反相高效液相色谱法测定清肝二十七味丸中栀子苷的含量
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关键词院 反相高效液相色谱法曰清肝二十七味丸曰栀子苷曰含量测定 中图分类号院R286.0 文献标识码院A 文章编号院1673- 260X渊 2011冤 11- 0097- 03
清肝二十七味丸又名钦那德贡斯乐袁是根据蒙 医药学配方理论及现代药理研究方法研制而成的 传统名方袁具有疏肝清热尧健胃消食尧杀粘虫尧抑制 肝炎病毒尧促使 HBsAg 转阴的作用[1].主要用于急尧
进样量(μ g)为横坐标尧峰面积为纵坐标袁绘制标准
栀子苷含量的同一批 ( 批号为 090414袁 含量为 0.660mg窑g-1)样品粉末 6 份袁分别精密加入一定量 196mg窑L-1 的栀子苷对照品贮备溶液袁按野 1.2.2冶项 方法处理后进样 20μ L 测定袁 计算栀子苷回收率袁 结果见表 1.
的色谱条件进样测定.计算得样品中栀子苷的平均
含量为 0.660mg窑g-1袁RSD=1.1%袁表明方法的重复性
良好.
1.2.8 加样回收率试验 分别精密称取 1.5g 已知
. All Rights ReserveCd. 图 1 对照品渊 A冤 尧阴性对照渊 B冤 尧供试品渊 C冤 溶液的高 效液相色谱图 1. 栀子苷 μ L 栀子苷对照品贮备溶液袁进样袁测定峰面积袁以
表 1 加样回收率试验结果
Origቤተ መጻሕፍቲ ባይዱnal/mg
Added/mg
Detected/mg
Recovery/%
x/%
0.992
0.784
1.764
98.5
A
的 RSD=0.92%袁表明仪器精密度良好.
1.2.6 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液袁
分别于 0尧4尧8尧12尧24h 时进样袁测定峰面积.计算得
栀子苷峰面积的 RSD=1.3%袁 表明供试品溶液在
24h 内稳定.
1.2.7 重 复 性 试 验 精 密 称 取同 一 批 样 品 袁 按
B
野 1.2.2冶项下方法制备 6 份供试品溶液袁按野 1.2.1冶项
. A慢ll性肝Ri炎g袁h脾ts胃虚Re热s袁e骨rv蒸e烦d.闷袁食欲不振袁恶心呕
逆 等 症 [2]袁 是 治 疗 肝 病 的 良 药 . 为 了 有 效 控 制 其 质 量袁作者参考有关文献[3-5]袁采用反相高效液相色谱 法对清肝二十七味丸中的栀子苷进行测定袁操作简 单尧省时袁结果准确尧可信袁精密度尧重复性较好. 1 实验部分 1.1 仪器与试剂
Agilent 1200 高效液相色谱系统渊 美国安捷伦 公司冤 曰KQ-250E 型超声波清洗器 渊 昆山市超声仪 器有限公司冤 曰METTLER AE240 电子天平渊 瑞士梅 特勒公司冤 曰栀子苷对照品渊 中国药品生物制品检定 所袁批号为 110748-200512冤 曰乙腈为色谱纯(美国 Fisher)曰水为娃哈哈纯净水曰甲醇为分析纯渊 天津市 福晨化学试剂厂冤 .
