α-淀粉酶(中温)使用方法及作用
耐高温α-淀粉酶在酒精生产中的应用
耐高温α-淀粉酶在酒精生产中的应用摘要:我国酒精工业通过数十年的努力, 在生产、技术上有了很大的提高,特别在节能、综合利用和自动化等方面。
自20 世纪80 年代末, 在消化、吸收国外新技术、新设备的基础上, 酒精生产技术也进入了一个新时期。
“中温蒸煮”使用“耐高温α-淀粉酶”的双酶法液化、糖化工艺,在我国已推广多年,从使用效果、节能降耗、提高质量、出酒率及酒糟固液分离等方面表现出明显的优越性。
关键词:耐高温α-淀粉酶;酒精;应用;现在每年仍以10%的产量在增加。
美国主要以玉米谷物为原料, 而巴西则是使用甘蔗与糖蜜。
欧洲等其他发达国家正在立法推广实施燃料乙醇工程。
现在全世界的酒精总产量中, 燃料酒精占66%, 食用酒精占14%, 溶剂占11%, 作为中间体占9%, 由此可见, 燃料乙醇已经成为酒精中主要的消费产品。
我国的实际酒精生产能力已经达到500 万吨左右, 但开工率不足, 近年来大体在70%左右, 实际年生产酒精约为350 万吨。
一、概述淀粉酶是研究较多、生产最早、产量最大和应用最广泛的一种酶,特别是20世纪60年代以来,由于淀粉酶在淀粉糖工业生产及食品工业中的大规模应用,其的需要量与日俱增。
到目前为止,几乎占整个酶制剂总产量的50%以上。
工业生产中,一般采用纯种优良的枯草芽孢杆菌利用淀粉质原料通过深层通风发酵进行生产中温α-淀粉酶;利用纯种优良高产黑曲霉菌株,以薯类淀粉为原料,采用多级补料发酵法生产糖化酶。
所以,在微生物发酵的酶废液内除了含有约20%没有被完全提取的淀粉酶,同时含有没有完全反应的原料,还含有菌体自溶物、核酸及未被微生物完全利用的糖类、无机盐、无机氮源、蛋白质等其他物质,充分利用这些营养成分,不但可以提高酒精的出酒率、给企业带来可观的经济效益,而且将营养丰富的有机废液转化为酒精发酵结束后营养贫瘠的酒糟处理,这对环境的污染程度大大降低,而且酒糟处理起来比发酵废液容易的多。
因此,实验的主要目的是将酶制剂与酒精生产行业进行联合,共同创收,使得企业获得更大的收益。
中温α-淀粉酶在鲜湿面条中的应用研究
中温α-淀粉酶在鲜湿面条中的应用研究何承云;孙俊良;李光磊;师玉忠;肖猛【摘要】Mesophilicα-amylase was a kind of important food industrial enzymes. The activity of mesophilicα-amylase as determined by DNS method was found to be (4068 ±24) U/g at pH 5.6 and 60℃.Next, partial properties of mesophilicα-amylase such as its optimal temperature, optimal pH, were investigated. The opti-mal temperature and pH of the mesophilicα-amylase were 60℃and pH 5.6, respectively. Based on its partial characterization, the feasibility of application of mesoph ilicα-amylase as flour products additive was studied. The farinograph showed that as flour products additive its use could reduce dough forming time. Moreover, mesophilicα-amylase not only markedly improved the sensory score of noodles, it also led to an increase in the chewingness of noodles. The added amount ranged from 16 mL/100 kg to 32 mL/100 kg wheat flour among which the optimal addition was 24 mL/100 kg wheat flour.%中温α-淀粉酶是一种非常重要的食品工业用酶.利用DNS法测定中温α-淀粉酶活力,在pH 5.6、温度60℃条件下该酶活力为(4068±24)U/g.