提高水稻愈伤组织再生频率的研究

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水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究在生产上,水稻作为重要粮食作物之一,其种子萌芽率低,苗期易受病虫危害。

利用愈伤组织诱导快速繁殖优良无性系,可提高水稻抗逆能力,改善品质,促进早熟丰产。

一、实验目的本实验旨在通过愈伤组织液体增殖培养的研究进一步了解植物组织培养技术,并且探索该项技术在农业中应用前景及存在问题。

二、实验原理二、实验材料和方法愈伤组织是由胚状体发育而来的幼嫩器官,具有再生能力强、适应环境广等特点。

愈伤组织的形成机制至今尚未完全清楚,但已知它们均需从外界获取营养才能继续分裂增殖。

而离体培养条件下愈伤组织细胞很难满足这些基本条件,因此人工创造合适的离体条件使愈伤组织不断增殖就显得十分必要。

近年来,许多学者对愈伤组织的培养进行了大量的研究,主要集中于如何建立最佳培养条件和选择最好的愈伤组织类型两个方面。

2。

培养基的配置与灭菌3。

接种4。

培养5。

检查6。

移栽7。

观察记载8。

总结9。

思考题10。

参考文献11。

致谢12。

附录13。

插图14。

表格15。

正文16。

图片17。

表格18。

图示19。

引言20。

实验设计21。

试剂22。

仪器23。

操作24。

结果25。

讨论26。

参考文献27。

后记三、结果与分析1。

愈伤组织的诱导2。

培养基的配置与灭菌3。

接种4。

培养5。

检查6。

移栽7。

观察记载8。

总结9。

思考题10。

参考文献11。

致谢12。

附录13。

插图14。

表格15。

正文16。

图片17。

表格18。

图示19。

引言20。

实验设计21。

试剂22。

仪器23。

操作24。

结果25。

讨论26。

参考文献27。

后记四、讨论根据本次实验得出以下几点: 1。

培养时间越长,愈伤组织的形态也随着变化,愈伤组织开始呈现绿色,逐渐转向褐色,到最终颜色会趋于白色或灰白色。

2。

培养基含糖量的高低直接影响愈伤组织的形成情况,若糖浓度较高,则愈伤组织形成缓慢;反之,愈伤组织容易形成。

3。

愈伤组织形成初期,细胞内的线粒体数量明显减少,核仁缩小,这都说明愈伤组织还没有形成完整的细胞结构。

水稻愈伤分化和再生研究进展

水稻愈伤分化和再生研究进展
要方 法之 一[ _ 8 _ 。
关键词 : 水 稻 ; 愈 伤 组 织 ;组织 培养 ; 转 基 因 ;籼 稻
D0I 编码 : 1 0 . 1 6 5 9 0 / j . c n k i . 1 O ¨ 。 1 - 4 7 0 5 . 2 O 1 6 . 1 1 . 0 5 5
中图 分 类 号 : S 5 1 1
综 述
பைடு நூலகம்
朱克 明 等 : 水 稻 愈 伤 分 化 和 再 生 研 究 进 展
水 稻 愈 伤 分 化 和 再 生研 究 进 展
朱克 明 , 陶慧敏 , 徐 硕 , 端 礼 钦 , 杨 艳华
( 1 . 江 苏大 学生命 科 学研究 院 , 江苏 镇江 2 1 2 0 1 3 ; 2 . 徐 州市 农水 畜禽 产 品质量 检测 中心 , 江苏 徐州 2 2 1 0 0 3 )
响, 以及 调 控 愈 伤 分 化 和 再 生 的 基 因 , 为 今 后 籼 稻 品 种 的 进 一 步遗 传 改 良提 供 理 论 依 据 。
法, 主要 有基 因枪 法 、 P E G法、 电融 合 法 、 农 杆 菌 介 导 法、 花粉 管通 道法 、 激 光介 导 法 和 D NA 吸收 法 。其 中 农 杆菌 介导 法具 有转 基 因低 拷 贝 、 遗 传稳 定 、 能够转 化 大 片段 的 以及 操作 简便 易行 , 成 本低 等优 点 , 已成为 水 稻遗 传转 化 的首选 方 法 , 并 已形成 了较 稳 定 的 转 化体 系, 逐渐 进入 了实 用化 阶段 , 成 为农作 物 品种改 良的重
困难 , 严 重地 制 约 了转 基 因技 术 在 籼稻 中 的应 用 l _ 2 。 ] 。
稻原 生质体 通 过 P E G法 融合 , 部分 水稻 愈伤 组织 能够

