实验一薄层色谱和纸色谱
实验1-薄层色谱和纸色谱
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱 (Thin Layer Chromatography)，常用 TLC 表
示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。一般是将固定相，如硅
胶和三氧化铝，负载在一张薄层板上，将样品置于固定相之后，流 动相通过毛细管效应从下往上流动而使样品分开。
TLC 是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常用来检测 反应和柱色谱前判断使用展开剂的极性。
干板 薄层板 平铺法—简易平铺法
湿板
浸渍法 (1) 二块 15×3cm 玻片，洗净，控水 (2) 调糊：3g硅胶G和8mL0.5%羧甲基纤维素钠水溶液在小烧杯中搅匀 (3) 用小勺取适量于玻片上粗铺平，手指轻弹玻片，反复数次，使糊
状物均匀地铺在玻片上于室温下晾干，每人铺二块
(4) 活化：将晾干的薄层板放在烘箱中，待烘箱温度升至 105-110oC，
计时30分钟
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较 Rf 值，确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
(Paper Chromatography) ：纸色谱法是以纸作为载体的色谱法。按分
离原理属于分配色谱法的范畴。固定相一般为滤纸纤维上吸附的水 分，流动相 (展开剂) 为有机溶剂。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
基础有机化学实验
实验一 纸色谱和薄层色谱
杨俊
致知楼 #1574/1531 Email:junyang@
实验目的
1.学习色谱法的原理 2.掌握薄层色谱和纸色谱分离和鉴定化合物操作
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数的 差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时，由于固 定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力较弱获溶 解度较小的组分在固定相中移动速度较快，经过多次反复平 衡，将混合物中各组分分离。 按操作分：薄层色谱、柱色谱、纸色谱、气相色谱和高效液相色谱 按原理分：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱
色谱法薄层色谱和纸色谱
将固定相涂布在玻璃板或塑料 板上形成薄层，然后用合适的 溶剂展开，实现组分的分离和
分析。
纸色谱法
将固定相吸附在滤纸上，然后 用合适的溶剂展开，实现组分 的分离和分析。
气相色谱法
适用于气体和挥发性液体的分 析，通过气体流动相将样品带 入色谱柱进行分离。
高效液相色谱法
一种高效、高分辨率的色谱方 法，广泛应用于化学、生物和
相之间的分配系数不同，因此会以不同
的速度在薄层板上移动，从而实现分离。
薄层色谱法的操作步骤
点样
将待分离的样品溶液点在薄层 板的起点处。
显色
在紫外灯下观察各组分的斑点， 或者用显色剂进行染色。
制备薄层板
将固定相涂布在玻璃板、塑料 板或铝箔上，形成一层均匀的 薄层。
展开
将薄层板放入展开槽中，用适 当的流动相展开。
色谱法薄层色谱和纸色谱
目 录
• 色谱法简介 • 薄层色谱法 • 纸色谱法 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的比较 • 色谱法薄层色谱和纸色谱的发展趋势
01 色谱法简介
定义与原理
定义
色谱法是一种分离和分析复杂混 合物中各组分的方法，通过不同 物质在固定相和流动相之间的分 配平衡实现分离。
原理
利用不同物质在两相之间的吸附 、溶解等分配平衡的差异，使不 同物质在色谱柱上移动速度不同 ，从而实现各组分的分离。
薄层色谱法的分离效率高于纸色谱法。薄层色谱法使用涂布在玻璃板或塑料板 上的固定相，能够快速、有效地分离复杂的混合物，而纸色谱法则需要较长的 时间进行分离。
分辨率
薄层色谱法的分辨率也更高，能够更好地分离出组分相近的物质，而纸色谱法 的分辨率相对较低。
操作难度的比较
操作简便性
薄层色谱法分离有机化合物2[重点]
![薄层色谱法分离有机化合物2[重点]](https://img.taocdn.com/s3/m/e6c602280812a21614791711cc7931b765ce7be9.png)
薄层色谱法分离有机化合物一、实验目的1.学习薄层色谱法、纸色谱法、柱色谱法分离有机化合物的原理；2.掌握薄层色谱法分离有机化合物的方法。
二、实验原理 我们有机实验过程中经常要合成一些有机化合物，纯度相对较低，要进行下一步反应必须进行提纯，通常的提纯手段（可先问学生，再总结）：重结晶、萃取法、色谱法、减压蒸馏、蒸馏、水蒸气蒸馏、分馏等，色谱法就是其中之一，通常用来分离、纯化和鉴定有机化合物。