在此基础上,研究中温α-淀粉酶部分酶学性质,结果表明:中温α-淀粉酶的最适温度为60℃、最适pH值为5.6.根据粉质曲线,中温α-淀粉酶可以明显降低鲜湿面条面团的形成时间,从而提高生产效率.适量添加中温α-淀粉酶能够明显改善鲜湿面条的感官和质构品质,添加范围可以在16 mL/100 kg~32 mL/100 kg面粉,其中24 mL/100 kg面粉的添加量较为适宜.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)013【总页数】5页(P104-108)【关键词】中温α-淀粉酶;面条;鲜湿面条【作者】何承云;孙俊良;李光磊;师玉忠;肖猛【作者单位】河南科技学院食品学院,河南新乡453003;河南科技学院食品学院,河南新乡453003;河南科技学院食品学院,河南新乡453003;河南科技学院食品学院,河南新乡453003;河南科技学院食品学院,河南新乡453003【正文语种】中文面条是我国的传统主食。
α-淀粉酶(中温)使用方法及作用
α淀粉酶(中温)使用要领及效率之阳早格格创做导读:α淀粉酶(中温)是采与劣良菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)经液体深层收酵、粗制而成的下效死物制剂,广大应用于啤酒等死产中.产品个性淀粉酶为火解酶类,能正在较下温度下随机火解淀粉、糖本及其落解物里面的α1.4葡萄糖苷键,爆收可溶性糊粗战少量矮散糖,使得胶状淀粉溶液的粘度赶快下落,过分火解可爆收少量葡萄糖战麦芽糖.酶活力单位的定义1mL液体酶,于60℃、pH=6.0条件下,1h液化1g可溶性淀粉所需的酶量,即为1个酶活力单位,以u/mL表示.效率条件温度: PH值:最适温度范畴:70℃~75℃;最适pH范畴:5.0~6.0;灵验温度范畴:60℃~85℃. 灵验pH范畴:5.0~7.0.效率成果使淀粉液化更真足,醪液分层更明隐,色度矮,收缩糊化战过滤时间,普及设备战本料利用率;可真止无麦芽糊化支配,以普及辅料比率,进而落矮啤酒死产成本,革新啤酒本量,普及经济效率.规格及尺度淀粉酶为浅褐色液机制剂,酶活力≥3,000u/mL,果收酵本料、周期等果素的效率,颜色会稍有好别,但是没有会效率使用成果.本产品切合国家尺度GB8275《食品增加剂α淀粉酶制剂》.本产品切合食品仄安国家尺度GB2760《食品仄安国家尺度食品增加剂使用尺度》战GB25594《食品仄安国家尺度食品工业用酶制剂》的相闭确定.使用量正在啤酒酿制历程中,使用辅料时,推荐加量为辅料搞沉的0.04~0.08%(即每吨辅料加进0.4~0.8L),与α淀粉酶(耐下温)拆配使用效验更好;然而,由于糖化本料组成及工艺参数的好别,本品的最好增加量应通过正在糖化车间中举止分歧增加量的考查去决定.如果工艺中需安排料液的pH,请正在安排完毕后再加进酶液.使用仄安酶制剂是蛋黑量,吸进灰尘或者悬浮微粒大概会爆收过敏效率,引导人们爆收过敏反应.如果万古间交触某些酶,大概会刺激皮肤、眼睛战粘膜;飞溅战热烈搅动大概制成可吸进的粉尘.修议脱戴具备呵护效率的衣服、脚套战眼睛或者脸部呵护物.储藏淀粉酶属死物活性物量,应置于矮温、搞燥处保存,预防阳光曲射及少久与中界交触.本产品本启拆正在15℃以下矮温阳凉搞燥环境,保量期12个月。
α淀粉酶在畜禽生产中的作用机理及应用进展
α-淀粉酶在畜禽生产中的作用机理及应用进展摘要随着近代酶技术及生物技术的发展,高效能生物活性物质——酶制剂已能大规模地工业化生产,并被应用于饲料工业中,许多实验和实际应用结果都表明,饲用酶制剂作为一种饲料添加剂能有效地提高饲料的利用率、促进动物生长和防治动物疾病的发生,与抗生素和激素类物质相比,具有卓越的安全性,引起了全球范围内饲料行业的高度重视。
饲用酶种类繁多,淀粉酶作为其中的一种,在畜禽生产中取得了相当好的效果。
本文主要介绍淀粉酶的组成、基本性质以及在畜禽生产中的应用。
关键词:α-淀粉酶畜禽生产作用机理应用进展正文:1、α-淀粉酶的简介1.1 α-淀粉酶的定义淀粉酶是一类能分解淀粉糖苷键的酶的总称,广泛存在于动植物和微生物中,是利用最早、用途最广、工业产量最大的酶制剂品种。
按照水解淀粉酶的方式,淀粉酶主要可分为四大类:α-淀粉酶(α-amylase)、β-淀粉酶(β-amylase)、葡萄糖淀粉酶(glucoamylase)和异淀粉酶(isoamylase)。
[1]其中,α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖苷酶,EC3.2.1.1)多是胞外酶,其作用于淀粉时可从分子内部随机地切开淀粉链的α-1,4糖苷键,而生成糊精和还原糖,产物的末端残基碳原子构型为α-构型,故称α-淀粉酶。