影响水稻成熟胚愈伤组织增殖力和再生力的因素

影响水稻成熟胚愈伤组织增殖力和再生力的因素
径 ,是 将 组 织 培 养特 性 控 制 良好 的基 因 转 移 到优 良的背
和再 生力 的影 响
张林 和服部 一 三 在 一个 高愈 伤组 织增 殖力 和一 个低
景中去 。张林” 等对具有不同愈伤组织增殖力的品种进
行 组 织学 的研 究 表 明 ,愈 伤 组 织增 殖 力 的 不 同 是 由于 在 愈 伤 组织 诱 导 培 养 中 ,盾 片 上 皮 细胞 和 愈 伤 组 织 内 的细 胞 分裂 活性 的不 同 引起 的 。
报道 了 1 个控 制高再生 力的显性基 因和 1 个隐性基 因 。 T a k e u c h i t 也于l 9 9 7年报道了一个控制高再生力 的显性
张 林 和 服 部 一 三 还 分 析 了 一 个 高 再 生 力 和 一 个 低 再 生力 的粳 稻 品种 杂 交 后 代 成熟 胚 培 养 愈 伤组 织 的再 生
大量 的实 践表 明 ,不 同 的水 稻 品种 在组 培 特 性 上也 不尽 相 同 ,粳 稻 >籼稻 。
细胞与基 因工程在育种上的运用 ,基础在于一个组
陈璋 等早年研究发现水稻不同基 因型之间成熟胚的
织培养体系是否能高效地形成愈伤组织及再生植株。但 愈伤组织诱导率变幅为 1 0 . 7 1 %~ 7 5 . 7 5 %。证明基因型之 不 同植物或相 同植物的不同品种 ,在这些培养特性上都 间存在遗传差异。 会有很大不同。现 阶段 ,克服这种遗传性 障碍的有效途 2 . 1 基 因 自身显 隐性 对水 稻成 熟胚 愈伤 组 织增 殖 力
愈伤组织增殖力 品种杂交的F 2 群体 中观察到 ,再生率高 和低 的类型在愈伤组织增殖不 良和 良好的个体 中同时存
在 。在 研 究 中 ,大 而黄 的愈 伤组 织 以及 小 而黑 的愈 伤 组

提高籼稻愈伤组织再生频率的研究

提高籼稻愈伤组织再生频率的研究

提高籼稻愈伤组织再生频率的研究
田文忠
【期刊名称】《遗传学报:英文版》
【年(卷),期】1994(21)3
【摘要】为了提高籼稻愈伤组织的植株再生频率,研究了影响再生的各种因素,如:在诱导培养基或继代培养基中加细胞分裂素和萘乙酸(KT、BAP、玉米素或Zip1毫克/升),或加Thidiazuron(0.5毫克/升),以及愈伤组织的部分干燥处理等。

这些措施明显地提高籼稻愈伤组织的再生频率。

结合使用这些处理可使TN1。

【总页数】7页(P215-221)
【关键词】籼稻;组织培养;植株再生
【作者】田文忠
【作者单位】中国科学院遗传研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S511.210.3
【相关文献】
1.影响籼稻愈伤组织再生频率的几个因素 [J], 黄亮群
2.影响籼稻成熟胚愈伤组织植株再生频率的几个因素 [J], 高三基;陈如凯;马宏敏
3.影响籼稻愈伤组织再生频率的若干因素 [J], 王慧中;黄大年;赵培洁;沈志民
4.影响籼稻愈伤组织再生频率的若干因素 [J], 王慧中;黄大年;赵培洁;沈志民
5.提高农杆菌介导的籼稻成熟胚愈伤组织再生频率研究 [J], 周杰;王春台;刘学群;谭艳平
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水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020水稻愈伤组织的诱导一、实验目的1、掌握外植体的消毒方法和接种技术;2、了解愈伤组织诱导的过程。

二、实验原理以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时,在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。

愈伤再经分化培养,通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。

外植体源自自然环境均为带菌状态,在接种前都必须进行消毒。

对于难消毒的材料,有时要几种消毒剂配合使用;对于多茸毛表面粗糙不平的材料,要加展着剂(吐温20)以增强消毒效果。

三、实验材料与用具1、材料:水稻成熟种子(用于诱导愈伤组织);2、试剂:75%酒精,2% NaCLO,无菌水(每组1瓶400mL);3、培养基:诱导培养基:NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L();4、仪器设备:培养室、超净工作台、培养皿(¢9cm)2个、枪形镊、量筒(100mL)2个、三角瓶(50mL、无菌)2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。

四、实验步骤1、接种室、培养基及用具表面消毒用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子,将培养基及用具放工作台,打开紫外灯,照射20分钟以表面消毒。

之后关紫外灯,打开工作台风机,通风30分钟后可进行无菌操作。

2、种子去壳选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子,手工脱去谷壳(注意保持胚完整),每人准备30粒去壳种子,并按照分组放到三角瓶中。

3、操作者双手的清洗与消毒在进入无菌室之前,各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干,然后进入无菌室,坐在超净台前位子上后,用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒,在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。

(注意:酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上!)4、超净台面的表面消毒(以下工作在超净工作台内进行)用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球,仔细把整个超净台面擦试一遍,尽量降低超净台面的带菌量,并将废棉球丢到废液缸中,然后点亮超净台里面放置的酒精灯。

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告实验目的:本实验旨在探究水稻愈伤组织的诱导方法,为将来的水稻遗传改造研究提供参考。

