Carnoy固定液
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析
人的外周血淋巴细胞培养及染色体制片方法、染色体组型分析一、实验背景1、Carnoy固定液：固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
单纯的固定液一般难以达到这些要求，因此在实验中使用两种混合的固定液。
由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称其为卡诺氏固定液。
Carnoy固定液（甲醇∶冰乙酸=3∶1）每次使用前需临时配制，长时间放置影响固定效果，固定时间15min至24h，冰箱、室温均可。
必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例，冰乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散失。
2、低渗液（hypotonic solution）低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液，渗透压低于组织液，与外周血混在一起时，水分迅速进入细胞，使其膨胀，甚至破裂，获得分散良好的染色体分裂象。
常见的低渗液：水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾（0.65mol/L）、氯化钾（0.075mol/L）等。
低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。
低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展，同时可使黏附于染色体的核仁物质散开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态。
实验室中一般选用0.075mol/L KCl为低渗液，其优点有：①染色体轮廓清楚，可染色性强，染色时间短。
②用于显带染色时能充分显示带型特点。
低渗处理为37℃，25～30min，以预实验条件为准。
2、肝素N-硫酸和艾杜糖醛酸含量较多的一种糖胺聚糖，由D-β-葡糖醛酸(或L-α-艾杜糖醛酸)和N-乙酰氨基葡糖形成重复二糖单位组成的多糖。
肝素是一种抗凝剂，是由二种多糖交替连接而成的多聚体，在体内外都有抗凝血作用。
2、PHA植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原，主要用于激活免疫细胞—淋巴细胞。
是一种干扰素诱导剂，不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素；还可以刺激机体产生非特异性抗体。
卡诺氏固定液
固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
单纯的固定液一般难以达到这些要求，因此在实验中使用两种混和的固定液。
由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。
Carnoy固定液（甲醇:冰乙酸=3:l）每次使用前需临时配制，长时间放置影响固定效果，固定时间15分钟至24小时，冰箱、室温均可。
必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例，冰乙酸比例增加，利于细胞膨胀、染色体铺展，但易导致细胞破裂、染色体散失。
水稻根尖染色体标本制备作者: biozxp 发布日期: 2006-4-04 查看数: 22 出自: 1.取材：选取水稻种子，充分浸种后，将它们摆在铺有滤纸的培养皿内，在约28℃条件下发芽培养，当胚根长至1～1.5cm时，剪下备用。
2.预处理压片法：采用0.1％秋水仙素处理2h左右去壁低渗法可采用以下四种方法处理处理方法0.002mol/L8-羟基喹啉α－溴萘饱和溶液低温（－4℃）卡诺氏Ⅰ固定液处理时间（h）1 24 24 24注：卡诺氏Ⅰ固定液乙醇：冰醋酸（3：1）3.固定卡诺氏Ⅰ固定液，固定时间以不超过24h为宜。
经过固定的材料如不及时使用，可经90％酒精换到70％酒精各半小时，再换入一次70％酒精，在0～4℃冰箱内备用。
去壁低渗法a.将3固定的材料用DDW洗净后，0.075mol/LKCL溶液室温条件下处理约30min。
b.酶解去壁吸取低渗液，加入1％混合酶液（1％果胶酶与1％纤维素酶的混合液，均为Sigma公司），28℃左右，酶解4.5～5h.酶解过程中，将材料瓶轻轻摇动1～3次，使材料与酶液充分接触。
c.后低渗吸取酶液,用DDW冲洗材料2～3次，然后在DDW中停留30min。
d.重固定吸取低渗液后,加入新配制的卡诺氏Ⅰ固定液，固定时间约20min。
e.标本制备吸取固定液后，将根尖捣碎,再滴入新鲜固定液3～5滴，制成细胞悬液，充分搅匀。
Carnoy固定液使用说明
Carnoy固定液Carnoy Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG04553Carnoy固定液100ml，500ml瓶Carnoy固定液用途：Carnoy氏液是由乙醇，氯仿和乙酸按6:3:1的比例混合而来的混合型固定液。
该液渗透快速，固定只需1-2小时。
固定后可以直接用95%乙醇脱水，固定核酸和糖原的效果最好，常用于组织化学。
保存条件：RT，避光保存，有效期一年。
Carnoy固定液固定时的注意事项：(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。
(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。
(3)固定的时间要合适：与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。
经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。
经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。
Carnoy固定液固定的条件：(1)迅速渗入组织，杀死原生质。
在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。
(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。
(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。
(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。
(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。
(6)增加媒染作用和染色能力。
(7)使组织变硬，具有一定的硬度。
(8)固定以后能起到保存的作用。
(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。
华越洋Carnoy固定液其他相关固定液：通用组织细胞固定液Champy固定液Helly固定液AAF固定液Bouin固定液戊二醛固定液Zetterqvist固定液Carnoy固定液Brasil固定液Dafano固定液Gendre固定液Methacarn固定液A-F固定液。
Carnoy固定液新用途的探讨
