酸性蛋白酶的作用机理

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3蛋白酶

3蛋白酶

蛋白酶 水解
蛋白胨、多肽、氨基酸
原料:动物蛋白——鱼、肉、蛋、奶、血
及其他下脚料;
植物蛋白——大豆蛋白水解物 微生物蛋白——
3.3.1.1大豆蛋白活性肽
• 以大豆为基本原料水解而得。 • 以前,人们认为氨基酸是人体吸收蛋白质的主 要途径,近年发现,主要以小肽的形式吸收, 比完全游离氨基酸更易、更快被机体吸收利用, 这是肽研究理论和实践的重大突破。 • 选择合适的蛋白酶水解, 把蛋白质中的生物活 性肽链片段释放出来从而可制备出具有各种各 样生理功能的生物活性肽。 • 酶法生产过程中主要应用的酶包括胰蛋白酶, 植物蛋白酶,枯草杆菌、放线菌、栖土曲霉等
Proteinases
第2章 蛋白酶
3.1 概述 3.2 常见的蛋白酶 3.3 蛋白酶在食品工业中的应用
第11问题
蛋白酶的分类、常见的种类
3.1.1、蛋白酶的作用
水解蛋白质或多肽中的酰胺键(肽键)。
COOH R1—CH—N—H + HO—C—CH—R2 H O COOH R1—CH—N—C—CH—R2 + H2O H O NH2 NH2
3.2.2 巯基蛋白酶
• 其活性中心包含有半胱氨酸。 • 主要有木瓜蛋白酶(papain)、无花果蛋 白酶(ficin)和菠萝蛋白酶 (bromelain),以及微生物蛋白酶链球 菌蛋白酶等。 • 半胱氨酸残基中的巯基-SH是酶活性中心 的必需基团,氧化剂或烷基化试剂或重 金属离子可以与巯基作用,从而抑制酶 的活性,一些还原剂如半胱氨酸、谷光 甘肽等和金属螯合剂如EDTA等可以使其 激活。
(2)无花果蛋白酶(EC 3.4.22.3)
• 分子量约为26,000,来自于无花果的乳汁 中,商品酶制剂中含有多种蛋白酶,热 稳定性差一些,在80℃下溶液中无花果 蛋白酶将完全失活。重金属离子对其有 抑制作用。 • 在pH3.5~9的范围内稳定,最适pH为6~8。 不过它的最适pH不会随着底物的变化而 发生明显的改变,例如对于酪蛋白它的 最适pH在6.7和9.5,对于明胶的液化为 pH7.5。

酸性蛋白酶

酸性蛋白酶

酸性蛋白酶
蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能够水解(断裂)蛋白质,因此也被称为蛋白水解酶。

酸性蛋白酶是由隆科特黑曲霉优良菌种经发酵精制提炼而成,能在低PH条件下,有效水解蛋白质,蛋白水解酶在许多的生理和病理过程中发挥着重要作用。

广泛应用于酒精、白酒、啤酒、酿造、食品加工、饲料添加、皮革加工等行业。

本产品是一种酸性蛋白酶制剂,在酸性条件下具有较高活性,由酸性蛋白酶高产菌株——曲霉菌(Aspergillus)深层发酵而成。

它广泛应用于饲料、纺织、废水处理和果汁提纯方面。

促进酵母的生长与繁殖,提高发酵速度,从而缩短发酵周期和提高发酵设备的生产能力。

酸性蛋白酶的应用

酸性蛋白酶的应用

YR-ACPro酸性蛋白酶◇产品概述:蛋白质由氨基酸组成,是自然界中发现的最复杂的有机化合物之一。

由盐酸和蛋白酶分解成易被高等动物的肠道和微生物有机体的细胞膜吸收的氨基酸。

包括人类在内的每种动物,必须要有足够的蛋白质来维持自身生长,来生成每个细胞所必需的氨基酸,一些特种蛋白质还是某些特殊细胞、腺体分泌物、酶和激素的功能性组成元素。

蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能够水解(断裂)蛋白质,因此也被称为蛋白水解酶。

蛋白水解酶在许多的生理和病理过程中发挥着重要作用,在食品和乳品加工业也有着广泛应用。

本产品是一种酸性蛋白酶制剂,在酸性条件下具有较高活性,由酸性蛋白酶高产菌株——曲霉菌(Aspergillus)深层发酵而成。

它广泛应用于饲料、纺织、废水处理和果汁提纯方面。

◇工作机理:蛋白水解酶制剂本产品能在酸性条件下水解蛋白质食品中的缩氨酸键,释放氨基酸或者多肽。

在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黄油和酱油生产中,添加酸性蛋白酶可澄清发酵液中的雾气。

酵母在发酵阶段的生长可以通过悬浮蛋白质转化的氨基酸来加以促进,从而加速发酵并提高产量。

◇产品特性:本产品能够产生最大活性的pH范围是2.5-6.0,最适pH值是3.5;温度范围是10-50℃(50-122°F),最适温度是50℃。

◇产品规格:产品为固体:酶活力为 10,000 U/g)酶活力单位定义: 温度为40℃,pH3.0条件下,1分钟内释放1ug酪氨酸所需要的酶量。

◇使用说明:用作饲料添加剂时,本产品的添加量为5-10U/g。

在酿造业使用时,本产品的添加比例为5U/g。

◇产品包装及储存:本产品的包装规格为25kg/箱。

也可根据客户需求提供大小不等的包装。

存放于阴凉干燥处,避免阳光直射。

本产品在低温下(25℃以下,但不能冷冻)贮存时,其活性可保持相当长一段时间。

◇使用注意事项:本产品无毒、可生物降解。

避免儿童接触及不必要接触,长期接触一些产品(如本产品)中的蛋白质会使有的人对该产品过敏。

酶学-蛋白酶

酶学-蛋白酶
bacillopeptidaseb
蛋白酶
成员:杨超越 李星宇 舒皓钰 王睿飞 徐也甜 李锐涛
蛋白酶
蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。到本
世纪初,已经报导的微生物蛋白酶估计超过900
种,生物体的生理活动和疾病的发生,如食物之
消化吸收、血液之凝固、溶血作用、炎症、血压
调节、细胞分化自溶、机体衰老、癌症转移、生
蛋白酶的应用
蛋白酶在烘焙中的应用
蛋白酶的作用机理
蛋白酶能作用于蛋白质和多肽形成多肽 和氨基酸。完好的面粉中蛋白酶活力很 低,制作面包时添加蛋白酶会使面团中 多肽和氨基酸含量增加,氨基酸是形成 香味物质的中间产物,多肽则是潜在的 滋味增强剂、氧化剂、甜味剂或苦味剂。 蛋白酶种类不同,产生的羰基化合物也 不同,若蛋白酶中不含产生异味的脂酶, 适量添加有利于改替面包的香气。
2009年 以色列 用了4500磅的原料 在特拉维夫做了世界最大的鹰嘴豆泥 昭示自己正宗
黎巴嫩人表示不服, 2010年300大厨做了两倍的量 许多人围着大盘载歌载舞
2015年以色列本来打算做一个15吨的 后来因为安全问题而作罢。。。。。。。。
赋予我们食物想象的豆类 粉身碎骨后带来了更多的惊喜
老祖先赠予人类的实惠食物 滋养了中东地区来来去去的民族 文明的兴盛和交流让其传遍地中海各个领域 融入了中东各国人民的血液 在交错分裂的历史和政治图景中 又成为了各自民族想象和身份认同的一部分
内源蛋白酶对肉类食品滋味的影响
滋味是肉制品的重要感官特性之一,公认的基本味 觉有酸、甜、苦、咸和鲜。肉类食品的滋味物质主要有 游离氨基酸、肽、核苷酸和无机盐。 蛋白质的降解是氨基酸和肽形成的重要途径之一, 不同的肽与氨基酸具有不同的呈味特性,从而使肉呈现 不同的滋味。

