纳豆激酶的研究进展与展望
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发酵法生产纳豆激酶的研究进展
1 菌种选育
作为微生物工业化发酵三大技术领域之一的菌 种选育，在微生物药物的发酵生产中有着至关重要 的地位。当前，发酵工业中使用的生产菌株，大部 分都是通过不同的育种技术而得到的具有高产目的 产物的菌株。
使用传统的物理诱变剂和化学诱变剂处理均匀
分散的菌悬液，通过物理辐射和化学试剂能与 DNA 相互作用的特点实现对菌种遗传物质的改变，进而 筛选出少数优良性状的突变株。 1.1.1 紫外诱变
窑 82 窑
农产品加工
2019 年第 6 期
基胍对 T-3 纳豆杆菌处理 20 min，诱变 2 轮，筛选 得到突变株 Y2-1 菌株，其产纳豆激酶活力比原始菌 株提高 14.8%，达到 5 740 IU/mL。 1.1.3 硫酸二乙酯诱变
硫酸二乙酯 （DES） 也属于烷化剂的一种，是一 种 常 见 的 化 学 诱 变 剂 。 许 建 平 等 人 [11]对 枯 草 杆 菌 B826 进行硫酸二乙酯处理，并筛选得到高效稳定的 突变株。
Hale Waihona Puke 中图分类号：Q815文献标志码：A
doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2019.06.062
（1. School of Medicine and Chemical Engineering，Yangling Vocational & Technical College， Yangling，Shaanxi 712100，China；2. China Pharmaceutical University，Nanjing，Jiangsu 211198，China）
2019 年第 6 期
第 6 期 （总第 482 期）
农产品加工
No.6
2019 年 6 月
作为微生物工业化发酵三大技术领域之一的菌 种选育，在微生物药物的发酵生产中有着至关重要 的地位。当前，发酵工业中使用的生产菌株，大部 分都是通过不同的育种技术而得到的具有高产目的 产物的菌株。
使用传统的物理诱变剂和化学诱变剂处理均匀
分散的菌悬液，通过物理辐射和化学试剂能与 DNA 相互作用的特点实现对菌种遗传物质的改变，进而 筛选出少数优良性状的突变株。 1.1.1 紫外诱变
窑 82 窑
农产品加工
2019 年第 6 期
基胍对 T-3 纳豆杆菌处理 20 min，诱变 2 轮，筛选 得到突变株 Y2-1 菌株，其产纳豆激酶活力比原始菌 株提高 14.8%，达到 5 740 IU/mL。 1.1.3 硫酸二乙酯诱变
硫酸二乙酯 （DES） 也属于烷化剂的一种，是一 种 常 见 的 化 学 诱 变 剂 。 许 建 平 等 人 [11]对 枯 草 杆 菌 B826 进行硫酸二乙酯处理，并筛选得到高效稳定的 突变株。
Hale Waihona Puke 中图分类号：Q815文献标志码：A
doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2019.06.062
（1. School of Medicine and Chemical Engineering，Yangling Vocational & Technical College， Yangling，Shaanxi 712100，China；2. China Pharmaceutical University，Nanjing，Jiangsu 211198，China）
2019 年第 6 期
第 6 期 （总第 482 期）
农产品加工
No.6
2019 年 6 月
纳豆激酶分离纯化研究进展
摘 要 纳 豆 激 酶 是 枯 草 芽 孢 杆 菌 发 酵 过 程 中产 生 的 一种 碱 性 蛋 白酶 ， 具 有 较 强 的溶 栓 作 用 。 与其 他 溶 栓 剂 相
比， 纳 豆 激 酶 易被 吸 收 ， 作用迅速 ， 安全 性好 ， 可 做 为 新 型 溶 栓 剂 。 文 中概 述 了纳 豆 激 酶 的理 化 性 质 和 作 用 机 制 ， 着 重 介 绍 了纳 豆 激 酶 的几 种 常 见 的 分 离 纯 化 方 法 ， 包 括柱层析 法、 超 滤法、 萃取 法和 亲和颗粒 法 ， 以 及 集 成 化 分
进纤 维蛋 白的溶 解 。虽 然 纳 豆 激 酶 对 纤维 蛋 白原 不
敏感 ， 但是 对交 联纤 维 蛋 白裂解 起 有 效 促 进 作 用 ， 并
且 能使 纤溶 酶原 激 活物 抑 制 剂 （ Ｐ Ａ Ｉ ． １ ） 失活 ， 通 过 阻 止 血栓 素形 成来 抑制 血小 板 的聚集 … 。 在 血液 中 纳 豆 激 酶 的纤 溶 活 性 能 保 持 ３ ｈ以
的活 性 。
１ 纳 豆 激 酶 的性 质 及 溶 栓 机 制
１ ． １ 纳 豆激 酶的性 质特 点 纳 豆激酶 是纳 豆 在 发 酵 过程 中产 生 的一 种碱 性 丝氨 酸 蛋 白酶 ， 由２ ７ ５个 氨 基 酸 残基 组 成 ， 分 子 质量 为２ ７ ． ７ ｋ ｕ ， 等电点 ｐ Ｉ 值为８ ． ６ 。虽然 纳 豆 激 酶与 丝氨 酸蛋 白家 族 的许 多 枯草 杆菌 蛋 白酶 的序列相 似 ， 并 且 具有 高度 的 同源性 ， 但是 对底 物表 现 出 了明显 的
胶 囊 的涂层 材 料 后 可 提 高 纳 豆 激 酶对 温度 和 ｐ Ｈ 的 稳定 性 。经 过 ５次反 复冻 融 ， 纳豆激 酶 的活性 仍 可 以保 持 在 ９ ５ ％ 以上 ， 表 明冻 融 对 纳 豆 激 酶 的活 性 影
纳豆激酶研究现状
利于 甲亢症 状 的控制 。
（２００８—０３一 ｌ４收 稿 ）
纳豆激酶研究现 状
孙 立 娜
（东 北农业 大学 成栋 学 院 ，１ ５００３０）
摘 要 本 文说 明 了纳 豆激 酶 （ＮＫ）的 溶栓 机 制 ——
以 直 接 溶 解 纤 维 蛋 白 占主 导 地 位 ；综 述 了 ＮＫ 的 理
焦虑 为 甲亢患 者最 常见 和最 突 出 的心理 反应 。因 此 ，在 护理 中必 须重视 心理 因素对 疾 病 的影 响 ，以诱 导 、启 发 、解 释与 自我训 练 等 心 理 治 疗方 法 ，使 甲亢 患者 加 强 自我锻 炼 、训 练其 自我调 控 能力 ，提高 心理 免 疫 与 应 激能 力 ，转 变其 Ａ 型 行 为 ，提 高 情 绪 的兴 奋 阈值 ，减 少应 激现象 发生 ，使 体 内儿茶 酚胺 类 激素 及 甲状腺素水平保持相对稳定 ，对 甲亢预后起到 良 好 的促进 作用 。 ４．２ 重视 甲亢患 者 睡眠质 量 的 改变 甲亢患 者 由 于 甲状腺 激 素水 平增 高 ，作 用 于神经 系 统 ，临床 表现 出失眠 多梦 、精神 紧张 、情 绪激 动 、烦躁 多虑 等 。充分 休 息 和 高质 量 的睡 眠 能 降低 大 脑 皮层 兴奋 性 ，使 甲 亢 患者 神经 兴奋性 降低 ，减 低 甲亢 的高 代谢 消耗 ，以
关键 词 纳豆 激酶 溶栓 发 酵食 品
１９８７年 日本 的 须 见洋 行博 士 从 ２００余 种 食 品
中筛 选 出了 有很 强溶 解 纤 维蛋 白作 用 的钠 豆食 品 ，
并从 其 中提取 纯 化 出这 种 酶 ，由于是 从 纳 豆 中获 得
因 此称 为 纳豆激 酶 （ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ，ＮＫ）Ｌ１］。纳 豆具 有
纳豆及纳豆激酶的研究进展
・２８・
血管、呼吸系统疾病、心脏病，男性占７２％，女性占 ７５％，而且少年儿童由于偏爱肉食及细粮，蔬菜、 粗粮摄取量少以及缺乏户外运动等种种因素，使