[2]-[3]1.2 α-淀粉酶的分类和结构依α-淀粉酶产物不同可将它们分为糖化型和液化型两种:液化型α-淀粉酶,能将淀粉酶快速液化,其终产物为寡聚糖和糊精:糖化型α-淀粉酶有较强的酶切活性,在水解可溶性淀粉时,随着水解时间的延长而产生寡聚糖,麦芽糖直至葡萄糖。
按照其使用条件可以分为低温型、中温型、高温型、耐酸耐碱型。
按产生菌不同又可以分为细菌、真菌、植物和动物淀粉酶。
[4]研究表明所有α-淀粉酶均为分子量在50ku左右的单体,由经典的三个区域(A、B、C)组成:中心区域A由一个(β/α)8圆筒构成;区域B由一个小的β-折叠突出于β3和α3之间构成;而C-末端球型区域C则由一个Greek-key 基序组成,为该酶的活性部位,负责正确识别底物并与之结合。
α-淀粉酶测定的操作规程
α-淀粉酶测定的操作规程1、用途:测定人血清中或尿液中α-淀粉酶的酶活浓度。
2、原理:α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶偶联,水解特异性底物4,6-亚乙基-4-硝基苯酚-α-庚糖,产生对-硝基苯酚,对-硝基苯酚生成速率与α-淀粉酶的活性成正比,在405nm波长下用速率法检测。
3、适用仪器:奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪.4、样本要求:4.1、样本种类:新鲜无溶血血清或尿液。
4.2、样本采集:常规静脉采血约2ml,不抗凝。
置普通管中,或采用含有分离胶的真空采血管。
尿液保存时应将pH值调节至7.0。
4.3、样本干扰:对反映吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定7天,-20℃可保存一个月,忌反复冻融。
尿液样本2℃—8℃可稳定10天.5、检测方法:5.1、试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤:2、动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准:用K因素进行试剂空白校准,也可使用Diazyme公司校准品进行校准操作,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
5.4、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
3、6、参考范围:(各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。
)7、注意事项:7.1、试剂具有一定的酸碱性,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理,扔入指定的垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献:中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第三版),东南大学出版社,2006。
王惠萱、李雪梅、王冈,临床检验操作手册,云南科技出版社,2008.陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006.。
α-淀粉酶测定标准操作程序
α-淀粉酶测定标准操作程序1.摘要α-淀粉酶试剂盒适用于定量测定人血清、肝素化血浆、尿液样本中α-淀粉酶的活力。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中α-AMY的浓度。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定α-AMY浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司的α-AMY试剂测定采用CNPG3方法。
5.原理底物CNPG3在α-AMY催化下产生的 2-氯-4-硝基苯酚(CNP)引起波长405nm 处吸光度上升,上升的速率与α-淀粉酶的活力成正比。
5CNPG3−−→−AMY3CNP+2CNP2+3G3+2G6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:MES缓冲液(PH6.0)、醋酸钙、硫氰酸钾、CNPG3。
