人半胱氨酸蛋白酶抑制剂CCysC酶联免疫分析

合集下载

ELISA测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C

ELISA测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C单桂芬;林伟;荣墨克;张静春【摘要】目的建立ELISA方法测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C.方法以双抗体夹心ELISA方法测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C. 结果该方法的线性范围可达100 mg/L.参考值范围为:男,1.81±0.73 mg/L.女,1.72±0.69 mg/L.回收率为:99.1±3.1%.批内和批间分别为:5.8±0.5%、7.3±0.7%.结论该方法操作简便,快速,准确,适于临床常规应用.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2010(014)001【总页数】2页(P105-106)【关键词】ELISA方法;半胱氨酸蛋白酶抑制剂C;肾功能【作者】单桂芬;林伟;荣墨克;张静春【作者单位】吉林大学第二医院,检验科,吉林,长春130041;吉林大学中日联谊医院;吉林大学中日联谊医院;吉林大学中日联谊医院【正文语种】中文【中图分类】R446.61半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C,Cys C)为非糖基化蛋白质,分子量为13 kDa,等电点约为9.3,由有核细胞产生。

其低分子量及高等电点的特性使其容易由肾小球滤过,近曲小管对其重吸收并将其分解。

Cys C在体内产生恒定,不受体重、身高、年龄、性别等因素影响。

其血液动力学及生理学特点优于血清肌酐对肾功能的判断。

当肾小球滤过率下降时血中的Cys C浓度增高,当近曲小管重吸收障碍时尿中的Cys C浓度增高。

因此,Cys C是反映肾小滤过率功能及近曲小管重吸收功能的良好内生性指标[1-3]。

由于方法学的原因,目前该项检验还没有在临床上广泛应用。

本试验用ELISA方法测定血清Cys C,方法简便快速,适于常规检测。

1 材料与方法1.1 对象选健康体检者65名。

男35名,年龄18-65岁。

女30名,年龄20-62岁。

采静脉血3 ml,分离血清,放-20℃冰箱,待测。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定的检验程序验证及三种测定方法比较的开题报告

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C测定的检验程序验证及三种测定方法比较的开题报告一、研究背景半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cystatin C，Cys C）是一种由146个氨基酸组成的低分子量蛋白，分子量约为13kDa，主要由于肾小球滤过机制清除而在血液中存在，是一种很好的肾小球滤过率（GFR）指标。

Cys C与肌酐相比，其受年龄、肌肉量、性别、肾外脏器等因素的影响较小，且呈现更为准确和灵敏的动态变化。

目前，Cys C测定已成为临床上评估肾功能的重要方法，尤其在早期肾病筛查、老年人肾功能监测等方面具有广泛的应用价值。

二、研究目的1.对Cys C的检测程序进行验证，确定检验的准确性和可靠性。

2.比较三种常见的Cys C测定方法在准确性、精确度和操作性上的优缺点，为临床应用提供参考。

三、研究内容和方法1.检验程序验证中，本研究将采用两组标准样品和两组质控品来检验Cys C的测定程序，其中标准样品采用动态时间点法制备，浓度分别为0.8mg/L和1.2mg/L；质控品分别为低、中、高三档，浓度分别为0.4mg/L、0.8mg/L、1.2mg/L。

通过对比检验结果和理论值，计算准确度和精密度指标，验证Cys C检验程序的准确性和可靠性。

2.对三种常见的Cys C测定方法（nephelometric assay、enzyme-linked immunosorbent assay、particle-enhanced turbidimetric assay）进行比较，分别测定标准样品和人体血清中的Cys C浓度，并计算准确度和精密度指标。

在操作性上对比各方法，包括手部操作时间、样品处理时长等。

四、研究意义和预期结果本研究通过Cys C检验程序的验证和三种测定方法的比较，旨在提高Cys C测定的准确性和精确度，并为进一步临床应用提供参考。

预期结果包括从实验上验证Cys C检验程序的可靠性、比较三种测定方法在准确性、精确度和操作性上的优缺点，并得出结论推荐最优测定方法。

7种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测系统的分析性能评价

7种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测系统的分析性能评价安崇文;李海霞【摘要】目的：评估7种半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（Cys C）检测系统的分析性能。

方法应用美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件评估5个颗粒增强免疫透射比浊（PETIA）检测系统和1个均相溶胶颗粒免疫法（SPIA）检测系统的精密度、正确度、空白限（LoB）、抗干扰性以及与SIEMENS BNⅡ颗粒增强免疫散射比浊（PE-NIA）检测系统（简称BNⅡ系统）的相关性和偏差。