万方数据
广东饲料第２２卷第９期２０１３年９月
肥胖儿童也逐年增加，随着我国人口的不断老龄 化和人们对保健食品的需求的增加，纳豆食品在 我国有广阔市场，因此在我国对功能性食品纳豆
将其作为营养食品和调味品，中国人把豆豉用锅炒 后或蒸后作为调味料。 １．２纳豆的营养价值 近年来，经医学家及生理学家等研究表明，纳
栓纤维蛋白的成分，是一种由纳豆菌或纳豆枯草 杆菌产生的碱性丝氨酸蛋白酶，并将其命名为纳
豆激酶（Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ，ＮＫ）。纳豆激酶具有很强的溶 栓作用，甚至要超过尿激酶，而且不会经过胃部分
Ｈａｅｍｏｓｔ，１９９７，７７
豆激酶产品仍需各界的继续努力，从而为血栓患
者更好的服务。 参考文献：
［Ｉ］陈丽娟．纳豆激酶溶解血栓机制［Ｊ］．中国生物工 程杂志，２００３，２３（４）：５３—５６． ［２］段智变，江汗湖，张书霞，等．纳豆激酶纤溶功能极 其机理研究［Ｊ］．食品与发酵工业，２００３，２９（２）：１－５． ［３］付兴，杨志兴．纳豆激酶研究应用［Ｊ］．生物工程进
【摘要】纳豆具有丰富的营养价值，并富含维生素Ｋ！等，可提高蛋白质的消化吸收率，在发酵过程中，可以产生纳豆激酶， 降解纤维蛋白原，并可以将纤维酶原激活为纤溶酶，从而刺激产生纤溶酶原激活剂。纳豆激酶以安全、高效、稳定，且成本较 低、易吸收、副作用小、作用时间长等优点，成为较为理想的保健及溶栓药物之一。本文对纳豆及纳豆激酶做了综述性研究，为
效、易吸收、体内半衰期长的药物方向发展。纳豆 激酶来源于传统发酵食品，生产工艺简单，无副作 用，安全性高，符合治疗血栓病的药品或食品基料
血管、呼吸系统疾病、心脏病，男性占７２％，女性占 ７５％，而且少年儿童由于偏爱肉食及细粮，蔬菜、 粗粮摄取量少以及缺乏户外运动等种种因素，使
万方数据
广东饲料第２２卷第９期２０１３年９月
肥胖儿童也逐年增加，随着我国人口的不断老龄 化和人们对保健食品的需求的增加，纳豆食品在 我国有广阔市场，因此在我国对功能性食品纳豆
将其作为营养食品和调味品，中国人把豆豉用锅炒 后或蒸后作为调味料。 １．２纳豆的营养价值 近年来，经医学家及生理学家等研究表明，纳
栓纤维蛋白的成分，是一种由纳豆菌或纳豆枯草 杆菌产生的碱性丝氨酸蛋白酶，并将其命名为纳
豆激酶（Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ，ＮＫ）。纳豆激酶具有很强的溶 栓作用，甚至要超过尿激酶，而且不会经过胃部分
Ｈａｅｍｏｓｔ，１９９７，７７
豆激酶产品仍需各界的继续努力，从而为血栓患
者更好的服务。 参考文献：
［Ｉ］陈丽娟．纳豆激酶溶解血栓机制［Ｊ］．中国生物工 程杂志，２００３，２３（４）：５３—５６． ［２］段智变，江汗湖，张书霞，等．纳豆激酶纤溶功能极 其机理研究［Ｊ］．食品与发酵工业，２００３，２９（２）：１－５． ［３］付兴，杨志兴．纳豆激酶研究应用［Ｊ］．生物工程进
【摘要】纳豆具有丰富的营养价值，并富含维生素Ｋ！等，可提高蛋白质的消化吸收率，在发酵过程中，可以产生纳豆激酶， 降解纤维蛋白原，并可以将纤维酶原激活为纤溶酶，从而刺激产生纤溶酶原激活剂。纳豆激酶以安全、高效、稳定，且成本较 低、易吸收、副作用小、作用时间长等优点，成为较为理想的保健及溶栓药物之一。本文对纳豆及纳豆激酶做了综述性研究，为
效、易吸收、体内半衰期长的药物方向发展。纳豆 激酶来源于传统发酵食品，生产工艺简单，无副作 用，安全性高，符合治疗血栓病的药品或食品基料
纳豆激酶产品研究现状及其进展
测 定 方 法 进 行 了 综 述 ，同 时 比较 了 纳 豆 激 酶 不 同测 定 方 法 之 间 的差 异 ，对 纳 豆 激 酶 生 产 的 现 状 进 行 了归 纳 ，并 提 出 未 来 纳 豆 激酶 产 品 的开 发 思 路 。
关 键 词 ：纳豆 激 酶 ；生 产 方 法 ；检 测 方 法 ；发 展 前 景 中 图 分 类 号 ：Ｔ ２ １ Ｓ ０ 文 献 标 志码 ：Ａ ｃ ｉ ０３ ６／ｓ ． ７ — ６ ６Ｘ．０ １ ４ ０ ｌ ：１ ． ９ｊｓ １ １ ９４ （） １． ． ６ ｏ ９ ｉｎ ６ ２ ００
Ａｂｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｓ ａ ｅ ｓ ｔａ ｔ ｉ ｐ ｐ ｒ ｕｍｍａ ｉｅ ｋ ｎ ｓ ｆ ｄ ｔ ｃｉ ｎ ｔｏ ｉ ａ ｅ ｃｉｉｙ ｅｈ ｄｓ ｎｄ ｏ ｐ ｒ ｓ ｈ ｒｚ ｓ ｉ ｄ ｏ ｅ ｅ ｔｎｇ ａ ｔｋ ｎ ｓ ａ ｔ ｔ ｍ ｔ ｏ ａ ｃ ｍ ａ ｅ ｔｅｍ，ｄｅ ｃ ｂｅ ｔ ｅ ｅ ｅ ｖ ｓ ｒ ｓ ｈ ｒ ｃ ｎｔ ｉ ｓｔ ｔ ｎ ｉ ｔｏ ｉ ａ ｅ ｐｒｄｕ ｔｏ ｄ ｇｖ ｓｎ ｔｏ ｉ ｉ ｎ ｎａｔｋ ｎ ｓ ｏ ｃ ｉｎ ａ ｉｅ ａ ｔ—ｍａ ｆｃｏ ｅ ｏ ａｕａ ｅ ａ ｖ ｃ ｓｔ ｍ ｐ ｌ ｒｎ ｗ ｔｏ ｐ ｏ ｕｃｓ ｕａ ｏ ｎ ｎｕａ ｔｒ ｓ ｓ ｍｅ ｖ ｌ ｂｌ ｄ ｉｅ ｏ ｅ ｏｄｅ ｅ ｎａｔ ｒ ｉ ｄ ｔ． Ｋｅ ｌ ｓ ｙ ｗｏ ｄ ：Ｎａｔｋｉ ｓ ；ｐ ｏ ｕｃｉ ｍｅｈ ｄ；ｄ ｔｃ ｉｇ ｍ ｅｈ ｄ；ｐ ｒ ｐ ｃｉｅ ｔ ｎａ ｅ ｒ ｄ ｔ ｏ ｎｇ ｔｏ ｅ ｅ ｔｎ ｔｏ ｅ ｅｔ ｓ ｖ
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ａｄ ａ ｅ ｎ ｆＮａｔｋ ｎ ｓ — ｒ ｄ ｃｓ ｓ ａ ｃ ｖ ｎｃ ｍｅ ｔｏ ｔ ｉ ａ ｅ． ｏ ｕ ｔ ｏ ｐ
纳豆激酶的研究进展
纳豆激酶的研究进展程守强,梁凤来,王仁静,刘如林(南开大学生命科学学院,天津 300071)摘 要 纳豆激酶是一种由纳豆菌产生的具有强烈纤溶作用的丝氨酸蛋白酶,与传统的一些溶栓剂相比,其具有安全性好、成本低、口服有效等优点。
就纳豆激酶的理化性质、制备过程、生物学功能、酶活测定方法及分子生物学研究等进行了综述。
关键词 纳豆激酶;纳豆菌;溶栓作用;丝氨酸蛋白酶中图分类号 Q556 文献标识码 A 文章编号 1005-7021(2005)02-0069-06Advance in N attokinase R esearchCHEN G Shou2qiang,L IAN G Feng2lai,WAN G Ren2jing,L IU Ru2lin(Coll.of L if e Sci.N ankai U niv.Tianji ng300071)Abstract Nattokinase is a kind serine proteinase that has strong fibrinolytic action produced by B acillus subtilis (natto).As compared with some traditional thrombolytics,nattokinase possesses the advantages of safety,low cost, and effective by oral administration etc.S ome advances in nattokinase research were reviewed in thispaper,mainly its physiological properties,preparation process,biological functions of dissolving fibrin,assay for enzymatic activity, and molecular biological study.K eyw ords nattokinase;B acillus subtilis(natto);fibrinolytic function;serine proteinase 纳豆激酶(Nattokinase,N K;也称Subtilisin NA T,Subtilisin BSP)是由纳豆菌(B acill us subtilis var.natto)产生的一种具有强烈溶栓功能的蛋白酶,是一种枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)。