实验材料和仪器:1. 材料:水稻种子、MS培养基、植物生长调节剂2,4-D、生长调节剂TDZ、无菌器具、琼脂、无菌操作室。

2. 仪器:无菌操作台、显微镜、实验室平衡器等。

实验步骤:1. 生物材料准备:选取幼苗期生长良好、品种鲜明的水稻种子作为材料。

将水稻种子进行表面消毒,处理方法为分别用70%的酒精和5%的次氯酸钠(1:1)混合消毒3-5分钟,然后充分清洗。

2. 建立组织培养体系:将消毒后的水稻种子在无菌操作台上进行分离培养。

将种子取出后,从胚乳中取出胚轴,用剪刀消毒后放入含有MS培养基的无菌培养瓶中,置于无菌操作室中进行培养。

在35-37°C下连续培养3-5天。

3. 筛选愈伤组织:将培养2-3天的胚轴等植物试管苗等组织放置在含有不同浓度的2,4-D和TDZ的培养基中,培养10-15天。

筛选出生长具有愈伤能力的组织,采用显微镜等方法进行观察,并进行相应的分离和培养。

4. 愈伤组织的维持和复壮:将筛选出的愈伤组织维持在含有2,4-D和TDZ的培养基中,定期进行转移或分离。

当愈伤组织增生至一定程度后,将其转移到不含激素的培养基中,进行复壮。

实验结果:在实验过程中,我们选择了4个不同浓度的2,4-D和TDZ进行培养,筛选出了愈伤组织,并进行了维持、修复工作。

经过5次转移和增殖培养,我们成功地建立了稳定的水稻愈伤组织体系。

结论:本实验采用的方法可行,成功地建立了稳定的水稻愈伤组织体系。

本研究为今后的水稻遗传改造和抗性育种提供了良好的基础。

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究水稻作为全球最重要的粮食作物之一,在提高粮食产量和提高粮食质量等方面发挥着重要作用。

其中,水稻愈伤组织增殖培养技术是提高水稻品质和产量的重要手段。

本文旨在以水稻愈伤组织液体增殖培养技术为研究对象,探讨其发展状况和应用前景。

水稻愈伤组织增殖培养技术是一种细胞分子生物学方法,是农艺学中植物传粉、植物驯化、植物色素调控、植物基因转移、植物基因组学等方面的重要技术。

水稻愈伤组织增殖培养技术将细胞分离、孢子分级、水稻愈伤组织液体增殖等整合到一起,可以为水稻的基因育种提供可靠的技术支持,实现植物的繁殖效果。

水稻愈伤组织增殖培养技术是基于水稻新品种建立过程中愈伤组织增殖培养技术发展出来的,在水稻品种建设中发挥着不可替代的作用。

水稻愈伤组织增殖培养技术可以有效地在短时间内增加水稻植株的多样性,保证新基因的保留,并且可以有效地实现水稻植株的生长,改善品质和产量等特性。

除此之外,水稻愈伤组织增殖培养技术还可以用于研究与水稻用途有关的诸如产量和品质、耐季节性和病抗性等性状。

水稻愈伤组织增殖培养技术可以有效实现基因突变,还可以用于研究特定基因在植物发育、形态、营养及生理作用上的影响,为研究调控水稻心叶色素的机理提供有力的技术平台。

水稻愈伤组织增殖培养技术的发展为水稻品种改良和新品种选育提供了可靠的技术支撑,有助于改善水稻的品质和效率,提高生产效率和粮食质量,有利于改善水稻的稳定性和耐旱性,促进水稻高产栽培。

今天,随着转基因技术等新技术的出现,水稻愈伤组织增殖培养技术可以与其他技术相结合,形成更加完善的水稻品种建设新体系,更加有效的推动水稻品种改良。

比如,水稻愈伤组织增殖培养技术可以与微小叶色素叶弁转化技术相结合,实现调控水稻叶色素含量,改善水稻品质,提高水稻产量。

总之,水稻愈伤组织增殖培养技术是水稻品种改良和新品种选育的重要技术,为优化水稻品种构建贡献了重要力量,在今后水稻育种工作中具有重要作用。

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究水稻(Oryzasativa)是一种营养丰富、品质优良、种植价值高的重要粮食作物,在世界主要的稻作生产国中占有重要地位。

近几年来,随着水稻栽培技术的改进和植物抗病性的提高,稻作物的产量和品质得到了大幅度的提高。

水稻愈伤组织增殖的研究是水稻基因工程技术研究的热点,它能够提高水稻作物的耐旱性、抗病性和产量,并且可以帮助研究人员开发出更具适应性的品种。

由于水稻组织培养技术的发展,开发愈伤组织液体增殖技术已成为一种可行的途径。

本文旨在探讨水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究。

水稻愈伤组织液体增殖培养的基本技术主要有以下几种:一是采用分离型培养系统,采用碳源或营养素如蔗糖、淀粉等进行培养;二是采用浸渍型培养系统,将愈伤部位浸渍在培养液中提取出细胞和组织;三是采用分神经细胞型培养法,将细胞或组织分为神经细胞、干细胞、干细胞混合物等,进行液体培养;四是采用传代分离型培养法,将愈伤组织的传代细胞进行液体培养。

