高中基因工程_典型例题

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基因工程高考题

生物基因工程高考真题1、【来源】 2020年高考真题江苏卷第33题8分如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoRⅠ酶切为例）：请据图回答问题：(1) 步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶，它通过识别特定的切割特定位点。

(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′−羟基与5′−磷酸间形成；PCR循环中，升温到95∘C是为了获得；Taq DNA聚合酶的作用是催化。

(3) 若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是（从引物①②③④中选择，填编号）。

(4) 对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。

下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是（）A. 5′−AACTATGCG⋯⋯⋯AGCCCTT−3′B. 5′−AATTCCATG⋯⋯⋯CTGAATT−3′C. 5′−GCAATGCGT⋯⋯⋯TCGGGAA−3′D. 5′−TTGATACGC⋯⋯⋯CGAGTAC−3′1 、【答案】 (1) 限制性核酸内切（或限制）;核苷酸序列;(2) ;DNA单链;以DNA为模板的DNA链的延伸;(3) ②④;(4) B;【解析】 (1) 步骤Ⅰ中的EcoRⅠ酶是一种限制性核酸内切酶，简称限制酶；EcoRⅠ酶能够识别并切割双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。

(2) 步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化DNA分子每一条链中特定部位的两个核苷酸之间形成磷酸二酯键；PCR循环中，升温到95∘C是为了断开DNA两条链间的氢键，得到DNA单链；Taq DNA聚合酶是一种热稳定性高的DNA聚合酶，其作用是催化以DNA为模板的DNA链的延伸。

(3) 引物是根据目的基因的一段核苷酸序列合成的，且与模板DNA链根据碱基互补配对合成，引物的3′端和DNA模板链的5′端根据碱基互补配对原则连接，由题目中已知序列5′−AACTAT⋯⋯−，对应的引物为3′−TTGATA⋯⋯−即④选项，由题目中另一段已知序列5′−AGAGGC⋯⋯−，对应的引物为3′−TCTCCG⋯⋯−即②选项。

基因工程试题及答案解析

基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。

答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。

答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。

答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。

在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。

2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。

四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。

答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。

重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。

然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。

(完整版)高中生物基因工程试题

阶段质量检测（一）基因工程（时间:45分钟，满分:100分）一、选择题（每小题3分，共45分）1.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体D.载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接2.（浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。

现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞3.日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。

GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。

依据GFP 的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（）A.作为标记基因，研究基因的表达B.作为标记蛋白，研究细胞的转移C.注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠D.标记噬菌体外壳，示踪DNA路径4•下列有关质粒的叙述，正确的是（）A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNAC.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制D.基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及入噬菌体的衍生物5•下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功D.质粒上抗生素的抗性基因有利于质粒与外源基因连接6•下列有关基因工程和蛋白质工程步骤的叙述不正确的是（）A.将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用显微注射法B.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列C.蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新蛋白质的技术D.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质7.利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是（）A.用适当的酶对载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合B.用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌C.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素8.下列关于图中P、Q、R、S、G的描述，正确的是（）A.P代表的是质粒RNA，S代表的是外源DNAB.Q表示限制酶的作用，R表示RNA聚合酶的作用C.G是RNA与DNA形成的重组质粒D.G是转基因形成的重组质粒DNA9.下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是（）A.目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒DNA中B.检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子10.科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。

2024届高三一轮复习生物：必考大题03——基因工程练习

必考大题03 基因工程1. 科研工作者在盐碱地中找到了一种生长良好且耐盐碱的植物(以下简称植物a)。

研究人员发现，植物a的液泡膜上特有一种Na＋/K＋逆向转运蛋白，这种蛋白是植物a耐盐碱的原因，并在植物a 中找到控制该蛋白合成的Na＋/K＋逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)。

该基因就是研究人员要找的耐盐碱的目的基因。

研究人员进一步获得了如下图所示的物质结构。

拟利用这些材料，用基因工程技术培育转基因棉花。

含有目的基因的DNA片段农杆菌Ti质粒结构示意图注：Sau3AⅠ、Eco RⅠ、Bam HⅠ为三种限制酶，Sau3AⅠ、Bam HⅠ切割形成的黏性末端相同。

用基因工程技术培育转基因棉花的操作程序包括四个步骤：(1)目的基因的获取：将植物a不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为。