表面活性剂、防腐剂7.3试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
试剂打开后冷藏于分析中可保存28天。
7.4试剂准备:试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。
8.3质控数据管理:按程序对检验后的质控后结果进行转换,及时质控数据进行分析处理,如出现失控值,应及时分析失控原因,并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则:按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评:分别参加某地区室间质评,对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
α-淀粉酶-酶活力GB24401-2009
n——样品的稀释倍数
样品酶活力X
ห้องสมุดไป่ตู้监督员:检验员:
陕西省酿造发酵产品质量监督检验站
原始记录表
No:______日期:_____年____月____日环境温湿度:_____
记录类别:中温α-淀粉酶——酶活力
产品名称:记录物品编号:
执行方法标准:
主要仪器
名称
编号
规格
精度
鉴定合格有效截止日期
电子天平
酸度计
恒温水浴
分光光度计
所用溶液配制
溶液名称
配制
原碘液
稀碘液
可溶性淀粉溶液(20g/L)
磷酸缓冲液(pH6.0)
盐酸溶液(0.1moL/L)
结果记录
样品称取量m(g)=稀释倍数n=
样品编号
吸光度(A)
对应酶浓度(c) (u/mL)
酶浓度(c)平均值(u/mL)
样品酶活力(u/g)
极差相对值(%)
1
2
活力计算:
X=c×n
式中:X——样品的酶活力,u /g(u/mL)
中温α-淀粉酶酶解怀山药的工艺
收稿日期:2011-07-04
*通讯作者
基金项目:河南理工大学研究生学位论文创新基金资助(校研[2011]1号)。
作者简介:李静静(1985—),男,河南商丘人,硕士研究生,研究方向为天然产物化学。
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2012年 第 37卷 第 3期
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
葡萄糖、浓硫酸、苯酚、Vc、氯化钙、氯 化钠:分析纯;蒸馏水:河南理工大学化学实验 中心。
DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器:河南 巩义市予华仪器有限公司;干燥箱:上海一恒科 学仪器有限公司;PHS-3C型pH计:上海精密科学 仪器有限公司雷磁仪器厂;SYQ-DSX-280B型压 力蒸汽灭菌器:上海申安医疗机械厂;TU-1900 紫外可见分光光度计:北京普析通用仪器有限责 任公司;TGL-10B高速台式离心机:上海安亭科 学仪器厂。 1.3 实验流程
可溶性固形物的测定:干燥法[12-13]。
ᓃ⢳Leabharlann ᓃ⢳2 结果与分析2.1 单因素试验 2.1.1 酶加入量对怀山药酶解效果的影响 准确称 取10.0 g怀山药,按料液比1:20打浆,分别采用酶 加入量为0.020、0.040、0.060、0.080、0.100 mg/ mL,在温度为70 ℃,时间为30 min,pH值为7的 条件下进行酶解,考察酶加入量对酶解效果的影 响,结果见图1。
食品开发
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年 第 37卷 第 3期
中温α-淀粉酶酶解怀山药的 工艺研究
李静静1,缪 娟2,符德学2*,张 磊1 (1.河南理工大学理化学院,焦作 454100;2.焦作大学,焦作 454100)
α-淀粉酶测定的操作规程
α-淀粉酶测定的操作规程1、用途:测定人血清中或尿液中α-淀粉酶的酶活浓度。
2、原理:α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶偶联,水解特异性底物4,6-亚乙基-4-硝基苯酚-α-庚糖,产生对-硝基苯酚,对-硝基苯酚生成速率与α-淀粉酶的活性成正比,在405nm波长下用速率法检测。
3、适用仪器:奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪.4、样本要求:4.1、样本种类:新鲜无溶血血清或尿液。
