肺癌开题报告.ppt

• 本研究主要是在建立小鼠肺癌模型，并在 此基础上用黄芪对该病进行治疗，通过观 察小鼠的一般情况，小鼠瘤组织的重量及 抑瘤率、小鼠肺转移灶的影响。采用免疫 组化方法，观察黄芪对荷瘤小鼠肿瘤坏死 因子及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化。 从微观机制研究黄芪对小鼠肺癌的作用机 制。预期成果不仅可为防治该病证提供新 思路和理论依据，指导临床对肺癌的预防、 治疗和康复，同时为的深层次机制和研究 中药微观作用机制的研究进行资料积累， 提供新思路和理论支撑。
技术路线
• 动物实验
• 1.肺癌的临床诊断：肺癌的临床诊断必须依据临 床表现和各种影像结果进行综合分析，但最后的 确诊必须取得细胞学或病理组织学的证据。任何 没有病理学或病理组织学证据的诊断，都不能为 最后的诊断结果。依据这样的原则，肺癌的诊断 可分为肺癌的定位诊断和肺癌的定性诊断两种， 所有的影像学诊断法方可认为是定位诊断，而所 有以获取细胞学或病理组织学为目的的诊断科认 为是定性诊断。定位诊断是基础，定性诊断是关 键。
• 用药方法：将药物按成人日服量换算，计算出小鼠日服量， 每日对治疗组小鼠灌服中药煎剂0.4ml/100g体重，对空白 组及肺癌模型组小鼠灌服生理盐水0.4ml/100g体重。
• 连续用药15天，第16天处理所有小鼠。后脱颈处死小鼠, 完整剖取接种的瘤块,电子天平称重，按公式:抑瘤率=(空 白组平均瘤重-给药组平均瘤重) /空白组平均瘤重×100%。 小鼠处死后，将整个肺取下。在双盲条件下,计数肺转移 瘤灶的数目，按公式:肺转移抑制率=(空白组平均肺转移瘤 灶数目-给药组平均肺转移瘤灶数目) /空白组平均肺转移瘤 灶数目×100%。
（2）药物干预阶段
• 造模24h后，空白组、肺癌模型组小鼠不予药物干预，以 生理盐水灌胃。中药治疗组小鼠黄芪煎汤灌胃。
• 药物制备：黄芪25g加8倍水，浸泡半小时，头次煎煮半小 时，滤出药渣后加水至药面以上3ml，再煎20分钟。将两 次药液混合、过滤，加压浓缩至100%（即每毫升含生药 1.0g）的水提剂。
4.统计学处理
• 计量资料以±S表示，多组间比较用单 因素方差分析，组间两两比较用q检验， 计数资料用χ2检验，P＜0.05为显著性 差异，P＜0.01为非常显著性差异，均 用SAS软件进行统计学处理。
• 中医药在治疗肺癌上有其自己的优势，近几年来应用辨证 论治、专方、专药及新药新剂型等方法治疗肺Leabharlann Baidu均有一定 的进展，在稳定病灶、改善症状、提高生存质量、延长生 存期等方面都具有一定的疗效和优势。因此研究中医药在 肺癌治疗中的作用有其很高的应用价值，能更好的服务于 临床中肺癌的治疗。
• 肺癌属“肺积”、“息责”等范畴，属于祖国医学“咳 嗽”、“咯血”、“肺积”，这与肺癌的临床表现有相似 之处。中医学认为，肺癌是由于人体正气不足，尤其是肺 脾肾虚损，再加上六淫和七情等因素长期作用，导致肺气 不足，肺阴亏虚，升降失调，气血瘀滞，内结于肺，形成 积块而发生的[6]。
选题意义
根据中国卫生部肿瘤防治办公室提供的2006年中国肿瘤发病 率和十大恶性肿瘤发病率排序显示，肺癌居男性恶性肿瘤 发病 首 位， 男女恶性肿瘤死亡率最高的均为肺癌 [2] 。 2000年世界卫生组织的统计资料表明，每年全球的肺癌新 发病例位1.2百万，占全部恶性肿瘤的12.3％，死亡1.1百 万，占肿瘤全部死因的17.8％。更为严重的是，凡是烟草 消费大国，其肺癌新发病率乃在不断增长，成为越来越严 重的危害人民生命和健康的常见疾病[3]。原发性肺癌是发 达国家的主要肿瘤，以美国为例，1997年全美国肺癌的发 生数男性为98300例，女性为79800例，分别是男女肿瘤 发病率第二位。1997年因肺癌死亡的人数为160400人， 居恶性肿瘤死亡率第1位，占全美国肿瘤死亡病人的29％ [4]。
3.检测指标
• （1）整体观测：在实验过程中观察小鼠症状、体 重、生存时间、呼吸、被毛情况、食量、饮水量， 胸腔，纵膈，胸水。（2）瘤体重测定：小鼠处死 后，去肿瘤组织，精密电子天平称重。（3）血生 化指标检测：小鼠腹主动脉取血，以ELISA法测 定、TNF-α的含量，放免法测定血浆中MMP-9的 含量（4）瘤组织处理：肿瘤组织用福尔马林液充 分固定，常规脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，常 规切片，HE染色，光镜下观察期组织学变化。肺 组织用福尔马林固定12h,进行HE染色,在光学显微 镜下观察读片,以进一步确认转移灶的病理性质及 特征。
2. 肺癌模型建立的方法
• （1）肺癌小鼠造模：在本院三级动物实验室中， 无菌操作，取肺癌瘤小鼠腹水，稀释至含瘤细胞 2 ×1010 /L，置冰上，每小鼠右腋皮下接种 0. 2ml，分别给模型组、中药组和西药组接种。接种 次日24h后进行药物抑药瘤试验；实验设空白组 和模型对照组，中药组和西药组。模型对照组中， 每只小鼠腹腔注射等体积生理盐水，中药组中每 只小鼠腹灌胃 0.4ml，100mg/ml。西药对照组中。 每只小鼠腹腔注射紫杉醇注射液0.2ml，20mg/ml 。 每只小鼠每天用药 1 次，连续用药 15天，停药次 日处死小鼠，剥离肿瘤，称体重及瘤重，计算抑 瘤率。
课题设计
• 研究内容与研究方法：
• 以小鼠转移肺癌模型为研究对象，采用中 西药对比进行治疗，动态观察小鼠的体重 改变、抑瘤率的比较、肺组织内基质金属 蛋白酶MMP-9肿瘤坏死因子TNF-α等细胞 因子的变化，从细胞分子水平阐释这些变 化，及黄芪和紫杉醇对肺癌的作用的相关 性，观察探讨黄芪对肺癌的干预作用的动 态变化及时效性，为防治肺癌提供新思路 和理论依据。
黄芪对肺癌小鼠模型的干预机 制研究
导师:孙广仁教授 学生：
选题依据
• 选题目的： • 通过建立小鼠肺癌模型，探讨黄芪对肺癌的抑制
和转移的作用机制，以期在临床上能有效的运用 黄芪对肺癌治疗提供实验依据。建立肺癌小鼠肺 模型，观察黄芪对小鼠生存时间，小鼠瘤组织的 重量及抑瘤率、小鼠肺转移灶的影响。采用免疫 组化方法，观察黄芪对小鼠肿瘤坏死因子及基质 金属蛋白酶-9(MMP-9)的变化。从微观机制研究 黄芪对小鼠肺癌的作用机制，为临床防治提供实 验依据。