(2)构建基因表达载体：计划用Eco RⅠ分别切割上图中DNA片段和上图所示质粒，以构建基因表达载体。

①构建表达载体除限制酶外还需要的工具酶是________；②本方案的缺陷是：可能导致______________________以及目的基因与质粒的反向连接。

③为避免上述缺陷，最佳方案是用______________切割上图的DNA片段，用____________切割上图质粒。

(3)将________导入受体细胞。

成功导入受体细胞后，还需要利用________技术才能得到转基因棉花幼苗，这一技术的原理是。

(4)目的基因的检测与鉴定：要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是。

2.研究发现人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。

科学家培育出转人溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶(从乳汁中提取)，过程如下图所示。

其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu 通过控制相关酶的合成而影响亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸)，基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。

高中生物《基因工程》练习题(含答案解析)

高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。

下列有关基因工程的说法错误的是（）A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。

下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（）A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）A. B.C. D.6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。

下列相关叙述正确的是（）A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A. 若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B. 若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C. 若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D. 若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B. 若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C. 乙中的酶切位点在A与G之间D. 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。

高中生物选修三基因工程作业

1．苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。

图21是转Bt 毒素蛋白基因植物的重组DNA 形成过程示意图；图22是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

（1）将图21①的DNA 用Hind Ⅲ、BamH Ⅰ完全酶切后，反应管中有种DNA 片段。

过程②需要用到酶。

（2）假设图21中质粒原来BamH Ⅰ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶Bcl Ⅰ的碱基序列，现用Bcl Ⅰ和Hind Ⅲ切割质粒，则该图21中①的DNA 右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，能获得所需重组质粒吗？并请说明理由。

（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒A ．能被BamH Ⅰ也能被Hind Ⅲ切开B ．能被BamH Ⅰ但不能被Hind Ⅲ切开C ．不能被BamH Ⅰ也不能被Hind Ⅲ切开D ．能被Hind Ⅲ但不能被BamH Ⅰ切开（4）图22中α链是。

不同组织细胞的相同DNA 进行过程③时启用的起始点（在“都相同”、“都不同”、 “不完全相同”中选择），其原因是。

（5）要想检测导入的Bt 毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因植物培育成功。

2．基因工程又叫做基因拼接技术。

该技术能够通过对生物的基因进行改造和重新组合，产生出人类所需要的基因产物。

自20世纪70图1和图2示基因工程部分操作过程：⑴从表中四种酶的切割位点看，可以切出平末端的酶是__________。

⑵将目的基因与质粒DNA 缝合时，两条链上的磷酸、脱氧核糖在__________酶的作用下连接起来，形成磷酸二酯键；两条链间的碱基对通过__________连接起来。

⑶图2中的质粒分子可被表中__________酶切割，切割后的质粒含有_____个游离的磷酸基团。

⑷若对图中质粒进行改造，插入的Sma I 酶切位点越多，质粒的热稳定性越_____。

高中基因工程试题及答案

高中基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程是指：A. 基因的自然选择B. 基因的人工选择C. 基因的人工重组D. 基因的自然重组答案：C2. 基因工程中常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 染色体D. 线粒体答案：A3. 基因枪法属于哪种基因转移技术？A. 化学法B. 物理法C. 生物法D. 机械法答案：B4. 以下哪个不是基因工程的步骤？A. 目的基因的获取B. 目的基因的克隆C. 目的基因的表达D. 目的基因的自然选择答案：D5. 基因工程在医学领域的应用不包括：A. 基因治疗B. 基因检测C. 基因编辑D. 基因克隆答案：D二、填空题6. 基因工程的核心技术是________。

答案：重组DNA技术7. 基因工程中常用的受体细胞有________和________。

答案：大肠杆菌、酵母菌8. 基因工程在农业上的应用包括________和________。

答案：转基因作物、基因改良9. 基因工程在环境保护中的应用包括________和________。

答案：生物修复、污染物降解10. 基因工程在工业生产中的应用包括________和________。

答案：生物催化剂、生物制药三、简答题11. 简述基因工程的基本原理。

答案：基因工程的基本原理是利用分子生物学技术，将目的基因从一种生物体中提取出来，然后通过重组DNA技术将其插入到另一种生物体的基因组中，使其在新的宿主细胞中表达，从而获得具有特定性状的生物体或生产特定的生物产品。