基本原理就是利用待分离各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同 ，使混合物溶液流经过该种物质，进行反复吸附或分配等作用，分开各组分。
按照操作条件不同分为：柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等，今天介绍柱色谱、纸色谱、薄层色谱，操作薄层色谱。
柱色谱：利用色谱柱 （1）色谱柱（2）吸附剂（3）溶剂（1）色谱柱（拿根柱子介绍）（2）吸附剂：吸附剂：表面积很大、经过活化的多孔性或粉状固体（常用氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙、活性炭等：（3）溶剂，先考虑被分离各组分的极性和溶解性，非极性化合物用非极性溶剂，先溶解在非极性溶剂中，从柱顶加入柱中，再用稍有极性的溶剂使谱带色，再用极性更大的溶剂洗脱被吸附物质简单介绍操作（1）装柱（2）装样，将待分离各组分的混合物溶液从上端装入色谱柱，流过吸附柱时，停在上端（3）洗脱 利用吸附能力不同，流下去的洗脱速度不同，形成不同层次（即有若干色带），再用不同的洗脱剂洗下不同组分分开收集；纸色谱：主要用于多官能团或高极性化合物如糖、氨基酸等的分析分离（1）固定相：特制滤纸（2）溶剂：水和有机溶剂的混合物(3)展开剂：含一定比例水的有机溶剂简单介绍操作（1）选择固定相特制滤纸（2）溶解待分离各组分（3）划线：在滤纸一端2~3cm 处用铅笔画好起始线，（4）点样：将待分离组分溶液用毛细管在起始线上点一点样点，（5）展开：将滤纸划好的线前端的滤纸接触到展开剂，展开剂利用毛细管作用沿纸条上升，当有机相沿滤纸经过原点时，即在滤纸上水与流动相多次分配，流动相中溶解度较大的物质随溶质移动速度较快，在水中溶解度较大的物质则随溶剂移动速度较慢，则达到分离目的，展开剂前沿接近滤纸另一个端点时取出，标出展开剂位置。
薄层层析和纸色谱操作注意事项
关于薄层色谱的一点体会总结：薄层层析和纸色谱操作注意事项一、应用：薄层色谱是一种微量、快速、简便的分析方法。
适用于微量样品的分离、鉴定和制备。
在中药制剂制备过程中，经适宜的工艺来取舍处方中各药材的各类成分，从而达到保持或改变药物作用性质或降低其毒副作用的目的。
而薄层色谱法具有分离与鉴定的双重功能，通过薄层图谱与对照品、对照药材的图谱相比较，除了能鉴出有效成分或特征成分外，还以完整的色谱图作为一个整体对制剂加以鉴别，提高了鉴别的准确性，尤其当有效成分尚不确切时，更显示出薄层色谱法的实用性。
薄层色谱分析法由于适合国情、简便、快速，能有效地、直观地反映药品地真实性、稳定性，现已成为中药制剂的鉴别和质量控制的行之有效的方法之一。
操作二、操作要点：（一）薄层层析1、铺制薄层板：将吸附剂1份和水2.5-3.0份（或加入黏合剂的水溶液）在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后，进行涂布（厚度为0.2～0.3mm）,颠板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透视光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于100-110℃烘30分钟,冷却后立即使用或置干燥箱中备用。
2、点样：用点样器点样于薄层板上,一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。
若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。
点样时必须注意勿损伤薄层表面。
注：在薄层色谱中，样品的用量对物质的分离效果有很大影响，所需样品的量与显色剂的灵敏度、吸附剂的种类、薄层的厚度均有关系。
样品太少，斑点不清楚，难以观察，但样品量太多时往往出现斑点太大或拖尾现象，以至不易分开。
3、展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离（一般为8～15cm），取出薄层板，晾干，待检测。
薄层色谱法实验报告
薄层色谱法cai前言:色谱法事分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法。
根据分离的原理不同,可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱等,根据操作条件的不同,又可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等类型。
薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的质。
此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
