四唑法测定种子生活力

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四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究摘要:为探讨白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑(2,3, 5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法,设置不同浸种时间､不同染色浓度､不同染色时间的正交试验设计,来研究白花前胡种子的生活力测定条件｡结果TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在30 ℃环境下,浸种10 h,采用浓度1 g/L的TTC溶液在35 ℃环境里染色16 h ｡此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法｡关键词:白花前胡;四唑染色法;种子生活力Study on TTC Method for Testing Seed Viability of Peucedanum praeruptorumAbstract: To explore a propel method for testing seed viability of Peucedanum praeruptorum Dunn., the effects of soaking time, 2,3,5-trphenyl tetrazolium chloride(ttc) concentration and staining time of the TTC testing method was studied by orthogonal design. The results showed that the optimum conditions for testing seed viability of P. praeruptorum were soaking seeds at 30 ℃ for 10 h and then staining in 1 g/L TTC solution at 35 ℃for 16 h. TTC method could be used as the standard method for testing seed viability of P. praeruptorum.Key words: Peucedanum praeruptorum Dunn.; 2, 3, 5-Triphenyl tetrazolium chloride test; seed viability种子的生活力是种子质量的重要指标,是种用价值的主要组成部分,它与种子田间出苗率密切相关,是反映种子生命过程中十分重要的特性之一[1]｡种子生活力测定也是快速鉴定种子发芽能力的一种间接方法,准确的生活力测定方法能够真实反映种子的发芽能力,尤其对一些休眠期长的种子更为适用｡由于采用常规的发芽试验来测定发芽力,需要的时间较长;而种子寿命长短各异,为了确定种子是否能用于播种及确定播种量,有必要进行种子生活力的高效率测定｡因此,研究不同种子生活力适宜的测定方法就具有重要意义[2],而且种子生活力的测定是国内外农作物生产上非常重视和关注的内容之一[3]｡前胡为常用的中药材,是伞形科(Umbelliferae)前胡属(Peucedanum L.)植物白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)的干燥根｡具有疏散风热､降气化痰的作用,临床上用于治疗风热咳嗽､痰多,痰热喘满,咯痰黄稠等症｡前胡最早收载于南北朝梁朝·陶弘景的《名医别录》中,被列为中品;以后历代本草均有记载｡白花前胡由于野生资源不足,已经开始了较大规模的栽培;但迄今为止,有关白花前胡种子的质量标准尚未制定,其生活力测定方法的研究报道甚少｡四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法为目前国际上公认的测定种子生活力较好方法,其原理为有生活力的种子胚细胞含有脱氢酶,具有脱氢还原作用,被种子所吸收的无色TTC 接受了活种子呼吸过程中脱氢酶产生的氢,而变成还原态的红色稳定不扩散物质[4],即不溶于水的三苯基甲替,而无生活力的种子则无此反应,故无染色出现,由此可按胚组织的染色情况区分有生活力的种子和无生活力的种子｡试验以白花前胡种子为材料,探讨采用TTC法快速测定白花前胡种子生活力的适宜方法,以期为白花前胡种子质量标准的制定提供技术依据｡1材料与方法1.1种子来源白花前胡种子于2009年11月分别采自湖北省长阳县(其中又分为低海拔点､海拔800 m点､海拔1 400 m点)､湖北省神农架林区､河南省内乡县夏关镇､河南省淅川县桐油镇､广西壮族自治区桂林市､浙江省磐安县､安徽省宁国市等7个不同产地的成熟种子｡1.2TTC染色方法1.2.1TTC溶液配制用去离子水分别将TTC配成1､3､5 g/L浓度的溶液,pH值范围为6.8~7.2,避光保存｡1.2.2浸泡处理取各产地白花前胡种子样品,均为200粒,在30 ℃的自来水里浸泡一定时间,然后用刀片沿种子胚的中心线将种子纵切为二,使其露出胚,以供染色所用｡1.2.3染色将剖开胚的50粒种子放入培养皿中,加入配制好的TTC溶液,放入35 ℃恒温箱中避光染色[5,6],重复4次｡