pCambia1391Z 植物表达载体
麻竹DISCL6基因amiRNA前体合成及表达载体构建
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｗｅｂ ＭｉｃｒｏＲＮＡ Ｄｅｓｉｇｎｅｒ ( ＷＭＤ３) ｉｓ ａ ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ ｗｅｂｓｉｔｅ ｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｐｌａｎｔ
麻竹 ＤｌＳＣＬ６ 基因 ａｍｉＲＮＡ 前体合成及表达载体构建
陈东亮１ꎬ２ 孙化雨２ 李利超２ 赵韩生２ 高志民２
(１ 北京市农林科学研究院 北京农业生物技术研究中心 北京 １０００９７
２ 国际竹藤中心 国家林业局竹藤科学与技术重点实验室 北京 １００１０２)
摘 要: Ｗｅｂ ＭｉｃｒｏＲＮＡ Ｄｅｓｉｇｎｅｒ ( ＷＭＤ３) 是一个专门应用于植物人工 ｍｉＲＮＡ 设计和前体序列设计的专业
十个基因中得到验证[４ － ７] ꎮ
２００９ 年ꎬ Ｗｅｉｇｅｌ 等 发 布 了 ＷＭＤ３ 软 件 平 台
ꎮ 人 工 ｍｉＲＮＡ ( ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｍｉＲＮＡꎬ
(ｈｔｔｐ: / / ｗｍｄ３ ｗｅｉｇｅｌｗｏｒｌｄ ｏｒｇ / ｃｇｉ￣ｂｉｎ / ｗｅｂａｐｐ ｃｇｉ )ꎬ
机制ꎬ 设计出一段与目标基因高度匹配的序列ꎬ 利
２ 结果与分析
２ １ ＤｌＳＣＬ６ 基因 ａｍｉＲＮＡ 前体序列设计
利用 ＷＭＤ３ 设计 ＤｌＳＣＬ６ 基因的 ａｍｉＲＮＡꎬ 共得
酶切ꎬ 回收线性化的表达载体和 ｐｒｅ￣ａｍｉＲ￣ｓｃｌ６ 片段ꎬ
到 ５７ 条候选的 ｍｉＲＮＡ 序 列ꎮ 选 择 最 优 的 ａｍｉＲＮＡ
ＤＨ５αꎮ 获得 的 阳 性 克 隆 提 取 质 粒ꎬ 用 ＢａｍＨ Ⅰ 和
图 ３ꎮ
用 ＴＡＫＡＲＡ 高保真酶ꎬ 进行重叠 ＰＣＲ 扩增ꎮ 首先摸
所有质粒载体汇总
pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK（+）,pBlueScript SK（-） pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质 粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴 侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103 JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3） HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI） BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir） Tuner（DE3） Bl21 codonplusRIPL Novablue（DE3） Rosetta Rosetta（DE3） Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3） RosettagamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3） OrgamiB（DE3） HMS174（DE3） 植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载 体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真 菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1 枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43, pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK, pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01， 配套 菌株BS 168,WB600,WB800,WB700, WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主 质粒pVLT33
pCambia1391Xb植物表达载体
pCambia1391Xb植物表达载体pCambia 1391Xb编号载体名称北京华越洋⽣物VECT0020 pCambia 1391XbpCambia 1391Xb载体基本信息出品公司: Cambia载体名称: pCambia1391Xb, p Cambia 1391Xb 质粒类型: 植物表达载体⾼拷贝/低拷贝: 低拷贝启动⼦: --克隆⽅法: 多克隆位点，限制性内切酶载体⼤⼩: 10647 b p5' 测序引物及序列: --3' 测序引物及序列: --载体标签: GusA载体抗性: 卡那和潮霉素筛选标记: HPTII备注: --产品⽬录号: 1391Xb稳定性: 稳定表达组成型: ⾮组成型病毒/⾮病毒: ⾮病毒pCambia 1391Xb载体质粒图谱和多克隆位点信息其他植物载体质粒：pBI101 pDF15pBI121 pEarleyGate 100pBI221 pEarleyGate 101pBI221--‐GFP pEarleyGate 102pBin19 pEarleyGate 103pBINPLUS pEarleyGate 104pCambia0105.1R pEarleyGate 201pCambia0305.1 pEarleyGate 202pCambia0305.2 pEarleyGate 203pCambia0380 pEarleyGate 204pCambia0390 pEarleyGate 205pCambia1105.1 pEarleyGate 301pCambia1105.1R pEarleyGate 302pCambia1200 pEarleyGate 303pCambia1201 pEarleyGate 304pCambia1281Z pFGC5941pCambia1291Z pGA643pCambia1300 pGreenpCambia1300GFP pGreen 0029pCambia1301 pGreen0029 