最常用于TLC的吸附剂为硅胶和氧化铝。
展开剂常用石油醚、CH2Cl2、CHCl3、CH3COOC2H5、CH3OH 、HCOOH，根据实际情况选择合适的展开剂。
一般合适的展开剂能使Rf值在0.3~0.6之间。
1、实验部分1.1实验设备和材料实验仪器：烘箱，广口瓶，载玻片，镊子，量筒实验药品：偶氮苯的苯溶液，羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）的水溶液，硅胶Ｇ，样品液1.2实验装置点样装置层析装置1.3实验过程1.31薄层板制备：将硅胶G和CMC溶液调成均匀的糊状，用滴管涂于洁净的载玻片上，取下涂好薄层板，置水平桌面上于室温下晾干，在110℃烘30分钟。
1.32点样：距薄层板底边1cm处划一横线作为起始线，在起始线上点样，点样直径不应超过2mm，点间距离约为1.5cm，在起始线左侧用毛细管吸取光照后的偶氮苯溶液点样，右侧用未光照的反偶氮苯溶液点样。
1.33 展开：待样点干燥后放在盛有15ml 3:1的环己烷—苯作展开剂的广口瓶中展开，待展开剂上行离板上端约1cm处取出薄层板，立即几下展开剂的位置。
1.34 样品点样展开：用毛细血管吸取少量样品液于薄层板中，分别用石油醚—CH2Cl2作展开剂，混合比例分别为9﹕1、4﹕6、2﹕8 、1﹕9，计算Ｒｆ值，探究最适合的展开剂。
色谱科普实验
色谱科普实验色谱（Chromatography）是一种分离混合物中组分的技术，广泛应用于化学、生物学、药学等领域。
色谱法通过固定相和移动相之间的相互作用来实现不同组分的分离。
以下是一个简单的色谱实验，你可以选择使用纸色谱、薄层色谱或气相色谱等不同类型的色谱法，取决于你的实验目的和可用设备：纸色谱实验：材料：1.色谱纸2.色素样品（食品着色剂适用）3.不同的溶剂（水、醇、醚等）4.玻璃棒或毛细管步骤：1.准备样品：准备一些包含不同色素的食物样品，例如不同颜色的果汁。
2.制备纸色谱片：将色谱纸切成适当大小的片段，然后在距离底端1-2厘米的地方在纸上标记一个线。
3.添加样品：在标记线上，使用玻璃棒或毛细管将不同颜色的食物样品涂抹在纸上。
4.进行色谱：将纸立在溶剂中，确保溶剂不超过标记线。
溶剂将通过纸上升，同时分离样品中的不同成分。
5.观察结果：当溶剂移至纸的上方时，观察到不同的色素分离出来形成彩色带。
记录带的颜色和相对迁移距离。
气相色谱实验：材料：1.气相色谱仪2.样品（可以是插入色谱柱中的气体或液体）步骤：1.准备样品：准备需要分析的样品，例如插入色谱柱中的气体或液体。
2.加载样品：将样品插入气相色谱仪中，通常通过进样器进行。
3.设定条件：根据分析需要，设定气相色谱仪的运行条件，包括温度、流速等。
4.运行实验：启动气相色谱仪，让样品经过色谱柱分离。
5.观察结果：在气相色谱图上观察峰的出现，每个峰代表一个组分。
根据峰的面积可以估算各组分的相对含量。
这两种实验都可以帮助理解色谱技术的基本原理和应用。
选择合适的实验类型取决于你的实验目的和设备可用性。
薄层色谱实验
、实验目的:1、掌握湿法制作薄层色谱的操作方法。
2、了解薄层色谱的基本原理和应用。
3、掌握使用薄层色谱的操作技术。
4、掌握样品检测前的处理方法。
二、实验原理:1、原理薄层色谱常用TLC表示，又称薄层层析，属于固-液吸附色谱。
样品在薄层板上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分离。
由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的目的。
2、薄层色谱的用途: 1）化合物的定性检验。
（通过与已知标准物对比的方法进行未知物的鉴定）在条件完全一致的情况，纯净化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定物质种类。
影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，外界温度和展开剂纯度、黏度等。
要获得重现的比移值就比较困难。
为此，在测定某一试样时,最好用已知样品进行对照。
R f =溶质最高浓度中心至原点中心的距离溶剂前沿至原点中心的距离2、快速分离少量物质。
（几到几十微克，甚至0.01 Q3、跟踪反应进程。
在进行化学反应时，常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失，来判断反应是否完成。
4、化合物纯度的检验（只出现一个斑点，且无拖尾现象，为纯物质。
）此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
三、实验仪器、试剂。
1.仪器：载玻片（5块）、玻璃棒、小烧杯（100ml）、烘箱、干燥器、普通天平、吹风机、紫外灯、分液漏斗、锥形瓶（250ml）、广口瓶、毛细管、量筒（10ml）、镊子、表面皿、铅笔、尺子。