到达规定的染色时间后,取出种子,并用自来水反复冲洗若干次后,用放大镜观察胚着色程度和染色部位,以此判断白花前胡种子生活力强弱｡1.3TTC法最佳测定条件的选择不同植物的种子,用TTC法测定生活力时,其适宜的设置条件各不相同,一般浸种时间､TTC浓度和染色时间对种子生活力测定的影响较大｡为确定白花前胡种子生活力的最佳测定条件,试验选用产地为浙江省磐安县的白花前胡种子,采用正交试验L9(33)设计方法比较各种因素对白花前胡种子生活力的影响｡所选择的各因素､各水平见表1,每50粒种子为1组处理,重复4次｡对试验所得数据采用SPSS 16.0软件进行分析处理,以确定出体现白花前胡种子最强生活力的条件｡1.4不同产地､不同粒径种子TTC法测定的种子生活力比较选择湖北省长阳县(低海拔点､海拔800 m点､海拔1 400 m点)､湖北省神农架林区､河南省内乡县夏关镇､河南省淅川县桐油镇､广西壮族自治区桂林市､安徽省宁国市等6个不同产地的成熟白花前胡种子,分别将其过10目､12目､14目种子筛,得到不同粒径的种子,再分别用TTC法测定白花前胡种子的生活力,进行不同产地､不同粒径种子的生活力比较｡2结果与分析2.1TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件采用四唑染色法测定白花前胡种子生活力的正交试验L9(33)设计结果见表2,所得数据用SPSS 16.0软件进行方差分析的结果见表3｡通过统计分析,可知浸种时间､染色液浓度､35 ℃恒温时染色时间3个因素的P值均小于0.05,说明各因素不同水平间具有显著性的差异,3个因素对白花前胡种子生活力的影响大小排序为染色液浓度>35 ℃恒温时染色时间>浸种时间｡对各试验因素不同水平的种子生活力平均值进行比较,结果如表4｡由表4结果分析可知,浸种时间过长会导致白花前胡种子生活力下降,试验的浸种时间以浸种10 h的白花前胡种子生活力最高,其与浸种时间8､12 h处理的种子生活力差异达到了显著水平(P<0.05);TTC液浓度越高,白花前胡种子的生活力越低,当TTC液浓度为1 g/L时,白花前胡种子的生活力最高,其与3､5 g/L TTC液浓度处理的种子生活力差异达到了显著水平(P<0.05);TTC液染色时间短的白花前胡种子生活力较低,以染色时间16 h的为最佳,其与8､12 h染色处理的种子生活力差异达到了显著水平(P<0.05)｡综上所述,TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为将种子在恒温30 ℃下､于自来水中浸种10 h后,用刀片沿种子胚的中心线纵切为二,取其中胚比较完好的一半放入1 g/L TTC溶液中,35 ℃恒温避光染色16 h｡2.2不同产地､不同粒径对白花前胡种子生活力的影响为进一步考察不同产地､不同粒径大小的白花前胡种子之间生活力的差异情况,选择6个不同产地的种子,并分别将其分为10目,12目,14目3个粒径规格,在前述TTC法最佳条件下测定种子生活力,每50粒为1组,重复3次,测定结果见表5,用SPSS 16.0软件对不同产地和不同粒径的白花前胡种子生活力进行双因素方差分析,结果见表6｡分析结果表明,不同产地的白花前胡种子生活力的差异不显著(P>0.05),而不同粒径的白花前胡种子生活力存在着极显著水平的差异(P<0.01),且生活力高低排序为10目>12目>14目｡3小结与讨论1)试验前期对TTC法测定白花前胡种子生活力的染色温度和TTC液浓度做了简单对比,结果表明,染色温度低于30℃和TTC液浓度高于5 g/L时,白花前胡种子不染色或染色情况极差,故试验考察生活力的温度设置在35 ℃左右,TTC液浓度在5 g/L以下｡2)试验对TTC法测定白花前胡种子生活力进行了正交试验分析,结果表明不同浸种时间,不同TTC液浓度,不同染色时间均对白花前胡种子生活力产生显著的影响｡最佳条件为将种子在恒温30 ℃下自来水中浸泡10 h后,用浓度为1 g/L的TTC液在35 ℃恒温条件下避光染色16 h｡3)试验采取最佳条件测定了不同产地,不同粒径大小的白花前胡种子生活力,并对其进行了双因素方差分析,发现不同产地白花前胡种子生活力的大小并没有明显的地域差异;但不同粒径大小的白花前胡种子生活力差异达到了极显著水平｡导致这种差异的产生,可能是因为胚的大小与种子生活力的强弱具有一定的联系,胚形体大的种子生活力要强于胚形体小的,而TTC法测定生活力是观察种子胚的染色情况,不同粒径大小的种子其胚的大小也存在差异;一般来讲,粒径大的种子胚形体相对粒径比它小的种子胚形体要大一些,所以不同粒径大小的种子的生活力强弱有差异存在｡参考文献:[1] 陈瑛. 实用中药种子技术手册[M].北京: 人民卫生出版社,1999. 34-35.[2] 史周华,张雪飞. 中医药统计学[M].北京:科学出版社,2009. 134-156.[3] 国际种子检验协会(ISTA). 1996国际种子检验规程[M]. 北京: 中国农业出版社,1999.[4] 郭巧生. 药用植物栽培学[M]. 北京:高等教育出版社,2004.52.[5] 喻方圆,唐燕飞.四唑染色法快速测定任豆种子生活力的研究[J]. 种子,2004,23(7):40-42.[6] 沈宇峰,王志安,俞旭平,等. 白术种子生活力测定方法及其与发芽率的相关性研究[J]. 中国中药杂志,2008,33(3):248.。

