赛默飞世尔 制备 HPLC 色谱柱使用说明书(节选) - NH2P 系列

色谱柱使用说明书
色谱柱使用说明书((节选)
NH2P系列
系列：
：NH2P-50 4E 1 色谱柱规格
产品名称理论塔板数官能团基质分离模式
粒径
（μm）
尺寸
I.D.×L(mm)
NH2P-50 4E 7500以上氨基聚乙烯醇正相分离 5 4.6×250
产品名称最大耐压
(MPa)
最大使用流量
（mL/min）
使用温度
范围(℃)
使用PH
范围
出厂时溶剂
NH2P-50 4E 15.0 1.5 4～50 2～13 CH3CN/H2O=75/25 通常使用流量：0.5～1.0 mL/min；使用频率高时，建议在通常流量下使用。

2 使用上的注意事项
使用上的注意事项
聚合物氨基柱与硅胶氨基柱相比，在同样的流动相条件下分离性能高，再现性好。

适用
于宽的PH范围（PH2~13）及各种缓冲液。

Ⅰ 操作注意事项
1）一定要在规定的压力、流量、温度范围内使用。

如果瞬间超过最高使用压力、或最大使用流量，都有可能会损坏色谱柱。

2）样品必须用流动相来配制。

对于流动相（如：乙腈/水=75/25）难溶解的样品，可将样品在纯水中溶解后，再加乙腈调成与流动相相同的组成。

3）连接色谱柱之前，对液相流路系统进行充分的清洗。

清洗方法如下。

A 流动相是极性溶剂/水的情况下
清洗液：NH2P色谱柱测试用流动相
清洗量：100mL
注意点：拨动切换阀，对进样系统也要进行清洗。

B 流动相是缓冲液的情况下
清洗液：①纯水 40mL②50mM 磷酸水溶液
③纯水 40mL④50mM 氢氧化钠水溶液 100mL
⑤纯水 100mL⑥NH2P色谱柱测定用流动相 100mL
注意点：拨动切换阀，对进样系统也要进行清洗。

C 色谱柱流动相置换时，置换流量为0.5mL/min以下。

4）色谱柱的再生
如果液相流路系统中含有污染填料的成分（金属离子等），会引起糖类的洗脱异常、分离性能降低。

因此3）流路清洗非常重要。

如果出现类似的分析异常，可以对色谱柱进行再生，有可能柱性能会回复。

再生方法如下。

流量：0.5mL/min
清洗液（清洗时间）： ①纯水（10min）②0.1M 高氯酸溶液(2 hr)
③纯水（10min）④0.1M 氢氧化钠水溶液(2 hr)
⑤纯水(20min)⑥NH2P色谱柱测定用流动相(1 hr)
Ⅱ 各种流动相使用注意事项
1）糖分析
①水、乙腈和乙醇的混合液或各单独液的任意比率都可使用。

因乙醇水溶液的黏度
高，使用流量请低于通常流量。

②上述的溶液中，也可使用乙腈或乙醇能溶的各种缓冲试剂（如氢氧化四丙基铵、
醋酸、醋酸钠）。

使用时请确认是否有沉淀的析出。

③PH使用范围2～13
2）作为离子交换色谱柱使用
①磷酸盐、醋酸盐等各种缓冲液及氯化钠、氯化钙、硫酸钠等可同时使用。

②PH使用范围2～13
3）使用温度
4℃～50℃范围下使用。

高温使用时注意防止生成气泡。

低温下由于流动相黏度升
高，建议在低流量下使用。

4）色谱柱的再生（简单再生法）
0.1N的NaOH水溶液在低于通常流量下以10～20倍色谱柱体积流过色谱柱。

碱洗净后，一定要置换成30～80%的乙腈水溶液后保存。

3色谱柱性能的测试方法
按照下面的条件，对色谱柱进行性能测试（详情请参考色谱柱附带的出厂检查报告COA）色谱柱流动相流量色谱柱温度样品注入量
NH2P-50 4E CH3CN/H2O=75/25 1.0mL/min 室温约30℃5mg/mL
Sucrose
6μL
理论塔板数的计算公式
N=5.54（Rt/W）2
N: 理论塔板数、Rt: 保留时间、W: 半峰宽
进样。