22 动物细胞工程(第二课时)-2022高二生物同步优质课件(人教版2019选择性必修3)

植物体细胞杂交
植物组织培养
动物细胞融合
动物细胞培养
动物体细胞核移植
动物细胞
工程
植物细胞
工程
胚胎工程
胚胎工程的理论基础
胚胎工程技术及其应用
第二章细胞工程
第1节 动物细胞工程（第二课时）动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物细胞融合技术与单克隆抗体本节聚焦
1、什么是动物细胞融合技术？
2、单克隆抗体是如何制备的？
动物细胞融合技术
指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

原理
诱导方式结果
意义细胞膜的流动性
物理法：电融合法、
化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒
杂交细胞
具有
拓 展
1)“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？
用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构
2) 灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，
使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞
膜打开，细胞发生融合。

（P48相关信息）
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合
原理
融合前处理
诱导融合的方法
意义和用途克服远源杂交的障碍，
获得杂种植株细胞膜的流动性
细胞膜的流动性植物细胞的全能性
去除细胞壁后诱导原生
质体融合使细胞分散后诱导细胞
融合
物理（离心、电融合法）化学（ PEG ）物理、化学方法（ PEG ）灭活的病毒
制备单克隆抗体
单克隆抗体的制备
研究背景
（1）早期获得抗体的方法
向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体（2）上述抗体的缺点
产量低、纯度低、特异性差
（3）大量制备单一抗体的思路和需解决的问题
每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
单一B淋
巴细胞
细胞群
选
择
克
隆
产
生
大量纯度
高特异性
强的抗体
注意：在体外培养条件下一个B淋巴细胞不可能无限增殖思考：
有什么办法能得到既能迅速大量增殖又能产生大量特定抗体的细胞？
一种B淋巴细胞（只产生一种特定抗
体）能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞
动物细胞融合
杂交瘤细胞
动物细胞培养
大量的特定抗体
（4）单克隆抗体制备思路
米尔斯坦
科勒
由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖
骨髓瘤细胞培养
杂交细胞
单一抗体
阳性细胞
单克隆
抗体
细胞融合
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
融
合·
脾脏中获取
单克隆抗体的制备过程
克隆化培养和抗体检测
★
有限稀释法
每一个孔中尽量只接种一个杂
交瘤细胞
侧面模拟图
克隆化培养一段时间取上清液进行抗体检测
拓 展
单克隆抗体的应用
诊断试剂应用
运载药物
治疗疾病
2、除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
①可以用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。

②一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗
1、ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体主要发挥靶向运输作用，即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物
输送到靶细胞；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞
3、单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床应用上各具有什么优势？
①单克隆抗体诊断试剂盒中的单克隆抗体只与特定的抗原反应，因此检测的特异性和灵敏度大大提高。

生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用，有利于控制产品的质量和标准化生产诊断试剂盒。

②ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点。

讨论
诊断试剂
（1）原理单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发
生特异性结合
（2）具体应用及部分实例
①多种疾病的诊断
实例：利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中成像的技术，可定位
诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。

②病原体的鉴定
实例：乙肝病毒表面抗原定量检测试剂盒
③其他类型诊断
实例：早早孕诊断试剂盒
运载药物
（1）具体应用实例
与药物结合，制成______________________ ， 杀伤癌细胞；
ADC通常由_____、_____和 _____ 三部分组成；
（2）原理
通过将药物与__________________________ 的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细
胞的_______________；发挥杀伤作用的为
______________________________________；单克隆抗体作用为_______________；（3）优点 _________________________________________________
抗体-药物偶联物（ADC）抗体接头药物能特异性识别肿瘤细胞抗原选择性杀伤放射性同位素、化学药物或细胞毒素
靶向运输作用靶点清楚、毒副作用小（不会对健康细胞造成伤害）
动物细胞融合技术
单克隆抗体的制备
单克隆抗体的应用1.动物细胞融合的概念、结果、原理、意义是什么
2.动物细胞融合常用的方法，
3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较
1.单克隆抗体制备的研究背景
1.诊断试剂
2.运载药物
3.治疗疾病
2.单克隆抗体制备
动物
细胞
融合
技术
与单
克隆
抗体课堂小结
1、抗PD-L 1单克隆抗体能与癌细胞膜表面的PD-L 1特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。

如下图是制备抗PD-L 1单克隆抗体的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为一种病原体可以诱导产生多种B淋巴细胞
B．多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞
C．图中细胞集落a-d既能大量繁殖，又能产生抗体
D．图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L 1单克隆抗体
B
试一试
2、甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。

为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作
过程如图。

相关叙述正确的是（ ）
D Array
A．过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲
B．过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性
C．过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同
D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
3、下列关于单克隆抗体制备的说法，正确的是（ ）
D
A．将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体
B．培养杂交瘤细胞必需提供动物血清
C．诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞D．第二次筛选杂交瘤细胞是为了筛选出能产生特定抗体且遗传稳定的杂交瘤细胞。