外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌。

(3)在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌是不能生长的。

(4)含一定量
该除草剂的培养基不透明，形成透明圈是由于该除草剂被某些细菌降解。

(5)突变株A的生长依赖于营养物质甲，突变株B的生长依赖于营养物质乙。

A、B混合培养都能生长，最可能的原因是突变株A和B互为对方提供了营养物质。

答案 (1)稀释
(2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂
(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源
(4)氮气该除草剂
(5)突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶
突变株A生长需要营养物质甲，突变株B可以提供，突变株B生长需要营养物质乙，突变株A可以提供
18．2005年诺贝尔生理学和医学奖授予两位澳大利亚的医生马歇尔和沃伦，以表彰他们发现幽门螺杆菌及其在胃炎等疾病中所起的作用。

(1)1974年沃伦在一份胃黏膜活体标本中发现有无数的细菌紧贴着胃黏膜上皮，这种细菌就是幽门螺杆菌，其繁殖方式是________，胃黏膜上皮细胞与细菌细胞结构相比，主要区别是前者无________。

(2)不同微生物有各自的代谢特点，人们常据此分离鉴别不同种类的微生物。

实验室有两个菌种：胱氨酸依赖型细菌(无胱氨酸不能生长)，甲基营养细菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源)，但试管上标签脱落。

某同学的鉴别思路是配制3个培养基，只接种其中的任一菌种，根据生长状况将其鉴别出来，另一种自然鉴别出来。

请根据这一思路完成实验方案。

实验步骤：
第一步：在两个菌种的试管上分别标记A、B；
第二步：配制不含胱氨酸和甲基营养物的培养基，分别倒入3个培养皿中，标上1、2、3，_____________________________
_______________________________________________________________________________ ____________________________________；
第三步：________________________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________。

结果分析：①_________________________________ _______________________________________________________________________________ _______________________________。

②
_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________。

和其他微生物的培养一样，第二步和第三步中都应注意________操作，否则将导致实验失败。

(3)第二步中倒平板及对菌种纯化的说法正确的是( )
A．倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖打开，右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿(约10～20 mL)，左手立即盖上培养皿盖
B．使用已灭菌的接种环，使用完后不需要再灭菌
C．稀释涂布平板时要将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
D．涂布器用火焰灼烧灭菌
解析本题主要考查真核与原核生物的区别，选择培养基的原理及倒平板的操作和注意事项。

答案 (1)分裂生殖细胞壁
(2)第二步：在1号培养皿中加入适量胱氨酸；在2号培养皿中加入适量甲基营养物(甲醇、甲烷)；3号作为对照，一起灭菌
第三步：将A菌(或B菌)接种于1、2、3号培养皿中，适宜条件下培养数天，观察细菌生长状况
结果分析：①若接种的A菌在1号培养皿中能生长，在2、3号培养皿中不能生长，则A菌为胱氨酸依赖型细菌，B菌为甲基营养细菌②若接种的A菌在2号培养皿中能生长，在1、3号培养皿中不能生长，则A菌为甲基营养细菌，B菌为胱氨酸依赖型细菌(①若接种的B 菌在1号培养皿中能生长，在2、3号培养皿中不能生长，则B菌为胱氨酸依赖型细菌，A 菌为甲基营养细菌②若接种的B菌在2号培养皿中能生长，在1、3号培养皿中不能生长，则B菌为甲基营养细菌，A菌为胱氨酸依赖型细菌) 无菌
(3)C
19．人们观察发现，在青霉菌生长之处，很难找到金黄色葡萄球菌等细菌，针对此现象，有人提出了化学拮抗的观点，即青霉菌产生了一种化学物质抑制金黄色葡萄球菌的生长繁殖。

试设计实验探究青霉菌与金黄色葡萄球菌之间是否存在这种关系。

(1)你的实验假设是____________________ ____________________________________________________。

(2)主要实验步骤：
①制备适合细菌的培养基两份，并编号A和B，向A中接种青霉菌，并将A、B培养基置于适宜温度下培养；
②____________________________________________________；
③____________________________________________________；
④观察________________________________________________。

(3)实验结果预测与分析：
①
_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________；
②
_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________。

解析本题重在考查探究实验的设计思路。

答案 (1)青霉菌产生了化学物质抑制了金黄色葡萄球菌的生长繁殖
(2)②取培养基A，将其中的青霉菌全部去除③向A、B培养基中同时接种金黄色葡萄球菌，并置于适宜的温度下培养一段时间④培养基上的金黄色葡萄球菌
(3)①若A培养基上的金黄色葡萄球菌不能正常生长、繁殖，而B培养基上的金黄色葡萄球菌能正常生长、繁殖，说明青霉菌通过产生某种化学物质来抑制金黄色葡萄球菌生长
②若A、B培养基上金黄色葡萄球菌都能正常生长、繁殖，说明青霉菌不是通过产生某种化学物质来抑制金黄色葡萄球菌的生长。