结果6个检测系统（以A～F表示）和BNⅡ系统在Cys C浓度为0．8～5．0 mg/L时的总批内变异系数（CV）均＜3．75％，总批间CV除E系统外均＜5％；正确度验证显示A～E系统和BNⅡ系统测定ERM-DA471的绝对偏倚分别为0．00、0．00、1．01、-0．01、-0．50和-0．35 mg/L，相对偏倚分别为0％、0％、18．43％、-0．18％、-9．12％和-6．39％；测定CAP室间质评物显示仅D系统和BNⅡ系统较为理想。

A～F系统及BNⅡ系统的LoB分别为0．00、0．00、0．31、0．01、0．10、0．06和＜0．05 mg/L。

干扰分析显示Hb≤13 g/L、TG≤28 mmol/L时，对A、B系统及BNⅡ系统无明显影响（干扰＜±10％），其他系统均有不同程度干扰。

相关分析显示A～F系统与BNⅡ系统相关性较好[相关系数（r）均＞0．975，P＜0．01]。

偏差分析显示，A～F系统与BNⅡ系统的平均偏差分别为-0．02、-0．10、-0．31、0．05、0．04、0．36 mg/L。

结论Cys C各检测系统测定有证参考物质ERM-DA471的最大偏倚可达到1 mg/L，最大相对偏倚为18．43％；其中PENIA在测定ERM-DA471和CAP室间质评物时结果低于PETIA；部分检测系统分析性能存在不足。

%Objective To evaluatethe analysis performance for 7 cystatin C (Cys C )analysis systems.Methods A total of 5 particle-enhanced turbidimetric immunoassay (PETIA)systemsand 1 sol particle immunoassay (SPIA) system were evaluated according to the documents of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI),and their correlation with particle-enhanced nephelometric immunoassay (PENIA)system from the SIEMENS BNⅡ system (BNⅡ system),precision,accuracy,limit of blank (LoB)and anti-interference ability were evaluated.Results For 6 systems (A-F)and BNⅡsystem,the total within-run coefficients of variation (CV)were all<3.75%,and except E, the total between-run CV were all<5%,when Cys C concentration was 0.8-5.0 mg/L.For A-E and BNⅡ systems, accuracy verification showed that the absolute biases for measuring ERM-DA471 were 0.00,0.00,1.01,-0.01,-0.50 and -0.35 mg/L respectively,and the relative biases were 0%,0%,18.43%,-0.18%,-9.12% and -6.39%respectively.The measurement of CAP external quality assessment materials showed that D and BNⅡ systems had desirable results.The LoB were 0.00,0.00,0.31,0.01,0.10,0.06 and <0.05 mg/L for A-F and BNⅡ systems, respectively.When Hb≤13 g/L and TG ≤28 mmol/L,A,B and BNⅡ systems were not signifi cantly influenced (interference<± 10% ).Other systems were influenced with different levels.The A-F systems correlated well with BNⅡ system,and the correlation coefficients (r)were all>0.975 (P<0.01 ).Compared with BN Ⅱ system,the average deviations were -0.02,-0.10,-0.31,0.05,0.04 and 0.36 mg/L for A-F systems,respectively. Conclusions The maximum bias can reach 1 mg/L when measuring the reference materials for Cys C analysis systems, and the maximum relative bias is 18.43%.The results of PENIA system are lower than those of PETIA system when measuring ERM-DA471 and CAP external quality assessment materials. In a part of analysis systems, analysis performance is not good.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2013(000)012【总页数】6页(P1106-1111)【关键词】半胱氨酸蛋白酶抑制剂C;颗粒增强免疫透射比浊检测系统;颗粒增强免疫散射比浊检测系统;均相溶胶颗粒免疫检测系统【作者】安崇文;李海霞【作者单位】北京大学第一医院检验科，北京100034;北京大学第一医院检验科，北京 100034【正文语种】中文【中图分类】R446.1近年来，国内外研究表明半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C，Cys C)已经成为反映肾小球滤过率功能受损的一个较理想的早期标志物［1-2］。

半胱氨酸蛋白水解酶抑制剂C——一种新型的肾脏功能标志物

半胱氨酸蛋白水解酶抑制剂C——一种新型的肾脏功能标志
物
姚建民
【期刊名称】《实用医技杂志》
【年(卷),期】2009(016)007
【摘要】半胱氨酸蛋白水解酶抑制剂C（cystatin C）是一种低相对分子质量，高等电点的非糖基化碱性蛋白质，在有核细咆内稳定生成，可自由通过肾小球基底膜，肾小球完全过滤后，经肾小管上皮细胞再吸收及分解，仅少量被排出尿液之中。