作切 片 ，进行 常规染色 、酶组 织化 学染 色 ，光镜 下观 察 ，并对 第 １、３周 的标 本 进 行 透射 电镜观 察 。 结果 Ｃａｍｏｙ液
和 ２０％和 ３５％三 氯醋酸均 可引起 颊囊 上皮 的坏 死 、脱 落 ，形 成溃 疡 ，深 达基 层 。术 后 ３周 ，脱 落坏 死 组织 区被 临近
上皮 和 （或 ）瘢 痕组织修 复 。结论 Ｃａｍｏｙ固定 液 具 有较 强 的 固定 作 用 和穿 透力 ，其 能导 致 正 常 生长 的囊 壁 衬 里
上皮 的坏死 脱落 ，组织 坏死脱 落区 可被 临近上 皮和 （或 ）瘢痕 组 织修 复 ，可试 用 于 临床 治疗 反 复 发 作 的尖 锐湿 疣 、
收稿 日期 ：２００７—０３—２７ 作 者 单 位 ：河 南 科 技 大 学 医 学 院 。河 南 洛 阳 ４７１００３ 作 者 简 介 ：付 银 锋 （１９６４一），男 ，河 南 洛 阳人 ，实 验 师 ，从 事 病 理 学 实 验
教 学 和 技 术 工作 。
酸 均可 引起 颊囊 上 皮 的 坏死 、脱 落 ，形 成 溃 疡 ，其 穿 透深 度 约 ０．３ ｍｍ，超 过黏 膜 下 层 深 达 基 层 。术 后 ３ 周 ，处理 面颊 囊 上 皮 重 新 形 成 ，胶 原 纤 维 明显 增 生 ， 成 纤维 细胞 增 多 。 术后 ６周 ，小 鼠颊 囊 组 织 恢 复 正 常 。 ２．２ 酶 组 织化学 反应 术 后 ３周 ，酶 组 织化 学 反应 也 在此 期 内重 新 出现 。 ２．３ 透 射 电镜观 察 术 后 １周 ，处 理 面 上皮 为 无结 构 的 电子密 度增 高 区 ，基底 膜 连 续性 中 断 ，桥 粒 和半 桥粒消 失 。术后 ３周 ，基底 膜 完 整 ，桥 粒 和半 桥 粒恢 复 ，细胞 器 呈异 常改 变 ，线 粒体 肿胀 ，嵴 变短或 消失 。 ３ 讨论
常用细胞固定剂及其优缺点比较
常常使用细胞固定剂及其优缺点比较之袁州冬雪创作1、95%酒精：最常常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要颠末水洗.此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色.固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间.颠末95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，布局清晰，颜色鲜艳.如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象.2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应.长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂.所以现在已经逐渐被95%酒精所代替.3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，布局清晰，染色鲜艳.常作为穿刺细胞涂片的固定液.对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液.缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害.甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关.以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩.近些年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关. 4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用.不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白.渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用.5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定.6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体.可以使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差.很少用于惯例细胞学的固定.广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液.丙酮具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害.7、Carnoy 固定液：配方：无水乙醇60ml，氯仿30ml，冰醋酸10mlCarnoy液能固定胞浆和胞核，尤其适宜于染色体等.常常使用于糖原及尼氏体的固定，由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩，对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好.缺点是每次固定后固定液内有大量的红细胞碎片和细胞脱落，必须及时过滤，否则容易造成污染.其次，氯仿具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害.8、10%中性缓冲甲醛液：配方1：40%甲醛10ml，0.01mol/L pH7.4的PBS90ml.配方2：40%甲醛120ml，蒸馏水880ml，磷酸二氢钠（NaH2PO4;H2O）4g，磷酸氢二钠（Na2HPO4）13g.10%中性缓冲甲醛液对大多数抗原保管较好，是免疫组织化学最常常使用的固定液，组织穿透性好，组织收缩较小.但此液体不适合固定湿固定的涂片，可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液.甲醛也具有挥发性和毒性.大量吸入会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛，也可发生支气管哮喘.常常吸入少量甲醛，能引起慢性中毒，出现粘膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等.全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等.。
carnoy固定液的作用原理
carnoy固定液的作用原理Carnoy固定液是一种常用于生物学和组织学实验中的固定剂。
它的作用原理是通过改变细胞和组织的结构，使其保持原始形态和结构，防止其在实验过程中的变形和腐败。
下面将详细介绍Carnoy固定液的作用原理及其在实验中的应用。
Carnoy固定液由乙酸、甲酸和乙醇组成，其具有较强的固定作用。
乙酸和甲酸能够使细胞和组织中的蛋白质发生交联反应，形成稳定的蛋白质网状结构，从而固定细胞和组织的形态。
乙醇则能够使细胞和组织中的脂质发生沉淀，进一步增强固定效果。
在实验中，Carnoy固定液通常用于固定细胞和组织样品，以便进行后续的染色、显微观察和分析。
固定液的选择对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