pCambia1302 pGreen029 pCambia1303 pGreenII pCambia1304 pGreenII 0049 pCambia1305.1 pGreenII 0179 pCambia1305.2 pGreenII 0229 pCambia1380 pGreenII 0579 pCambia1381 pHANNIBAL pCambia1381Xa pHELLSGATE pCambia1381Xb pHELLSGATE 12 pCambia1381Xc pHELLSGATE 4 pCambia1381Z pHELLSGATE 8 pCambia1390 pKANNIBAL pCambia1391 pPZP100 pCambia1391Xa pPZP101 pCambia1391XbpPZP102 pCambia1391Xc pPZP111 pCambia1391Z pPZP112 pCambia2200 pPZP121 pCambia2201 pPZP122 pCambia2300 pPZP200 pCambia2301 pPZP201 pCambia2301--‐101 pPZP202 pCambia3200 pPZP211 pCambia3201 pPZP212 pCambia3300 pPZP221 pCambia3301 pPZP222 pCambia35s--‐ECFP pPZp--‐RCS2--‐Bar pCambia35s--‐EGFP pRI 101--‐AN pCambia35s--‐EYFP pRI 101--‐ON pCambia5105 pRI 201--‐AN pSB1 pRI 201--‐ON pSB11 pRI 909 pSoup pRI 910 pSPYCE(MR) pRI101pTCK303 pSAT1--‐cCFP--‐C Super1300 pSAT1--‐cCFP--‐N pSAT6nCeruleanC(A+) pSAT4--‐nVenus--‐C。
抗真菌双T-DNA植物表达载体构建及农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化
抗真菌双T-DNA植物表达载体构建及农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化抗真菌双T-DNA植物表达载体构建及农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化植物真菌病害严重影响了农作物的产量和质量，因此开发抗真菌基因对于解决这一问题至关重要。
近年来，基因工程技术被广泛应用于植物抗病育种中，其中包括通过遗传转化方式将外源抗病基因导入农作物。
本研究旨在构建抗真菌双T-DNA植物表达载体，并利用农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化方法将该载体导入玉米植株中，从而使玉米表达外源抗真菌基因，提高对真菌病害的抗性。
首先，我们选择了已经广泛应用于植物基因工程的pCAMBIA1301作为基础载体。
该载体具有高效的农杆菌介导遗传转化能力以及丰富的选择标记和表达元件。
然后，通过PCR扩增得到两个外源抗真菌基因，分别为黄芥子氨酰载氧酶基因（AtAOX1a）和真菌抗菌肽基因（AMP2）。
接着，利用限制性内切酶将这两个基因定向克隆到pCAMBIA1301载体的相应位点上。
通过测序验证了两个基因的正确克隆。
为了实现双T-DNA的表达，我们在构建载体中引入了辅助基因BAR（除草剂抗性基因）。
将BAR基因克隆到pCAMBIA1301载体中，以生成双T-DNA载体。
利用PCR和限制性内切酶切割测序验证了双T-DNA载体的构建成功。
接下来，我们进行了农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化试验。
首先，收集新鲜的玉米茎尖作为转化材料。
将双T-DNA载体通过电击法导入农杆菌，并在适当培养条件下，使其发生同源重组，形成整体的农杆菌。
然后，将这一农杆菌注射到玉米茎尖内，并利用植物生理培养基优化培养条件。
经过一段时间的培养，成功地获得了经过遗传转化的玉米茎尖。
为了进一步确认玉米茎尖是否成功遗传转化，我们进行了PCR检测。
通过PCR分析，我们发现在经过遗传转化的玉米茎尖中检测到了目标抗真菌基因和辅助基因BAR的特异片段。
这一结果进一步证明了我们成功地将抗真菌基因导入了玉米植株中。
本研究构建了抗真菌双T-DNA植物表达载体，并通过农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化方法成功导入玉米植株中。
pBI221-GFP植物表达载体
pBI221-‐GFP编号 载体名称北京华越洋生物VECT0320 pBI221-‐GFPpBI221-‐GFP载体基本信息出品公司: -‐-‐载体名称: pBI221-‐GFP质粒类型: 植物双元表达载体高拷贝/低拷贝: -‐-‐启动子: -‐-‐克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: -‐-‐5' 测序引物及序列: -‐-‐3' 测序引物及序列: -‐-‐载体标签: GFP载体抗性: -‐-‐筛选标记: -‐-‐备注: -‐-‐产品目录号: -‐-‐稳定性: -‐-‐组成型: -‐-‐病毒/非病毒: -‐-‐载体质粒图谱和多克隆位点信息其他植物载体质粒：pBI101 pDF15pBI121 pEarleyGate 100 pBI221 pEarleyGate 101 pBI221-‐GFP pEarleyGate 102 pBin19 pEarleyGate 103pBINPLUS pEarleyGate 104 pCambia0105.1R pEarleyGate 201 pCambia0305.1 pEarleyGate 202 pCambia0305.2 pEarleyGate 203 pCambia0380 pEarleyGate 204 pCambia0390 pEarleyGate 205 pCambia1105.1 pEarleyGate 301 pCambia1105.1R pEarleyGate 302 pCambia1200 pEarleyGate 303 pCambia1201 pEarleyGate 304 pCambia1281Z pFGC5941 pCambia1291Z pGA643 pCambia1300 pGreen