水稻愈伤组织液体增殖培养的培养液设计利用了一种多维度的培养方法,可以满足不同细胞类型的生长需求,包括营养素,激素,激活剂,矿物质,细胞因子和抗生素等。

此外,培养液中还应加入适量的抑菌剂和调节氧化还原环境的调节剂,以增强液体培养效果。

在实验过程中,我们采用不同类型的培养方法,以及不同制备的培养液,对水稻愈伤组织进行液体增殖培养。

经过一段时间的培养,我们观察到细胞株数量有所减少,而且某些类型的细胞似乎受到抑制。

通过对水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究,我们发现,采用分离型培养系统可以实现水稻愈伤组织液体增殖,而采用浸渍液体增殖培养可以有效控制细胞增殖速率,并减少抑制效应。

此外,我们还发现,培养液的配方和细节设计也会影响液体增殖的结果,因此需要适当的控制。

本文探讨了水稻愈伤组织液体增殖的基本技术、培养液的组成以及实验结果,对水稻愈伤组织液体增殖的未来实验提供了重要的基础信息。

将来,我们还需要深入研究培养条件、培养液成分和加以改进,以提高水稻组织液体增殖的效果,从而提高水稻作物的品质和生产量。

水稻成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生

水稻成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生

e r o n r e a x lns a d rg n rt n pa t w r b an d s c e s l .T e r s l h w d ta mb si i se pa t, n e e e a o l s e e o t e u c sf l h e ut s o e t y c i n i uy s h 2,水稻基 因工程 的基 础技术 , 在水 稻遗传 改 良中具 有重要 的作 用 。因此 , 建
立一个高效再生体系是实现基 因转化 的先决条件。1 5 ,m my 等开始水稻组织培养 , 9 年 A ei 6 a 几十年来 ,
研究者先后从水稻各部位诱导出愈伤组织和再生植株。虽然 , 幼穗、 幼胚、 花粉粒 、 花药愈伤组织诱导率 高, 愈伤组 织质 量好 而受 到青 睐被广泛 用于水 稻 的遗传 转 化 、 品种 培育 中。但 上述 材 料 多受 季 节 限 制 ,
关键词 : 水稻 ; 成熟胚 ; 愈伤组织 ; 再生植株 中图分类号 :5 1 ¥1 文献标 识码 : A 文章编号 :0 1 30 20 )6 8 0 10 —43 (Or o —89— 3 7
CalsI d cin a d P a tRe e e ai n o a u e Emb y si c l n u t n ln g n r t fM t r u o o r o Rie n
123 生根培 养基 ..
以 M 为基本培养基 , S 蔗糖 3 L p .。 O / ,H58 g
1 材料 与 方 法
1 1 材 料 .
供试材料为早锦 1 、 田小町[ 8 号 秋 6]  ̄ 两个水稻品种。
1 2 方 法 .
12 1 愈伤 组 织诱 导培 养基 ..

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告
实验目的:
通过诱导方法获取水稻愈伤组织,为后续的基因转化等实验打下基础。