4.2、样本采集:常规静脉采血约2ml,不抗凝。
置普通管中,或采用含有分离胶的真空采血管。
尿液保存时应将pH值调节至7.0。
4.3、样本干扰:对反映吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定7天,-20℃可保存一个月,忌反复冻融。
尿液样本2℃—8℃可稳定10天.5、检测方法:5.1、试剂的准备:试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤:2、动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准:用K因素进行试剂空白校准,也可使用Diazyme公司校准品进行校准操作,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。
5.4、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
3、6、参考范围:(各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。
)7、注意事项:7.1、试剂具有一定的酸碱性,避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理,扔入指定的垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献:中华人民共和国卫生部医政司,全国临床检验操作规程(第三版),东南大学出版社,2006。
王惠萱、李雪梅、王冈,临床检验操作手册,云南科技出版社,2008.陆永绥、李清华、张伟民主编,临床检验自动化仪器分析标准操作规程,浙江大学出版社,2006.。
酶制剂知识
酶制剂种类很多,功效不一,使用在啤酒生产过程中的工序也不一样,目前啤酒生产常用酶制剂有耐高温α-淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、复合酶、α-乙酰乳酸脱羧酶、溶菌酶等。
在实际生产中使用酶制剂首先要了解各种酶的作用机理、特性、底物和最终产物是什么,并要设计好应用的目的和所要达到的效果。
在此将几种常用酶制剂的特性作以简要介绍。
1.α-淀粉酶α-淀粉酶只可作用于淀粉分子内任意α-键,且从分子链的内部进行,故又称内淀粉酶,属于内切酶。
在水溶液中α-淀粉酶能使淀粉分子迅速液化,产生较小分子的糊精,故也被称为液化酶。
α-淀粉酶作用于直链淀粉,分解产物为6~7个葡萄糖单位的短链糊精及少量的麦芽糖和葡萄糖,糊精还可以进一步水解。
按理论最终产物为87%的α-麦芽糖和13%的葡萄糖。
α-淀粉酶作用于支链淀粉只能任意水解α-1,4键,但不能分解α-1,6键也不能绕过α-1,6键。
作用接近α-1,6键时速度放慢,其分解产物为α-界限糊精、麦芽糖和葡萄糖。
常用的α-淀粉酶有耐高温α-淀粉酶, 真菌α-淀粉酶。
啤酒生产中常用的耐高温α-淀粉酶一般由地衣芽孢杆菌产生,pH在5.0~7.0内较稳定,尤以pH=6.0为佳,作用淀粉的最适温度为90℃。
中温α-淀粉酶也应用到啤酒生产中。
单独使用耐高温α-淀粉酶比单独使用中温α-淀粉酶麦芽糊精收率高,透光率也较大,但黏度较高,将两者结合起来使用则可互相弥补不足,得到很好的效果。
耐高温α-淀粉酶:pH最适范围:5.5~7.0;温度最适范围:90oC以上;钙离子浓度:50~70mg/kg;参考用量:0.1%。
2. 糖化酶糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,它能将淀粉从非还原性末端水解α-1,4-葡萄糖苷键,产生葡萄糖,也能缓解水解α-1,6-葡萄糖苷键,转化成葡萄糖。
pH最适范围:4.0~4.5;温度最适范围:58~60℃;抑制剂:大部分重金属;参考用量:50U/g。
3.普鲁兰酶普鲁兰酶能水解淀粉和糊精中的支链α-D-1,6葡萄糖苷键生成含有α-D-1,4葡萄糖苷键的直链低聚糖。
中温α-淀粉酶水解糯玉米汁的工艺条件
46/植保技术版/·农副产品加工·中温α-淀粉酶水解糯玉米汁的工艺条件苏爱梅1,吴海燕1,唐明霞2,陈 慧2(1.南通科技职业学院,江苏南通226007;2.江苏沿江地区农业科学研究所,江苏如皋226500) 糯玉米作为玉米属的一个亚种,起源于中国,最先在我国的西南地区被发现,是由当地种植的硬粒玉米发生基因突变,并经人工选择而保存下来的一种玉米新类型,其特有的基因决定了糯质玉米胚乳淀粉全部为支链淀粉,且富有黏性,籽粒不透明、有光泽、坚硬、平滑,煮熟后黏软,别称黏玉米或蜡质玉米,是一种老少皆宜的、对身体健康有益的粮食作物。