酸性蛋白酶及其在畜牧业中的应用_肖竞

酸性蛋白酶及其在畜牧业中的应用_肖竞
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到一株酸性蛋白酶的高产菌—— — ;##H,遗传性状非常 稳定 。 J8?5 OL> ’ <AA" + 等从 JPQP9870 BR>SD>9E?ET8R7P 中获得一种酸性蛋白酶,其最适作用温度为 6"K , 在 G6K 或 66K , 酶活 力 只有 最 大活 力 的 A"= , 若 66K 保温 G"7E?,则活力减半,在 H"K 保持 <"7E?, 酶活力不足 <6= 。 UP? 3LE7>D0 等 ’ !""" + 利用转基因 技术将 3BCD09EFE>7 9E5?EB89>7 中的酸性蛋白酶基因导 入到酵母中,获得分泌该种酸性蛋白酶的酵母突变体
文献标识码: 3 文章编号:’$$* ! $$2* & "$$% ) $% ! "# ! $% 中图分类号: ;2’1/ #
酸性蛋白酶包括胃蛋白酶、凝乳酶和一些微生物 蛋白酶,适宜在酸性条件下水解蛋白质。酸性蛋白酶 用作动物饲料添加剂,可提高动物 & 特别是幼龄动物 ) 对饲料中蛋白成分的消化吸收率,促进其生长。此 外,它还用于制革工业中皮革的脱毛和软化,食品工 业中蛋白质的水解生产高档食品,医药工业中消化剂 和消炎剂的制造等。 近年来,随着集约化畜禽生产的发展,加剧了环 境污染。其中,氮是污染环境的主要物质,因而提高 饲料中蛋白类营养物质的利用效率,降低其排放就显 得尤为重要 。此外,由于我国蛋白质饲料资源严重 缺乏,需要寻求非常规蛋白资源,而动物对非常规蛋 白饲料的利用效率很低。研究表明在饲料中添加酸性 蛋白酶 + 可提高该类蛋白质的可消化性,因此酸性蛋 白酶的开发利用就显得非常重要。 ! 酸性蛋白酶的酶学性质 酸性蛋白酶是一类具有复杂理化性质的化合物, 不同微生物菌种分泌的酸性蛋白酶虽具有一些共同的 性质,但在底物特异性、抑制剂、激活剂等方面均存 在着一定的差异。 !" ! ,- 值 酸性蛋白酶作用的最适 ,- 值一般在 " . *,但不

酸性蛋白酶产生菌的筛选及其部分性质研究

酸性蛋白酶产生菌的筛选及其部分性质研究
琼脂, p H为 6 . 0 ~7 . 0 .
种子 培 养 液 : 1 9 / 5 蛋 白胨 , 0 . 3 牛 肉膏 , 0 . 5
Na C1 .
及 水产 加工 等多个 行业 , 对 国民经济 的发 展起着 重 要 的作用 [ 1 ] . 酸性 蛋 白酶 在 白酒 大 曲 中的含量 较 高 , 一般 在
p H值为 2 . 0 ~5 . 0的 酸 性 条 件 下 活 力 最 强 ] 萄糖 , 0 . 6
Na 2 HP O ・2 H2 O, 0 . 2 酵母提取物 , 0 . 1 KC 1 ,
0 .0 1 M gS O4・7 H2 O.
酸性 蛋 白酶属 于水 解酶 类 , 能够在 酸性 条件 下 将 蛋 白质 水解 成 多肽类 物质 和 游离 的氨基 酸. 酸 性 蛋 白酶是 最 重要 的工业 用酶 之一 , 其应 用 已经深 入 到食 品 、 酿造、 医药 、 纺织、 皮革、 日用 化 工 、 饲 料 以
0 . 0 5 K2 HP O , 0 . 0 5 KH2 P O 4 , 1 酪蛋 白, 2
酸性蛋白酶与固体曲的制备窖泥培养及其白酒中散发的醇香味有着密切的联系在发酵白酒的过程中高级醇实际上主要是从酸性蛋白酶所分解产生的氨基酸得来的
第 3 O卷 第 2期
Vo 1 . 3 O N o. 2
周 口师范 学院 学报
J o u r n a l o f Z h o u k o u No r ma l Un i v e r s i t y
生化 性 质 进 行 了研 究. 结果表明 : 筛选 得 到 的 菌株 D B M2初 步 鉴 定 为 芽孢 杆 菌 , 其 最适 温度 为 3 0口 c, 最适 p H
值为5 , 为 酸性 蛋 白 酶 产 生 菌 . 关键词 : 酸 性 蛋 白酶 ; 菌株 ; 性 质 中图 分 类 号 :T S 2 0 2 . 3 文 献标 志 码 :A 文章编号 : l 6 7 1 — 9 4 7 6 ( 2 0 1 3 ) 0 2— 0 0 7 0 — 0 3

饲用酸性蛋白酶高产菌株选育及应用研究

饲用酸性蛋白酶高产菌株选育及应用研究

酸性蛋白酶高产菌株选育及应用研究一、概述本项目2004年获得河南省科技攻关项目的立项支持,项目编号:0424240040。

酶是生物细胞原生质合成且具有高度催化活性的蛋白质。

人类早在认识酶之前就知道利用酶为生产和生活服务,例如酿造、鞣革及制造奶酪等已经有几千年的历史。

1897年Büchner发现磨碎的酵母仍然能够使糖液发酵产生酒精和二氧化碳。

二十世纪初,有更多的酶被发现和分离提纯,注意到了某些酶的作用需要有低分子物质(辅酶)的参加,并陆续认识了很多酶所催化的反应。

1926年Sumner第一次从刀豆中分离出脲酶并获得了该蛋白质的结晶。

30年代,J.Northrop 又连续分离出结晶的胃蛋白酶、胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶。