2.试剂：硅胶GF254 1%羧甲基纤维素钠（CMC、APC药片1片、二氯甲烷、无水MgSO、水、展开剂（苯：乙醚：冰醋酸：甲醇=120: 60： 80： 1的混合溶液）四、实验操作步骤:1溥层板的制备（湿板的制备）：在实验台上的水槽中取出五块载玻片，小心除去上面的部分水分，放在实验台上待用。
薄层层析和纸层析
四、薄层层析和纸层析一、实验目的：1．了解色谱法的基本原理及薄层层析和纸层析的用途2．学习并掌握薄层层析和纸层析的操作方法二、实验原理：色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同。
或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
用途：分离，纯化，鉴定有机物的重要方法。
比移值R f 计算：R f =R f a = h 1/hR f b = h 2/h三、所用试剂及仪器偶氮苯，苏丹III ，偶氮苯和苏丹三混合物，9:1环己烷：乙酸乙脂，天门冬氨酸 蛋氨酸，茚三酮乙醇溶液；薄层板，毛细管，展开缸，10：50：2的水-乙醇-冰醋酸。
溶质的最高浓度中心至原点中心的距离溶剂前沿至原点中心的距离四、操作步骤（一）薄层层析：偶氮苯和苏丹III的分离1．薄层板的制备：将3g硅胶G和5%羧甲基纤维素钠(CMC)水溶液混合调匀呈糊状，倾倒在洁净的玻璃片上，制成均匀平整的薄层板。
室温放置0.5h后，防入烘箱中1100C,0.5h 取出备用。
2．点样：在距离薄层板一端1.5cm处，用铅笔轻轻划一条线起始线，并用毛细管分别点上偶氮苯，混合样，苏丹III。
3．展开：用9：1的环己烷-乙酸乙脂为展开剂，待样点干燥后，放入展开瓶中展开（注意：展开剂不易过多，使样点浸入0.5cm为宜）当展开剂到达薄板上端1cm处时，将薄板取出，并用铅笔划出溶剂前沿。
观察分离情况计算并比较二者的R f值。
（二）纸层析：天门冬氨基酸和蛋氨酸的分离在特定展开剂中分配系数的不同，采用标准样品和试样在同一张层析纸上进行层析。
比较它们的R f值，以达到分离和鉴定氨基酸的目的。
1．吸取20ml展开剂（10：50：2的水-乙醇-冰醋酸），放入展开缸中，按图3.38制备层析滤纸2．点样（同薄层层析）3．展开：待样点干燥后，小心地置于事先盛有展开剂的展开缸中。
4．显色：当溶剂前沿到达终点线时，取出纸条并用吹风机吹干，将茚三酮溶液均匀地喷在滤纸上，干燥后出现红斑点。
[参考实用]薄层色谱法实验报告
![[参考实用]薄层色谱法实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/4bb157e35122aaea998fcc22bcd126fff7055d11.png)
[参考实用]薄层色谱法实验报告实验报告：薄层色谱法的原理和应用一、实验目的：1.了解薄层色谱法的原理和应用。
2.掌握薄层色谱法的操作方法。
3.通过实验实践，了解如何通过薄层色谱法鉴定和分离混合物中的成分。
二、实验原理：薄层色谱法是一种分离和鉴定化合物的有效方法，其原理基于化合物在固定相和流动相之间的不同相互作用。
薄层色谱法的基本原理可以总结如下：1.固定相：将固体材料均匀地涂在薄层色谱板上，固定相可以是硅胶、氧化铝等。
固定相的选择要考虑待测物质与之的相互作用。
2.流动相：通常是有机溶剂或溶剂混合物，用于带动化合物在固定相上的运移。
3.样品的加载：将待测物质溶解于溶剂中，直接在固定相的起点处或者利用载体（例如玻璃纤维纸）上进行负载。
4.运移：将色谱板插入含有流动相的色谱槽中，通过毛细现象使得溶剂沿着板缘上升，溶质随着溶剂一起上升，与固定相发生相互作用。
5.鉴定和检测：用合适的方法在运移完成后，对色谱板上的斑点进行检测和鉴定。
三、实验操作步骤：1.准备工作：将薄层色谱板切割成所需尺寸，用铅笔在起点处标记出一个细线，用玻璃纤维纸负载样品。
2.准备固定相：将固定相在玻璃片或铝箔上均匀涂布，并将其插入薄层色谱槽中。
3.准备流动相：根据待测物质的性质和需求，选择合适的有机溶剂或溶剂混合物，并将其倒入薄层色谱槽中，使其淹没固定相。
4.进行色谱分离：将负载有样品的玻璃纤维纸插入薄层色谱槽中，让溶剂自下而上地进行运移。
5.取出色谱板：当溶剂前端接近色谱板的上端时，取出色谱板并迅速将其干燥。
6.鉴定和检测：将干燥的色谱板放入紫外灯下，观察样品斑点的颜色和位置，并记录下来。
四、实验结果和分析：根据实验操作步骤，完成了一次薄层色谱分离实验。
观察样品在薄层色谱板上的斑点后，我们可以得到样品中的不同成分在固定相和流动相之间的相互作用性质。
通过与已知标准物质的比对，可以对未知物质进行鉴定分析。
五、实验总结：通过本次实验，我对薄层色谱法有了更深入的认识和理解。
实验---薄层色谱法
（3）测定：紫外分光光度法：洗脱液调整至一定体积，在此化合物最大吸收波长处测定。同时把样品斑点相应位置薄层吸附剂同样取下做空白对照。
比色法：选择灵敏度高、专属性好的比色反应测定化合物含量，是比较常用的方法。
其它方法：极谱、库仑滴定、荧光测定等。
2 直接测定法：