pCambia1300GFP pGreen 0029 pCambia1301 pGreen0029 pCambia1302 pGreen029 pCambia1303 pGreenII pCambia1304 pGreenII 0049 pCambia1305.1 pGreenII 0179 pCambia1305.2 pGreenII 0229 pCambia1380 pGreenII 0579 pCambia1381 pHANNIBAL pCambia1381Xa pHELLSGATE pCambia1381Xb pHELLSGATE 12 pCambia1381Xc pHELLSGATE 4 pCambia1381Z pHELLSGATE 8 pCambia1390 pKANNIBAL pCambia1391 pPZP100 pCambia1391Xa pPZP101 pCambia1391Xb pPZP102 pCambia1391Xc pPZP111 pCambia1391Z pPZP112 pCambia2200 pPZP121 pCambia2201 pPZP122 pCambia2300 pPZP200 pCambia2301 pPZP201 pCambia2301-‐101 pPZP202 pCambia3200 pPZP211 pCambia3201 pPZP212 pCambia3300 pPZP221 pCambia3301 pPZP222 pCambia35s-‐ECFP pPZp-‐RCS2-‐Bar pCambia35s-‐EGFP pRI 101-‐AN pCambia35s-‐EYFP pRI 101-‐ONpCambia5105 pRI 201-‐AN pSB1 pRI 201-‐ON pSB11 pRI 909 pSoup pRI 910 pSPYCE(MR) pRI101pTCK303 pSAT1-‐cCFP-‐C Super1300 pSAT1-‐cCFP-‐N pSAT6nCeruleanC(A+) pSAT4-‐nVenus-‐C。
所有质粒载体汇总
酿酒酵母表达载体p YES2 ,p YES2/NT ,p YES2/CT ,p YES3 ,p YES6, pYCp Iac22-GF P,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEFPY15TEF, pY16TEF,酵母基因重组表达载体p UG6, p SH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统：酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109 ;质粒PGADT7,pGBKT7 ；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T , PCL1,酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109，丫187，丫190, 毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ aA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115,原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体，包括pET系列，pET-GST, PGEX 系列(含GST标签)，pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列，pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB 系列，pLLP-ompA,pIN-HI-ompA (分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a,pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His, pET Dsb, pET GST, pET Trx p QE2, pQE9 p QE30,31,32, pQE 40 p QE70 pQE80L p QETirs system pRSET-A pRSET-B p RSET-C p GEX4T-1,-2,-3,5x-1,6 p-1,6 p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinP oi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3, PACYC184, pBR322 ,p UC119 p TYB1, pTYB2, pTYB4, pTYB11 p BIueScri pt SK(+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒：pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣：PG-KJE8 PGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞：DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21( DE3) HB101 ER2529 E2566C2566 MG1655 XL- 10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21 ( AI) BL21(DE3)plysS TG1 TB1 DH5a (pir)Tuner( DE3)BI21 codonplusRIPL Novablue(DE3) Rosetta Rosetta(DE3) Rosetta( DE3)plys Rosetta-gami (DE3)Rosetta-gamiB(DE3) , Rosetta-gamiB( DE3)plysS Orgami(DE3) OrgamiB( DE3) HMS174 (DE3) 植物表达/RNAi 载体农杆菌PBI121,PBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, p UN1301, pRTL2 , p RTL2-GF P , p RTL2-C FP, p RTL2-R FP , p RTL2-Y FP,p CAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z, 1391Z,2300, 2301,3300,3301, pCAMBIA sup er1300, pCAMBIAsup er1300-GF P,pPZP 212, pPZP 2121, pPZP 212-GF P,p GDG,RNA K 体p ART27, pH ANNIBAL ,p KANNIBAL, pFGC5941, pTCK303, pTRV1, pTRV2,T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体p BIG2R HPH 2-GUS-GF P,p BHt1枯草芽抱杆菌表达载体P WB980, pH T43, pHP 13, pHP 43, pBE2, PMUTIN4,pUB110, pE194, pMA5, p MK3, pMK4, pH T304, pH Y300PLK, pBest502, PDG1363,p SG1154, pAX01, pSAS144, pDL, pDG148-stu, pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01 ,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi 基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0, pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer3.1-H1 hygro, pSilencer 3.1-H1 neo PSilencer4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi 载体(oligoengine) pSuper-puro RNAi 逆转录病毒载体(clontech) : RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen ( Luciferase shRNA Ann ealed Oligo nucleotide) RNAi 慢病毒载体(addgene : pLKO.1哺乳动物表达载体PCDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B , pSecTag2 A, pVAX1 , pBudCE4.1,pTracer CMV2, pcDNA3.1 (-) /myc-His A , pcDNA6-Myc/His B , pCEP4, pIRES, pIRESneo, pIRES hyg3, pCMV-myc, pCMV-HA , pIRES-puro3, pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT , pBIND , pACT-MyoD , pBIND-Id , pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-HybridSystem:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II 哺乳动物诱导表达系统：pOPRSVI , pOPI3CAT , pCMVLacI,GeneSwitchSystem: pSwitch哺乳动物表面展示系统：p Dis play,四环素调控系统(In vitrogen): pcDNA4/TO/Myc-His A , pcDNA4/TO/Myc-His B , pcDNA4/TO/Myc-His C ,pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ , pcDNA6/TR 四环素调控系统(Clontech): pTet-On , pTet-Off , pTRE2,pRevTRE , pRevTet-On , pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc , pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc , pI K B-EGFP,pNFAT-TA-Luc ,pCaspase3-sensQr pAP1 (PMA)-Luc; pGL4.26[luc2 P/minP/Hygro], pGL4.29[luc2 P/CRE/Hygro], pGL4.30[luc2 P/NFA T-RE/Hygro] , pGL4.75;p53-Luc, pAP-1-Luc, pNF-K B-Luc, pSRE-Luc, pFA2-Elk1 , pFC-MEKK , pFR-luc,Gateway系统(invitrogen) pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR , 乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株pN Z8148, pLEISS, pMG36e, pBBR1MCS-5, pBBR1MCS-6, pRV610, pLEM415, pHY3 OOPLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523, pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L. pla ntarum,L.rham no susGG,B.coagula ns’Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infan tis,Lactococcus lactisM17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33, pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215, pJN105, pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444 (GFP) , pHY300PLK,pRT102,pRL1063a,转座子载体pUT-mi niT n5, pMGS100, p