纳豆及纳豆激酶的研究进展
１ ． １ 浸 泡 ：大豆 与水 的 比例 为 １ ： ３ ，浸泡 时 间最好 是ｌ ０ ℃时 Ｉ ８ － ２ ０ ｈ ，夏天 一般 为 １ ０ ｈ 。 １ ． ２蒸 煮 ：在高 温灭菌 锅 中 １ ２ １ ℃ ，蒸 煮３ ０ ｍｉ ｎ 。 １ ． ３ 接 种 ：将蒸 制 好 的黄 豆冷 却 至室 温后 ，分装
ｎ ａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ． Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ：ｎ ｏ ｔ ｔ ｏ ； ｎ ａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ； ｈｒ ｔ ｏ ｍｂ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｒ ｏ ｌ ｅ ； ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ｐ ｒ ｏ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ
ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｓ ｕ ｍｍ ａ ｒ ｉ ｚ ｅ ｓ ｔ ｈ ｅ ｐ ｈ ｙ ｓ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｆ ｕ ｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ｎ ａ ｔ ｔ ｏ ａ ｎ ｄ ｎ ａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ． Ｔｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ ｌ ｙ ｉ ｎ ｔ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｒ
ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ． Ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｐ ｒ ｅ ｖｅ ｎ ｔ ｂ ｌ ｏｏ ｄ ｃ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎｇ ，ａ ｎ ｔ ｉ ｃ ａ ｎｃ ｅ ｒ，ｌ ｏ ｗｅ ｒ ｔ ｈｅ ｂｌ ｏｏ ｄ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｕｒ ｅ ａ ｎ ｄ Ｓ Ｏ ｏ ｎ． Ｎａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ｉ ｓ ｆ ｏ ｕ ｎｄ ｔ Ｏ ｂｅ ａ ｓ ｔ ｒ ｏ ｎｇ ｉｂｒ ｆ ｉ ｎｏ ｌ ｙｔ ｉ ｃ Ｅｎｚ ｙ ｍｅ ．Ｔｈ ｅ ｎａ ｔ ｔ ｏ ｂｅ ｃ ｏ ｍｅ ａ ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｈ ｏｔ ｓ ｐ ｏｔ ｏｆ ｎａ ｔ ｕｒ ａ ｌ ｆ ｕｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ ｆ ｏｏ ｄ．Ｔｈｉ ｓ
新型溶栓剂纳豆激酶的研究进展
新型溶栓剂纳豆激酶的研究进展【摘要】纳豆激酶是一种由纳豆菌产生的具有强烈纤溶作用的丝氨酸蛋白酶，与传统的一些溶栓剂相比，其具有安全性好、成本低、经口服后可迅速入血、纤溶活性强、作用时间长等优点。
有望被开发为新一代的口服抗血栓药物。
本文就纳豆激酶的结构、理化性质、活性测定方法，作用机制以及开发现状和应用前景等方面进行了综述。
【关键词】血栓；纳豆激酶；活性测定；溶栓功能【Abstract】 Nattokinase is a kind of serine proteinase that has strong fibrinolytic activity produced by Bacillus subtilis （natto）．As compared with some traditional thrombolytics，nattokinase possesses the advantages of safety，low cost，and effective by oral administration etc．Some advances in nattokinase research were reviewed in this paper，mainly its structure,physicochemical properties, biological function of dissolving fibrin, activity assay method and its prospect.【Key words】 thrombosis；nattokinase；activity assay；dissolve fibrin血栓疾病是一类严重危害人类健康和生命的疾病，包括心血栓、脑血栓、肺栓塞和末梢动静脉血栓等常见疾病。
据估计，全世界有血栓性疾病患者约1500万人，其中每年死于心脑血栓疾病的就高达1200万人。
纳豆激酶的制备与分离纯化研究进展
５％ 、接种量 ８％ ꎬ３４℃ 发酵 ２４ ｈ 的固态发酵工艺条件 １ ４３７������ ３４ ＩＵ / ｍＬꎬ比分批培养提高了 ２１������ ３８％ [１６] ꎮ 赵
下ꎬ纳豆激酶活力可达(４ ０８７������ ８３ ± ９３������ ７５) Ｕ / ｇ[１４] ꎮ
谋明等采用液态发酵方式制备纳豆激酶ꎬ发现添加糙
Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎꎬ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ
ＷＡＮＧ Ｌｅｉ
( Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｅｘｈｉｂｉｔｉｏｎ Ｂｕｒｅａｕꎬ Ｈａｒｂｉｎ １５００９０ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ ｔｈｅ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｏｆ ｈｉｇｈ￣ｙｉｅｌｄ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ ｓｔｒａｉｎｓꎬ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｍｏｄｅ ｏｆ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅꎬ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎꎬ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ������ Ｔｈｅ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｓ������ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅꎻ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄꎻ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎꎻ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
纳豆及纳豆激酶的研究进展
１９９７，３２（５）：２６３． ［１６］ＣＥＳＡＲＯＮＥ ＭＲ，ＢＥＬＣＡＲＯ Ｇ，ＮＩＣＯＬＡＩＤＥＳ Ａ，ｅｔ
ａｌ．Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｖｅｎｏｕｓ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｉｎ ｌｏｎｇ－ｈａｕｌ ｆｌｉｇｈｔｓ ｗｉｔｈ Ｆｌｉｔｅ Ｔａｂｓ：ｔｈｅ ＬＯＮＦＬＩＴ－ＦＬＩＴＥ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ［Ｊ］．Ａｎ－ ｇｉｏｌｏｇｙ，２００３，５４（５）：５３１－５３９．
Ｍｎ、Ｃａ、Ｃｕ 和 Ｚｎ 有一定的抑制作用，Ｋ 和 Ｆｅ 无明 显影响，Ｍｇ 和 Ｃｏ 具有明显的激活作用。该酶的等 电点 ＰＩ 为 ８．６±０．３，最适酶反应 ｐＨ 为 ８，最适反 应温度为 ４５℃。
2.2 纳豆激酶的作用 Ｍａｒｔｉｎ 等（２００２）研究 ２００ 种具有溶纤作用的 物质发现纳豆激酶具有很大潜力。纳豆激酶不但 提高血液的纤溶活性，还可以直接穿透肠壁进入 血液，给大鼠静脉注射纳豆激酶，纤溶能力大大高 于血纤维蛋白溶酶的能力。纳豆激酶也可以通过 刺激血管内壁产生内源纤溶酶原激活剂，进而提 高溶栓能力。研究发现，纳豆激酶具有溶解纤溶酶 原激活剂抑制物的作用，以保证纤溶酶原激活剂 的生理活性。王萍等（２００４）研究表明，纳豆激酶不 会被胃酸及胰蛋白酶降解，且是直接溶解纤维蛋 白；段智变（２００３）建立兔颈动脉血栓模型，观察纳 豆激酶溶解血栓的作用。试验表明，纳豆激酶可以 提高纤溶活性，并能增强抗凝作用。Ｅｓｚｔｅｒ Ｐａｉｓ 等 （２００６）在体外研究了纳豆激酶对血液流变学的影 响，结果显示该酶能够剂量依赖性地使全血低切 粘度和红细胞聚集性下降，改善血流状态和微循 环，抑制血栓形成。毛娜娜等（２００９）建立了大鼠急 性血瘀模型，观察发现纳豆激酶能够明显降低血 瘀大鼠的全血低、中、高切黏度，血浆黏度，红细胞 压积，纤维蛋白原，红细胞聚集指数及电泳指数， 提示纳豆激酶能明显改善血瘀大鼠的血液流变学 指标，具有显著的抗血小板聚集作用。Ｋａｉｄａ 等 （１９９７）报道内皮损伤后附壁血栓的形成与内膜增 厚有关。 2.3 其他作用 另有报道，纳豆激酶中含有可以治疗高血压的 血管紧张素转化酶抑制剂成分，因此可以进一步研 究其在治疗高血压方面的应用。有研究表明，口服 纳豆激酶能明显降低深静脉血栓和肢体水肿的发 生。吴杰忱等（２００３）报道了纳豆激酶在骨质疏松和 糖尿病的预防和治疗中的作用。 ３ 纳豆及纳豆激酶的开发前景 在我国，随着离退休老年人的越来越多，老龄 化 日 趋 严 重 ，在 城 市 人 口 死 亡 原 因 中 ，患 癌 病 、脑 血管、呼吸系统疾病、心脏病，男性占 ７２％，女性占 ７５％ ，而 且 少 年 儿 童 由 于 偏 爱 肉 食 及 细 粮 ，蔬 菜 、 粗粮摄取量少以及缺乏户外运动等种种因素，使
ａｌ．Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｖｅｎｏｕｓ ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ ｉｎ ｌｏｎｇ－ｈａｕｌ ｆｌｉｇｈｔｓ ｗｉｔｈ Ｆｌｉｔｅ Ｔａｂｓ：ｔｈｅ ＬＯＮＦＬＩＴ－ＦＬＩＴＥ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ［Ｊ］．Ａｎ－ ｇｉｏｌｏｇｙ，２００３，５４（５）：５３１－５３９．
Ｍｎ、Ｃａ、Ｃｕ 和 Ｚｎ 有一定的抑制作用，Ｋ 和 Ｆｅ 无明 显影响，Ｍｇ 和 Ｃｏ 具有明显的激活作用。该酶的等 电点 ＰＩ 为 ８．６±０．３，最适酶反应 ｐＨ 为 ８，最适反 应温度为 ４５℃。
2.2 纳豆激酶的作用 Ｍａｒｔｉｎ 等（２００２）研究 ２００ 种具有溶纤作用的 物质发现纳豆激酶具有很大潜力。纳豆激酶不但 提高血液的纤溶活性，还可以直接穿透肠壁进入 血液，给大鼠静脉注射纳豆激酶，纤溶能力大大高 于血纤维蛋白溶酶的能力。纳豆激酶也可以通过 刺激血管内壁产生内源纤溶酶原激活剂，进而提 高溶栓能力。研究发现，纳豆激酶具有溶解纤溶酶 原激活剂抑制物的作用，以保证纤溶酶原激活剂 的生理活性。王萍等（２００４）研究表明，纳豆激酶不 会被胃酸及胰蛋白酶降解，且是直接溶解纤维蛋 白；段智变（２００３）建立兔颈动脉血栓模型，观察纳 豆激酶溶解血栓的作用。试验表明，纳豆激酶可以 提高纤溶活性，并能增强抗凝作用。Ｅｓｚｔｅｒ Ｐａｉｓ 等 （２００６）在体外研究了纳豆激酶对血液流变学的影 响，结果显示该酶能够剂量依赖性地使全血低切 粘度和红细胞聚集性下降，改善血流状态和微循 环，抑制血栓形成。毛娜娜等（２００９）建立了大鼠急 性血瘀模型，观察发现纳豆激酶能够明显降低血 瘀大鼠的全血低、中、高切黏度，血浆黏度，红细胞 压积，纤维蛋白原，红细胞聚集指数及电泳指数， 提示纳豆激酶能明显改善血瘀大鼠的血液流变学 指标，具有显著的抗血小板聚集作用。Ｋａｉｄａ 等 （１９９７）报道内皮损伤后附壁血栓的形成与内膜增 厚有关。 2.3 其他作用 另有报道，纳豆激酶中含有可以治疗高血压的 血管紧张素转化酶抑制剂成分，因此可以进一步研 究其在治疗高血压方面的应用。有研究表明，口服 纳豆激酶能明显降低深静脉血栓和肢体水肿的发 生。吴杰忱等（２００３）报道了纳豆激酶在骨质疏松和 糖尿病的预防和治疗中的作用。 ３ 纳豆及纳豆激酶的开发前景 在我国，随着离退休老年人的越来越多，老龄 化 日 趋 严 重 ，在 城 市 人 口 死 亡 原 因 中 ，患 癌 病 、脑 血管、呼吸系统疾病、心脏病，男性占 ７２％，女性占 ７５％ ，而 且 少 年 儿 童 由 于 偏 爱 肉 食 及 细 粮 ，蔬 菜 、 粗粮摄取量少以及缺乏户外运动等种种因素，使
新 型 溶 栓 剂 纳豆激酶的制备和发展前景共20页
目录
纳豆激酶的介绍 纳豆激酶的反应机理
纳豆激酶的生产工艺流程
纳豆激酶的发展与展望
血栓
是什么导致了这些疾病
血栓是血流在
？ 心血管系统血
管内面剥落处 或修补处的表 面所形成的小 块。由不溶性 纤维蛋白,沉积 的血小板,积聚 的白细胞和陷 入的红细胞组 成。
目前市面上治疗血栓的药物
易导致各种出血，早期表 现有瘀斑、紫癜、牙龈出血、 伤口出血经久不愈甚至还会导 致月经量过多等。
接至斜面培养基
37℃培养18h
37℃、200r/min 接入装有2mL 种子培养基的