实验材料和设备:
水稻种子、MS培养基、2,4-D溶液、NaClO溶液、无菌操作
器材、显微镜等。

实验步骤:
1.种子消毒:将水稻种子放入1% NaClO溶液中浸泡10分钟,再用去离子水洗净后,放进无菌操作室中。

2.种子发芽:将消毒后的种子放进含有营养的MS培养基中,
在25℃下进行光照培育。

3.愈伤组织诱导:将发芽后的幼苗从培养基中取出,用无菌水
清洗。

将茎部和叶片等不同部位的组织嫁接在含有2,4-D溶液
的MS培养基上,培养在25℃下、光照下,观察诱导组织的
生长情况。

4.分离愈伤组织:当组织生长到一定大小后,用无菌操作器材
将组织用无菌剪刀分离下来。

5.愈伤组织培养:将分离出的愈伤组织放入含有NAA、BA、MS培养基中进行培养。

结果分析:
在诱导的茎部和叶片等不同部位,均出现了白色愈伤组织的诱导生长。

经过分离和培养,得到了纯化的愈伤组织。

通过显微镜观察发现,愈伤组织的细胞间隙变窄,胞间质增多,中心细胞数量增多,细胞核增大,一些细胞内的小器官也出现转化现象。

结论:
通过2,4-D溶液的诱导方法,可以在水稻幼苗的不同部位诱导出白色愈伤组织,愈伤组织的分离和培养也取得了成功。

实验结果为后续的基因转化、基因工程等实验提供了基础。

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究林艺【摘要】以MS培养基为基本培养基,采用液体培养的方式,通过调节2,4-D,6-BA 及蔗糖浓度,对粳稻南农4007愈伤组织的增殖进行了初步研究.结果表明:2,4-D浓度在0.0~4.0mg/L时对水稻愈伤组织的增殖和生长有一定的影响, 6-BA浓度在0.2~3.2mg/L、蔗糖浓度在10~50g/L时对愈伤组织增殖生长差异不显著,但当2,4-D为2.0mg/L、6-BA为0.8mg/L,蔗糖为20g/L时,其愈伤组织不论从生长状态,还是增殖速度上都较好且褐化程度相对较轻.适合粳稻南农4007愈伤组织液体增殖培养的基本配方为MS+NAA0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L+水解络蛋白1g/L+蔗糖20g/L+6-BA0.8mg/L.【期刊名称】《安徽农学通报》【年(卷),期】2010(016)011【总页数】4页(P60-62,88)【关键词】水稻;愈伤组织;增殖;液体培养【作者】林艺【作者单位】宿州市农业科学研究所科技管理科,安徽宿州,234000【正文语种】中文【中图分类】S511水稻是生长于沼泽地带由普通野生稻逐渐驯化演变的一种栽培稻,栽培稻属禾本科稻属植物,全球目前稻属植物有20多个种[1]。

水稻是我国乃至全世界的主要粮食作物之一,特别是许多发展中国家人民赖以生存的重要作物[2]。

为了创造新的种质资源,组织培养及基因工程技术被广泛用于水稻育种研究,并取得显著成果[3]。

1965年,Nishi等[4]用稻根的愈伤组织分化出水稻植株,以后又有很多学者进行了相关研究[5-6]。

现代生物技术育种的过程中,愈伤组织经常作为外源基因的受体,因此愈伤组织质量的好坏及其分化植株能力的高低,直接影响着水稻基因工程的进展,也影响着水稻种质资源的创新。

组织培养这一现代生物技术手段,大体包括两大培养方式即固体培养及液体培养,在科研及工厂化生产上根据其需要及研究成本来选择不同的培养方式。

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告

水稻愈伤组织的诱导实验报告水稻愈伤组织的诱导实验报告Prepared on 22 November 2020水稻愈伤组织的诱导一、实验目的1、掌握外植体的消毒方法和接种技术;2、了解愈伤组织诱导的过程。

二、实验原理以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时,在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。

愈伤再经分化培养,通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。

外植体源自自然环境均为带菌状态,在接种前都必须进行消毒。

对于难消毒的材料,有时要几种消毒剂配合使用;对于多茸毛表面粗糙不平的材料,要加展着剂(吐温20)以增强消毒效果。

三、实验材料与用具1、材料:水稻成熟种子(用于诱导愈伤组织);2、试剂:75%酒精,2% NaCLO,无菌水(每组1瓶400mL);3、培养基:诱导培养基:NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L();4、仪器设备:培养室、超净工作台、培养皿(¢9cm)2个、枪形镊、量筒(100mL)2个、三角瓶(50mL、无菌)2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。

四、实验步骤1、接种室、培养基及用具表面消毒用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子,将培养基及用具放工作台,打开紫外灯,照射20分钟以表面消毒。

之后关紫外灯,打开工作台风机,通风30分钟后可进行无菌操作。

2、种子去壳选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子,手工脱去谷壳(注意保持胚完整),每人准备30粒去壳种子,并按照分组放到三角瓶中。

3、操作者双手的清洗与消毒在进入无菌室之前,各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干,然后进入无菌室,坐在超净台前位子上后,用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒,在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。

(注意:酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上!)4、超净台面的表面消毒(以下工作在超净工作台内进行)用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球,仔细把整个超净台面擦试一遍,尽量降低超净台面的带菌量,并将废棉球丢到废液缸中,然后点亮超净台里面放置的酒精灯。

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究近年来,随着科学技术的发展,水稻已经成为全球粮食的主要来源之一。

在水稻研究中,伤口愈合是最重要的课题。

鉴于此,本文旨在通过概述当前水稻愈伤组织液体增殖培养的研究进展,提出水稻愈伤组织对于研究和改良水稻品种具有重要意义。

一、水稻愈伤分化特点及愈伤组织液体增殖特性水稻愈伤特点指的是水稻愈伤的生物学特征。

水稻愈伤分化通常分为三个阶段:初期愈合阶段、肿胀期和成熟期。

在初期愈合阶段,整个植株会出现大量的细胞分裂现象,导致细胞的增殖。

当伤口进入肿胀期时,细胞会开始重新形成组织,包括基质和细胞间蛋白等。

最后,细胞将开始凝固,并形成重建组织,从而形成伤口终末状态。

水稻愈伤组织液体增殖是指当水稻愈伤组织放入混合培养液中,细胞会在混合液中迅速增殖,形成一层粘性的固定生物膜(BFAM),并迅速形成一个完整的植株体。

二、水稻愈伤组织液体增殖技术水稻愈伤组织液体增殖的技术在近些年来发展迅速,基本上可以分为三种技术:液体培养法、水稻愈伤组织培养管理技术和利用薄层液体培养技术改良水稻品种。