12. 基因工程在医学领域有哪些应用？答案：基因工程在医学领域的应用包括基因治疗，通过将正常基因导入患者体内以治疗遗传性疾病；基因检测，用于疾病诊断和风险评估；基因编辑，通过修改基因序列来治疗疾病；以及生产生物药物，如胰岛素、干扰素等。

四、论述题13. 论述基因工程的伦理问题及其解决途径。

答案：基因工程的伦理问题主要包括对人类基因组的修改可能带来的未知风险、基因歧视、生物多样性的减少等。

高中生物必修二第六章基因工程练习

答案B
•
• 基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATC,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是
• -GATC↓.根据图示判断下列操作正确的是( ) • A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 • B. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 • C. 质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割 • D. 质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割
答案D
• 如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（）。
• A: ②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶的参与 • B: 切割Ti质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核
苷酸序列 • C: ②中通常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因 • D: ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
• 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（）。
• A: 用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸
• B: 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
• C: 将重组DNA分子导入烟草体细胞
• D: 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
答案A
• 限制酶MumⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示目的基因，下图表示四种质粒，其中箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因，适于作为目的基因运载体的质粒是（）
• A: 基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
• B: 质粒包括细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和病毒中的DNA
• C: 限制性核酸内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键

高中生物基因工程练习题(含解析)

高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。

相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。

下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。

高中基因工程典型例题

关于酶切的几道题：1. (08江苏生物)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。

以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。

表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。

请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。

（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。

1.（1）耐高温2）引物对B （3）否（4）农杆菌（5）①2 ②1解析：答题需要以准确画出黏性末端序列为前提2、(08海南)图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，amp R为青霉素抗性基因，tct R为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。

已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。

（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有_________________________________、_________________________________、______________________三种。

《基因工程及其应用》典型例题

《基因工程及其应用》典型例题例题1 在基因工程中不会出现（）A．DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来B．限制性内切酶用于目的基因的获得C．目的基因须有运载体导入受体细胞D．人工合成目的基因不用限制性内切酶【解析】：基因工程中两个DNA分子的黏性末端的碱基间通过碱基互补配对的方式结合起来，但DNA分子的骨架——糖与磷酸的连接还未接上，DNA连接酶的作用就是使这个断裂处连接起来，因此A的说法是错误的，在基因工程中不会出现。

【答案】：A例题2 要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（）①限制酶②连接酶③解旋酶④还原酶A．①②B．③④C．①④D．②③【解析】目的基因与对应的运载体结合起来的过程是：先用限制酶分别处理目的基因和运载体，使之露出相同的黏性末端；将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处，再用DNA连接酶将处理好的目的基因和运载体的黏性末端接好，就完成了基因的重组。

【答案】 A例题3 下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达【解析】此题考查基因的操作工具、目的基因表达等知识。

解答此类题目须明确以下三方面知识：（1）基因操作的工具有限制酶、连接酶；（2）一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，不同的限制酶识别的核苷酸序列不同；（3）运载体是基因的运输工具；（4）目的基因进入受体细胞后，受体细胞表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程；（5）导入受体细胞中的目的基因主要是为了表达，生产目的基因的产物，因此能够快速繁殖是选择受体细胞的重要条件之一。

据以上分析，A、B、D选项的说法均不正确，应选C。

解答此类题目易出现的思维障碍是：①审题不严，把运载体当成基因工程的工具酶；②存在一定的思维定势，脑海中只有细菌的质粒可作运载体，忽略了细菌也是常用的受体细胞之—这一知识。