Carnoy固定液具有以下几个优点，使其成为常用的固定剂之一：1. 优异的固定效果：Carnoy固定液能够迅速穿透细胞和组织，将其内部的结构进行有效地固定，保持其原始形态和结构。
相比其他固定液，Carnoy固定液具有更高的固定效率和更好的保留细胞和组织结构的能力。
2. 快速固定速度：Carnoy固定液具有较快的固定速度，通常只需数分钟至十几分钟即可完成固定。
这对于需要迅速进行实验的研究人员来说非常重要，能够节省宝贵的时间。
3. 适用于多种实验：Carnoy固定液适用于多种细胞和组织的固定，包括动物组织、植物组织和微生物等。
无论是常规染色、免疫组化、原位杂交还是电镜等实验方法，Carnoy固定液都能够提供良好的固定效果。
4. 保存时间长：Carnoy固定液固定的细胞和组织样品可以保存较长时间，不易发生变形和腐败。
这对于需要进行长期保存或远程运输的样品非常重要，能够保证实验结果的可靠性。
尽管Carnoy固定液具有许多优点，但在实际应用中也存在一些注意事项。
首先，Carnoy固定液具有较强的毒性，使用时需要注意安全。
其次，不同类型的细胞和组织对Carnoy固定液的适应性不同，需要根据实验的需要选择合适的固定液。
一些固定剂的配方及性能介绍
一些固定剂的配方及性能介绍固定，就是用某种方法以最快的速度将细胞杀死并保持组织及细胞原有的形态结构及其组成。
固定在组织制片中极为重要，因为机体死后血液循环停止，细胞逐渐死亡，如不立即处理，则细胞内的酶（水解酶）会使蛋白质分解为氨基酸渗出细胞，使细胞溶解破坏，组织变形，在无冰藏的条件下，更可因其病原微生物的迅速繁殖而腐败，组织结构破坏，不利于形态学的诊断。
组织固定的目的为1、迅速防止组织、细胞死后变化，防止自溶与腐败，以保持和细胞与正常生活时的形态相似；2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶解物质，以保持它原有的结构与生活时相仿；3、使组织中的各种物质沉淀和凝固起来而产生不同的折光率，造成光学上的差异，以便染色后易于鉴别和观察；4、固定剂兼有硬化作用，使组织硬化，增加组织硬度，便于制片；5、防止细胞过度收缩或膨胀而失去其原有的形态结构；经过固定的组织，能对染料产生不同的亲和力而着色清晰，便于辨认。
为了能够达到固定的目的，固定剂必须具备以下的性质和条件：1、迅速渗入组织而固定原生质，使短期解剖的组织细胞形态不至于有较大变化；2、固定液有相当的渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定；3、使组织细胞中不至于因固定引起人为的改变；4、在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不至于因以后的处理，而使固定后的原生质变形；5、尽可能避免使组织膨胀或收缩（不致改变原生质原来的体积）；6、能使细胞内的成分（蛋白质）凝固或沉淀下来；7、增加细胞内含物的折光度，易于鉴别，增加媒染作用和染色作用；8、使细胞变硬，适于切片，但又不使材料太坚硬或松脆；9、使组织充分固定，便于保存。
[1][2]下面我们介绍中华医学会病理分会推荐的几种常用固定剂的性能[3]：1、4%中性甲醛（10%中性福尔马林）固定液配方：甲醛（40%）100ml，无水磷酸氢二钠6.5g，磷酸二氢钠4.0g，蒸馏水900ml。
卡诺氏液的作用
卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
配方:无水酒精3份:冰醋酸1份或无水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。
龙胆紫，其1～2％溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。
龙胆紫为一种碱性阳离子染料，因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。
它能抑制革兰氏阳性菌，特别是葡萄球菌、白喉杆菌，对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。
它杀菌力强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作用。
醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。
在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋高中生物试验中试剂和药品的作用如下：1、斐林试剂作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
2、班氏尿糖定性试剂使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。
3、双缩脲试剂作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
4、苏丹Ⅲ作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。
能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
卡诺氏液
北京雷根生物技术有限公司
卡诺氏液
简介：
卡诺氏液、Carn oy 固定液(Carnoy's Fluid)又称卡诺氏固定液，主要由乙醇、乙酸等混合而成。
适用于一般动植物组织和细胞的固定，常用于动植物压片及石蜡切片等，有极快的渗透力，固定最多不超24h 。
其特点是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
推荐用于RNA 和DNA 染色的组织固定，亦可用于糖原染色的组织固定，能够使糖原呈细微颗粒状。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 一般小块组织固定30～40min 。
2、 稍大块组织2～4h 。
3、 如果组织块大，可适当延长固定时间，但不宜超过24h 。
注意事项：
1、 Carnoy 固定液对人体有一定的损害，请小心操作。
不宜用于固定脂类染色的组织。
2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同。
3、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 DF0019 DF0019 Storage Carnoy Fluid 100ml 500ml RT 避光
使用说明书 1份。
常用细胞固定剂及其优缺点比较
经常使用细胞固定剂及其优缺点比较之吉白夕凡创作1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要经过水洗。
此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。
固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。
经过95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，结构清晰，颜色鲜艳。
如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象。
2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。