（1） 目测法：样品经色谱分离后，直接观察所得斑点的大小和颜色的深浅，并与标准品在相同条件下展开所得到的一系列已知不同浓度的标准斑点相比较，而近似地判断样品中所测成分的含量。
薄层色谱法：
通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑料等光洁的表面上均匀地铺成薄层，试样点在薄层的一端，流动相借毛细作用流经固定相,使被分离的物质展开。
比移值（Rf）
Rf=原点至组分点中心的距离/原点至流动前沿的距离
组分A的Rf=a/c
(2)双波长扫描：是采用两种不同波长的光束先后扫描所要测定的斑点，并记录下此两波长吸光度之差。
扫描轨迹：
直线扫描、锯齿状扫描、圆形扫描
双底展开槽
水平展开槽
4.展开方式：
(1)近水平展开：将点样后的薄层板下端浸入展开剂0.5cm，薄层上端垫高使薄层与水平成5-10o的角。
(2)上行展开：将点样后的薄层放在盛有展开剂的直立型的展开槽中，展开剂由薄层下端借毛细管作用上升至前沿。
(3)下行展开
极性较小的溶剂降低极性大的溶剂的洗脱能力，使Rf值降低。
中等极性的溶剂往往起着使极性相差较大溶剂混合均匀的作用。
在展开剂中加入少量酸、碱可以使某些极性物质斑点集中，提高分离度。
用粘度太大的溶剂时需要加入一种溶剂以降低展开剂的粘度，加快展开速度。
(四)点样：
有机化学实验-薄层色谱实验报告(总结报告范文模板)
有机化学实验薄层色谱实验报告【实验目的】学习薄层层析的基本原理和分离鉴别有机化合物的操作方法。
【实验重点和难点】学习薄层色谱法的原理及方法。
【实验类型】基础性【实验学时】4学时【实验装置和药品】主要实验仪器：4块显微载玻片 50mL烧杯分液漏斗布氏漏斗研钵烘箱吸管玻璃板点样毛细管、大头针、直尺、玻棒无水硫酸钠主要化学试剂：95%乙醇石油醚（60-900C）丙酮乙酸乙酯菠菜叶0.5%羧甲基纡维素钠(CMC)水溶液硅胶G【实验装置图】【实验原理】薄层色谱（thin layer chromatography，缩写TLC）薄层色谱又叫薄板层析，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
薄层层析法是一种微量快速的分析分离方法。
它具有灵敏、快速准确等优点。
薄层层析的原理和柱层析一样，属于固一液吸附层析的类型。
通常是把吸附剂放在玻璃板上成为一个薄层，是为固定相，以有机溶剂作为流动相。
实验时，把要分离的混合物滴在薄层析的一端，用适当的溶剂展开，当溶剂流经吸附剂时，由于各物质被吸附的强弱不同，就以不同的速率随着溶剂移动。
展开一定时间后，让溶剂停止流动，混合物中各组分就停留在薄层析上显示出一个个色斑的色谱图。
若各组分无色，可喷洒一定的显色剂使之显色。
它是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
它是近年来发展起来的一种微量快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。
最典型的薄层色谱法是在一块洗净干燥的玻璃片上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄层板。
第十一章薄层色谱法
（一）概述
１.概念
固定相被涂布在玻璃板上，形成
薄薄的平面涂层。干燥后在涂层的一
端点样，用合适的流动相借毛细作用
向上移动，经过在两相之间的多次吸
附-溶解作用，将混合物中各组分分离
成孤立的样点。
一、薄层色谱法（TLC)
2. 特点
（1）设备简单，操作方便。 （2）分析原理与经典柱上色谱相同、但是在敞开
5、定性定量：
பைடு நூலகம்
Rf值
目视比较法
标 准
洗脱法
品
薄层扫描
溶剂前沿
bc a
起始线
薄层扫描
W
λR
D
λS
双波长薄层扫描
PMR PMT
一、薄层色谱法（TLC)
薄层色谱应用特点：
⑴可用于判断两个化合物是否相同（同一展开条件下是否 有相同的移动值）；
⑵可用于确定混合物中含有的组分数；
⑶可用于为柱色谱选择合适的展开剂，监视柱色谱分离状 况和效果；
⑷可用于检测反应过程。
薄层色谱法在各个学科中的应用
⑴食品和营养
食品中的营养成分是蛋白质、氨基酸、糖类、油和脂肪、 维生素、食用色素等。与食品和营养有害的物质则有残留 农药、致癌的黄曲霉素等。这些成分都可用薄层色谱法定 性和定量。
⑵药物和药物代谢 ⑶化学和化工
⑷医学和临床 ⑸毒物分析和法医化学 ⑹农药
第十一章 色谱分析法概述 第四节 平面色谱法
第四节 平面色谱法
薄层色谱( TLC) (thin layer chromatography. TLC
纸色谱 (PC) (paper chromatography. PC)
一、薄层色谱法
（thin layer chromatography; TLC)
纸色谱与薄层色谱法
二 纸色谱--氨基酸的纸上层析
• 1取两片新华一号滤纸,分别用铅笔在距下端点约1cm处起 始线,用直尺从中间折叠,在左右两侧点样距约1.8cm,试剂 分别为亮氨酸和混合酸,甘氨酸和混合酸.展开剂为5：4：1 的水-正丁醇-冰醋酸2ml.展开剂在2/15cm的大试管.