基因工程经典例题

基因工程经典例题解析一、例题1（一）题目已知一种限制酶能识别DNA分子中的GAATTC序列，并在G和A之间进行切割。

现有一段DNA分子序列为：- 5’—GGATCCGAATTCCTTAAG—3’- 3’—CCTAGGCTTAAGGAATTC—5’若用该限制酶对其进行切割，会产生几个黏性末端？这些黏性末端的碱基序列是什么？（二）解析1. 识别切割位点：-该限制酶识别GAATTC序列，在DNA分子中有两处该序列，分别是5’—GGATCCGAATTCCTTAAG—3’中的GAATTC和3’—CCTAGGCTTAAGGAATTC—5’中的GAATTC（注意DNA两条链的反向平行关系）。

2. 切割产生黏性末端：-在G和A之间切割后，产生的黏性末端为：- 5’—G AATTC—3’- 3’—CTTAA G—5’- 5’—CTTAA G—3’- 3’—G AATTC—5’-共4个黏性末端，碱基序列分别是5’—G AATTC—3’和5’—CTTAA G—3’（另两条链的反向互补序列与之相同，只是方向相反）。

二、例题2（一）题目在基因工程中，将目的基因导入受体细胞是一个关键步骤。

现有以下几种受体细胞类型：植物细胞、动物细胞、大肠杆菌细胞。

若目的基因是一种编码胰岛素的基因，应选择哪种受体细胞最为合适？为什么？（二）解析1. 分析受体细胞特点：-植物细胞：可以通过农杆菌转化法、基因枪法等方法导入目的基因，但植物细胞中没有胰岛素加工的相关内质网、高尔基体等细胞器，不能对胰岛素进行正确的加工和分泌。

-动物细胞：具有内质网、高尔基体等细胞器，能够对胰岛素进行正确的加工和分泌，适合胰岛素基因的表达。

-大肠杆菌细胞：是原核细胞，没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对胰岛素进行糖基化等加工，且胰岛素基因中可能含有大肠杆菌不能识别的密码子等，表达出的胰岛素可能没有活性。

2. 得出结论：-应选择动物细胞作为受体细胞最为合适，因为它能对胰岛素进行正确的加工和分泌，使胰岛素具有生物活性。

基因工程选引物的典型例题及解析

基因工程选引物的典型例题及解析基因工程是一门前沿的生物学技术，它涉及到对生物体的基因进行改造和调控。

在基因工程中，选取合适的引物是至关重要的一步，因为引物的选择直接影响到基因工程的成功与否。

下面我们将以典型例题及解析的方式来讨论基因工程选引物的重要性和方法。

典型例题：假设你需要在实验室中进行一项基因工程实验，要求你设计引物来扩增目标基因。

目标基因的序列如下：5'-ATGCTAGCTAGCTAGCATG-3'。

请设计适合的引物序列。

解析：在设计引物时，需要考虑引物的长度、GC含量、配对性和特异性。

在这个例题中，我们需要设计一对引物来扩增目标基因。

首先，我们需要选择两个合适长度的引物序列，通常引物的长度在18-25个碱基对之间。

其次，引物的GC含量应该在40-60%之间，以确保引物的稳定性和特异性。

最后，引物的配对性和特异性也是非常重要的，避免引物与非目标序列产生杂交反应。

根据上述要求，我们可以设计如下两个引物序列：引物1，5'-ATGCTAGCTAGCTAGC-3'。

引物2，5'-CATGCTAGCTAGCTAGC-3'。

这两个引物序列分别位于目标基因的起始和终止序列上，长度适当，GC含量合适，并且具有良好的特异性和配对性。

在基因工程实验中，选取合适的引物是成功的关键之一。

通过合理的引物设计，可以有效地扩增目标基因，为基因工程实验的顺利进行提供了重要保障。

总结：基因工程中选取合适的引物是至关重要的一步，它直接影响到基因工程实验的成功与否。

在设计引物时，需要考虑引物的长度、GC含量、配对性和特异性等因素，并且要根据目标基因的序列特点来进行合理的选择和设计。

只有通过精心设计的引物才能确保基因工程实验的顺利进行，为相关研究和应用提供坚实的基础。

高二生物基因工程试题答案及解析

高二生物基因工程试题答案及解析1.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用【答案】C【解析】由于基因的选择性表达，在人的肝细胞中，没有胰岛素基因转录的mRNA，A错误表达载体的复制启动于复制原（起）点，胰岛素基因的表达启动于启动子，B错误；标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，C正确；启动子在胰岛素基因的转录中起作用，终止密码子在胰岛素基因的翻译中起作用，D错误。