种子生活力测定PPT

TTC）无色溶液作为指示剂，当其被活种子组织吸
收后，接受活细胞脱氢酶中的氢，被还原成一种
红色的、稳定的、不会扩散的和不溶于水的三苯
甲基臜。根据胚和胚乳组织的染色反应来区分种
子有无生活力。
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【仪器与用具】
玉米种子；单面刀片；放大镜；培养皿等。
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【试剂】
1．磷酸缓冲液：。 2．0.1%TTC：采用磷酸缓冲液来配制。即在上述磷酸缓冲液中溶解准确数量的四唑盐类，配制成所需浓度的TTC溶液。如每 1000mL缓冲液中溶入1g四唑盐类即得1％浓度的溶液。
【实验方法】
1．数取试样
从净种子中随机数取至少200粒
种子，每个重复100粒或少于100粒。
期的休眠种子。
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2．预措预湿
预措是在种子预湿前除去种子的外部附属物（包括剥去果壳），或在种子非要害部位弄破种皮，如水稻脱去内外稃，刺破硬实等。
3．染色前的准备
种子生活力的四唑测定
唐涛爱
化垭农职业中学
【实验目的】
种子生活力是种子质量的重要指标。种子生活力是指种子生命的有无，是种子发芽的潜在能力指标。具有休眠特性的和要快速预测种子发芽能力的种子都要进行生活力测定。学会四唑测定种子生活力的方法。
13
【原

理】
利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（简称四唑，
根据种子构造和胚的位置进行处理。如禾谷种子沿胚纵切，使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来，便可使四唑溶液快
速充分地渗入，供观察鉴定。
4．染色
将准备好的种子样品放入染色盘（培养皿）中，加入四唑溶液完全淹没种子。已经切开胚的种子用0.1％～0.5％的溶液，不切开胚的种子用1％的溶液。达到规定时间或已明显染色时，倒去四唑溶液，用清水清洗。

教案-种子生活力测定(精)

种子室内检验技术教学单元教师手册
教学项目三种子室内检验技术学生手册（学习方案）
任务6：种子生活力测定资讯单
任务4：种子生活力测定实训任务单
室内检测技术任务六：种子生活力四唑测定原始记载表
生活力的生化（四唑）测定原始记载表
检验员：日期：校核人：日期：审核人：日期：
11
教学项目三种子室内检验技术任务6 种子生活力测定考核方案种子生活力检验考核评价表
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室内检测技术任务六：种子生活力四唑测定总考核评价
种子生活力四唑考核评价单
13。

