实验八 甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定

实验八甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定（费林法）

一、原理

蔗糖的测定常以还原糖的测定为基础，样品经前处理后，加入稀盐酸，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以斐林试剂法测定试样水解后的总还原糖量（即食品中的总糖）及水解前的还原糖量（食品原有的还原糖），两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖量。

二、操作步骤：

1、样品处理

准确吸取10.00mL甘蔗汁移入100m L容量瓶中。缓慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置后过滤，弃去初滤液，收集滤液，即样品处理液。

2、标定碱性酒石酸铜溶液（费林试剂）：

（1）准确吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL乙液，置于150mL锥形瓶中。

（2）加水10mL，加入玻璃珠数粒。

（3）从滴定管滴加约9mL葡萄糖（转化糖）标准溶液，2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，记录消耗葡萄糖标准溶的总体积。

（4）同时平行操作三份，取其平均值。

3、水解前样品中还原糖含量的测定：

取样品处理液，按还原糖法测定水解前的还原糖含量。（同实验七）

4、样品总糖量的测定：

（1）吸取10.00mL样品处理液置于100mL容量瓶中。

（2）加入6mol/L 盐酸5mL，在68～70℃水浴加热15min。

（3）迅速冷却后加2滴指示剂，用20% NaOH中和（甲基红指示剂：溶液颜色由红变黄；酚酞指示剂：由无色变浅粉红色），加水至刻度，混匀，按还原糖法测定水解后的总还原糖含量。（同实验七）

三、实验记录及处理：

碱性酒石酸铜溶液的标定

10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(转化糖)的质量mg。

葡萄糖标准溶液蔗糖标准溶液（转化糖）

标准溶液浓度

ρ,mg／ml

标定所耗标液的

体积V，ml

1 2 3 平均 1 2 3 平均

10mL碱性酒石酸

铜相当于葡萄糖

（转化糖）的质

量F，mg

公式:F1= ρ1× V1公式:F2 = ρ2× V2/0.95

食品中还原糖含量测定

水解前（试样原有还原糖）水解后(总糖)

试样量，ml

稀释过程

试样定容总体

积V，ml

样液预测总消

耗量V0，ml

样液正式滴定

总消耗量V1 ，ml

1 2 3 平均值 1 2 3 平均值

测得还原糖含

量，%

公式：

样品中还原糖

含量R1，%

总糖含量R2,%

（以转化糖计）

蔗糖的含量，%

公式：蔗糖% = (R2-R1)×0.95

100

1000

V

V

m

F

%

计）

还原糖（以葡萄糖

1

⨯

⨯

⨯

=

或转化糖

四、说明及注意事项

1.严格控水解条件以确保结果的准确性及重现性。

2.其余注意事项同还原糖的测定。

五、实验准备

1、仪器：

2、试剂：

3、试剂配制附录：

（1)碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL。

(2)碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。

(3)转化糖标准溶液：准确称取经105℃烘干至恒重的纯蔗糖1.0000g，用100ml水溶解，置于三角瓶中，加6mol/L盐酸5mL，摇匀于68~70℃水浴中加热15min，取出，冷却至室温，加水定容至1000ml，摇匀。此溶液每1ml相当于1mg蔗糖，相当于1/0.95 mg转化糖。

(4）5mol/L NaOH：称取20g NaOH，溶于水中，稀释至100 mI。

（5）6mol/L HCl（1+1）：量取110ml浓HCl加入到100ml蒸馏水中，混匀。