WHM10, pKC1139, pSET152, pO J260, pP G611.1, pP G612.1腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统(Stratagene : pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ, pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3,配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cell line 腺相关病毒系统(Stratageng : pAAV-MCS , pAAV-RC , pHeIper , pAAV-LacZ , pAAV-IRES-hrGFP , pCMV-MCS ,慢病毒载体:p LVX-DsRed-Mo no mer-N1, pLVX-IRES-ZsGree n1, pLVX-AcGF P1-N1,Le nti6/v 5-EDST-EGF P,pWP XL, FUGW, pLe ntilox 3.7,RNAi-Ready p SIREN-Retro Q,RNAi-Ready p SIREN-Retro Q-ZsGree n,pSUP ER.Retro-GF P/Neo ,pSUP ER-Retro-Neo, pSUP ER.Retro-puro,P LNCXP LNCX2 p MSCV-HYG p MSCV- neo p MSCV- puro p LEGF P-C1 p LOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry 质粒载体。
植物安全性表达载体的构建策略_以_省略_达水稻反义蜡质基因的载体构建为例_杨丽君
分子植物育种，2009年，第7卷，第5期，第1027－1031页Molecular Plant Breeding,2009,Vol.7,No.5,1027－1031新思路、新技术、新方法Novel Thinking&Technology植物安全性表达载体的构建策略：以表达水稻反义蜡质基因的载体构建为例杨丽君1,2戎益泉1,2张善明1李建粤1*1上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234;2上海医药高等专科学校,上海,201318*通讯作者,lijianyue01@摘要基于转基因作物的安全性考虑，在用于转化的表达载体上除了含有目的基因以及控制该目的基因表达的启动子和终止子外，最好不存在其它有可能存在安全性争议的DNA序列，由此培育的转基因植物可能将更易于被消费者所接受。
本研究以pCAMBIA1300载体为基础，基因操作去除pCAMBIA1300质粒上的潮霉素抗性基因和花椰菜花叶病毒的35S启动子序列，构建了两种只含有水稻蜡质基因启动子引导蜡质基因反义片段的表达载体，p13AWY－1和p13AWY－2。
其中p13AWY－1表达载体含有一个由水稻蜡质基因启动子、第一内含子、反义蜡质基因(Waxy pro+intron1+anti-Waxy)的融合基因单元；而p13AWY－2表达载体含有两个正向排列的Waxy pro+intron1+anti-Waxy融合基因单元。
我们通过构建水稻反义蜡质基因安全性表达载体，试图为植物安全性表达载体的构建提供一种思路，为今后大规模商业化采用转基因技术改良农作物遗传特性提供安全的转基因方法。
关键词转基因植物,植物表达载体,生物安全性,35S启动子,抗生素标记,水稻Strategy for Building Safe Plant Express Vector,an Example of Construct for Expressing Rice Anti-Waxy GeneYang Lijun1,2Rong Yiquan1,2Zhang Shanming1Li Jianyue1*1College of Life and Environment Science,Shanghai Normal University,Shanghai,200234;2Shanghai Institute of Health Sciences,Shanghai,201318 *Corresponding author,lijianyue01@DOI:10.3969/mpb.007.001027Abstract In view of the biosafety of genetically modified crops,the idea construct used for plant genetic trans-formation should only contain expression elements such as target gene,promoter and terminator,which would be necessary for expressing the target gene.And also it is strong recommended that the biosafe construct should have no any uncertain element and exogenous DNA sequence such as antibiotics gene,35S promoter etc.It is no doubt that the transgenic products developed by using safety expression construct might be increasing accepted by con-sumer.In this study,we put forward a strategy for building a kind of safety plant expression construct by removing both of hygromycin resistant gene and the cauliflower mosaic virus35S promoter,and then we developed two ex-press constructs on the basis of plasmid pCAMBIA1300,named p13AWY－1and p13AWY－2.The expression ele-ments were combined as a fusion unit