培养12h
试管，放到恒温水浴震荡器
将该种子液2mL 转入装有 100mL 种子培养基的摇瓶
37℃、 200r/min 培养12h灌装Βιβλιοθήκη 子的制备转速 260r/min
温度 37℃
空气流量 24L/min
动态 监控
将培养好的摇瓶种子液100mL 在火焰保护 下倒入10L 种子罐中，罐中有5L培养液
出血可发生在任何部位， 特别是泌尿和消化道。而且还 会出现双侧乳房坏死，微血管 病或溶血性贫血以及大范围皮 肤坏疽等。
半衰期长，给药5—7日后 疗效才可稳定，维持量的足够 与否观察5—7日后方能作定论。
新型溶栓剂—纳豆酶素
美国Doctor's Best 纳豆激酶素食胶囊
中奇—纳豆激酶片
纳豆酶素与现有溶栓药物相比：
2019年 世界上第一代富含纳豆激酶 的营养食品由日本生物科学 研究所研制成功并生产上市
1980年 从事溶解血栓药物研究工作 的日本心脑血管专家须见洋 行博士在著名的两点半实验 中发现了纳豆激酶
目前全球纳豆激酶生产公司分布
纳豆激酶协 会
纳豆激酶的介绍 纳豆激酶的反应机理
纳豆激酶的生产工艺流程
纳豆激酶的发展与展望
血栓
是什么导致了这些疾病
血栓是血流在
？ 心血管系统血
管内面剥落处 或修补处的表 面所形成的小 块。由不溶性 纤维蛋白,沉积 的血小板,积聚 的白细胞和陷 入的红细胞组 成。
目前市面上治疗血栓的药物
易导致各种出血，早期表 现有瘀斑、紫癜、牙龈出血、 伤口出血经久不愈甚至还会导 致月经量过多等。
接至斜面培养基
37℃培养18h
37℃、200r/min 接入装有2mL 种子培养基的
培养12h
试管，放到恒温水浴震荡器
将该种子液2mL 转入装有 100mL 种子培养基的摇瓶
37℃、 200r/min 培养12h灌装Βιβλιοθήκη 子的制备转速 260r/min
温度 37℃
空气流量 24L/min
动态 监控
将培养好的摇瓶种子液100mL 在火焰保护 下倒入10L 种子罐中，罐中有5L培养液
出血可发生在任何部位， 特别是泌尿和消化道。而且还 会出现双侧乳房坏死，微血管 病或溶血性贫血以及大范围皮 肤坏疽等。
半衰期长，给药5—7日后 疗效才可稳定，维持量的足够 与否观察5—7日后方能作定论。
新型溶栓剂—纳豆酶素
美国Doctor's Best 纳豆激酶素食胶囊
中奇—纳豆激酶片
纳豆酶素与现有溶栓药物相比：
2019年 世界上第一代富含纳豆激酶 的营养食品由日本生物科学 研究所研制成功并生产上市
1980年 从事溶解血栓药物研究工作 的日本心脑血管专家须见洋 行博士在著名的两点半实验 中发现了纳豆激酶
目前全球纳豆激酶生产公司分布
纳豆激酶协 会
纳豆激酶液态发酵生产的研究进展
血 栓性疾 病 严重 危害 人类健 康 ， 其 发病率 和死 亡 率 居各 种疾 病 之 首 。 据 统 计 ， 目前 全 世 界 每 年 约 有
但 可 以直接 水解 交联 纤维蛋 白 ， 而且 可 以激 活体 内的 尿 激酶 原转 变成 为尿激 酶 ， 刺激 血管 内皮细 胞产生 组 织 型纤 溶 酶 原 激 活 剂 （ ｔ － Ｐ Ａ） ， 间接 地 通 过 降解 和 失
吴 燕 ， 李 英 波 ， 梁 向峰 ， 刘会 洲 ， 肖建 辉ｈ
１ （ 遵 义 医学 院 附属 医 院 ， 医药生物技术研究所 ， 贵州 遵 义 ， ５ ６ ３ ０ ０ ３ ）
２ （ 中国科学院过程工程研究所 ， 中 国科 学 院绿 色 过 程 与 工 程 院 重 点 实 验 室 ， 北京 ， １ ０ ０ １ ９ ０ ）
品 中也 发 现 了 该 酶 。 １ ９ ９ ２年 日本 学 者 Ｎ Ａ Ｋ Ａ ＭＵ ．
Ｒ Ａ 首 次对 纳 豆激 酶 基 因 ａ ｐ ｒ Ｎ进 行 了克 隆 并 对 包 含 调 控序 列 的 １ ４ ７ ３ ｂ ｐ的基 因序 列 全长进 行 了测定 。 该 酶 的分 子量 为 ２ ７ ． ７ ｋ Ｄ ａ ， 是 由２ ７ ５个氨基 酸残 基组
成 的单 链 多肽 酶 ， 在 ｐ Ｈ ７～１ ２的 范 围 内具 有 强 大 的
然而 ， 大 规 模 固态 发 酵 生 产 中存 在 物
料灭 菌 不彻底 ， 生 产周 期 长 ， 生 物 量 浓度 、 ｐ Ｈ、 湿度 等
各项 参数 指标 不 易在 线 检 测 ， 散热 、 发 酵 调 控及 发 酵 终 点等 问题未 能得 到很 好 的解 决 ， 严重 影 响菌体 的生 长 和酶 的产量 ， 并 导致 不 同批 次 的 产量 差 异 大 ， 生 产
纳豆激酶活性和稳定性的研究进展
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｄｒｕｇｓｆｏｒｔｈｅｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎａｎｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒａｎｄｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｓ．ＮＫｉｓ ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍ ｆｏｏｄ，ｉｔｉｓｎｏｎｔｏｘｉｃ，ｈａｒｍｌｅｓｓ，ｌｏｗｃｏｓｔ，ｅａｓｙｔｏｅｘｔｒａｃｔａｎｄｐｕｒｉｆｙ，ａｎｄｈａｓｇｏｏｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓｉｎｔｈｅｆｉｅｌｄｏｆｈｅａｌｔｈｆｏｏｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｔｓａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙａｒｅａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅｅｘｔｅｒｎａｌ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ｗｈｉｃｈｈａｓｂｅｃｏｍｅａｒｅｓｅａｒｃｈｈｏｔｓｐｏｔｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｈｙｓｉｃａｌ，
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００９９７３．２０１９．０７．０３６
ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎＡｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＳｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＮａｔｔｏｋｉｎａｓｅ
ＹＵ Ｘｉａｏｘｉａｏ，ＤＵ Ｈｕｉｃｏｎｇ，ＳＨＡＮＧ Ｈｅｑｉｎ，ＭＡ Ｌｉｎｇｌｉｎｇ，ＬＩＪｉｎｙｉｎｇ，ＹＵＡＮ Ｎｉｎｇ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｅｂｅｉ，Ｃａｎｇｚｈｏｕ０６１１００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎａｔｔｏｋｉｎａｓｅ （ＮＫ）ｉｓｆｏｕｎｄａｎｄｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍ ｎａｔｔｏ，ｗｈｉｃｈｉｓａｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｓｅａｓｏｎｉｎｇｆｏｏｄ． Ｂｅｃａｕｓｅｏｆｉｔｓｓｔｒｏｎｇｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃａｎｄａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ＮＫｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔ
纳豆激酶研究现状及展望
2 纳豆激酶的作用
2.1 预防和治疗血栓病
动物实验和人体试验均已证实，纳豆激酶是一种 安全高效并且具有极强溶栓活性的纤溶酶，且具有传 统溶栓药物无可比拟的优势，如溶栓效果好、药效持 续时间长、安全无毒副作用、成本低、可口服等。纳 豆激酶体外溶栓作用明显。吕伟 [12] 将纳豆激酶与等量 的蚓激酶同时作用于纤维蛋白 - 琼脂糖平板相同时间， 比较两种酶体所产的溶圈直径大小，从而判断体外溶 栓效果。结果表明，等量纳豆激酶和蚓激酶，纳豆激 酶组溶圈直径大于蚓激酶组，说明等量纳豆激酶体外 溶栓效果优于蚓激酶。饶颖竹等 [13] 研究纳豆激酶粗酶 液体外溶栓效果，结果表明，纳豆激酶组溶解血块的 速率明显高于尿激酶组。纳豆激酶良好的体内溶栓作 用也得到许多实验证实。舒敏 [14] 建立大鼠血栓模型并 灌喂不同剂量纳豆激酶，经采血检测和纤维蛋白降解 产物测定证实纳豆激酶具有较强的体内纤维蛋白溶解 活性。健康人群服用纳豆激酶试验结果显示，口服纳 豆激酶后可提高体内纤溶活性 [15]，因此也可证实纳豆 激酶具有预防血栓病的作用。
关键词：纳豆激酶；分离纯化；溶栓；研究进展 Abstract：Nattokinase is a serine proteinase extracted from food natto which is known for its strong fibrinolytic activity. Nattokinase is considered to be a new generation of thrombolytic agentsdue to many advantages, such as easy absorption by the body, long half-life, safety and low cost. This paper focusesd on the purification process, thrombolytic mechanism and prospect of nattokinase in order to provide a theoretical basis for the development of new products. Key words：Nattokinase; Purification; Thrombolysis; Research advance 中图分类号：Q814
2.1 预防和治疗血栓病
动物实验和人体试验均已证实，纳豆激酶是一种 安全高效并且具有极强溶栓活性的纤溶酶，且具有传 统溶栓药物无可比拟的优势，如溶栓效果好、药效持 续时间长、安全无毒副作用、成本低、可口服等。纳 豆激酶体外溶栓作用明显。吕伟 [12] 将纳豆激酶与等量 的蚓激酶同时作用于纤维蛋白 - 琼脂糖平板相同时间， 比较两种酶体所产的溶圈直径大小，从而判断体外溶 栓效果。结果表明，等量纳豆激酶和蚓激酶，纳豆激 酶组溶圈直径大于蚓激酶组，说明等量纳豆激酶体外 溶栓效果优于蚓激酶。饶颖竹等 [13] 研究纳豆激酶粗酶 液体外溶栓效果，结果表明，纳豆激酶组溶解血块的 速率明显高于尿激酶组。纳豆激酶良好的体内溶栓作 用也得到许多实验证实。舒敏 [14] 建立大鼠血栓模型并 灌喂不同剂量纳豆激酶，经采血检测和纤维蛋白降解 产物测定证实纳豆激酶具有较强的体内纤维蛋白溶解 活性。健康人群服用纳豆激酶试验结果显示，口服纳 豆激酶后可提高体内纤溶活性 [15]，因此也可证实纳豆 激酶具有预防血栓病的作用。
关键词：纳豆激酶；分离纯化；溶栓；研究进展 Abstract：Nattokinase is a serine proteinase extracted from food natto which is known for its strong fibrinolytic activity. Nattokinase is considered to be a new generation of thrombolytic agentsdue to many advantages, such as easy absorption by the body, long half-life, safety and low cost. This paper focusesd on the purification process, thrombolytic mechanism and prospect of nattokinase in order to provide a theoretical basis for the development of new products. Key words：Nattokinase; Purification; Thrombolysis; Research advance 中图分类号：Q814
纳豆激酶的研究进展_陈志文
其中第二种假设已经引起关注通过对产生组胺和酪胺微生物的研究发现凡能够降解生物胺的菌珠均无组氨酸酪氨酸苯丙氨酸赖氨酸或鸟氨酸脱羧能力ab的终止ab结束后乳酸菌群体数量并不迅速下降如果不及时采取终止措施乳酸菌就会利用葡萄酒中的氨基酸生成生物胺
S%2I D"， T%I !# !"# D##D，
食品科学
参考文献 ! D " ;
!综述
EF 因此， 生产上应采用接种无 >?$ 活性的乳酸菌进行 @AB C D ， ， 这
也是目前控制葡萄酒中生物胺含量的最为有效的方法。 目前，接种前无须活化的直投式 （ +-)*5. -1%592(.-%1）苹果酸 这使得 @AB 的生产操作大为 G 乳酸菌发酵剂已经商业化生产， 简化， 供生产上接种的菌珠不仅要求有良好的酿造学特性， 而且 还要无 >?$ 活性， 接种优选菌珠进行 A%1H(9+ G B91*2 研究发现， @AB 后的葡萄酒，其生物胺含量显著低于自然 @AB 葡萄酒中的 含量，这可能是因为接种的乳酸菌抑制并消除了葡萄酒中的自 然菌群，也可能是由于接种的乳酸菌降解了自然菌群产生的生 物胺 C E F 。其中， 第二种假设已经引起关注， 通过对产生组胺和酪 胺微生物的研究发现， 凡能够降解生物胺的菌珠均无组氨酸、 酪 氨酸、 苯丙氨酸、 赖氨酸或鸟氨酸脱羧能力 C E F 。 ;I D @AB 的终止 @AB 结束后，乳酸菌群体数量并不迅速下降，如果不及时 采取终止措施，乳酸菌就会利用葡萄酒中的氨基酸生成生物 胺。这就要求在 @AB 结束后立即对乳酸菌进行清除，可以采用 的工艺方法包括
： \ [
K ! L 添加足够的 MND ， @AB 结束后立即调整总 MND 至 !##&: O 较高浓度的 MND 可以抑制葡萄酒 APQ A 或游离 MND 至 "#&: O A 。 的生长， 该方法简单、 最有效， 在生产上广为采用； K D L 尽早下胶、 倒罐、 去酒脚、 澄清或进行瞬间高温灭菌； K " L 在 !E R 左右低温贮酒； K ; L 添加化学抑制剂。美国允许在葡萄酒中添加富马酸
S%2I D"， T%I !# !"# D##D，
食品科学
参考文献 ! D " ;
!综述
EF 因此， 生产上应采用接种无 >?$ 活性的乳酸菌进行 @AB C D ， ， 这