长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。
所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。
3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，结构清晰，染色鲜艳。
常作为穿刺细胞涂片的固定液。
对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。
缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。
甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关。
以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。
近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。
4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。
不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。
渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。
5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。
6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体。
可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。
很少用于惯例细胞学的固定。
广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。
若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。
若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织，通常固定8~24h，可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative）配方Ⅰ：纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ：纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ：甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6（6~10）ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h，亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml（3）强液配方：10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短，一般为数小时，最长可固定12~24h，但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
卡诺氏液的作用
卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
配方:无水酒精3份:冰醋酸1份或无水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。
龙胆紫，其1～2％溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。
龙胆紫为一种碱性阳离子染料，因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。
它能抑制革兰氏阳性菌，特别是葡萄球菌、白喉杆菌，对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。
它杀菌力强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作用。
醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。
在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。
改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋高中生物试验中试剂和药品的作用如下：1、斐林试剂作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。
还原性糖与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。
如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。
2、班氏尿糖定性试剂使用方法同斐林试剂，所不同的是班氏试剂可长期使用。
3、双缩脲试剂作用：鉴定蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可产生紫色反应。
也可用于鉴定多肽。
4、苏丹Ⅲ作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液作用：用于洋葱根尖的解离，即使组织中的细胞相互分离开来。
能杀死细胞固定。
6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
大体标本常用的固定液
大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分，它可以帮助保存和稳定组织和细胞，使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。
一般来说，固定液包括多种化学成分，不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。
以下是最常用的固定液：
1. 10% 福尔马林（Formaldehyde）
福尔马林是最常用的固定液之一，它可以作为一种信标分子，标记细胞蛋白。
福尔马林具有良好的渗透性，能够迅速渗透到组织中，提供良好的固定效果。
2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液（SDS-EDTA Buffer）
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。
该固定液是一种离子池化学固定液，能够特异性地固定蛋白质，适用于研究细胞骨架和线粒体。
3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液，不过使用比较少。
该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸，可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。