种子生活力的四唑测定在质检中的运用

种子生活力的四唑测定在质检中的运用
景彦彪
（兰州市种子管理站，甘肃兰州７０５３００）
随着种子产业化和信息化的发展，种子生活力快
速测定在种子质量检测和种子贸易中已经显得非常重要。现就种子生活力的四唑快速测定法简述如下，
～～
３２磷酸缓冲液的配置．
为保证四唑的染色效果，要求四唑溶液的ｐ值Ｈ必须在６５～７５范围之内。当四唑溶液的ｐ值不在．．Ｈ这一范围之内时，议采用磷酸缓冲液来配置。首先建配两种母液Ｉ Ⅱ，液Ｉ和母为称取９０７ｇ酸二氢钾．磷８溶于１００ｍＬ蒸馏水中，母液 Ⅱ为称取９７磷酸０．２ｇ４氢二钠溶于１００ｍ０Ｌ蒸馏水中，后取母液Ｉ然２份和母液 Ⅱ ３份混合而成。
２３不受休眠限制．
预湿的目的是使种子加快和充分湿润，软化种皮，方便样品准备和促进活组织酶系统的活化，以提高染色的均匀度，鉴定的可靠性和正确性。４２１缓慢湿润：种子放在纸上或纸问，其缓慢．．将让吸湿。该法适用于那些直接浸在水中容易破裂和损伤的种子，以及已经劣变的种子或过分干燥的种子。４２２水中浸泽：种子完全浸入水中。该法适用于．．将种子直接浸入水中不会造成组织破裂和损伤，不影并响鉴定结果的种子。浸种温度一般采用３０℃的水温。

四唑染色法测定巨紫荆种子生活力

用；有文献报道，京尼平１－β－Ｄ龙胆二糖苷能改善戊巴比妥钠引起的心力衰竭；绿原酸为栀子中主要有机酸酯类成分，具有显著的抗癌作用及保肝利胆作用；西红花苷－Ⅰ、西红花苷－Ⅱ是西红花、栀子中共有的色素类成分，具有去黄疸、利胆及明显的降血脂作用［７］。

本研究通过一测多评的分析方法对栀子药材中６种成分进行测定，为栀子药材中活性成分的多成分、多指标质量控制提供了新模式。

环烯醚萜类化合物是已知栀子药材中的有效成分，２３８ｎｍ为京尼平苷酸、栀子苷、京尼平１－β－Ｄ龙胆二糖苷的最大吸收波长，３３０ｎｍ为酚酸类物质绿原酸常用检测波长，４４０ｎｍ为西红花苷类化合物西红花苷－Ⅰ和西红花苷－Ⅱ最佳检测波长，因此选用２３８、３３０、４４０ｎｍ为检测上述６种成分的波长。

通过比较一测多评法和传统回归方程法所得栀子６种成分含量值，发现两者之间并没有显著差异，且不同实验室、仪器、色谱柱下各有效成分间的校正因子重现性良好，说明在对照品不足的情况下，将一测多评用于栀子中药材多指标质量评价与质量控制是可行的，该方法具有一定的发展前景。

参考文献：［１］王智民，高慧敏，付雪涛，等．“一测多评”法中药质量评价模式方法学研究［Ｊ］．中国中药杂志，２００６，３１（２３）：１９２５－１９２８．［２］朱晶晶，王智民，匡艳辉，等．一测多评法同步测定人参和三七药材中多种人参皂苷的含量［Ｊ］．药学学报，２００８，４３（１２）：１２１１－１２１６．　［３］匡艳辉，朱晶晶，王智民，等．一测多评法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱含量［Ｊ］．中国药学杂志，２００９，４４（５）：３９０－３９４．［４］朱晶晶，王智民，张启伟，等．一测多评法同时测定黄芩药材中４种黄酮类成分的含量［Ｊ］．中国中药杂志，２００９，３４（２４）：３２２９－３２３４．　［５］王智民，钱忠直，张启伟，等．一测多评法建立的技术指南［Ｊ］．中国中药杂志，２０１１，３６（６）：６５６－６５８．［６］杨全军，范明松，孙兆林，等．栀子化学成分、药理作用及体内过程研究进展［Ｊ］．中国现代中药，２０１０，１２（９）：７－１２．［７］孟祥乐，李红伟，李　颜，等．栀子化学成分及其药理作用研究进展［Ｊ］．中国新药杂志，２０１１，２０（１１）：９５９－９６７．凌　敏，杨秀莲，王良桂．四唑染色法测定巨紫荆种子生活力［Ｊ］．江苏农业科学，２０１５，４３（１）：２９５－２９７．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１５．０１．０９８四唑染色法测定巨紫荆种子生活力凌　敏，杨秀莲，王良桂（南京林业大学风景园林学院，江苏南京２１００３７）摘要：为探讨巨紫荆（Ｃｅｒｃｉｓｇｉｇａｎｔｅａ）种子生活力的适宜测定方法，采用四唑染色法，以染色浓度、染色温度、染色时间设计正交试验，研究巨紫荆种子的生活力测定条件。