由于其生成稳定，与人体肌肉量无关，
【总页数】2页(P549-550)
【作者】姚建民
【作者单位】民航总医院,100123
【正文语种】中文
【相关文献】
1.半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在糖尿病患者肾脏功能评价中的应用 [J], 张明;王喜青;李成;周详;汪静
2.半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在肾脏功能早期损伤评估中的应用 [J], 王文武;涂茹;丛蓉
3.半胱氨酸蛋白水解酶抑制剂减少大鼠心肌细胞凋亡的研究 [J], 解强;高文卓;李潞
4.半胱氨酸蛋白酶抑制剂C-一种新的儿童肾小球滤过率的内源性标志物 [J], 李朝霞;黄美莲;梁敏坚;陈忠成
5.血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在肾脏功能评价中的优点及其应用 [J], 黄光华;阎有功
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

评估肾小球滤过率的敏感指标_CysC

血清胱抑素C：评估肾小球滤过率的敏感指标本文来自《中华检验医学网》自从1985年以来，半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (cystatin C)已被视为检测肾功能的良好标志物，由于其不受许多生理病理因素的影响，同肾小球滤过率(GFR)的其他标志物相比具有众多优越性。

cystatin C在一系列生理病理过程中也发挥着作用，有重要的临床意义。

一、肾功能评价和肾功能标志物临床评价肾脏疾病进展和严重程度，一般以肾功能为参考，肾功能一般以肾小球滤过率（GFR）反映。

它是反映肾功能最重要的指标。

GFR指在一定时间内通过肾小球的血浆量（定义为在单位时间内肾脏将若干容积血浆内的物质从体内清除，其单位一般为ml/min物质）。

它不能直接测定，必须借助某物质的肾清除率来反映。

根据GFR标志物来源，分外源性和内源性。

外源性标志物包括菊粉 ( inulin )、碘海醇( iohexol )、51Cr-EDTA、99mTc-DTPA等。

内源性标志物包括血清肌酐 ( Scr )、尿素( Urea )、β2-微球蛋白（β2-MG ）、β-痕迹蛋白(BTP)以及血清胱抑素C ( Cystatin C，Cys C )。

二、肾小球滤过率检测现状1、外源性标志物肾清除率测定方法被视为GFR评判的“金标准”，但存在许多不足。

首先这些物质费用昂贵；其次同位素标记的物质涉及放射暴露问题；另外标本采集、实验操作烦琐；碘海醇测定需要特殊仪器设备（射线荧光光谱仪）；加之受年龄、性别和体表面积的影响，尤其是无法实现危急患者检测的及时性，从而限制其在临床的应用。

2、内源性标志物是在评价肾小球滤过功能实验中最常用的指标。

理想内源性标志物应具备：⑴ 稳定的生成率；⑵ 稳定的血浓度，不受其他病理变化的影响，不与蛋白结合；⑶ 肾小球自由滤过；⑷ 肾小管不分泌、不重吸收；⑸ 无肾外清除。

目前常用的指标为血清肌酐( Scr )、尿素( Urea )、内生肌酐清除率( Ccr )，但由于受许多肾外因素，如年龄、性别、身高、肌肉量、膳食结构、机体疾病状况、药物等，以及肾小管对肌酐的分泌等影响，使这些指标不能满足内源性标志物的要求。

血清胱抑素C(CySC)—生化检测项目

血清胱抑素C（CysC）
一、检测原理
样品中的CysC与胶体金颗粒增强的抗胱抑素C抗体特异性反应，形成免疫复合物，在546nm波长处检测其吸光度的变化，与通过同样处理的校准品比较，即可计算出样品中CysC的含量。

二、参考区间
血清：0.5—1.0mg/L
三、临床意义
1、胱抑素C是一种半胱氨酸蛋白酶的抑制剂
2、胱抑素C是反映肾小球滤过功能的可靠指标，胱抑素C 浓度几乎不受蛋白质，肌酸，饮食，身高，体重，年龄等因素影响，所以干扰因素比较少一些。