今天已有500种酶得到结晶,2000多种酶得到鉴定,200种左右商品酶已经开发,但工业上应用的酶仅有50多种。

二次世界大战后抗生素工业的通风搅拌发酵技术的利用,使微生物酶制剂工业得到迅速发展。

20世纪40年代末,生产α-淀粉酶的液体深层发酵首先在日本实现了工业化生产,标志着现代酶制剂工业的开始。

20世纪50年代后期遗传工程、蛋白质工程等现代生物技术的研究成果,促使世界酶制剂工业持续地高速发展,成为生物工程四大主导产业中最早产业化的高技术产业。

由于酶制剂是一种绿色高效生物催化剂,具有高效、节能、安全和环保等特点,对酶制剂应用产业开发新产品、提高质量、节能降耗、保护环境重要意义;因此,这一产业的发展受到各国政府的高度重视,有着广阔的发展前景。

国际酶制剂市场目前保持着9%的增长速度,2010年世界酶制剂年销售额达160亿美元,目前已有一大批可用于工业发酵生产的各种胞外酶的微生物,如芽孢杆菌、大肠杆菌、放线菌、毛霉、黑曲霉、青霉、酵母等。

商品化的酶品种数量主要有糖化酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、凝乳酶、脂肪酶、DNA聚合酶、T4DNA连接酶、葡萄糖苷酶、葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶、a-乙酰乳酸脱羧酶、乳酸脱氢酶、天冬氨酸转氨酶、延胡索酸酶、青霉素酰化酶、溶菌酶、链激酶、漆酶、植酸酶、复合酶等等。

酸性蛋白酶高产菌株的选育

酸性蛋白酶高产菌株的选育
( 4 ) 发酵时间的影响 在基础培养基中接 入菌种 ,3 l ℃恒温培 养箱 中分 别培养不 同 的时间, 测定 酶活 力。 ( 5 ) 水分 的影响 在 5 0克基础 发酵 培 养中分 别加 入不 同量的蒸馏 水, 接 入菌种。 3 1 ℃恒 温培养箱中培 养 5 d , 测定 酶活 力。 ( 6 )豆饼水解 液的影响 在基础培 养基 中分 别添 加不 同量 的豆 饼水 解液 , 接 入菌

酸性蛋 白酶高产菌株的选育
孙 作 宝
( 沂 水 大地 玉米 开发有 限公 司 , 山东 临 沂 2 7 6 4 0 0 )
摘 要 酸性 蛋 白酶是 一 种能在 酸 性环境 下水解 蛋 白质的 酶类 , 由于其 具有 较好 的 耐酸性 , 而被 广泛 应 用于食 品 、 酿造 等 工业 。 本 实验 以 吉林 大学微 生物 实 验 室提 供 的 黑 曲霉 ( As p e r g i l l L I S n i g e r )为 出发 菌株 , 分别 采 用紫 外线 、 亚硝基 胍 、 甲基磺 酸 乙酯等 进行 诱 变选 育 , 筛选得 到 酸性蛋 白酶 高产 菌株 。 对该 菌
1 . 1培养基 ( 1 ) 斜面培养基为 P D A 培养基, 分离培养 基为察 氏培养基中加 入 1 %的酪蛋 白。 ( 2 ) 固体 基础培 养基 :每千 克麸皮 中添 加N H 4 C 1 1 . 5 % 、 水7 5 0 m 1 ,p H 5 . 5 。 豆饼 水 解液的配制方 法: 豆饼粉 1 0 0 份、 石灰 6 份、 水6 0 0 份0 . 1 M P a 蒸汽水解 l h 。 1 . 2诱变选育 ( 1 ) 紫 外诱 变 菌种活 化后 制成 孢子 悬 浮液, 用悬 浮液涂布初 筛平板,3 O ℃培 养 让孢 子萌 发, 把 培养 皿开 盖放 在无 菌紫 外 线环境 中照射不同时间。 然后把平板转移至 3 O ℃的恒温 培养箱 中黑 暗培养 5 d , 挑取 透 明圈最大的菌落复筛。

62蛋白酶

62蛋白酶
大豆肽可促进成长激素的生成,促进肌肉生长,对消除疲劳, 缓解肌肉酸疼,增强体力十分有效,还具有增强免疫功能、 降血脂、降血压等功能。
大豆肽已广泛使用于饮料、点心、及各种食品中。 推荐摄取量是每日4000mg。
1.大豆多肽的理化性质
(1) 溶解性
2) 黏度
大豆蛋白质的黏度是随着浓度的增加而增加,而大豆肽即使在很 高的浓度状态下,仍可以保持较低的黏度。
中性蛋白酶
生产菌种
枯草杆菌、耐热解蛋白芽孢杆菌、灰色链霉菌、寄生曲霉、米曲 霉
性质
(1)大多数微生物中性蛋白酶是金属酶,一部分酶蛋白总含有一 个锌离子,相对分子质量3500~40000,等电点在pH8~9 ,是微 生物蛋白酶中最不稳定的酶,很易自溶,即使在低温冰冻干燥的条 件下,也会造成相对分子质量的明显减少。
—CHR′—COO- + +NH3—CHR″—
C. 氨基的滴定 +NH3—CHR″— + OH-
NH2—CHR″— + H2O
蛋白质水解度测定原理
当肽键被水解裂开后,紧接着在羧基和α–氨基之间产生 质子交换作用。当蛋白质酶解过程在pH6.5以上进行时, 质子化的氨基酸将离解。
如果要保持反应体系pH不变,就必须加入碱液。
加蛋白酶 水解 氨基酸产品
氨基
• 前处理
一般采用热处理的方法,也可采取生化分离技术将 蛋白质先提取出来,再进行酶解。
2、明胶的生产
原料 动物的皮或骨 生产方法
酸法或碱法,也可用蛋白酶水解法生产。 酶法生产明胶的工艺流程如下:
原料 切割、捣碎 水洗 加酶水解 除酶 炭处理 过滤 干燥 明胶产品
溶解性、乳化性、起泡性、粘度、风味等 应用广泛

浅谈几种常见酶制剂的研究及其应用

浅谈几种常见酶制剂的研究及其应用

浅谈几种常见酶制剂的研究及其应用酶是具有催化活性的蛋白质,它具有高效性、专一性、无毒副作用、不产生残留等特点。

酶广泛的存在于动物、植物以及微生物体内,是生物体维持正常的生理生化功能必不可少的成分。

家禽、家畜对饲料中营养物质的利用也是在消化道中各种酶的作用下将各种大分子的物质降解为易被吸收利用的小分子物质的。

酶制剂通常可粗略分成2大类:一类是内源性酶,与消化道分泌的消化酶相似,如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等,直接消化水解饲料中的营养成分;另一类是外源性酶,它是消化道不能分泌的酶,如纤维素酶、果胶酶、半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、戊聚糖酶(阿拉伯木聚糖酶)和植酸酶。