蒙药清肝二十七味丸 渊 内蒙古库伦蒙药厂袁批 号院090413袁090414袁090415冤 曰 阴性对照品的药材 渊 内蒙古赤峰市中蒙医院冤 . 1.2 方法与结果
1.2.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Agilent Eclipse XDB-C18 色谱柱(150mm× 4.6mm袁5μ m)袁柱温为室 温袁流动相为 0.1%三乙胺渊 10%磷酸调 pH7.0冤 - 乙 腈 渊 83:17冤 袁 流 速 为 1.0mL窑min-1袁 检 测 波 长 为 238nm袁进样量 20μ L. 1.2.2 溶液的制备 精密称取 4.9mg 栀子苷对照 品袁置 25mL 量瓶中袁用流动相溶解袁并稀释至刻 度袁即得 196mg窑L-1 的对照品贮备溶液.精密吸取贮 备溶液 2mL袁置 10mL 量瓶中袁用流动相稀释至刻 度袁即得 39.2mg窑L-1 的对照品溶液.精密称取 1.5g 已研细的清肝二十七味丸袁置具塞锥形瓶中袁加入 25mL50%甲醇袁密塞袁精密称定重量袁超声处理渊 功 率院250w袁频率院40KHz冤 30min袁放冷袁再称定重量袁 用 50%甲醇补足减失的重量袁摇匀袁滤过袁取续滤液 即得供试品溶液.按处方要求制备不含栀子苷药材 的样品袁同法制成阴性样品溶液袁备用. 1.2.3 阴性对照试验 取栀子苷对照品溶液尧供试 品溶液和阴性样品溶液袁在野 1.2.1冶项的色谱条件下 分别进样 20μ L袁测定渊 图 1冤 .由图可知院阴性样品 对栀子苷的测定无干扰袁且栀子苷与其他组分可达 基线分离. 1.2.4 标准曲线的制备 精密吸取 4尧8尧12尧16尧20
第 27 卷 第 11 期 2011 年 11 月
赤 峰 学 院 学 报渊 自 然 科 学 版 冤 Journal of Chifeng University渊 Natural Science Edition冤
Vol. 27 No. 11 Nov. 2011
反相高效液相色谱法测定清肝二十七味丸中栀子苷的含量
邹继红
渊 赤峰学院 医学院袁 内蒙古 赤峰 024000冤
摘 要院 目的院 建立测定清肝二十七味丸中栀子苷的方法. 方法院 采用 HPLC 法袁 色谱柱为 Agilent Eclipse XDB- C18 柱袁流动相为 0.1%三乙胺渊 10%磷酸调 pH7.0冤 - 乙腈渊 83:17冤 袁流速为 1mL窑min- 1袁检测波 长为 238nm. 结果院 栀子苷的 进样量在 0.784- 3.920μ g 与峰面 积呈良好的 线 性袁 回归 方程 为院Y = 1419.8X+3.095袁渊 r= 0.9998冤 曰平均加样回收率为 99.1%袁RSD=0.79%.结论院所用方法简便尧快速尧准确袁适用 于清肝二十七味丸中栀子苷的质量控制.
-9 7-
曲线袁得回归方程为:Y=1419.8X+3.095袁渊 r=0.9998冤 .
结果表明院 栀子苷进样量在 0.784~ 3.920μ g 与峰
面积具有良好的线性关系.
1.2.5 精密度试验 取浓度为 39.2mg窑L-1 的对照
品溶液及供试品溶液各 20μ L袁 分别进样袁 重复 5
次测定峰面积.计算得对照品的 RSD=0.76%袁样品
清肝二十七味丸又名钦那德贡斯乐袁是根据蒙 医药学配方理论及现代药理研究方法研制而成的 传统名方袁具有疏肝清热尧健胃消食尧杀粘虫尧抑制 肝炎病毒尧促使 HBsAg 转阴的作用[1].主要用于急尧
进样量(μ g)为横坐标尧峰面积为纵坐标袁绘制标准
栀子苷含量的同一批 ( 批号为 090414袁 含量为 0.660mg窑g-1)样品粉末 6 份袁分别精密加入一定量 196mg窑L-1 的栀子苷对照品贮备溶液袁按野 1.2.2冶项 方法处理后进样 20μ L 测定袁 计算栀子苷回收率袁 结果见表 1.
的色谱条件进样测定.计算得样品中栀子苷的平均
含量为 0.660mg窑g-1袁RSD=1.1%袁表明方法的重复性
良好.
1.2.8 加样回收率试验 分别精密称取 1.5g 已知
. All Rights ReserveCd. 图 1 对照品渊 A冤 尧阴性对照渊 B冤 尧供试品渊 C冤 溶液的高 效液相色谱图 1. 栀子苷 μ L 栀子苷对照品贮备溶液袁进样袁测定峰面积袁以
表 1 加样回收率试验结果
Origቤተ መጻሕፍቲ ባይዱnal/mg
Added/mg
Detected/mg
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x/%
0.992
0.784
1.764
98.5
A
的 RSD=0.92%袁表明仪器精密度良好.
1.2.6 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液袁
分别于 0尧4尧8尧12尧24h 时进样袁测定峰面积.计算得
栀子苷峰面积的 RSD=1.3%袁 表明供试品溶液在
24h 内稳定.