【考点】基因工程的原理及技术【名师】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2.科学家将人的生长激素基因与某种细菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子进行重组，并成功地在该细菌中得以表达（如下图）。

请据图分析回答：（1）过程①所示获取目的基因的方法是________。

（2）细菌是理想的受体细胞，这是因为它______________________________。

基因工程典型例题

1．下图a 示基因工程中经常选用的运载体——pBR322质粒，Amp r 表示氨苄青霉素抗性基因，Tet r 表示四环素抗性基因。

目的基因如果插入某抗性基因中，将使该基因失活，而不再具有相应的抗性。

为了检查运载体是否导入原本没有Amp r 和Tet r 的大肠杆菌（受体细胞），将大肠杆菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图b 的结果（黑点表示菌落）。

再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图c 的结果（空圈表示与b 对照无菌落的位置）。

据此分析并回答：（1）pBR322质粒的化学本质是，其控制着等性状，质粒的复制必须在中完成。

（2）根据用途，题中所用培养基属于选择培养基，与图c 空圈相对应的图b 中的菌落表现型是，由此说明目的基因插入了中。

2、科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。

其过程大致如下图所示：a(1)基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是。

(2)获取Bt毒蛋白基因的方法一般有、等。

(3)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的特点。

Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为。

(4)将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是。

(5)一个基因表达载体的组成必须有等。

(6)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是。

这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是。

若从个体水平来任何检测？。

3、利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。

2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。

第18讲基因工程(练习)(解析版)

第18讲基因工程目录01 基因工程101 基因工程1．（不定项）聚合酶链式反应（PCR）是一种体外扩增DNA片段的技术。

某DNA片段的PCR反应程序如图所示。

下列叙述错误的是（）A．预变性可促进模板DNA边解旋边复制B．退火是让解旋状态模板DNA恢复双螺旋C．延伸结束后，新片段中的引物将被切除D．终延伸可使目的基因的扩增更加充分【答案】ABC【分析】PCR过程为①变性，当温度超过90①时，氢键断裂，双链DNA解聚为单链；①复性，当温度降低到50①左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；①延伸，温度上升到72①左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。

【详解】A、预变性的目的是破坏DNA中可能存在的较难破坏的复杂二级结构，使DNA充分变性，A错误；B、退火是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，B错误；C、延伸结束后，新片段中不会切除引物，C错误；D、终延伸过程是为了让引物完全延伸并让单链产物完全复性形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，D正确。

故选ABC。

2．R型细菌生长至一定阶段会分泌感受态因子，诱导感受态特异蛋白质的表达；使细胞表面的DNA结合蛋白及核酸酶裸露，具有与DNA结合的活性。

S型细菌中控制荚膜形成的S基因吸附在R型细菌上即可整合到R型细菌的基因组中，完成转化。

据此解释格里菲思实验中只有少数R型细菌发生转化的原因，错误的是（）A．S基因只有从加热杀死的S型细菌中释放出来才能促成R型细菌的转化B．只有少数的S基因可吸附在R型细菌上，完成部分R型细菌的转化C．蛋白质和DNA对高温的耐受力不同是导致蛋白质不是转化因子的原因D．R型细菌的转化与S基因的数量、R型细菌的状态有关【答案】A【详解】A、S基因从获得S型细菌中释放出来也能促成R型细菌的转化，A错误；B、因为R型细菌只有进入感受态才相对比较容易接受外源基因，而即使进入了感受态，也会受到外源基因大小等各种因素的影响，从而只有少数的S基因可吸附在R型细菌上，完成部分R型细菌的转化，B正确；C、蛋白质空间结构不稳定容易受到高温等因素的影响而变性，DNA空间结构为双螺旋结构较稳定；蛋白质和DNA对高温的耐受力不同是导致蛋白质不是转化因子的原因，C正确；D、转化效率受外源基因大小、数量、细菌密度及生长状况等因素的影响，故R型细菌的转化与S基因的数量、R型细菌的状态有关，D正确。