外源性酶不能直接消化水解大分子营养物质,而是水解饲料中的抗营养因子,间接促进营养物质的消化利用。

大量的试验研究表明,酶制剂主要参与机体内的以下活动:①参与细胞的降解,使酶与底物充分接触,促进营养成分的消化;②去除抗营养因子,改善消化机能;③补充(或激活)内源酶的不足,改进动物自身肠道酶的作用效果;④参与动物内分泌调节,影响血液中某些成分的变化;⑤水解非淀粉多糖(NSP),降解消化道内容物的黏度;⑥改变消化道内菌群的分布;⑦加强动物保健;⑧减少环境污染。

几种常见酶制剂的作用见表1。

1 蛋白酶蛋白酶是工业酶制剂中最重要的一类酶,约占全世界酶销售量的60%。

根据其作用机制和作用最适pH值,蛋白酶可分为酸性蛋白酶(pH值为2.5~3)、中性蛋白酶(pH值在7左右)、碱性蛋白酶(pH值在8左右)。

酸性蛋白酶用途十分广泛。

食品工业上用于啤酒、白葡萄酒的澄清和酱油的酿造;制革工业用于脱毛和皮革软化;医药工业用作消炎和助消化剂;饲料工业中多采用酸性和中性蛋白酶,以提高动物对蛋白质的水解效率,促进动物对饲料蛋白质的吸收效率。

1.1 酸性蛋白酶酸性蛋白酶分子量在35 000道尔顿左右。

酶分子活性中心有2个天冬酰氨残基,在已经进行过氨基酸序列分析的酸性蛋白酶分子中约有30%的区域是同系的。

蛋白酶的作用及种类都有哪些

蛋白酶的作用及种类都有哪些

蛋⽩酶的作⽤及种类都有哪些 蛋⽩酶存在于动物的肝脏,植物的茎叶和果实等等,蛋⽩酶的作⽤是很多的,下⾯是店铺为⼤家带来的蛋⽩酶的作⽤及种类,欢迎阅读。

蛋⽩酶的作⽤ 蛋⽩酶是⽔解蛋⽩质肽链的⼀类酶的总称。

按其降解多肽的⽅式分成内肽酶和端肽酶两类。

前者可把⼤分⼦量的多肽链从中间切断,形成分⼦量较⼩的朊和胨;后者⼜可分为羧肽酶和氨肽酶,它们分别从多肽的游离羧基末端或游离氨基末端逐⼀将肽链⽔解⽣成氨基酸 蛋⽩酶的种类 ⽊⽠蛋⽩酶 ⽊⽠蛋⽩酶,是⼀种蛋⽩⽔解酶,可将抗体分⼦⽔解为3个⽚段。

是番⽊⽠中含有的⼀种低特异性蛋⽩⽔解酶,活性中⼼含半胱氨酸,属巯基蛋⽩酶,应⽤于啤酒及⾷品⼯业。

⽊⽠蛋⽩酶是⼀种巯基蛋⽩酶,具有⼴泛的底物特异性蛋⽩质精氨酸的作⽤,L-赖氨酸精氨酸、⽢氨酸、L-⽠氨酸残基的羧基参与形成的肽键。

这种酶属内肽酶,能把整个鸡蛋的蛋⽩多肽分⼦肽-NH-分⼦量较⼩的代。

⽊⽠蛋⽩酶是⼀种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋⽩质的蛋⽩酶。

它的外观为⽩⾊⾄浅黄⾊的粉末,微有吸湿性。

⽊⽠蛋⽩酶(Papain)简称⽊⽠酶,⼜称为⽊⽠酵素。

是利⽤未成熟的番⽊⽠(Carica papaya)果实中的乳汁,采⽤现代⽣物⼯程技术提炼⽽成的纯天然⽣物酶制品。

它是⼀种含疏基(-SH)肽链内切酶,具有蛋⽩酶和酯酶的活性,有较⼴泛的特异性,对动植物蛋⽩、多肽、酯、酰胺等有较强的⽔解能⼒,同时,还具有合成功能,能把蛋⽩⽔解物合成为类蛋⽩质。

溶于⽔和⽢油,⽔溶液⽆⾊或淡黄⾊,有时呈乳⽩⾊;⼏乎不溶于⼄醇、氯仿和⼄醚等有机溶剂。

最适合PH值6~7(⼀般3~9.5皆可),在中性或偏酸性时亦有作⽤,等电点(pI)为8.75;最适合温度55~65℃(⼀般10~85℃皆可),耐热性强,在90℃时也不会完全失活;受氧化剂抑制,还原性物质激活。

胃蛋⽩酶 胃蛋⽩酶是⼀种消化酶,在细胞的主要功能是胃粘膜的胃分泌的⾷物中的蛋⽩质分解为⼩肽⽚段。

酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较

酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较

酸性蛋白酶性质
(1)酸性蛋白酶的pH适应性 酸性蛋白酶的最适 pH 为 2.5 ~5.0, 但 不同微生物的酶稍有差异 (2)酸性蛋白酶的温度适应性 酸性蛋白酶的适宜温度 为 30 — 50 ℃ , 最适作用温度为40 ℃左右。 在温度较低时,酶活性随温度的上升而增 大,在温度达到酶的最适温度后,酶活力随温 度升高而急剧下降,失活很快。一般50 ℃以下 可保持稳定,但随产酶微生物菌种不同而有所 差异。
碱性蛋白酶性质
大多数微生物碱性蛋白酶作用于肽链的中间,生成二个 肽。除酶本身的氨基酸残基外,不具有特定的活性基团, 酶发挥作用是不需要特定的激活剂,而需要金属离子激 活,如除去金属离子就不能作用,必须的金属离子有 Mn2+、Mg2+、Zn2+、Co2+、Fe2+等 。酶的活性中心有丝 氨酸,故又称丝氨酸蛋白酶。因此,这类蛋白酶遇到作 用于丝氨酸的试剂二异丙基氟磷酸(DFP)便失活,这 是碱性蛋白酶的一个重要特征。但是碱性蛋白酶对金属 螯合剂EDTA、重金属和巯基试剂却不敏感。钙离子对此 酶有一定的稳定作用。碱性蛋白酶有较大的耐热性, 55℃下放置30min能保留大部分活力。碱性蛋白酶作用 位点要求在水解点羧基侧具有芳香族或疏水性氨基酸 (如酪氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸等),它比中性蛋白酶 有更大的水解能力。此外,碱性蛋白酶还具有酯酶的活 力。
酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较
酸性蛋白酶 活性中心
最适pH 最适温度
碱性蛋白酶 丝氨酸残基
9-11(大多数) 分布范围较广 失活(重要特征)
天冬氨酸残基
2.5-5.0 30-50℃ 不敏感
对二异丙基氟磷 酸(DFP) 对EDTA
金属离子
不敏感
Ag+轻度抑制 Gu2+、Mn2+激活

酸性蛋白酶生产工艺

酸性蛋白酶生产工艺

酸性蛋白酶生产工艺1 蛋白酶、酸性蛋白酶1.1 蛋白酶的定义蛋白酶是催化肽键水解的一类酶,它可迅速水解蛋白质为胨、肽类,广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。

同时大多数微生物蛋白酶都是胞外酶。

1.2 微生物蛋白酶分类微生物蛋白酶按其作用的最适pH可分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶三类。