• 2待展开剂上升约7厘米时,取出作终点线后在红外灯下烘 干.
隔应1—1.5㎝.一次点样若不够,可点几次,但要等溶剂挥发 后再点下一次,防止量多出现拖尾现象； • 3.所用滤纸应质地均匀平整 且实验中手不要触及滤纸的表 面,以免污染； • 4.避免两条滤纸在大试管中碰一起,切勿将样点浸入展开剂 中； • 5.若溶质展开后较分散,则选取其最高浓度中心； • 6.在向滤纸喷洒茚三酮时,要以雾状喷洒,不能有液滴在其 表面凝集,更不能有液滴在其表面流动,以免影响展开效果.
纸色谱演示
三.实验试剂和仪器
• 甘氨酸、亮氨酸的水溶液,两种氨基酸各取等体积 组成混合液,展开剂为5：4：1的水-正丁醇-冰醋酸 体积比,2%的茚三酮乙醇溶液.大试管一支,滤纸 215cm,喷雾器一支,电吹风一把,毛细管口径1mm 若干支,直尺一把,铅笔一支
• 1%偶氮苯的苯溶液,1%苏丹III的苯溶液,1%的羧 甲基纤维素钠ＣＭＣ的水溶液,硅胶Ｇ,9：1的无 水苯-乙酸乙酯.研钵一个,台秤,载玻片7.52.5cm5 片,烘箱一个,广口瓶一个.
• 3 展开：广口瓶需预先用展开剂9：1的无水 苯-乙酸乙酯饱和,将点好样品的薄层板放入 装有展开剂的广口瓶中,薄层板浸入展开剂 的深度为距薄层板底边约0.7cm切勿将样点 浸入展开剂中,密封室盖,等展开至规定距离 距薄层板上端1cm左右,取出薄层板,尽快划 一横线,晾干,测出显色点与起始线的距离和 溶剂上升的距离,并计算比移值.
实验一薄层色谱板的制备和使用
实验一薄层色谱板的制备和使用实验一薄层色谱板的制备和使用目的要求:通过实验进一步理解薄层色谱技术理论，熟悉掌握薄层色谱板的制备和使用方法。
一、薄层层析的基本原理把吸附剂(固定相)均匀地铺在一块玻璃板上，将待分离的样品溶液点加在一薄层板的一端，在密闭的容器中用适当的溶剂(流动相)展开，由于吸附剂对不同物质的吸附力大小不同及溶剂对不同物质溶解分配系数不同，当溶剂流过时，各物质在吸附剂和溶剂之间发生连续不断地吸附，解吸附，再吸附，再解吸附。
不易被吸附或易被溶剂溶解的物质相对移动得快一些。
经过一段时间的展开，不同的物质被彼此分开，最后形成相互分离的斑点。
将展开完毕的薄层板从密闭容器中取出后，应用特定的试药或方法将斑点显色，从而达到定性和定量的目的。
二、薄层板的制备1(玻璃板用一块玻璃板涂上很薄的吸附剂，如硅胶或氧化铝等，玻璃板要求薄厚一致，大小相同，表面光滑平整，一般玻璃只要合乎这些要求就可。
如果找不到平整均一的，将旧光学照像底片截成同样大小也可以。
用前先将玻璃用肥皂和水洗干净，必要时浸泡在清洗液中，然后水洗烤干，用纱布擦光。
玻璃板大小有各种规格，一般有20×20、20×10、20×5厘米，也有更小的，可根据需要自行设计。
宽度要求至少能点开两三个样品，每两点之间相隔至少1.5厘米，玻板长度一般要满足展开10厘米的距离。
点样的起点应距底边至少1.5厘米的距离。
2(吸附剂应用最广泛的为硅胶和氧化铝，市场上有专供薄层色谱用的吸附剂，规格分不含粘合剂的硅胶H，氧化铝H和含有粘合剂熟石膏的硅胶G，氧化铝G，如市售硅胶G含13,熟石膏，氧化铝分中性、酸性、碱性三种。
吸附剂的粒度范围最好在180,200目之间，太小了流速慢，太大则影响分离效果。
如不合要求，应过筛。
3(薄层板的涂布最简单的涂布方法是用两条比玻璃板厚0(25毫米的玻璃条或有机玻璃条(或在同样厚度的玻璃条下粘一层胶布)，将玻璃板夹住，把调好的吸附剂浆液平铺在薄层板上，然后用一有机玻璃条或直尺，迅速均匀地向前推进，就象推血片一样，只要推进的速度均匀一致，1即可得到薄厚均匀的薄层板，如在一块玻璃板末端再接一块相同的玻璃板，把剩余的装液接过去，可使涂层边缘整齐，厚度一致，吸附剂浆液的加水量和搅拌时间是涂布成败的关键，像12×8平方厘米的玻璃板需要2~3克硅胶G，加4~6毫升水即可，只要技术熟练即能涂成厚薄一致，光滑平整的一块薄层板。
纸色谱与薄层色谱的分离原理有何不同
纸色谱与薄层色谱的分离原理有何不同
纸色谱与薄层色谱是常见的色谱分离技术，它们在分离原理和应用方面有着一些不同之处。
本文将对这两种色谱分离技术的原理进行比较，以便更好地理解它们的特点和应用。
首先，我们来看看纸色谱的分离原理。