首先,液体培养法是指将植物细胞悬浮液放入混合液中,然后将植物细胞分散悬浮,利用液体培养的方法进行培养。

在液体培养的过程中,植物细胞会在适宜的环境条件下快速增殖,从而获得更多的细胞。

其次,水稻愈伤组织培养管理技术是指在研究室里,将水稻愈伤组织放入培养基中,然后在贴膜室内,调整贴膜室环境温度,湿度等参数,提供最佳气候条件,以促进水稻愈伤组织的增殖,进而改良水稻品种。

最后,利用薄层液体培养技术改良水稻品种是指将调配好的培养液放入培养皿中,在适宜的环境条件下,利用薄层液体培养技术,通过不断培养,改良水稻品种,使育种更容易实现。

三、结论水稻愈伤组织液体增殖培养是目前研究水稻愈伤特性的有效技术之一,可以用来改良水稻品种。

伴随着相关技术的不断发展,水稻愈伤组织液体增殖培养技术将成为促进水稻品种改良的重要手段。

水稻愈伤组织诱导与之植株再生培养体系的建立

水稻愈伤组织诱导与之植株再生培养体系的建立

水稻愈伤组织诱导与之植株再生培养体系的建立1:研究的目的和意义1.1:研究的目的1.1.1. 以水稻成熟胚为外植体,寻求一个科学的实验方法,探讨愈伤组织的产生规律。

1.1.2. 用相同的培养方式对不同类型的籼稻品种和粳稻品种成熟胚进行组织培养,比较不同类型的水稻品种成熟胚愈伤组织诱导率之间的差异。

1.1.3. 通过植株再生培养体系,寻求提高水稻成熟胚的再生频率的方法,建立水稻不同种间成熟胚高效的培养体系。

1.2:研究的意义1.2.1. 水稻种子是水稻组织培养研究中使用最早的外植体,与其它外植体相比,种子胚具有再生周期短,再生植株育性好,取材不受生长季节的限制,灭菌容易,外植体均匀,重复性好等优点,因而是一种理想的研究材料。

但种子胚也存在诱导率不高,品种差异明显等限制因素[1]。

为了不断优化该体系的各个环节,人们做了大量研究,有关的研究报道也较多。

杨跃生等[2]以籼稻栽培种成熟胚诱导形成的愈伤组织为材料,对影响植株再生的一些因素进行了研究。

发现与N6相比MS培养基中的无机大量成分严重抑制再生植株根系生长,但MS的无机微量成份对诱导植株再生的效果则较明显。

较高浓度的BA利于诱导更多的植株再生,而较低的BA 浓度则利于壮苗和植株根系的形成。

增加诱导培养基或分化培养基中的渗透压和琼脂浓度,维代培养时加入适量的激动素或6-节基氨基嚓吟以及在分化培养基中加入活性炭、玉米素和AgNO3等均可提高水稻愈伤组织的分化成苗率[3]。

另有研究则发现脱水处理能有效促进水稻愈伤组织的植株再生[4-6]。

目前用于作物转基因的外植体,主要有胚性悬浮细胞系,成熟胚愈伤组织,幼胚及其愈伤组织,花药愈伤组织,分生组织盘,萌发的胚!叶或根,茎尖分生组织等,其中成熟胚具有取材方便,不受季节的限制,在转基因研究中有着较为广阔的应用前景,但是到现在为止,适合不同籼稻品种的有效组织培养体系还未建立,特别是釉稻品种成熟胚的组织培养效果很差,因此,严重影响了籼稻基因工程的开展,为此,进行籼稻愈伤组织的高频率诱导,胚性愈伤组织的保持及高频率绿苗分化的研究,是一项极其重要的水稻细胞工程和基因工程研究的基础工作,因此,研究籼稻成熟胚的组织培养特性,建立杂交水稻亲本成熟胚再生体系具有极其重要的理论和现实意义。

水稻愈伤组织的诱导及应用[文献综述]

水稻愈伤组织的诱导及应用[文献综述]

毕业论文文献综述生物工程水稻愈伤组织的诱导及应用一、前言部分1.1 关于水稻愈伤组织的简介水稻是人们重要的食粮之一,由于其基因组小,通过组织培养易获得再生植株等特点而在基因克隆、基因功能验证以及遗传转化等研究方面成为模式植物.生长和分裂旺盛的胚性愈伤组织细胞培养是获得转基因植物的最好来源.因此,建立一个高效再生体系是实现基因转化的先决条件[1].近年来,研究者先后从水稻各部位诱导出愈伤组织和再生植株.虽然,幼穗、幼胚、花粉粒、花药愈伤组织诱导率高,愈伤组织质量好而受到青睐被广泛用于水稻的遗传转化、品种培育中[2-3].但上述材料多受季节限制,取材不便,阻碍了水稻组织培养的进一步发展.1.2 组织培养所谓的植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基对离体的植物器官组织细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术[4]。