1.2.7 重 复 性 试 验 精 密 称 取同 一 批 样 品 袁 按
B
野 1.2.2冶项下方法制备 6 份供试品溶液袁按野 1.2.1冶项
. A慢ll性肝Ri炎g袁h脾ts胃虚Re热s袁e骨rv蒸e烦d.闷袁食欲不振袁恶心呕
逆 等 症 [2]袁 是 治 疗 肝 病 的 良 药 . 为 了 有 效 控 制 其 质 量袁作者参考有关文献[3-5]袁采用反相高效液相色谱 法对清肝二十七味丸中的栀子苷进行测定袁操作简 单尧省时袁结果准确尧可信袁精密度尧重复性较好. 1 实验部分 1.1 仪器与试剂
Agilent 1200 高效液相色谱系统渊 美国安捷伦 公司冤 曰KQ-250E 型超声波清洗器 渊 昆山市超声仪 器有限公司冤 曰METTLER AE240 电子天平渊 瑞士梅 特勒公司冤 曰栀子苷对照品渊 中国药品生物制品检定 所袁批号为 110748-200512冤 曰乙腈为色谱纯(美国 Fisher)曰水为娃哈哈纯净水曰甲醇为分析纯渊 天津市 福晨化学试剂厂冤 .
蒙药清肝二十七味丸 渊 内蒙古库伦蒙药厂袁批 号院090413袁090414袁090415冤 曰 阴性对照品的药材 渊 内蒙古赤峰市中蒙医院冤 . 1.2 方法与结果
1.2.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Agilent Eclipse XDB-C18 色谱柱(150mm× 4.6mm袁5μ m)袁柱温为室 温袁流动相为 0.1%三乙胺渊 10%磷酸调 pH7.0冤 - 乙 腈 渊 83:17冤 袁 流 速 为 1.0mL窑min-1袁 检 测 波 长 为 238nm袁进样量 20μ L. 1.2.2 溶液的制备 精密称取 4.9mg 栀子苷对照 品袁置 25mL 量瓶中袁用流动相溶解袁并稀释至刻 度袁即得 196mg窑L-1 的对照品贮备溶液.精密吸取贮 备溶液 2mL袁置 10mL 量瓶中袁用流动相稀释至刻 度袁即得 39.2mg窑L-1 的对照品溶液.精密称取 1.5g 已研细的清肝二十七味丸袁置具塞锥形瓶中袁加入 25mL50%甲醇袁密塞袁精密称定重量袁超声处理渊 功 率院250w袁频率院40KHz冤 30min袁放冷袁再称定重量袁 用 50%甲醇补足减失的重量袁摇匀袁滤过袁取续滤液 即得供试品溶液.按处方要求制备不含栀子苷药材 的样品袁同法制成阴性样品溶液袁备用. 1.2.3 阴性对照试验 取栀子苷对照品溶液尧供试 品溶液和阴性样品溶液袁在野 1.2.1冶项的色谱条件下 分别进样 20μ L袁测定渊 图 1冤 .由图可知院阴性样品 对栀子苷的测定无干扰袁且栀子苷与其他组分可达 基线分离. 1.2.4 标准曲线的制备 精密吸取 4尧8尧12尧16尧20
第 27 卷 第 11 期 2011 年 11 月
赤 峰 学 院 学 报渊 自 然 科 学 版 冤 Journal of Chifeng University渊 Natural Science Edition冤
Vol. 27 No. 11 Nov. 2011
反相高效液相色谱法测定清肝二十七味丸中栀子苷的含量
邹继红
渊 赤峰学院 医学院袁 内蒙古 赤峰 024000冤
摘 要院 目的院 建立测定清肝二十七味丸中栀子苷的方法. 方法院 采用 HPLC 法袁 色谱柱为 Agilent Eclipse XDB- C18 柱袁流动相为 0.1%三乙胺渊 10%磷酸调 pH7.0冤 - 乙腈渊 83:17冤 袁流速为 1mL窑min- 1袁检测波 长为 238nm. 结果院 栀子苷的 进样量在 0.784- 3.920μ g 与峰面 积呈良好的 线 性袁 回归 方程 为院Y = 1419.8X+3.095袁渊 r= 0.9998冤 曰平均加样回收率为 99.1%袁RSD=0.79%.结论院所用方法简便尧快速尧准确袁适用 于清肝二十七味丸中栀子苷的质量控制.
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曲线袁得回归方程为:Y=1419.8X+3.095袁渊 r=0.9998冤 .
结果表明院 栀子苷进样量在 0.784~ 3.920μ g 与峰
面积具有良好的线性关系.
1.2.5 精密度试验 取浓度为 39.2mg窑L-1 的对照
品溶液及供试品溶液各 20μ L袁 分别进样袁 重复 5
次测定峰面积.计算得对照品的 RSD=0.76%袁样品