碱性蛋白酶为透明褐色液体,能与水混溶,最适温度50~60℃,最适pH8.5。

中性蛋白酶为金属酶,褐色颗粒或液体,易溶于水,最适温度45~55℃,最适pH5.5~7.5。

酸性蛋白酶为近乎白色至浅黄色无定型粉末或液体,易溶于水,最适温度45℃,最适pH2.5。

1.3酸性蛋白酶的概述酸性蛋白酶(acidic protease)在 1954 年首先由吉田在黑曲酶中发现。

该酶广泛存在于霉菌、和担子菌中,细菌中极少发现,其最适pH3~4,相对分子质量 30000~40000,等电点(pH3~5)。

酸性蛋白酶主要是一种羧基蛋白酶,大多数在其活动中心含有 2 个天冬氨酸残基。

酶蛋白中酸性氨基酸含量高,而碱性氨基酸含量低。

不同微生物的酸性蛋白酶其氨基酸组成虽有所差别,但性质基本相同,许多性质也与动物胃蛋白酶相似,其活动中心肽键也基本相似,它对 DFP、PCMP (对氯汞苯甲酸)EDTA不敏感,及但能为DNA(二重氮乙酰亮氨酸甲酯)EPNP及(1,2 环-3-对硝基苯养基丙烷),SDS(十二烷基磺酸钠)等抑制。

DNA,EPNP 之所以能引起酶失活是由于活性中心天冬氨酸残基被酯化。

DNA 只同有活性的酸反应,而同失活的酶不能反应。

P-BPB(对溴酚乙酰溴)虽然也可同酶的1个天冬氨酸残基反应,但同它反应的天冬氨酸的位置与以上两种抑制不一样,故不能引起青霉酸性蛋白酶失活。

1.4 酶的生产方法酶的生产方法主要有:提取分离法、生物合成法、化学合成法。

酶的微生物合成法主要有:液体深层发酵、固体培养发酵、固定化细胞培养、固定化原生质发酵。

酒精酸性蛋白酶在发酵中的应用

酒精酸性蛋白酶在发酵中的应用

酒精酸性蛋白酶在发酵中的应用酒精酸性蛋白酶在酒精发酵中的应用在酿酒业中应用蛋白酶,可在玉米,木薯酒精酿造的发酵中起协同作用,具有溶解发酵原料的颗粒,促进微生物繁殖,分解蛋白质生成香味物质,降解酵母菌体蛋白酶等多种功能。

以提高产量和质量,并愈来愈受到人们的重视。

但目前,国产酒用酸性蛋白酶比较少,主要是由于菌种酶活力低,生产成本高,因而其酒用酸性蛋白酶的研究有待于进一步深入展开。

发酵速率提高和出酒率增加与酵母密切相关,酒精浓醪发酵时,高低物浓度和高酒精含量会限制酵母菌的生长繁殖,对酒精发酵产生强烈的抑制作用。

因此发酵工艺的改进和耐高浓度酒精酵母的选育是实现酒精浓醪发酵工业的关键。

酵母的生理状态及营养状况对改善高酒精浓度下酵母的生存率,提高酵母酒精发酵速率会产生很大影响。

在高浓度酒精发酵中主要是营养缺乏,而不是积累的酒精导致发酵活性降低的。

添加自由氨基酸FAN不但可以缩短发酵时间,而且提高了酒精的产量,增加了酵母的酒精耐性和存活率。

酸性蛋白酶作用产物是氨基酸,是酵母生长的最好营养物质和发酵的促进剂,在玉米原料中除含有大量的淀粉,还含有一定量的粗蛋白与淀粉紧密结合,影响淀粉的水解速度。

在发酵中添加酸性蛋白酶,通过水解蛋白酶,使一些难水解的淀粉释放出来,为淀粉酶的糖化作用创造条件,也为发酵酵母提供更丰富的营养。

基于此,本文对酒用酸性蛋白酶研究及其酒中酶学功能作用综述。

1 酒用酸性蛋白酶源研究国内目前用于生产酸性蛋白酶的菌种主要有黑曲霉和宇佐美曲霉等,黑曲霉主要用于固体发酵,而宇佐美曲霉主要用于液体发酵。

本文主要用于液体发酵。

宇佐美曲霉用于液体发酵,产酶活性在5600u/ml。

在此基础上,于丽萍等通过控制斜面培养成分和液体发酵的通气量提高宇佐美曲霉537产生的酸性蛋白酶活力,产酶活性提高20%左右。

并用20L自控发酵罐,是产酶活性提高7100u/ml。

在发酵罐中进行液体培养,通气量的大小与风量、搅拌速度、罐压三者有关。

食品酶学复习题(1)

食品酶学复习题(1)

⾷品酶学复习题(1)⾷品酶学复习题(1)1.酶的特性有哪些?(1)催化效率⾼:⽐⼀般的酶⾼106-1013倍;(2)酶作⽤的专⼀性:⼀种酶作⽤于⼀种或⼀类分⼦结构相似的物质(3)易变性:⼤多数酶的化学本质是蛋⽩质,因⽽会被⾼温、酸、强碱等破坏(4)酶的催化条件温和;(5)酶在⽣物体内参与每⼀次反应后,它本⾝的性质和数量都不会发⽣改变。

8. 国际酶学委员会推荐的分类和命名规则的主要依据是什么?酶学委员会提出以酶所催化的化学反应性质作为酶的分类和命名规则的主要依据,每⼀种酶都给以三个名称:系统名,惯⽤名和⼀个数字编号。

2、脂肪酶和脂肪氧化酶的不同?脂肪酶⽔解脂肪,产⽣⽢油、⽢油⼀酯和脂肪酸脂肪氧化酶催化顺,顺-1,4-戊⼆烯的不饱和脂肪酸及酯的氢化氧化作⽤。

4、酶活⼒:指酶催化反应的能⼒,它表⽰样品中酶的含量。

3、Km值代表反应速度达到最⼤反应速度⼀半时的底物浓度。

固定化酶:是指在⼀定的空间范围内起催化作⽤,并能反复和连续使⽤的酶。

优点:同⼀批固定化酶能在⼯艺流程中重复多次的使⽤;固定化后,和反应物分开,有利于控制⽣产过程,同时也省去了热处理使酶失活的步骤;稳定性显著提⾼;可长期使⽤,并可预测衰败的速度;提供了研究酶动⼒学的良好模型。

26.固定化酶的稳定性增强主要表现在哪些⽅⾯?操作稳定性(2)贮藏稳定性(3)热稳定性(4)对蛋⽩酶的稳定性(5)酸碱稳定性。

27.什么是糖酶?常见的糖酶有哪⼏种?(四种以上)糖酶:裂解多糖中将单糖连接在⼀起的化学键,使多糖降解为⼩分⼦,催化糖单位结构上的重排形成新的糖类化合物的酶。

常见的糖酶:α-淀粉酶、糖化酶、β-淀粉酶,乳糖酶,果胶酶,纤维素酶等最常见的微⽣物产酶发酵类型是液体深层发酵2. 琼脂糖凝胶过滤和离⼦交换法等纯化酶的机理各是什么?琼脂糖凝胶过滤:不同式样通过凝胶时,能进⼊颗粒状凝胶的微孔的⼩分⼦被阻滞,不能进⼊微孔的⼤分⼦未被阻滞,改变颗粒状凝胶的微孔⼤⼩可能改变凝胶量分级分离范围。