也是目前控制葡萄酒中生物胺含量的最为有效的方法。 目前，接种前无须活化的直投式 （ +-)*5. -1%592(.-%1）苹果酸 这使得 @AB 的生产操作大为 G 乳酸菌发酵剂已经商业化生产， 简化， 供生产上接种的菌珠不仅要求有良好的酿造学特性， 而且 还要无 >?$ 活性， 接种优选菌珠进行 A%1H(9+ G B91*2 研究发现， @AB 后的葡萄酒，其生物胺含量显著低于自然 @AB 葡萄酒中的 含量，这可能是因为接种的乳酸菌抑制并消除了葡萄酒中的自 然菌群，也可能是由于接种的乳酸菌降解了自然菌群产生的生 物胺 C E F 。其中， 第二种假设已经引起关注， 通过对产生组胺和酪 胺微生物的研究发现， 凡能够降解生物胺的菌珠均无组氨酸、 酪 氨酸、 苯丙氨酸、 赖氨酸或鸟氨酸脱羧能力 C E F 。 ;I D @AB 的终止 @AB 结束后，乳酸菌群体数量并不迅速下降，如果不及时 采取终止措施，乳酸菌就会利用葡萄酒中的氨基酸生成生物 胺。这就要求在 @AB 结束后立即对乳酸菌进行清除，可以采用 的工艺方法包括
： \ [
K ! L 添加足够的 MND ， @AB 结束后立即调整总 MND 至 !##&: O 较高浓度的 MND 可以抑制葡萄酒 APQ A 或游离 MND 至 "#&: O A 。 的生长， 该方法简单、 最有效， 在生产上广为采用； K D L 尽早下胶、 倒罐、 去酒脚、 澄清或进行瞬间高温灭菌； K " L 在 !E R 左右低温贮酒； K ; L 添加化学抑制剂。美国允许在葡萄酒中添加富马酸
纳豆激酶的研究进展
在中年人的疾病中，心脑血管血栓疾病是常见的 一种疾病，纳豆激酶作为一种重要的活性物质，在治疗 心脑血管血栓中具有重要的作用。在纳豆激酶研究 中，要加强对其结构、药理学药效以及临床等方面的分 析，加快心脑血管血栓药物研究进度，为纳豆激酶的进 一步开发利用奠定基础。
1 纳豆激酶的历史
纳豆激酶是近年来研究的重点，它是从纳豆中提 取的一种枯草杆菌蛋白激酶，这种激酶主要是在纳豆 的发酵过程中产生的，属于一种活性物质，这种物质在 近年来的心脑血管血栓药物研究中具有重要作用，可 以对心脑血管血栓具有较大的溶栓作用，抵抗胰酶水 解，对于心脑血管血栓疾病的研究具有重大的促进作 用，加之该激酶在人的肠道中能够较好地吸收，且研究 和生产成本较低，越来越受到人们的关注［1］。
纤维蛋白平板法是最早用于活性测定的方法之 一，它是参照尿激酶或组织纤溶酶原激活剂的测活方 法建立的，在测定的过程中，主要是借助对人工血栓平 板的实验进行测定，通过取相关的纳豆激酶的样板，将 其放于人工血栓平板上，借助恒温孵育后利用溶解圈 垂直直径的乘积来表示纤溶活力，这种测定活性的方
式由于操作较为简单，在纳豆激酶的测定中经常使用。 3. 2 纤维蛋白块溶解时间法
纤维蛋白块溶解时间法能够对常见血栓物质（ 如 UK、TPA 以及纤溶酶等） 的活性进行准确测定。测定 温度控制在 2℃ ，按照顺序在试管中分别加入凝血酶、 硼酸生理盐水缓冲溶液、溶液和纤维蛋白原，并将试管 放置在恒温水浴中进行溶解，恒温水浴的温度控制在 37℃ ，这种纳豆激酶活性的测定方式，在进行测定的过 程中由于测定的方式较为简便，同时可以测定较多的 样本，在样本的测定之后，可以对比不同的测定样本， 进而保障测定的质量和水平，同时，在测定过程中要对 温水的温度进行控制，如果水温过高，会影响测定的结 果，因此，在纤维蛋白块溶解时间法中，要加强对测定 过程的监督，并控制好温水的温度。 3. 3 血清板法
纳豆激酶百科
纳豆激酶百科纳豆激酶（natto kinase），又称纳豆酶，是一种由大豆发酵而得到的酶类物质。
纳豆激酶在日本传统食品纳豆中含有丰富，被广泛认为具有多种保健功效。
本篇文章将对纳豆激酶的相关背景知识、发现历程、生物学作用及其与健康的关系进行综述和讨论。
第一节：纳豆激酶的发现与历史纳豆激酶最早是在20世纪初由日本的科学家所发现。
当时，人们在纳豆这种传统发酵食品中发现了一种具有抗凝血活性的酶。
随着研究的深入，人们发现这种酶能够在人体内发挥重要的生理功能。
纳豆激酶的发现引起了科学界的广泛关注，并逐渐成为研究的热点之一。
第二节：纳豆激酶的生物学作用纳豆激酶主要通过调节血液中的凝血系统来发挥作用。
它能够抑制凝血因子（如血小板聚集因子）的活性，从而减少血液的凝结能力，维持正常的血液流动性。
研究还发现，纳豆激酶还具有抗高血压、抗血栓形成、降低胆固醇和改善心血管功能等多种生理功能。
第三节：纳豆激酶与健康的关系纳豆激酶作为一种功能性食品成分，被认为对人体健康有着积极的影响。
临床研究表明，纳豆激酶能够降低血脂、改善动脉硬化、预防血栓形成，对心血管疾病的防治有一定的作用。
此外，纳豆激酶还具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等生物活性，有助于增强免疫力和提高人体的抵抗力。
结语纳豆激酶作为一种具有多种保健功效的重要酶类物质，其研究和应用前景广阔。
然而，目前纳豆激酶的安全性、应用范围和剂量等方面仍需要更多的研究。
相信随着科学技术的发展和人们对健康意识的提高，纳豆激酶将为人类健康作出更大的贡献。
（本文所述内容旨在为读者提供科普知识，不作为医学建议，请在使用纳豆激酶及其相关产品前咨询专业人士意见。
）（字数：500）。
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（ １ ． Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｌ ｉ ｑ ｕ ｏ ｒ ａ ｎ ｄ Ｆ ｏ ｏ ｄＥ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ， Ｇ ｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ Ｏ ４ Ｇ ｕ ｉ ｙ ａ ｎ ｇ５ ５ ０ ０ ２ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｋｅ ｙＬ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙｏ ｆ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ ａ ｎ ｄ Ａｎ ｉ ｍａ ｌ
摘 要： 纳 豆 激酶 主 要是 由枯 草 芽孢 杆 菌 （ Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓ ） 代 谢产 生 的碱 性 丝氨 酸 蛋 白酶 ， 因其 具 有较 强 的溶栓 能 力而 著称 。 与其 他
的大 多溶 栓 剂相 比， 纳豆 激 酶具 有 安全 性 好 、 成本 低 、 易吸 收 、 副 作用 小等 优 点 ， 因此 可用 于 开发 溶栓 药物 。 该 文对 国内外 纳豆 激酶 的 溶 栓功 效 、 理 化特 性 、 发酵工艺、 活性 测 定 、 纯化、 改 性和 产 品进 行 了综述 ， 对 其 当 前研 究 中 的关 键 问题 进 行 分析 ， 并 对未 来 纳 豆激 酶
的研 究方 向进 行 了展 望 。
关键词： 纳豆激酶； 溶栓； 理化 特 性 ； 纯化； 改性 中图分 类 号 ： Ｔ Ｓ ２ ６ ２ ． ３ 文 章编 号 ： ０ ２ ５ ４ — ５ ０ ７ １ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ８ — ０ ０ １ １ — ０ ５ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ １ ８ ８ ２ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ０ ２ ５ ４ — ５ ０ ７ １ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ８ ． ０ ０ ３