其研究的类型主要包括组织培养、器官培养、细胞培养、及原生质体培养。

随着研究T作的深入进展,上述5个方面的研究理论和技术体系逐渐得到完善促使植物组织培养的应用范围日益广阔延伸。

组织培养作为一种育种技术在水稻等重要粮食作物已广泛应用,并培育出一大批优良品种,自1965年我国开展水稻细胞培养研究后,研究者以水稻幼穗、幼胚、花粉粒和花药为材料进行组织培养研究,取得了较大的进展,尤其是建立起来的水稻胚性悬浮细胞系可作为基闪枪的理想受体,在水稻的遗传转化,品种培育巾具有重要作用。

再如细胞次生代谢物的生产,即通过细胞培养可得到大量合成的植物次生化合物,如生物碱、抗菌剂、利血平、橡胶、类同醇、糖类衍生物、天然色素等很多物质。

远源杂种植物的产生,是指由受精后障碍导致远缘杂交的植物不孕,使得植物的种间和远缘杂交常难以成功。

采用胚的早期离体培养可以使杂种胚正常发育,产生远缘杂交后代,从而育成新物种。

植物的快速繁殖,是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究

水稻愈伤组织液体增殖培养的初步研究近年来,水稻作为重要的农作物,受到了国家和农民的共同重视,在国内几十年来一直是重要的粮食和农产品生产基础。

然而由于愈伤组织液体的迅速增殖,影响了水稻的生长发育和产量,从而引起了国内外科学家们的重视。

因此,为解决水稻的愈伤组织液体增殖问题,本文将对其进行探究和研究,以便为今后的研究提供科学依据。

一、水稻愈伤组织液体增殖的特征1、水稻愈伤组织液体产生的原因水稻愈伤组织液体的产生主要是由于受损部位的局部愈合而引起的,受损的水稻细胞会引起细胞的增殖及分化,从而产生愈伤组织液体。

2、水稻愈伤组织液体的形态特征水稻愈伤组织液体的形态特征主要表现为发白、质地柔软,表面有光滑感。

3、水稻愈伤组织液体的生物学特性水稻愈伤组织液体的生物学特性主要是具有较强的耐热性和抗菌性,可以抑制或杀灭病原微生物,有助于促进组织的修复。

二、水稻愈伤组织液体增殖培养的研究方法1、水稻愈伤组织液体的分离首先将受损的水稻放入可活性溶剂中,如碳水化合物溶液,使其放射状体细胞受到有效振动而脱离,然后用离心机将悬浮液离心分离后的液体即为水稻愈伤组织液体。

2、水稻愈伤组织液体的培养实验中可以采用培养基细胞培养的方法将悬浮液重新培养,以确保悬浮液中细胞有可以繁殖的能力,从而达到提高细胞繁殖效率的目的。

三、水稻愈伤组织液体增殖培养的结论1、水稻愈伤组织液体可以有效地抑制和杀灭病原微生物,从而促进水稻植株的正常生长发育和提高产量;2、水稻愈伤组织液体的分离和培养的研究方法可以有效地提高细胞的繁殖效率,进而改善水稻植物的生长状况;3、在水稻愈伤组织液体增殖培养方面,还需要更多的研究以及对比实验,以便对水稻愈伤组织液体增殖培养的机理有更深入的了解与认识。

综上所述,水稻愈伤组织液体的增殖培养是改善水稻植物生长发育情况的重要手段,但仍需要更多的实验资料和细节深入的分析研究。

此外,未来在进行水稻愈伤组织液体增殖培养的研究时,应该重视培养条件的控制,以及细胞繁殖的时间点的控制,以便准确地得到有效的水稻愈伤组织液体。

提高水稻愈伤组织再生频率的研究

提高水稻愈伤组织再生频率的研究

提高水稻愈伤组织再生频率的研究周玲艳;秦华明;谢俊平;黄天华【摘要】以长时间继代的水稻成熟胚愈伤组织为试验材料,研究激素配比、继代方式、干燥处理和添加物对分化的影响.结果表明,分化培养基中加3 mg/L BA对分化有利;继代培养基中加入3 mg/L ABA,以麦芽糖代替蔗糖,或以甘露醇代替部分蔗糖在一定程度上可以改善愈伤组织状态,提高分化率;干燥处理能明显提高愈伤组织分化率;分化培养中添加一定浓度的AgN03和CuSO4有利于愈伤组织分化.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2006(025)007【总页数】5页(P28-31,35)【关键词】水稻;愈伤组织;继代;分化【作者】周玲艳;秦华明;谢俊平;黄天华【作者单位】仲恺农业技术学院生命科学学院,广东,广州,510225;暨南大学理工学院,广东,广州,510632;仲恺农业技术学院生命科学学院,广东,广州,510225;仲恺农业技术学院生命科学学院,广东,广州,510225【正文语种】中文【中图分类】S5遗传转化是水稻品种改良的重要手段,同时也是基因克隆和功能分析不可缺少的步骤,而进行遗传转化的前提是建立成熟的组织培养和再生体系\[1\]。