蛋白酶的作用

蛋白酶的作用

蛋白酶的作用蛋白酶在动物的肝脏,植物的茎叶和果实,以及微生物中是很广泛存在的,蛋白酶的作用是很多的,现在蛋白酶在毛皮、皮革、丝绸、食品、医药、酿造方面已经有了很广泛的应用了,能够创造出很大生产力,蛋白酶的种类也有很多,常见的有胰蛋白酶和胃蛋白酶。

蛋白酶是有很多的用途的,它的药用功能也是很强大的,胃蛋白酶对于治疗消化不良有很大的作用,酸性的蛋白酶能够很好的治疗支气管炎,下面我们就来看看蛋白酶的作用,特别是胰蛋白酶。

★胰蛋白酶的作用胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。

不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。

胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在 pH 为 8.0 、温度为 37℃时,胰酶溶液的作用能力最强。

使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。

因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。

终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。

1. 称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为 0.25 %,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调 PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。

搅拌混匀,置于 4℃内过夜。

2. 用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器( 0.22 微米微孔滤膜)抽滤除菌。

然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。

胰蛋白酶能够催化蛋白质的特定肽键水解,这个催化过程是不需要能量的,不会使酶失去活力,也不会改变形状和使自身水解。

底物与酶的活性中心的结合是可逆的,这种结合使得蛋白质特定肽键因弯曲变形而被活化,更易于受到水分子的攻击,分别形成氨基和羧基而断裂,得到小分子多肽或氨基酸。

不同的蛋白酶可以作用在不同氨基酸相连组成的肽键,因此胰蛋白酶并不能作用在所有的肽键。

胃蛋白酶原激活机理

胃蛋白酶原激活机理

胃蛋白酶原激活机理
胃蛋白酶原是一种由胃部分泌的酶前体,在胃酸和胃蛋白酶的协同作用下会被激活为胃蛋白酶。

胃蛋白酶原的激活过程是一个复杂的分子生物学过程,涉及多个酶和蛋白质的相互作用。

目前已经确定的激活机制包括三种:酸性激活、粘液蛋白酶激活和胃蛋白酶原自身激活。

其中,酸性激活是最主要的机制,胃酸的存在使胃蛋白酶原的
N-末端被切割,导致其结构改变,从而使得酶前体能够与胃蛋白酶结合并被其激活。

粘液蛋白酶激活和胃蛋白酶原自身激活则是辅助机制,可以在一定程度上促进胃蛋白酶原的激活。

胃蛋白酶原的激活过程不仅与胃酸分泌和蛋白质消化相关,还涉及到多种疾病的发生和发展,因此对其激活机制的研究具有重要的生物学和临床意义。

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溶酶体与细胞内消化自噬作用的关系

溶酶体与细胞内消化自噬作用的关系

溶酶体与细胞内消化自噬作用的关系细胞是生命体的基本单位,它们通过各种机制来完成其生存和繁殖的任务。

其中,细胞内消化自噬作用是细胞内最重要的代谢途径之一,它涉及到细胞内溶酶体的功能。

本文将从溶酶体与细胞内消化自噬作用的关系入手,探讨这两个细胞内重要机制的互动。

一、溶酶体的结构和功能溶酶体是一种细胞内膜包裹的小囊泡,它们包含有多种水解酶和蛋白酶,可以对各种细胞内外的物质进行分解和消化。

溶酶体的形态和大小因细胞类型和功能而异,但它们都由膜包裹的酸性液体组成,这种液体的pH值通常为4.5-5.0,可以使其中的水解酶和蛋白酶发挥最佳的酶活性。

溶酶体的形成和维持需要多种蛋白质的参与,包括蛋白酶、转运蛋白、引导蛋白等。

其中,溶酶体酸性蛋白酶(lysosomal acid protease)是溶酶体的典型标志物,它们的产生和运输都需要经过多个细胞器的协同作用。

此外,溶酶体还可以通过内吞作用(endocytosis)和自噬作用(autophagy)等途径将各种细胞内外的物质引入其中,进行分解和消化。

二、细胞内消化自噬作用的机制细胞内消化自噬作用是细胞内最基本的代谢途径之一,它可以对细胞内各种不需要的或损坏的物质进行分解和回收,从而维持细胞内环境的稳定。

细胞内消化自噬作用的机制主要包括以下步骤:1. 形成自噬体(autophagosome):在细胞内消化自噬作用过程中,膜结构会从细胞质膜上卷曲成一个小囊泡,将细胞内各种不需要的或损坏的物质包裹在其中,形成自噬体。

2. 融合溶酶体:自噬体与溶酶体膜融合,将自噬体内的物质释放到溶酶体内,进行消化和分解。

3. 物质分解和回收:溶酶体内的酶对自噬体内的物质进行分解和消化,将其中的分解产物释放到细胞质中,进行再利用或排泄。

细胞内消化自噬作用的机制涉及到多个蛋白质的协同作用,其中最重要的是自噬体形成相关基因(autophagy-related genes,Atg)。

这些基因编码的蛋白质可以协助细胞内的膜结构形成自噬体,并参与自噬体与溶酶体的融合和消化过程。

自噬相关蛋白

自噬相关蛋白

自噬相关蛋白自噬(Autophagy)是一种重要的细胞自我调节过程,能够清除细胞内的受损或过剩的蛋白质、细胞器以及其他细胞成分,以维持细胞内稳态并对细胞的生理和病理状态起调控作用。

自噬依赖于一系列相关蛋白的参与,其中自噬相关蛋白(Autophagy-related proteins)起着关键的调控作用。

本文将对自噬相关蛋白进行详细的介绍。

自噬是一个高度调控的细胞过程,它可以分为三个阶段:自噬体形成、自噬体与溶酶体融合和降解。

自噬相关蛋白在这些阶段中发挥关键作用,调节整个自噬过程的进行。

自噬相关蛋白包括参与自噬体形成的蛋白,如 Beclin-1、ATG14等;参与自噬体与溶酶体融合的蛋白,如SNARE蛋白和LAMP1、LAMP2等;以及参与降解过程的蛋白,如酸性蛋白酶酶源、Cathepsin D等。

