微生物的培养与应用专题
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一.微生物基础知识
㈠.微生物的类群
原核类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻
原生生物：显微藻类、原生生物
微
（如：草履虫、变形
生 真核类
虫等）
物
真菌：酵母菌、霉菌、食用菌
非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
1.细菌的形态
球菌
杆菌
弧菌
2.ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ菌的繁殖 二分裂
为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体——芽孢
⑶.常见的生长因子：
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
㈢.培养基
1.概念：培养基（培养液）是由人工方法配制 而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。
P14
2.培养基的成分：
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物
质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营
养物质以及氧气等的要求。
P15
3.培养基的类型和用途
2.微生物的氮源
⑴.概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵.来源： ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。
②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 ⑶.作用： 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产 物。
3.生长因子
⑴.概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。
⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。
物的生长
培养、分离出特 定微生物
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂 或化学药品,用以鉴别不同
种类的微生物
鉴别不同种类微
生物 P84
练习
1.不能作为异养微生物碳源的是（D ） A．牛肉膏 B．含碳有机物 C．石油 D．含碳无机物
2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的 主要差别是（A ）
A．碳源 B．氮源
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
1.微生物的碳源
⑴.概念 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。
⑵.来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生 粉饼、石油等
⑶.作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
划分标准 物理性质 化学成分
用途
培养基的种类
培养基种类
特点
用途
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体培养基 固体培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、 分类鉴定
微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌
种
天然培养基 合成培养基
含化学成分不明确的天然物 质
培养基成分明确
工业生产 分类、鉴定
选择培养基
在培养基中加入某种化学物 质,以抑制不需要的微生物 的生长,促进所需要的微生
防止外来杂菌的入侵
2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其 他外来微生物污染外，还有什么目的？ （P15旁栏思考）
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
3. 消毒和灭菌有何不同？
4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？
消毒与灭菌的比较
比 理化因素的 消灭微生物 芽孢和孢子 较 作用强度 的数量 能否被消灭 项
5．右表是某微生物培养 基成分，请据此回答：
（1）右表培养基可培养 的微生物类型 是 自养型微生。物
（2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。如不 想浪费此培养基，可再加 入 含碳有机物 ，用于培 养
金黄色葡萄球菌 ，
编号 ①
②
③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
成分 粉状硫 （NH4） 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
C．无机盐 D．生长因子
3.下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是 （ B）
A．是微生物生长不可缺少的微量有机物 B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等 D．一般是酶和核酸的组成成分
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的
微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；
消 较为温和 部分生活状
毒
态的微生物
不能
灭 强烈 全部微生物
能
菌
3.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.消毒的方法：
①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。 ④紫外线消毒。
3.细菌的菌落
⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量 繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有 一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、 透明度等。
⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落， 可以作为菌种鉴定的重要依据。
几 种 菌 落 及 其 形 态
几 种 菌 落 及 其 形 态
。
③
（6）调右整表pH中各成分重量确定的原 ④
则是
。
（7）若右表培养基用于菌种鉴定，⑤
应该依增微加生物的的成生分长需要确定
。⑥
K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g
⑦
H2O
100m l
琼脂（或凝固剂）
㈣.无菌技术
思考： 1. 获得纯净培养物的关键？
含量 10g
0.4g
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g 100ml
（3）若除去成分②，加入
（CH2O），该培养基可用于培
养 固氮微生。物
编号 成分 含量
（4）表中营养成分共有 3 类。① 粉状硫 10g
（5）不论何种培养基，在各种成 分都溶化后分装前，要进行的
②
（NH4） 2SO4
0.4g
是
b. 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干
燥的物品( 玻璃器皿)
c. 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min
通常用于培养基的灭菌
P16旁栏思考
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿 ⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管 ⑶实验操作者的双手
表面灭菌和空气 灭菌等使用 紫 外线 灭菌法， 所用器械是 紫 外灯 。照射 30min，可先喷 洒石炭酸或煤酚 皂溶液加强消毒 效果。
（2）灭菌 a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a. 灼烧灭菌
注意适用范围
微生物的接种工具 (接 种环、接种针)或其 他金属用具直接在火 焰的充分燃烧层灼烧
在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法
能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④纤维素分解菌