3、胱抑素C和肾小球滤过率呈线性相关，反应肾小球功能损伤的时候敏感性比较高，显著优于血尿素氮，血肌酐和内生肌酐清除率测定，可以作为肾小球滤过功能的首选的指
标。

人胱抑素C(CysC)说明书

人胱抑素C（CysC）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胱抑素C（CysC）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胱抑素C（CysC）水平。

用纯化的人胱抑素C （CysC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胱抑素C（CysC），再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的胱抑素C（CysC）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人胱抑素C（CysC）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：900μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

五种胱抑素C（半胱氨酸蛋白酶抑制剂c）试剂的方法学性能评价

五种胱抑素C试剂的方法学性能评价赵世巧陈忠余* 梁华郭广波孙伟（重庆市中医院检验科，400021）摘要：目的对五个不同厂家血清胱抑素C(CysC)检测系统的分析性能进行评价和验证。

方法采用美国雅培C16000全自动生化分析仪与五个不同厂家胱抑素C试剂组成的检测系统测定血清胱抑素C，评价的方法学性能指标为精密度、线性、抗干扰性及偏倚。

结果CysC浓度在0.9～7.1mg/L时，各厂家试剂总不精密度（CV）＜6%。

在0.6～5.6mg/L浓度范围，各厂家均有良好的线性范围。

血清中一定浓度的胆红素、血红蛋白和乳糜物对五个厂家的CysC的测定结果产生不同程度的影响，但与厂家声明相符。

除利德曼外各厂家的偏倚均<15%。

结论五个厂家CysC 试剂的主要分析性能：精密度、线性、抗干扰性、偏倚的验证结果与厂家声明基本一致，但利德曼试剂测定结果与Randox质控品存在偏差。

【关键词】胱抑素C；分析性能；评价Methodology p erformance evaluation on five kind s of Cysteine proteinase inhib itors C reagent kits.(ZHAO Shi-Qiao,CHEN Zhong-Y u,LIANG H ua,Department of clini cal laboratory, Hospital of traditi onal chinese medi cine of Chongqing,China,400021)Objective To eval uate and veri fy the analyti c performance on five kinds of Cysteine proteinase inhibitors C(Cys C) reagent kits. M ethod s Cys C was detected by Abbott C16000 automati c biochemi cal anal yzer and f ive kinds of Cys C reagent,The preci sion,lineari ty,interference and bias of five testi ng systems were analyzed. Results The total CV of the samples that contain 0.9～7.1mg/L were all less than 6%.Within the range 0.6～5.6mg/L,five kinds of reagent ki ts showed good linearity.The detecti on outcome was i nterfered to vari ous degree by bilirubin,haematogl obin and chyle,but the i nterference was consistent wi th manufa cturer’s cl aimed.The others four kinds of reagents of bias were l ess than 15%,except for LEADMAN reagent. Conclusion The primary analyti c performance veri fi cation results of five manufacturer i ncl uding the preci sion,lineari ty,i nterference and bias are consi stent wi th the analyti cal performance defi ned by manufacturer,but there was bias between the results of LEADMAN and Randox control material s.【K ey word s】Cysteine proteinase inhibi tors C；A nalyti c performance;Evaluation为保证质量，临床实验室在建立或引进新的检验项目时，应对检测方法的基本性能进行评价，证实其能够满足临床预期用途【1，2】。

人半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（CST4）参考范围

人半胱氨酸蛋白酶抑制剂S（CST4）参考范围
CST 4是一种分泌蛋白，可与半胱氨酸酶结合，抑制细胞内外半胱氨酸酶的活性，阻止细胞外基质的水解，属于半胱氨酸酶抑制剂。

CST 4基因和蛋白在胃肠道癌组织中异常高表达，在正常胃肠组织中低表达。

CST 4蛋白在胃癌和结直肠癌患者血清中的表达也异常高，而在正常组织中的表达较低。

因此，血清中CST 4浓度的定量检测可作为胃肠道癌的肿瘤标志物。

日常生活中患者需要注意饮食，饮食清淡，低盐，注意休息，不要熬夜。

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、肌酐及改良MDRD方程在糖尿病肾功能损害中诊断价值的研究