i.e.Waxy pro+intron1+anti-Waxy and placed in the p13AWY－1construct, while the two forward arranged fusion units placed in the p13AWY－2construct.In this study,the initial goal we expected would share our thinking and strategies for building safety expression construct and provide case study in the field of rice transgenic research by using rice self promoter and necessary elements without any unsafe DNA el-ement in order to be possible by employing genentic engineering technology for large-scale commercializing use in/doi/10.3969/mpb.007.001027基金项目：本研究由上海市农委科技兴农重点攻关项目(农科攻字(2004)第2－17号)资助future.Keywords Genetically modified crop,Plant expression constructs,Biosafety,35S promoter,Antibiotics marker gene,Rice尽管转基因生物种类和商业化的数量在不断的增加，但是人们对转基因植物的食品安全性和生态风险的关注也是与日俱增。
所有质粒载体汇总
酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。
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酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。
植物表达载体及有关载体质谱图
二、载体信息
• 1. pBI121质粒图谱及载体信息
启动子：CaMV35S 终止子：Nos 报告基因：GUS 抗性基因：NptII
pBI121
2. pBI221
3.pCAMBIA系列载体
• pCAMBIA1300无gus报告基因； • pCAMBIA2301以gus基因作为报告基因； • pCAMBIA1303以gus基因作为报告基因，且 pCAMBIA1303载体含有绿色荧光蛋白GFP的报告 基因；
• pCAMBIA1302只含有绿色荧光蛋白GFP的报告基 因； • pCAMBIA3300和3301含编码抗除草剂草丁膦的bar
pCAMBIA1300
pCAMBIA3300
pCAMBIA3301
2301，3300，3301，1380，1390； pCAMBIA super1300,
pCAMBIA super1300-GFP, pCAMBIA super 1300-EGFP，
pCAMBIA1390-GFP
• 3.农杆菌：LBA4404，EHA103、105，GV3101
2、其他植物载体
• 4. pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-RFP , pRTL2-YFP
植物表达载体一植物表达载体的分类二其中常用载体的载体信息1常用植物表达载体?1
植物表达载体
一、植物表达载体பைடு நூலகம்分类 二、其中常用载体的载体信息
1、常用植物表达载体
• 1.pBI101，121，221；pBI121-GFP, pBI221-GFP
• 2.pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303，1304，1305，2300，
• 5. pH7FWG2，pH7WGF2 6. pK2GW7
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北京华越洋⽣生物⾸首页关于我们新闻中⼼心产品展⽰示在线留⾔言加⼊入我们联系我们pCambia1391Z pCambia1391Z 产品编号载体名称北京华越洋⽣生物VECT0010pCambia1391Z pCambia 1391Z 载体基本信息出品公司:Cambia 载体名称:pCambia1391Z, pCambia 1391Z 质粒类型:植物表达载体⾼高拷贝/低拷贝:低拷贝启动⼦子:CAMV 35S 克隆⽅方法:多克隆位点，限制性内切酶载体⼤大⼩小:11227 bp 5' 测序引物及序列:M13-F: TGTAAAACGACGGCCAGT 3' 测序引物及序列:M13-R: CAGGAAACAGCTATGAC 载体标签:GusA 载体抗性:卡那和潮霉素筛选标记:HPTII 详情产品分类⽣生化试剂精细化学品中间体/标准品病理实验试剂其他关键词： 热线电话：400-818-1148150 1148 1284备注:--产品⽬目录号:1391Z稳定性:稳定表达组成型:⾮非组成型病毒/⾮非病毒:⾮非病毒pCambia 1391Z载体质粒图谱和多克隆位点信息pCambia 1391Z载体序列LOCUS pCAMBIA1391Z 11227 bp ds-DNA circular SYNDEFINITION Agrobacterium binary vector for plant transformation, withhygromycin- and kanamycin-resistance and LacZ-GUS genes plus thepUC9 MCS.ACCESSION AF234312VERSION .KEYWORDS pCAMBIA1391ZSOURCE synthetic DNA constructORGANISM synthetic DNA constructREFERENCE 1 (bases 1 to 11227)AUTHORS CambiaTITLE Direct SubmissionJOURNAL Exported from SnapGene ViewerCOMMENT The GenBank record was corrected by inserting a G at position 4743. 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