首先,我们来介绍一些参与自噬体形成的自噬相关蛋白。

Beclin-1是自噬起始复合体的一个组成部分,它与PI3K类信号通路相互作用,在细胞自噬体形成的过程中发挥重要的调控作用。

ATG14也是一个重要的调节蛋白,与Beclin-1一起形成复合体,进一步增强自噬体形成的效率。

其次,我们来介绍一些参与自噬体与溶酶体融合的自噬相关蛋白。

SNARE蛋白家族在细胞膜融合过程中发挥着重要的作用,在自噬体与溶酶体融合过程中也起到了关键的调节作用。

LAMP1和LAMP2是溶酶体膜蛋白,在自噬体与溶酶体融合的过程中充当着重要的桥梁。

最后,让我们介绍一些参与降解过程的自噬相关蛋白。

酸性蛋白酶酶源是自噬体融合后进入溶酶体的蛋白酶,它对自噬体内被降解的蛋白质进行降解。

Cathepsin D也是一种酸性蛋白酶,在自噬体与溶酶体融合的过程中发挥调控作用。

除了上述介绍的自噬相关蛋白,还有一些其他的自噬相关蛋白,比如ATG5、ATG7、ATG12和LC3等等,它们也在自噬过程中发挥着重要的作用。

自噬调节的失衡与多种疾病的发生发展密切相关。

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酸性蛋白酶与碱性蛋白酶生产工艺的不同之处?酸性蛋白酶是一种在酸性环境下(pH 2.5-4.0)催化蛋白酶水解的酶制剂,适用于酸性介质中水解动植物蛋白质。

可用于毛皮软化,酒精发酵,啤酒、果酒澄清,动植物蛋白质水解营养液,羊毛染色,废胶片回收,饲料添加剂等等。

本品在酸性条件下有利于皮纤维松散,且软化液可连续使用,是当前理想的毛皮软化酶制剂;在酒精发酵中,添加酸性蛋白酶,能有效水解原料中的蛋白质,破坏原料颗粒粒间细胞壁的结构,有利于糖化酶的作用,使原料中可利用碳源增加,从而可提高原料出酒率;另一方面,蛋白质的水解提高了醪液中α-氨基态氮的含量,促进酵母菌的生长与繁殖,提高发酵速度,从而缩短发酵周期和提高发酵设备的生产能力。

碱性蛋白酶碱性蛋白酶是在碱性条件下水解蛋白质肽键的酶类,是一类非常重要的工业用酶,最早发现于猪胰脏。

碱性蛋白酶广泛存在于动、植物及微生物中。

微生物蛋白酶均为胞外酶,不仅具有动植物蛋白酶所具有的全部特性,还有下游技术处理相对简单、价格低廉、来源广、菌体易于培养、产量高、高产菌株选育简单、快速、易于实现工业化生产等诸多优点。

1945年瑞士M等在地衣芽孢杆菌中发现了微生物碱性蛋白酶。

碱性蛋白酶是由细菌原生质体诱变选育出的地衣芽孢杆菌 2709,经深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶,其主要酶成分为地衣芽孢杆菌蛋白酶,是一种丝氨酸型的内切蛋白酶,它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸,具有较强的分解蛋白质的能力,广泛应用于食品、医疗、酿造、洗涤、丝绸、制革等行业。

1、碱性蛋白酶是一种无毒、无副作用的蛋白质,属于丝氨酸型内切蛋白酶,应用在食品行业可水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸,形成具有独特风味的蛋白质水解液。

2、碱性蛋白酶成功应用于洗涤剂用酶工业,可添加在普通洗衣粉、浓缩洗衣粉和液体洗涤剂当中,既可用于家庭洗衣,也可用于工业洗衣,可以有效的去除血渍、蛋类、乳制品、或肉汁、菜汁等蛋白类的污渍,另外也可作为医用试剂酶清洗生化仪器等。

3、在生物技术领域,碱性蛋白酶可作为工具酶用于核酸纯化过程中的蛋白质(包括核酸酶类)去除,而对DNA无降解作用,避免对DNA 完整性的破坏。

酸性蛋白酶如何灭活第一种方法几乎所有酶都适用,就是加热。

第二种,既然是酸性酶,加入强碱应该也是可以的。

酸性蛋白酶产生菌的筛选方法?酸性蛋白酶是一种能在酸性环境下水解蛋白质的酶类,其最适作用pH值为2.5-5.0。

由于酸性蛋白酶具有较好的耐酸性,因此被广泛地应用于食品、医药、轻工、皮革工艺以及饲料加工工业中。

目前用于工业化生产的酸性蛋白酶大多为霉菌酸性蛋白酶,此类酶的最适作用pH值为3.0左右,当pH值升高时,酸性蛋白酶的酶活会明显降低,且此类酶不耐热,当温度达到50℃以上时很不稳定,从而限制了酸性蛋白酶的应用范围。

因此,本研究以开发耐温偏酸性蛋白酶为目标,进行了以下几方面的研究:(1)偏酸性蛋白酶产生菌的分离筛选。

(2)偏酸性蛋白酶粗酶酶学性质的研究。

(3)偏酸性蛋白酶固体发酵条件的优化。

(4)偏酸性蛋白酶产生菌P-1007的初步鉴定。

(5)偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的应用。

本论文主要研究结果和结论如下: (1)用常规土壤分离方法,从土壤样品中筛选到一株产偏酸性蛋白酶的菌株,命名为P-1007。

(2)通过单因素发酵条件实验和正交实验的方法得到最佳固体发酵条件为:麦麸15g,黄豆粉8%,葡萄糖3%,NaH2PO41%,CuSO40.2%,水35ml,最佳起始pH7.0,最适发酵温度为40℃。

在此条件下所产酶活可达3700u/g,比原始菌株发酵酶活提高了将近2倍,且产酶稳定性较好。

(3)菌株P-1007所产的偏酸性蛋白酶的最适作用pH值为5.5,最适作用温度为50℃。

酶的pH稳定性和耐温性较好,50℃、pH5.5条件下保温8h后剩余酶活可达83%以上,pH5.5、50℃条件下保温2h后剩余酶活仍在70%以上。

Mn2+、Cu2+对偏酸性蛋白酶有明显的激活作用,其它金属离子则对该酶有不同程度的抑制作用。

与目前所得到的酸性蛋白酶相比较,偏酸性蛋白酶具有较高的作用pH值和较好的耐温性。

(3)从菌株P-1007菌落形态、显微观察以及5.8SrDNA-ITS区序列分析可以看出菌株P-1007可能属于烟曲霉。

(4)从酶学性质上可以看出,菌株P-1007所产的偏酸性蛋白酶的作用条件满足于啤酒澄清工艺的要求,因此本实验进行了偏酸性蛋白酶在啤酒澄清中的应用研究以及该酶与酿造复合酶和啤酒用中性蛋白酶作用效果的比较。