4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液，由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。
该固定液可以用于稳定核质和细胞膜，适用于肝脏和小肠等组织。
5. 4%多聚甲醛（Paraformaldehyde）
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液，可以优先固定蛋白质和核酸。
多聚甲醛很便宜，但其固定效果不及福尔马林。
需要注意的是，不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。
因此，选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素，才能选择最合适的固定液。
同时，固定液使用时需要注意安全，防止吸入和接触固定液。
常用固定液的配制
钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。
12.苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3种：配方Ⅰ：苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin）甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml丙液：甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。
配方Ⅲ：爱氏苏木精（Ehrlich’s haematoxylin）苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾（钾矾）3~5g。
配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化1~2月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。
13.席夫试剂（Schiff’s regent）将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水，搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右，加入1g偏亚硫酸钾或钠（Na2S2O5或K2S2O5），振荡使其溶解，密封瓶口，置于黑暗低温处过夜。
次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。
若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.5~2g），振荡1min，置于4℃冰箱中过夜，过滤使用。
此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能产生多色反应。
常用的组织固定液
常用的组织固定液1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚甲醛：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
甲醛(40％) 100 ml95％乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。
固定液的种类和功能
固定液的种类和功能1．单纯固定液(1)4％中性福尔马林固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性福尔马林是以pH7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％福尔马林固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
福尔马林(40%)100ml无水磷酸氢二钠6.5g磷酸二氢钠4.0g蒸馏水900ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性福尔马林，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚福尔马林：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一福尔马林(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
福尔马林(40％)100ml95％乙醇900ml(2)B5(醋酸钠一升汞一福尔马林)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠1.25g升汞6.0g蒸馏水90ml使用前加入福尔马林10ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60ml氯仿30ml冰醋酸10ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞5.0g重铬酸钾2.5g硫酸钠1.0g蒸馏水(加至)100ml。
常用的组织固定液
常用的组织固定液1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚甲醛：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
甲醛(40％) 100 ml95％乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。
Carnoy固定液
Leagene 。
com 北京雷根生物技术有限公司
Carnoy 固定液
简介：
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长Carnoy 固定液(Carnoy's Fluid)又称卡诺氏固定液，主要由乙醇、乙酸等混合而成。
适用于一般动植物组织和细胞的固定，常用于动植物压片及石蜡切片等，有极快的渗透力。
推荐用于RNA 和DNA 染色的组织固定，亦可用于糖原染色的组织固定，能够使糖原呈细微颗粒状。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 一般小块组织固定30～40min 。
稍大块组织2～4h 。
注意事项：
1、 Carnoy 固定液对人体有一定的损害，请小心操作。
2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同。
3、 固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
4、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
编号 名称 DF0019 DF0019 Storage Carnoy Fluid 100ml 500ml RT 避光
使用说明书 1份。
常用细胞固定剂及其优缺点比较