水稻种子生产技术

种子室内检验
种子生活力测定的方法
1.掌握氯化三苯基四氮唑法（TTC法）原理和技术要点 2.掌握靛蓝染色法测定法的原理和技术要点
一、染色法
1.氯化三苯基四氮唑法（TTC法）四唑测定法是一种世界公认、省时快速、结果可靠的种子生活力测定方法。四唑测定法的原理：有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都会发生氧化还原反应。四唑溶液作为一种无色的指示剂，被种子活组织吸收后，参与活细胞的还原反应，从脱氢酶接受氢离子，在活细胞里产生红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲替。可根据四唑染成的颜色和部位，区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。
3.红墨水染色法 ⑴抽取测定样品：从纯净种子中随机取出四组种子（用对角线法），每组 100粒，此外还要抽取约100粒种子作为后备，以便代替取胚时弄坏的种子。 ⑵浸种：将待测种子在30～35℃温水中浸种（小麦、大麦、籼稻种子6～8h；玉米种子5h左右；粳稻种子2h），以增加种胚的呼吸速率，使显色迅速。
（3）观察鉴定：肉眼，手持放大镜或10～100倍的体视显微镜进行观察。观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。
2.靛蓝染色法此法适用于豆类、谷类、棉花、瓜类和林木等大粒种子的生活力测定。所用试剂为靛蓝（或称靛蓝洋红），分子式为C18H8O2N2（SO5Na）2，系蓝色粉剂，能缓慢溶于水。
靛蓝染色法测定法的原理：有生活力的种子，其活细胞原生质膜具有选择透性，当种子浸入染料后，染料大分子不能进入活细胞内，所以胚部等活组织不能被染料染色，而死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力，故可被染料染色。
测定方法如下：（1）种子预处理：将种子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等种子须先去壳再浸种，浸种时间因种子不同而异，小麦、大麦、大豆、豌豆和向日葵等为3h，燕麦、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6 h，蓖麻、红麻、大麻等7 h、黍8 h、水稻12 h、玉米20 h将充分吸胀去种皮（如双子叶种子），以备染色用。

三种常用检测种子生活力方法比较(1)

植物生理学小论文三种常用检测种子生活力方法的比较班级：09级生物技术2班学号: 20091052258系别: 化学与生命科学系姓名: 孙雪婷日期：2012年5月15日浅谈三种常用检测种子生活力的方法孙雪婷（楚雄师范学院化学与生命科学系楚雄675000）[摘要] 种子活力是种子最重要的生理及生产指标之一，近年来，无论在育种选种方面还是植物生理实验方面都得到广泛关注。

本文基于对种子活力的概念、影响种子活力的因素和种子活力快速测定的最新研究进展为基准, 对TTC法、BTB法及红墨水染色法三种常见种子活力快速检测方法进行了简要综述。

结论：四氮唑染色法是蔓荆子种子生活力测定的最佳方法，生活力与发芽率呈显著的正相关。

关键词：种子活力；TTC法；BTB法；红墨水染色法；研究进展The discussion on three kinds of methods todetect seed vigorSUN-xueting（Chuxiong normal university，chuxiong，yunnan675000，China）Abstracts: The seed vigor is the most important physiological and seed production indexes. In recent years，No matter in selecting seeds breeding or in plant physiology experiments. The seed vigor is widely mentioned This paper based on the concept of the seed vigor influence factors of the seed vigor and the seed vigor rapid determination of the latest research progress Comparition of three kinds of methods to determine seed vigor.Keywords: seed vigor ；Triphenyl Tetrazolium Chloride method；Bromo—thymol blue method; red ink method;research progress种子生活力是检测种子质量最重要的指标之一，它对于种子的发育，萌发，成熟以及成长为植株的潜在能力具有十分紧密的联系。

生活力的四唑测定

第十四章生活力的四唑测定实际工作中如种子贸易时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果种子处于休眠状态则难以通过发芽测定得到结果。