20世纪70年代,我国糯玉米育种事业起步;直到20世纪90年代,随着市场和国民经济的不断发展,我国相继培育出了中糯l 号、中糯2号、苏玉糯1号、苏玉糯2号等一系列的糯玉米新品种;目前,我国糯玉米的种植面积已经达到33万hm 2,主要分布在长江三角洲地区,约占40%以上。
糯玉米营养价值高,除含有蛋白质、氨基酸、膳食纤维、钙、铁、磷等营养物质外,还含有多种维生素、胡萝卜素、硒等营养物质。
其中含蛋白质10.6%、氨基酸8.3%左右,赖氨酸含量比普通玉米高16%~74%。
糯玉米不仅营养丰富,而且保健功能显著,能降低血脂和血压、预防癌症、提神健脑等。
糯玉米汁作为一种新型谷物饮料,符合饮料工业的发展趋势,口感好、饮用方便、更容易吸收,因此受到广大消费者青睐,具有很好的市场前景。
然而,由于糯玉米中含有较多的淀粉,对于制成饮料后的稳定性有不利的影响,在加工中一般须要水解,即利用α-淀粉酶将玉米中的淀粉水解降解成糊精、低聚糖、单糖、双糖等,从而提高玉米汁的稳定性。
本研究以期通过对糯玉米汁中温α-淀粉酶水解工艺的研究,确定最佳的酶解工艺参数。
1材料与方法1.1材料与试剂 供试糯玉米品种为苏玉糯l 号,由江苏沿江地区农业科学研究所提供。
试验试剂主要为中温α-淀粉酶(酶活力6000U/g)、氯化钙、氢氧化钠、葡萄糖等。
a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用实验教案--
实验三 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测一、实验目的1.制备固定化的淀粉酶。
2.进行淀粉水解的测定。
二、实验原理用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成。
这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适pH 范围为 5.5-7.5,最是温度为50-75℃。
1、酶的固定化酶:生物体内活细胞产生的具有催化作用的有机物。
固定化酶:将水溶性酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
一般酶的固定化方法:吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法。
吸附法:P32利用各种吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上而使酶固定的方法。
通常有物理吸附法和离子吸附法。
常用吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等。
采用吸附法固定酶,其操作简便、条件温和,不会引起酶变性或失活,且载体廉价易得,可反复使用。
2.石英砂的吸附作用石英砂吸附酶的物理吸附也称范德华吸附,它是由吸附质和吸附剂分子间作用力所引起,此力也称作范德华力。
由于它是分子间的吸力所引起的吸附,所以结合力较弱,吸附热较小,吸附和解吸速度也都较快。
被吸附物质也较容易解吸出来,所以物理吸附在一定程度上是可逆的。
3.淀粉酶催化反应 淀粉酶:淀粉酶是指一类能催化分解淀粉(包括糖原、糊精等)的糖苷键的酶之总称。
淀粉酶包括α—淀粉酶、β—淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、脱支酶、麦芽寡糖生成酶等水解酶类和葡萄糖苷转移酶、环状糊精葡萄糖苷转移酶等。
α—淀粉酶是一种内切酶,它随机地从分子内部切开α—1.4糖苷键(水解中间的α—1.4键比分子末端的α—1.4键概率大),遇到分支点的α—1.6键不能切,但能跨越分支点而切开内部的α—1.4糖苷键,由于产物的还原性末端葡萄糖残基上的C1碳原子呈直接使用酶缺点固定化酶优点 通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活固定化酶提高了酶的稳定性,可较长时间地储存和使用;(更能耐受温度、PH 的变化) 溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本固定化酶可以被反复使用,更经济,更利于生产 反应后会混在产物中,可能影响产品质量(难分离) 酶既能与反应物接触,又能与产物分离纯化α—构型(光学),故称这种酶为α—淀粉酶。