纸色谱是一种以纤维素纸为固定相的色谱技术，它利用纸张的毛细作用和吸附作用来进行物质的分离。
在进行纸色谱分离时，样品溶液被吸附在纸张上，然后通过溶剂的上升或下降来进行分离。
不同成分在纸张上的吸附速度不同，从而实现了它们的分离。
纸色谱的分离原理主要依靠物质在纸张上的吸附和分配来实现。
与纸色谱不同，薄层色谱是一种以薄层为固定相的色谱技术。
薄层色谱利用薄层板的吸附作用和分配作用来进行物质的分离。
在进行薄层色谱分离时，样品溶液被涂抹在薄层板上，然后通过溶剂的上升或下降来进行分离。
不同成分在薄层板上的吸附速度不同，从而实现了它们的分离。
薄层色谱的分离原理也主要依靠物质在薄层板上的吸附和分配来实现。
从上述分析可以看出，纸色谱和薄层色谱的分离原理都是依靠物质在固定相上的吸附和分配来实现的。
它们的不同之处主要在于固定相的不同，一个是纸张，一个是薄层板。
由于薄层板比纸张更薄，因此薄层色谱的分离效果更加明显，分离速度更快。
此外，薄层色谱还可以承受更高的压力，适用于更多类型的样品。
总的来说，纸色谱与薄层色谱的分离原理有一些不同，但它们都是通过固定相上的吸附和分配来实现物质的分离。
在实际应用中，可以根据样品的特点和分离要求来选择合适的色谱技术，以达到最佳的分离效果。
希望本文对纸色谱与薄层色谱的分离原理有所帮助，谢谢阅读。
纸色谱与薄层色谱的分离原理有何不同
纸色谱与薄层色谱的分离原理有何不同纸色谱和薄层色谱是常见的色谱分离技术，它们在化学分析和实验室中被广泛应用。
虽然它们都是利用物质在固定相和流动相之间的分配来实现分离，但是它们的分离原理有着明显的不同。
本文将对纸色谱和薄层色谱的分离原理进行详细比较，以帮助读者更好地理解它们的异同之处。
首先，纸色谱是一种在纸质载体上进行的色谱分离技术，而薄层色谱则是在玻璃、铝箔或塑料片等基质上进行的色谱分离技术。
纸色谱的固定相是纸质本身，而薄层色谱的固定相是薄层板上的硅胶或其他吸附材料。
这一点是两者最基本的区别，也决定了它们的分离原理有所不同。
其次，纸色谱的分离原理是以吸附作用为主，物质在纸上的分配是通过吸附和解吸的过程实现的。
当样品溶液通过纸质载体时，不同成分会因为对固定相的亲和力不同而在纸上发生分离。
而薄层色谱的分离原理则是以吸附和分配作用为主，样品成分在薄层板上的分配是通过吸附和流动相的作用实现的。
另外，纸色谱和薄层色谱在分离原理上的不同还表现在分离速度和分辨率上。
由于薄层色谱使用的是薄层板作为固定相，样品分子在其表面的扩散速度更快，因此薄层色谱的分离速度通常比纸色谱更快。
而纸色谱的分辨率较低，不适合对复杂混合物进行分离，而薄层色谱则可以实现更高的分辨率，适用于复杂混合物的分离和分析。
最后，纸色谱和薄层色谱在实际应用中也有各自的优缺点。
纸色谱操作简单，成本低廉，适用于一般的分离和初步分析；而薄层色谱分离效果好，分析速度快，但需要专门的薄层板和显色剂，成本较高。
因此，在实际应用中需要根据样品的特性和分离要求选择合适的色谱技术。
综上所述，纸色谱和薄层色谱的分离原理主要体现在固定相的不同、分离原理的差异、分离速度和分辨率的异同等方面。
通过深入比较和分析，我们可以更好地理解它们的特点和适用范围，从而更加有效地应用于实际的化学分析和实验中。
希望本文能够对读者有所帮助，谢谢阅读！。
色谱法薄层色谱和纸色谱
按分离原理
1
按色谱法分离所依据的物理或物理
化学性质的不同，又可将其分为：
2
吸附色谱法( adsorption
chromatography )
3
利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差
别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。
4
分配色谱法( partition
chromatography )
5
利用固定液对不同组分分配性能的差别而
按两相状 态
气相色谱 法
气ห้องสมุดไป่ตู้色谱 法
气液色谱 法
液相色谱 法
液固色谱 法
液液色谱 法
按固定相的几何形式
·柱色谱法 柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固 定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱头到柱尾 沿一个方向移动而进行分离的色谱法。