常用细胞固定剂及其优缺点比较1、95%酒精：最常用的细胞学固定液,能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白,但核蛋沉淀后,能溶于水,因此,经95%酒精固定的涂片,染色前没有必要经过水洗;此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色;固定时间根据标本的不同,时间也不尽相同,一般标本固定时间为15-30分钟,痰标本需要更长一些时间;经过95%酒精固定的标本,细胞核保存较好,结构清晰,颜色鲜艳;如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳,可以保护细胞免受空气干燥后的人工假象;2、乙醚酒精液1：1：其效果与95%酒精相似,但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味,容易挥发,长期低浓度吸入,有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应;长期皮肤接触,可发生皮肤干燥、皲裂;所以现在已经逐渐被95%酒精所代替;3、甲醇：固定时间快,细胞收缩小,细胞核保存较好,结构清晰,染色鲜艳;常作为穿刺细胞涂片的固定液;对抗原保存较好,可作为细胞涂片免疫组化的固定液;缺点是具有挥发性和毒性,大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害;甲醇的毒性与其代谢产物甲醛和甲酸的蓄积有关;以前认为毒性作用主要为甲醛所致,甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不能合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩;近年研究表明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害,主要与甲酸含量相关;4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用;不能沉淀白蛋白,但能沉淀核蛋白;渗透性强,固定快,能使红细胞膨胀而破碎,常与其它液体配合使用;5、无水酒精：对糖原保存较好,容易使细胞收缩,其性能与95%酒精相似,很少单独使用,一般只用于糖原的固定;6、丙酮：为易挥发的无色液体,有刺激性气体;可使蛋白质沉淀,渗透性强,细胞收缩严重,对核的固定差;很少用于常规细胞学的固定;广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定,也有人用于抗原的保存,作为细胞涂片免疫组化的固定液;丙酮具有挥发性和毒性,大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害;7、Carnoy固定液：配方：无水乙醇60ml,氯仿30ml,冰醋酸10mlCarnoy液能固定胞浆和胞核,尤其适宜于染色体等;常用于糖原及尼氏体的固定,由于冰醋酸能溶解红细胞并可防止细胞由酒精引起的过渡收缩,对固定有血的标本和显示DNA、RNA效果很好;缺点是每次固定后固定液内有大量的红细胞碎片和细胞脱落,必须及时过滤,否则容易造成污染;其次,氯仿具有挥发性和毒性,大量接触与吸入对肝、肾及中枢神经有一定的伤害;8、10%中性缓冲甲醛液：配方1：40%甲醛10ml,L的PBS90ml;配方2：40%甲醛120ml,蒸馏水880ml,磷酸二氢钠NaH2PO4;H2O4g,磷酸氢二钠Na2HPO413g;10%中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好,是免疫组织化学最常用的固定液,组织穿透性好,组织收缩较小;但此液体不适合固定湿固定的涂片,可作为干固定涂片和细胞蜡块的固定液;甲醛也具有挥发性和毒性;大量吸入会出现呼吸道的严重刺激和水肿、眼刺痛、头痛,也可发生支气管哮喘;经常吸入少量甲醛,能引起慢性中毒,出现粘膜充血、皮肤刺激症、过敏性皮炎、指甲角化和脆弱、甲床指端疼痛等;全身症状有头痛、乏力、胃纳差、心悸、失眠、体重减轻以及植物神经紊乱等;。
常用细胞固定剂及其优缺点比较
经常使用细胞固定剂及其优缺点比较之勘阻及广创作1、95%酒精：最经常使用的细胞学固定液，能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋沉淀后，能溶于水，因此，经95%酒精固定的涂片，染色前没有需要经过水洗。
此固定液适用于苏木素-伊红染色和巴氏染色。
固定时间根据标本的分歧，时间也不尽相同，一般标本固定时间为15-30分钟，痰标本需要更长一些时间。
经过95%酒精固定的标本，细胞核保管较好，结构清晰，颜色鲜艳。
如果在95%酒精液内加入聚乙二醇更佳，可以呵护细胞免受空气干燥后的人工假象。
2、乙醚酒精液（1：1）：其效果与95%酒精相似，但由于乙醚有很强的吸水性和特有的刺激性气味，容易挥发，长期低浓度吸入，有头痛、头晕、疲倦、嗜睡、蛋白尿、红细胞增多等不良反应。
长期皮肤接触，可发生皮肤干燥、皲裂。
所以现在已经逐渐被95%酒精所代替。
3、甲醇：固定时间快，细胞收缩小，细胞核保管较好，结构清晰，染色鲜艳。
常作为穿刺细胞涂片的固定液。
对抗原保管较好，可作为细胞涂片免疫组化的固定液。
缺点是具有挥发性和毒性，大量接触与吸入对中枢神经有一定的伤害。
甲醇的毒性与其代谢产品甲醛和甲酸的蓄积有关。
以前认为毒性作用主要为甲醛所致, 甲醛能抑制视网膜的氧化磷酸化过程,使膜内不克不及合成ATP,细胞发生变性,最后引起视神经萎缩。
近年研究标明,甲醛很快代谢成甲酸,急性中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害，主要与甲酸含量相关。
4、冰醋酸：5%水溶液可作固定用。
不克不及沉淀白蛋白，但能沉淀核蛋白。
渗透性强，固定快，能使红细胞膨胀而破碎，常与其它液体配合使用。
5、无水酒精：对糖原保管较好，容易使细胞收缩，其性能与95%酒精相似，很少单独使用，一般只用于糖原的固定。
6、丙酮：为易挥发的无色液体，有刺激性气体。
可使蛋白质沉淀，渗透性强，细胞收缩严重，对核的固定差。
很少用于惯例细胞学的固定。
广泛用于酶组织化学中的各种酶的固定，也有人用于抗原的保管，作为细胞涂片免疫组化的固定液。
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北京吉美生物技术有限公司
Carnoy固定液
产品简介：
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Jimei Carnoy固定液(Carnoy，s Fluid)又称卡诺氏固定液，主要由乙醇、乙酸等混合而成。
适用于一般动物组织和细胞的固定，常用于动植物压片及石蜡切片等，有极快的渗透力，固定最多不超24h。
其特点是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
推荐用于RNA和DNA染色的组织固定，亦用于糖原染色的组织固定，能够使糖原呈细微颗粒状。
由于该液穿透力强，亦可固定外膜致密不宜渗透的组织。
组织固定后暂时不用，可置于70%乙醇中保存。
操作步骤（仅供参考）
1、一般小块组织固定30~40min。
稍大块组织2~4h。
如果组织块大，可适当延长固
定时间，但不宜超过24h。
注意事项：
1、Carnoy固定液对人体有一定的损害，请小心操作，不宜用于固定脂类染色的组织。
2、组织取材的厚度不同，固定时间也不同。
3、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10：1。
4、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。