a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用实验方案
实验:α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用背景资料一、酶酶(enzyme)催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。
是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。
绝大多数酶的化学本质是蛋白质。
具有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。
1.高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;2.专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;因此在食用酵素当今在功能上,主要有四种:高浓缩SOD酵素如复方天然酵素主要用于乳腺瘤、子宫肌瘤、卵巢囊肿等肿瘤方面;长生酵素直接补脾补肾补气血,全面调理;纤体酵素专门转化脂肪减肥;肠毒清酵素则专门清理肠皱褶的毒素。
3.多样性:酶的种类很多,大约有5000多种,其中可以通过食用补充的酵素达2000多种;形态上主要有三种:专业级酵素为酵素胶囊,其次为酵素粉,而液体酵素含量低、效价低、易腐败而安全性较差一些,食用风险较高。
4.温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的,因此,纯正酵素是中性的,温和的,不存在副作用,或“好转反应”。
对于有刺激性而必然存的“好转反应”,除了本身腐败以外,也有可能有药品的添加。
5.活性可调节性:包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等。
6.易变性:大多数酶是蛋白质,因而会被高温、强酸、强碱等破坏;7.有些酶的催化性与辅助因子有关。
酶与无机催化剂的比较但酶易受环境影响而失活,包括温度、PH值等,例如一般来说动物体内的酶最适温度在35到40℃之间,植物体内的酶最适温度在40-50℃之间;细菌和真菌体内的酶最适温度差别较大,有的酶最适温度可高达70℃。
动物体内的酶最适PH大多在6.5-8.0之间,但也有例外,如胃蛋白酶的最适PH为1.8,植物体内的酶最适PH大多在4.5-6.5之间。
另外,反应中反应产物和酶的分工和回收困难等缺点限制了酶在工业上的广泛应用。
α-淀粉酶
α-淀粉酶概述摘要:α- 淀粉酶(α-1,4-D-葡萄糖-葡萄糖苷水解酶) 普遍分布在动物、植物和微生物中, 是一种重要的淀粉水解酶。
其作用于淀粉时从淀粉分子的内部随机切开α-1,4糖苷键,生成糊精和还原糖。
由于产物的末端残基碳原子构型为α构型,故称α-淀粉酶。
现在α-淀粉酶泛指能够从淀粉分子内部随机切开α-1,4糖苷键,起液化作用的一类酶。
α-淀粉酶分布十分广泛,遍及微生物至高等植物。
α-淀粉酶是一种十分重要的酶制剂,大量应用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业等,是应用最为广泛的酶制剂之一。
本文概述了α-淀粉酶的发现和应用、分离纯化及结构性质、催化机制、工业化生产、应用现状与发展趋势等。
关键词:α-淀粉酶生产结构性质催化机制分离纯化应用1 α-淀粉酶的发现啤酒是最古老的酒精饮料,发酵是其关键步骤,其中所包含的糖化过程就是把淀粉转化为糖,这个转化过程的机理一直都没有被弄清楚。
在19世纪早期,Nasse(1811年)发现,从生物体中提取的淀粉能过被转化为糖,而从被沸水杀死的植物细胞中提取的淀粉不能被转化为糖。
Kirchhoff的实验发现奠定了发现谷物中一种能够将淀粉转化为糖的蛋白质的基础。
Payen和Persoz(1833年)发现,发酵液的酒精析出物中含有一种对热不稳定的物质,它能使淀粉转化为糖,他们将其称为“diastase”。
1886年,Lintner发现了两种淀粉酶,淀粉液化酶和淀粉糖化酶。
1924年,Kuhn将淀粉水解酶归为两类。
将发酵过程中能够将淀粉水解为β-淀粉酶,其能够将淀粉水解为β型麦芽糖。
将能够液化和糊化淀粉的酶称为α-淀粉酶,其作用于淀粉的产物表现为低旋光性,这一点为α型麦芽糖和相关糖的特性[1]。