研究结果表明:经偏酸性蛋白酶作用后,麦汁和发酵液中酪氨酸含量、透光率、总氮量、可凝固性氮含量都有了明显的提高。

麦汁中a-氨基氮含量也增加了,说明偏酸性蛋白酶将凝固性蛋白质水解成了分子量较小的a-氨基氮,为啤酒酵母的生长繁殖提供了氮源。

同时发酵液中的a-氨基氮含量却降低了,分析原因为发酵阶段中酵母利用a-氨基氮的速度比偏酸性蛋白酶降解蛋白质的速度快。

麦汁和发酵液的pH值都无太大变化,因此不会影响啤酒酵母的生长和繁殖。

在与酿造复合酶和啤酒用中性蛋白酶中性蛋白酶作用效果的比较中发现,三种酶的作用效果大致相同,但从最适作用条件来看,偏酸性蛋白酶比另两种蛋白酶更适合于啤酒澄清工艺。

以上研究结果表明,本课题筛选到的菌株P-1007所产偏酸性蛋白酶的作用条件特别适合于啤酒澄清工艺,因此在啤酒工业中有较好的应用前景。

酸性蛋白酶及其在畜牧业中的应用酸性蛋白酶能在酸性环境中水解蛋白质,广泛用于制革工业、医药业、酿造业和饲料工业。

酸性蛋白酶作为一种新型的饲料添加剂,可以明显促进幼龄动物的生长发育,降低断奶带来的应激效应,饲用效果非常显著,是一类应用前景非常广阔的酶制剂。

本文对酸性蛋白酶的酶学特性及其在畜牧业中的应用研究进展进行了综述。

酸性蛋白酶及其在畜牧业中的应用酸性蛋白酶包括胃蛋白酶、凝乳酶和一些微生物蛋白酶,适宜在酸性条件下水解蛋白质。

酸性蛋白酶用作动物饲料添加剂,可提高动物&特别是幼龄动物)对饲料中蛋白成分的消化吸收率,促进其生长。

此外,它还用于制革工业中皮革的脱毛和软化,食品工业中蛋白质的水解生产高档食品,医药工业中消化剂和消炎剂的制造等。

近年来,随着集约化畜禽生产的发展,加剧了环境污染。

其中,氮是污染环境的主要物质,因而提高饲料中蛋白类营养物质的利用效率,降低其排放就显得尤为重要。

此外,由于我国蛋白质饲料资源严重缺乏,需要寻求非常规蛋白资源,而动物对非常规蛋白饲料的利用效率很低。

研究表明在饲料中添加酸性蛋白酶+可提高该类蛋白质的可消化性,因此酸性蛋白酶的开发利用就显得非常重要。

!酸性蛋白酶的酶学性质酸性蛋白酶是一类具有复杂理化性质的化合物,不同微生物菌种分泌的酸性蛋白酶虽具有一些共同的性质,但在底物特异性、抑制剂、激活剂等方面均存在着一定的差异!"!蛋白酶中的羧基在其催化反应中起关键作用有关。

黑曲霉所产的&型蛋白酶,受二硫代双!$硝基苯甲酸’的抑制,而.型酶完全不被,抑制,只被(.-及重氮试剂部分抑制,需要指出的是,上述试剂对两种酶的抑制作用都需要有的参加。

对啤酒酵母所产的胞外酸性蛋白酶的研究表明,其可被甲苯磺酰氟’和对氟汞苯甲酸’+部分抑制。

另外,从日本清酒酒曲中分离出的酸性蛋白酶,其性质类似于“胃蛋白酶”型酸性蛋白酶,和胃蛋白酶抑制剂所抑制,但对对$溴苯和联乙酰试剂不敏感。

! 金属离子对酸性蛋白酶的影响。

1酸性蛋白酶的作用机理及饲用效果!作用机理由于饲用酶进行催化反应在畜禽消化道内进行,故其作用条件必须与动物消化道生理条件相适应,而通常猪和家禽消化道内温度为G"K左右,胃IJ<@6W#@6,小肠IJ6WM,与酸性蛋白酶作用的一些基本参数相吻合。

畜禽尤其是幼龄动物的消化道内蛋白酶分泌体系发育不健全,而在生长的中后期,自身虽有内源酶,但尚显不足,当采用高蛋白饲料饲养时,因其对饲料蛋白质消化能力较差而易引起腹泻等疾病。

尤其是断奶仔猪,消化道发育不成熟,消化酶分泌系统不健全,特别是胃酸分泌不足,免疫功能低下,加上断奶时的生理、营养和环境应激反应,对饲料的营养成分不易消化和吸收,对病原微生物的抵抗力较弱,易造成正常肠道菌群平衡紊乱,经常出现较高的腹泻率,导致早期生长受阻。

若在饲料中添加酸性蛋白酶,则能补充内源酶的不足,使高分子的蛋白质降解为低分子的肽、胨及各种氨基酸,而易被畜禽消化吸收,从而降低饲料对断奶仔猪消化道的刺激,降低应激反应,减少营养障碍,提高饲料利用率,促进生长。

2饲料效果营养研究促进短肽、氨基酸的吸收。

由此可见酸性蛋白酶的作用不仅在于降低幼龄动物的应激反应,更在于其分解蛋白质为动物提供了大量的小肽,以促进动物的吸收利用,从而促进动物的生长。

饲用效果美国用头小猪进行的(%次试验表明,在蛋白质来源以大豆为主的日粮中,给()周龄小猪添加酸性蛋白酶,增重提高,饲料利用率提高。

许怡等在仔猪饲料中添加"*的酸性蛋白酶,结果增重提高,饲料转化率提高.。

费笛波等,报道:酵母的酸性蛋白酶解液中氨基酸总量、必需氨基酸总量分别比对照提高;鱼粉的酸性蛋白酶解液中氨基酸总量、必需氨基酸总量分别比对照增加.。

此研究结果表明,酸性蛋白酶在非常规饲料中的应用效果要优于常规蛋白饲料。

费笛波等,(##0-研究表明,在最佳作用条件下1酸性蛋白酶对酵母和鱼粉具有明显降解作用1氨基酸总量分别比对照增加饲用酸性蛋白酶制剂以的量添加于乳猪及仔猪饲料中,日增重和饲料转化率分别比对照提高。

4.结语试验证明在饲料中添加酸性蛋白酶能促进动物的生长,特别是对幼龄动物的作用非常明显。

但目前在酸性蛋白酶的使用上还存在很多问题:首先,现在作为饲料添加剂使用的酸性蛋白酶一般是添加于粉料中而不是添加于颗粒料中,这主要是由于其耐热性能不好而影响了其应用范围,应用包埋技术,饲料加工等技术,只在一定程度上解决了这一问题,但仍不能解决酶本身耐热性差的问题。

其次,现在使用的酸性蛋白酶生产菌株产酶水平都较低。

近年来人们开始利用分子生物学技术来构建高水平表达耐高温酸性蛋白酶的基因工程菌,为上述问题的解决提供了光明前景。

另外,对不同生长阶段动物的添加量和添加形式还不确定,存在很大的盲目性,还需要营养学专家的进一步研究。

尽管酸性蛋白酶的应用在目前还存在着各种问题,但相信随着科学技术的不断发展,这些问题都会得到妥善解决。

无论如何,酸性蛋白酶的本质特性和应用效果决定了其发展和应用的前景十分广阔。

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