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、肌酐及改良MDRD方程在糖尿病肾功能损害中诊断价值的研究赵金玲;周宏博;刘立峰;郑慧丽【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2009(024)003【摘要】目的比较血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C)、肌酐(Scr)和改良后的肾病预后膳食改良试验(modifica tion of diet in drsease,MDRD)方程估算肾小球滤过率(eGFR)对糖尿病肾功能损害的诊断价值.方法 Cystatin C采用颗粒增强免疫透射比浊法,Scr采用碱性苦味酸动力学法.结果 247例糖尿病患者,各期Cystatin C,Scr随eGFR的下降逐渐升高,各期水平差异显著.Cystatin C,Scr与eGFR的相关系数分别为-0.8539,-0.7409,二者间差异有统计学显著性意义(P＜0.01).ROC曲线下面积(AUC)分别为0.962,0.987,差异无统计学意义(P=0.10),Cystatin C最佳诊断点为1.39 mg/L.结论 Cystatin C是反映糖尿病肾病肾功能损害的良好指标,敏感度高于Scr,如与eGFR结合,可作为早期诊断的依据.MDRD方程适用于Scr正常及增高患者eGFR的估算.【总页数】3页(P52-54)【作者】赵金玲;周宏博;刘立峰;郑慧丽【作者单位】哈尔滨医科大学基础医学院,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学基础医学院,哈尔滨,150086;齐齐哈尔市第一医院检验科,黑龙江齐齐哈尔,161005;齐齐哈尔市第一医院检验科,黑龙江齐齐哈尔,161005【正文语种】中文【中图分类】R587.2;R446.112【相关文献】1.血尿素氮、血肌酐与血清胱抑素C联合检测对肾功能损害程度的诊断价值研究[J], 付玉华;菅建国2.血清胱抑素C和尿微量白蛋白在老年2型糖尿病早期肾功能损害监测中的临床研究 [J], 胡健;江映红;刘凌;王琛伟;田璐3.糖尿病肾病患者血浆中VCAM-1、MIF、SFRP-5含量与肾功能损害的相关性研究 [J], 杨志;张骥;唐立萍4.尿液足细胞标志蛋白在糖尿病患者早期肾功能损害中的诊断价值 [J], 陆中奎;侯有矶;邓勇莹5.2型糖尿病肾功能损害与颈动脉内-中膜厚度的关系研究 [J], 郑美月因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的临床应用

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的临床应用摘要：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（cystatin C）是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员之一，由机体所有有核细胞产生，产生速率稳定，可用于评价肾小球滤过率(GFR)。

它能敏感反映早期肾功能损害，可用于肾脏透析、糖尿病肾病、肾移植和肿瘤患者肾功能的监控。

关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂；肾小球滤过率；肌酐半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)，又称为胱抑素C、γ-微球蛋白，属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员之一，自从1985年以来，cystatin C已被视为检测肾功能的良好标志物，由于其不受许多生理病理因素的影响，同肾小球滤过率(GFR)的其他标志物相比具有众多优越性。

cystatin C在一系列生理病理过程中也发挥着作用，有重要的临床意义。

本文对其临床应用作一综述。

1 cystatin C的生物学特性1.1 结构和基因半胱氨酸蛋白酶是一种淀粉生成酶，主要存在于小动脉壁，产生淀粉样物质。

而cystatin C是半胱氨酸蛋白酶的细胞外抑制剂，在cystatin 中含量最为丰富，并对细胞内蛋白的转换起作用。

cystatin C又称γ-微量蛋白( γ-trace)或后γ-球蛋白(post-γ-globulin)，它是由120个氨基酸构成的非糖基化的碱性蛋白，相对分子质量低(13．26×1 03)[1]，与木瓜蛋白酶、二肽酶、组织蛋白酶有很高的亲和力[2]。

编码cystatin C的基因位于染色体20pl1，长约4．3kb，包括3个外显子和2个内含子。

研究表明cystatin C基因属于管家基因[3]，但是与含有CAAT盒的经典看家基因有所不同，它的启动子在转录区域没有CAAT盒，存在GGGCGG区带和富含AT序列[4]，所含GATAAA位点与转录因子结合位点2D相似，同时也是转录因子AP一2(activator protein 一2，激活蛋白)和MEP一1(metal element protein一1金属组成蛋白一1)的结合位点[5]。

人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)

人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。

本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。

用途：用于人血清、血浆及相关液体样本中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）的水平。

向预先包被了人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）单克隆抗体的酶标孔中加入半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC），温育；洗涤后，加入HRP标记过的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）抗体。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅与样品中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CysC）的浓度呈正相关。

试剂盒组成需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。

2．标准规格酶标仪。

3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

3．建议所有标准品、样本都做双份检测。

如标本中待测物质含量过高，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再按说明书操作进行测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

5．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6．不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