水稻组织培养和遗传转化研究的报道很多\[2~5\],但多数研究集中在培养条件和影响因素等方面,对于经过长时间继代培养愈伤组织再生频率的提高报道较少。

水稻遗传转化的受体有愈伤组织、幼穗、幼胚等。

幼穗和幼胚取材受季节限制,且在操作中易污染,因此,许多情况下,先由其诱导获得大量的愈伤组织,再用于遗传转化。

对一些组织培养特性不同的品种来说,由幼穗、幼胚和成熟胚诱导产生的愈伤组织有限,需经过长时间的继代培养才能得到大量的受体材料,且愈伤组织状态的调整也需较长时间,这与长时间继代将降低愈伤组织的再生频率相矛盾。

本研究拟从分化培养基激素配比、愈伤组织的继代培养、干燥处理以及添加附加物等方面,探讨长时间继代愈伤组织分化频率的提高,从而为一些组织培养困难的水稻品种遗传转化频率奠定基础。

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t l tr g n rtቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ o p a e e e a n. n i
Ke r s Ri e C l s S b u u e Di ee t t n y wo d c a u u c h r l f rni i ao
遗传转化是水稻品种改 良的重要手段 , 同时也是基 因克隆和功能分析不可缺少的步骤 , 而进行遗传转化的前 提是建立成熟的组织培养和再生体系 。水稻组织培养和遗传转化研究的报道很多 】但 多数研究集 中在培 】 ,
定浓度的 A N 3 C S 4 g O 和 u O 有利于愈伤组织分化 。 关键词 水稻 愈伤 组织 继代 分化
Su y o h h n e n fRe e eain F e u n y o al si c td n t e En a c me to g n r t r q e c fC l n Rie o u
维普资讯
第2 5卷
第 7期
20 06年 7月
种 子
( ed Se )
提高水稻愈伤组织再生频率 的研究
周玲 艳 秦 华 明 谢 俊 平 黄 天华
(. 1仲恺农业技术学院生命科学学院 广东广州 50 2 ; 2 暨南大学理工学院 125 .
广东广州 50 3 ) 162
2 C lg f c neadtcnl , nvrt o n , u ghu503 ) . o eeo i c n hoo U i sy fia G a zo 62 l se e y g e i j n n 1
Ab t a t T e ef c f h r n , u c l r d a d sc ain t ame ta d s p lme t n r g n r t n o sr c  ̄ h f to omo e s b u t e me i , e ic t r t n n u p e n s o e e e a i f e u o e o ma u e e r o d r e al s s b u u e o o g t n r e w r t d e . e r s l h w d a l ws t r mb y . e i d c l u c h r d fr a ln i i c e e su i d T e u t s o e s f o : v u me i h s o 3 mg L B n d f r n a o d u w sfv r b e frr g n r t n o a u ; d i o f / A ,u r s / A i i e e t t n me i m a o a l e e e ai fc l s a dt n o mg L AB s c o e ii a o o i 3 s b t ue i l s , rs c o e p r a y s b t u e t n n tli u c l r d a i rv d t e sau u s t td w t mat e o u r s a t l u s t td wi ma i s b u t e me i mp o e h tt s i h o i i h o n u o a u n a d ge d e h n e h i e e t t n f q e c ; a t ld sc a o e t n in f a d n fc l s i e r e a n a c d t e df r n i i e u n y p r a e ic t n t a me ts i c n y i - n f a o r i i r g i c e s d t e r g n r t n f q e c f al s a d t n o NO rC S 4i i e e t t n me i m o t b td r a e e e e a i e u n y o l u ; d i o f h o r c i Ag 3 u O d f r n ii d u c n r u e o n ao i
摘要 : 以长时间继代 的水稻成 熟胚愈伤组 织为试验材料 , 研究激素配比、 继代方式 、 干燥处理和添加 物对分化的影响。结
果表 明, 分化培养基 中 3 sLB 加 / A对分化有利 ; m 继代培养基 中加 入 3 gLA A 以麦 芽糖 代替蔗糖 , 以甘露 醇代替 / B , m 或 部 分蔗糖在 一定程度 上可 以改善愈伤组 织状 态, 高分化率; 燥处理能 明显提 高愈伤组 织分化率 ; 提 干 分化培养 中添加 一
养条件和影响因素等方面, 对于经过长时间继代培养愈伤组织再生频率的提高报道较少。 水稻遗传转化的受体有愈伤组织 、 幼穗、 幼胚等。幼穗和幼胚取材受季节 限制 , 且在操作中易污染 , 因此, 许
多情况下 , 由其诱导获得大量 的愈伤组织, 先 再用于遗传转化。对一些组织培养特性不同的品种来说 , 由幼穗、 幼 胚和成熟胚诱导产生的愈伤组织有限, 需经过长时间的继代培养才能得到大量 的受体材料, 且愈伤组织状态的调 整也需较长时间, 这与长时间继代将降低愈伤组织的再生频率相矛盾。本研究拟从分化培养基激素配比、 愈伤组 织的继代培养、 干燥处理以及添加附加物等方面 , 探讨长时间继代愈伤组织分化频率的提高 , 从而为一些组织培 养困难 的水稻品种遗传转化频率奠定基础。
Z o ig a Qi a n Xi J n ig , a gTa h a h u Ln y n , nHu mig , e u pn Hu n i u n
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