A.④②
B.①②
C.①③
D.③④
解析：选A。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可 以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可 以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。
㈠.微生物的类群
原核类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻
原生生物：显微藻类、原生生物
微
（如：草履虫、变形
生 真核类
虫等）
物
真菌：酵母菌、霉菌、食用菌
非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单
1.细菌的形态
球菌
杆菌
弧菌
2.ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ菌的繁殖 二分裂
为抵抗不良环境可形成细菌的休眠体——芽孢
⑶.常见的生长因子：
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
㈢.培养基
1.概念：培养基（培养液）是由人工方法配制 而成的，专供微生物生长繁殖使用的营养基质。
P14
2.培养基的成分：
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物
质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营
养物质以及氧气等的要求。
P15
3.培养基的类型和用途
2.微生物的氮源
⑴.概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 ⑵.来源： ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。
②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 ⑶.作用： 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产 物。
3.生长因子
⑴.概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。
⑵.作用： 酶和核酸的组成成分。
物的生长
培养、分离出特 定微生物
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂 或化学药品,用以鉴别不同
种类的微生物
鉴别不同种类微
生物 P84
练习
1.不能作为异养微生物碳源的是（D ） A．牛肉膏 B．含碳有机物 C．石油 D．含碳无机物
2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的 主要差别是（A ）
A．碳源 B．氮源
㈡.微生物需要的营养物质及功能
微生物需要的五大类营养要素物质是： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水
1.微生物的碳源
⑴.概念 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的 营养物质。
⑵.来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、花生 粉饼、石油等
⑶.作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
划分标准 物理性质 化学成分
用途
培养基的种类
培养基种类
特点
用途
液体培养基
不加凝固剂
工业生产
半固体培养基 固体培养基
加凝固剂，如琼脂
观察微生物的运动、 分类鉴定
微生物分离、鉴定、 活菌计数、保藏菌
种
天然培养基 合成培养基
含化学成分不明确的天然物 质
培养基成分明确
工业生产 分类、鉴定
选择培养基
在培养基中加入某种化学物 质,以抑制不需要的微生物 的生长,促进所需要的微生
防止外来杂菌的入侵
2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其 他外来微生物污染外，还有什么目的？ （P15旁栏思考）
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
3. 消毒和灭菌有何不同？
4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？
消毒与灭菌的比较
比 理化因素的 消灭微生物 芽孢和孢子 较 作用强度 的数量 能否被消灭 项
5．右表是某微生物培养 基成分，请据此回答：
（1）右表培养基可培养 的微生物类型 是 自养型微生。物
（2）若不慎将过量 NaCl加入培养基中。如不 想浪费此培养基，可再加 入 含碳有机物 ，用于培 养
金黄色葡萄球菌 ，
编号 ①
②
③ ④ ⑤ ⑥ ⑦
成分 粉状硫 （NH4） 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
C．无机盐 D．生长因子
3.下列关于生长因子的说法中，不正确的一项是 （ B）
A．是微生物生长不可缺少的微量有机物 B．是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 C．主要包括维生素、氨基酸和碱基等 D．一般是酶和核酸的组成成分
4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的
微生物。在碳源为纤维素的培养基上，大部分微生物无法生长；
消 较为温和 部分生活状
毒
态的微生物
不能
灭 强烈 全部微生物
能
菌
3.常用的消毒与灭菌的方法 ⑴.消毒的方法：
①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。 ②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。 ③化学药剂消毒法：用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。 ④紫外线消毒。
3.细菌的菌落
⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量 繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有 一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
⑵.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、 透明度等。
⑶.功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落， 可以作为菌种鉴定的重要依据。
几 种 菌 落 及 其 形 态
几 种 菌 落 及 其 形 态
。
③
（6）调右整表pH中各成分重量确定的原 ④
则是
。
（7）若右表培养基用于菌种鉴定，⑤
应该依增微加生物的的成生分长需要确定
。⑥
K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g
⑦
H2O
100m l
琼脂（或凝固剂）
㈣.无菌技术
思考： 1. 获得纯净培养物的关键？
含量 10g
0.4g
4.0g 9.25g 0.5g 0.5g 100ml
（3）若除去成分②，加入
（CH2O），该培养基可用于培
养 固氮微生。物
编号 成分 含量
（4）表中营养成分共有 3 类。① 粉状硫 10g
（5）不论何种培养基，在各种成 分都溶化后分装前，要进行的
②
（NH4） 2SO4
0.4g
是
b. 干热灭菌 160－170℃ ；1－2h 能耐高温的需要保持干
燥的物品( 玻璃器皿)
c. 高压蒸汽灭菌 100kPa 121℃ 15-30min
通常用于培养基的灭菌
P16旁栏思考
请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法。 ⑴培养细菌用的培养基与培养皿 ⑵玻棒、试管、烧瓶和吸管 ⑶实验操作者的双手
表面灭菌和空气 灭菌等使用 紫 外线 灭菌法， 所用器械是 紫 外灯 。照射 30min，可先喷 洒石炭酸或煤酚 皂溶液加强消毒 效果。
（2）灭菌 a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a. 灼烧灭菌
注意适用范围
微生物的接种工具 (接 种环、接种针)或其 他金属用具直接在火 焰的充分燃烧层灼烧
在培养基中加入青霉素，可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法
能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④纤维素分解菌
A.④②
B.①②
C.①③
D.③④
解析：选A。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可 以利用纤维素，大部分微生物却不能；培养基中加入青霉素可 以抑制细菌和放线菌，但霉菌能够生长。