7．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与肾脏病理改变的相关性分析

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与肾脏病理改变的相关性分析吴春林【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2012(027)009【摘要】目的通过探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、血清肌酐(SCr)与一些重要肾脏病理改变及临床指标的相关性,为Cys C的临床应用提供更多的循证医学证据.方法随机抽取260例肾活检患者,分别分析患者的Cys C、SCr与肾脏病理损害程度(全球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化)评分、年龄、血红蛋白(Hb)的相关性.将患者按全球硬化0~4分划分为5组;按肾小管萎缩0~3分划分为4组;按间质纤维化0~3分划分为4组,再分别比较各病理组间Cys C及SCr的变化.结果 Cys C与SCr、全球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化、年龄均呈明显正相关(r分别为0.850、0.471、0.592、0.610、0.197,P均＜0.01);SCr与全球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化均呈明显正相关(r分别为0.501、0.595、0.607,P均＜0.01),但SCr与年龄无相关性(r=0.118,P＞0.05);Cys C、SCr均与Hb呈明显负相关(r 分别为-0.448、-0.369,P均＜0.01).各病理组间Cys C及SCr水平差异均有统计学意义(P均＜0.01),随着病理损害程度的增加,各组Cys C及SCr水平也随之增加;当病理损害程度达到1~2分(＜50%)时,大多数患者Cys C水平达到或超出参考范围上限,而大多数患者SCr水平仍在参考范围内.结论 Cys C与SCr均能较好地反映患者的肾脏病理损害及肾功能状况,Cys C评价早期肾损伤的敏感性要优于SCr,但两者均存在影响因素.因此在选择评估肾功能的指标时应以患者存在的影响因素为参考,必要时可联合多项指标以提高评估肾功能的准确性.【总页数】4页(P728-731)【作者】吴春林【作者单位】广西壮族自治区南溪山医院肾内科,广西,桂林,541002【正文语种】中文【中图分类】R446.1【相关文献】1.肝硬化及原发性肝癌患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平的改变及其意义 [J], 王坤;房萌;赵琳;蔡美琳;高春芳2.基于不同糖代谢状态下的急性冠脉综合征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与冠脉病变的相关性分析 [J], 祝雪丽; 熊尚全; 詹萍; 林超3.基于不同糖代谢状态下的急性冠脉综合征患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与冠脉病变的相关性分析 [J], 祝雪丽; 熊尚全; 詹萍; 林超4.股骨头坏死患者血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、1型纤溶酶原激活物抑制剂水平及其与骨密度、骨钙素相关性分析 [J], 马超;武晔;张楠;王旭洋;魏金栋5.血清IgA、IgA/C3比值对儿童原发性IgA肾病的诊断价值和肾脏病理的相关性分析 [J], 王嘉;丁娟娟;栾江威;戚畅;祝高红;江倩倩;刘黎黎;王筱雯因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C重组蛋白的制备

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C重组蛋白的制备张超;李小鹏;张传宝【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2022(40)8【摘要】目的构建半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)原核表达载体,用以快速获取低成本、高浓度、高纯度的CysC纯化蛋白,为制备应用于临床实验室检测的CysC标准物质和质控品奠定基础。

方法用Codon Adaptation Tool将人的CysC编码序列优化为大肠杆菌偏好的密码子序列,再将合成的DNA片段克隆至pET-28a(+)原核表达载体。

将重组CysC表达质粒转化至E.coli BL21感受态中,优化诱导表达条件、确定最优表达条件组合及有效表达序列,并用融合标签对重组蛋白进行纯化。

结果成功构建重组CysC原核表达质粒,明确CysC表达序列,确定异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达浓度、诱导温度等条件,纯化的CysC蛋白可通过临床检测,且稀释倍数与检测浓度间呈现线性关系。

结论成功构建重组CysC的高效原核表达系统,重组CysC蛋白纯度大、浓度高、生产周期短,有望为CysC标准物质和质控品的制备提供物质基础。

【总页数】4页(P567-570)【作者】张超;李小鹏;张传宝【作者单位】北京医院国家老年医学中心国家卫生健康委临床检验中心中国医学科学院老年医学研究院【正文语种】中文【中图分类】R446【相关文献】1.重组人脑利钠肽对急性心力衰竭患者疗效及对血清中半乳糖凝集素3、内皮素1和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的影响2.蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α表达的影响3.蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白对小鼠黑色素瘤血管生成拟态的影响及其机制4.大鼠丝氨酸或半胱氨酸蛋白酶抑制剂B2的表达、纯化及抗体制备5.重组刺桐胰蛋白酶抑制剂的制备及活性鉴定(英文)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。