·纸色谱法 纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体，把试样点在滤 纸上，然后用溶剂展开，各组分在滤纸的不同位置以斑点 形式显现，根据滤纸上斑点位置及大小进行定性和定量分 析。 ·薄层色谱法 薄层色谱法是将适当粒度的吸附剂作为固定相涂布在 平板上形成薄层，然后用与纸色谱法类似的方法操作以达 到分离目的。
”
谢 谢
薄层色谱
薄层色谱法是应用非常广泛的色谱方法，这种色谱方法将固定 相图布在金属或玻璃薄板上形成薄层，用毛细管、钢笔或者 其 他工具将样品点染于薄板一端，之后将点样端浸入流动相中， 依靠毛细作用令流动相溶剂沿薄板上行展开样品。薄层色谱法 成本低廉操作简单，被用于对样品的粗 测、对有机合成反应进 程的检测等用途。
色谱法又称“色谱分析”、 “色谱分析法”、“层析
法”，是一种分离和分析方 法，在分析化学、有机化学、 生物化学等领域有着非常广 泛的应用。色谱法利用不同 物质在不同相态的选择性分 配，以流动相对固定相中的 混合物进行洗脱，混合物中 不同的物质会以不同的速度 沿固定相移动，最终达到分
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1. 学习色谱法的原理 2. 掌握使用薄层色谱和纸色谱对化合物进 行分离和鉴定
色谱法的一般原理
利用混合物各组分在固定相和流动相中的分配平衡常数 的差异进行分离。当带有样品的流动相流经固定相时， 由于固定相对各组分的吸附或溶解性能的不同，使吸附
力较弱获溶解度较小的组分在固定相中移动速度较快，
5、要求在原始记录中画出板的真实展开情况并计算Rf值
TLC是有机化学实验室中使用的非常多实验操作，常常
用来检测反应和柱色谱前药品： 偶氮苯，苏丹红，混合物（自配），环己烷/乙酸乙酯 9:1
仪器： TLC板，毛细管，广口瓶，铅笔
1. 准备TLC板
0.5cm
0.5 cm
2. 展开
展开剂：环己烷/乙酸乙酯 9:1
经过多次反复平衡，将混合物中各组分分离。
薄层色谱
薄层色谱：薄层色谱（Thin Layer Chromatography），
常用TLC表示，是一种微量，快速和简便的色谱方法。
一般是将固定相，如硅胶和三氧化铝，负载在一张薄层 板上，将样品置于固定相之后，流动相通过毛细管效应 从下往上流动而使样品分开。
的影响，产生分配现象，亲脂性强的流动相中分配的多，
移动速度快。
纸色谱实验药品和仪器
药品：
甘氨酸，亮氨酸，混合物（自配），展开剂（水/正丁
醇/醋酸 5:4:1，取上层液体）
仪器： 滤纸，大试管，带钩塞子，铅笔
实验操作类似于TLC
两张色谱滤纸，分别点上甘氨酸， 混合物，以及亮氨酸，混合物 使用茚三酮乙醇溶液进行显色 通过比较Rf值确定混合物中各 组分。
3. 干燥、显色
自身有颜色 有共轭体系的使用紫外灯 各种显色剂
4. 计算Rf值
Rf = D1/D2
5. 分析结果
通过比较Rf值，确定混合物中各组分分别是什么物质
纸色谱
纸色谱（Paper Chromatography）：纸色谱法是以纸作
为载体的色谱法。按分离原理属于分配色谱法的范畴。 固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分，流动相(展开剂) 为有机溶剂。由于滤纸纤维的毛细管现象，溶剂在含水 的滤纸上缓慢上升，流动相各组分在滤纸上受两相溶剂
展开装置图
注意事项
1、制板和活化：铺板厚度0.25-1mm且均匀；晾干；一块
一块铺；活化时烘箱要从低温开始 2、点样：画线时不能将板划破；点样斑点直径小于2mm， 斑间距1-1.5cm，标准左样品右；点样结束干燥后再 进行下一步 3、展开：展开剂用9：1的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂， 一般原则：根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等 因素考虑。溶剂的极性越大对样品的洗脱力越强。 4、显色：照原样画出斑点形状