专论与综述
３ ６ 卷第８ 期
总第 ３ ０ ６期
・１ １・
纳 豆 激 酶 的研 究 进展 与展 望
高泽鑫 ， 何 腊 平 拙， 刘亚兵 ， 高 冰 ， 李翠 芹 ， 刘涵 玉
（ １ ． 贵州大学 酿酒与食 品工程学 院， 贵州 贵阳 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ； ２ ． 贵州大学 贵州省农畜产 品贮藏与加工重点实验室， 贵州 贵阳 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ； ３ ． 湖北工业大学 生物工程 与食 品学院 ， 湖北 武汉 ４ ３ ０ ０ ６ ８ ； ４ ． 贵 州大学 化学与化工学院 贵州， 贵阳 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ）
Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ｐ ｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ａ ｎ ｄ ｐ ｒ ｏ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｎ ａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ
ＧＡＯ Ｚ ｅ ｘ ｉ ｎ ， ＨＥ Ｌａ ｐ ｉ ｎ ｇ ， Ｌ １ Ｕ Ｙａ ｂ ｉ ｎ ｇ ， ＧＡＯ Ｂｉ ｎ ｇ ， Ｌ Ｉ Ｃｕ ｉ ｑ ｉ ｎ ４ ， Ｌ １ Ｕ Ｈａ ｎ ｙ ｕ
Ｇ ｕ ｉ ｙ ｎｇ５ ａ ５ ０ ０ ２ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｎａ ｔ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ｉ ｓ ａ ｋ ｉ ｎ ｄ ｏ ｆ ａ ｌ ｋ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｒ ｉ ｎ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ｍａ ｉ ｎ ｌ ｙ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｂａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｉ ｓ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｗｅ ｌ ｌ ｋ ｎ ｏ ｗｎ ｆ ｏ ｒ ｉ ｔ ｓ ｓ ｔ ｒ ｏ ｎ ｇ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｂ ｏ ｌ ｙ ｔ ｉ ｃ ｐ ｒ ｏ ｐ ｅ ｒ ｔ ｙ ．
ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｅ ｄ ａ ｓ ａ ｐ ｒ ｏ ｍｉ ｓ ｉ ｎ ｇ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｂ ｏ ｓ ｉ ｓ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｐ ｙ ． Ｉ ｎ ｔ ｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ， ｈｅ ｔ ｈｒ ｔ ｏ ｍｂ ｏ ｌ ｙ ｔ ｉ ｃ ｅ ｉｃ ｆ ａ ｃ ｙ ， ｐ ｂｒ ｓ ｉ ｃ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｐ ｒ ｏ ｐ ｅ ｒ ｔ ｉ ｅ ｓ ， ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ，
Ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｓＳ ｔ ｏ ｒ ｅ＆ Ｐ ｒｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ ｇｏ ｆ Ｇｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕＰ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｇｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｓｉ ｒ ｙ， ｔ Ｇｕ ｉ ｙ ａ ｎ ｇ５ ５ ０ ０ ２ ５ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ３ ． Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｂｉ ｏ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｉ ｒ ｎ ｇａ ｎ ｄＦ ｏ ｏ ｄ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ， Ｈｕ ｂ ｅ ｉ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｙｏ ｔ ｆＴ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ，Ｗ ｕ ｈ ａ ｎ ４ ３ ０ ０ ６ ８ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ４ ． Ｓ ｃ ｈｏ ｏ ｌ ｏ ｆＣ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙａ ｎ ｄＣ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｎｎ ｇ ， Ｇｕ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ，
Ｃｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｍｏ ｓ ｔ ｏ ｆｏ ｈｅ ｔ ｒ ｔ ｈ ｒ ｏ ｍｂｏ ｌ ｙ ｔ ｉ ｃ ａ ｇ ｅ ｎ ｔ ｓ ， ｉ ｔ ｈ ａ ｓ ｇ ｏｏ ｄ ｓ ａ ｆ ｅ ｔ ｙ， ｌ ｏ ｗ ｃ ｏ ｓ ｔ ，ｅ ａ ｓ ｙ ａ ｂｓ ｏ ｒ ｐ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｌ ｏ ｗ ｓ ｉ ｄｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ａ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ａ ｄ ｖ ａ ｎ ｔ ａ ｇｅ ｓ ， ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｂ ｅ