1949年日本采用深层通风培养法生产α-淀粉酶。
1959年, 日本采用淀粉酶和糖化酶进行淀粉的液化和糖化, 确定了酶法制造葡萄糖浆的工艺, 革除了沿用100年酸水解工业, 使淀粉出糖率由80% 提高到100% 。
α淀粉酶的添加济代码
α淀粉酶的添加济代码α淀粉酶,又称淀粉酶A,是一种重要的酶类,在食品加工、饲料生产、生物燃料等领域具有广泛的应用。
本文将介绍α淀粉酶的添加济代码,以及其在食品加工中的应用。
一、α淀粉酶的添加济代码α淀粉酶的添加济代码通常由国际食品法典委员会(Codex Alimentarius Commission)制定和规范。
目前,国际上常见的α淀粉酶添加济代码包括:1. E1400:α淀粉酶(淀粉酶A)2. E1401:α淀粉酶(淀粉酶A)预浸膏3. E1402:α淀粉酶(淀粉酶A)发酵提取物4. E1403:α淀粉酶(淀粉酶A)酸水解提取物5. E1404:α淀粉酶(淀粉酶A)酶变性物6. E1405:α淀粉酶(淀粉酶A)酶解物这些代码是为了标识和区分不同类型的α淀粉酶及其衍生物,以便于食品生产者和消费者对产品进行正确识别和选择。
二、α淀粉酶在食品加工中的应用α淀粉酶在食品加工中具有多种应用,其中主要包括以下几个方面:1. 面包制作:α淀粉酶可以促进面团的发酵过程,提高面包的体积和口感,并延长面包的保鲜期。
2. 酿造业:在啤酒和白酒的生产过程中,α淀粉酶可以帮助淀粉的降解和糖化,提高酒精发酵率和酒的口感。
3. 乳制品加工:在乳制品加工中,α淀粉酶可以促进乳制品的加热稳定性,改善口感和质地。
4. 糖果制作:在糖果制作中,α淀粉酶可以降低糖果的粘性,提高糖果的口感和储存稳定性。
5. 精细化工:α淀粉酶还可以用于澄清果汁、提取果胶、制备食品添加剂等方面。
总结:通过对α淀粉酶的添加济代码和在食品加工中的应用进行介绍,我们可以看到α淀粉酶在食品工业中具有广泛的应用前景。
在今后的食品制造过程中,科学合理地应用α淀粉酶,将会为食品加工业带来更多的创新和发展机遇。
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α-淀粉酶(中温)使用方法及作用
导读:
α-淀粉酶(中温)是采用优良菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)经液体深层发酵、精制而成的高效生物制剂,广泛应用于啤酒等生产中。
产品特性
淀粉酶为水解酶类,能在较高温度下随机水解淀粉、糖原及其降解物内部的α-1.4葡萄糖苷键,产生可溶性糊精和少量低聚糖,使得胶状淀粉溶液的粘度迅速下降,过度水解可产生少量葡萄糖和麦芽糖。
酶活力单位的定义
1mL液体酶,于60℃、pH=6.0条件下,1h液化1g可溶性淀粉所需的酶量,即为1个酶活力单位,以u/mL表示。
作用条件
温度: PH值:
最适温度范围:70℃~75℃;最适pH范围:5.0~6.0;
有效温度范围:60℃~85℃。
有效pH范围:5.0~7.0。
作用功效
使淀粉液化更彻底,醪液分层更明显,色度低,缩短糊化和过滤时间,提高设备和原料利用率;
可实现无麦芽糊化操作,以提高辅料比例,从而降低啤酒生产成本,改善啤酒品质,提高经济效益。
规格及标准
淀粉酶为浅褐色液体制剂,酶活力≥3,000u/mL,因发酵原料、周期等因素的影响,颜色会稍有差异,但不会影响使用功效。
本产品符合国家标准GB8275-2009《食品添加剂α-淀粉酶制剂》。
本产品符合食品安全国家标准GB2760-2011《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》和GB25594-2010《食品安全国家标准食品工业用酶制剂》的相关规定。
使用量
在啤酒酿造过程中,使用辅料时,推荐加量为辅料干重的0.04~0.08%(即每吨辅料加入0.4~0.8L),与α-淀粉酶(耐高温)搭配使用效果更佳;然而,由于糖化原料组成及工艺参数的差异,本品的最佳添加量应通过在糖化车间中进行不同添加量的试验来确定。
如果工艺中需调整料液的pH,请在调整完成后再加入酶液。
使用安全
酶制剂是蛋白质,吸入灰尘或悬浮微粒可能会产生过敏作用,导致人们产生过敏反应。
如果长时间接触某些酶,可能会刺激皮肤、眼睛和粘膜;飞溅和强烈搅动可能造成可吸入的粉尘。
建议穿戴具有保护作用的衣服、手套和眼睛或脸部保护物。
储存
淀粉酶属生物活性物质,应置于低温、干燥处保存,避免阳光直射及长期与外界接触。
本产品原封装在15℃以下低温阴凉干燥环境,保质期12个月。