种子生活力测定可以满足这一需要，四唑测定可以测定出休眠种子样品的生活力百分率。

四唑测定方法于1942年由德国的G. Lakon教授发明，第2次世界大战期间传入美国。

随着四唑测定技术的发展，ISTA(国际种子检验协会)于1950年成立四唑测定技术委员会，致力于种子四唑测定技术的发展。

2003年出版《ISTA四唑测定工作手册》，列有120种农业和122种林业种、属的四唑测定方法。

第一节概述一、生活力概念种子生活力（seed viability）是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。

第一节概述二、种子生活力测定的意义1. 可以测定休眠种子的生活力2.快速预测种子发芽能力种子贸易中，常因时间紧迫，不可能采用正规的发芽试验来测定发芽力，这是因为发芽试验所需的时间更长。

林木种子可用生活力代替发芽力。

第一节概述三、四唑染色测定的原理在种子组织活细胞内脱氢酶的作用下，无色的氯化三苯基四氮唑，接收活种子代谢过程中呼吸链上的氢，在活细胞里变成还原态的红色、稳定、不扩散的三苯基甲月替(Triphenyl Formazam)。

可根据四唑染成的颜色和部位，区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。

2，3，5-氯化三苯基四氮唑三苯基甲月替(无色) (红色)第一节概述种子有无生活力主要取决于胚和(或)胚乳(或配子体)坏死组织的部位和面积的大小，而不一定在于颜色的深浅。

颜色的差异主要是将健全的、衰弱的和死亡的组织判别出来。

根据以上理由和所用指示剂，把这种测定称为“局部解剖图形的四唑测定”(topographical tetrazolium test)。

这就是说，是根据种子胚和活营养组织局部解剖染色部位及颜色状况，鉴定种子胚的死亡部分，查明种子死亡的原因。

第一节概述四、四唑测定适用的范围收获后需马上播种的种子；具有深休眠的种子；发芽缓慢的种子；要求估测发芽潜力的种子。

浅析种子生活力的四唑测定

浅析种子生活力的四唑测定作者：吕海忠，李文欣，张丹来源：《种子科技》 2009年第10期在实际工作中时常需要在短时间内掌握种子批的生活力状况，如果此时种子处于休眠状态则难以通过发芽测定得到结果。

种子生活力测定可以满足这一要求，四唑测定可以测定出休眠种子样品的生活力。

四唑测定法于1942年由德国的莱康教授发明，随着四唑测定技术的发展，ISTA（国际种子检验协会）于1950年成立四唑测定技术委员会。

1 生活力概念种子生活力是种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。

2种子生活力测定的意义2.1 可以测定休眠种子的生活力新收获的或在低温贮藏处于休眠状态的种子，播种之前对发芽率低而生活力高的种子，对那些发芽率低和生活力也低的种子，仅用发芽试验测定其发芽率，就不可能测出种子的最高发芽率，就必须进一步测定其生活力，以了解种子潜在发芽能力。

在实际工作中，如果发芽试验末期发现有新鲜不发芽的种子或硬实，进行生活力测定后，就可以根据具体情况做出破除休眠的处理，然后再做发芽试验。

2.2 快速预测种子发芽能力休眠种子可借助于各种预处理打破休眠后，进行发芽试验，但时间较长；在种子贸易中，常因时间紧迫，采用正规的发芽试验来测定发芽率所需时间也较长，这时可用生物化学速测法测定种子生活力，为该批种子的质量状况提供参考依据3 四唑测定适用的范围四唑测定一般适用于下列情况：收获后需马上播种的种子；具有深休眠的种子；发芽缓慢的种子；要求估测发芽潜力的种子。

另外，也适用于测定发芽末期个别种子的生活力，特别是怀疑有休眠时；测定已萌发种子，或收获期间存在的不同类型和加工的损伤（热害、机械损伤或虫蛀等）种子；解决发芽试验中存在的问题，如不清楚不正常幼苗产生的原因或怀疑杀菌剂的处理效果等。

4四唑染色测定的原理生活力测定是应用2,3，5-三苯基四氮唑（简称四唑，1rc）无色溶液作为指示剂，这种指示剂是一种可被种子活组织吸收后，接受活细胞脱氢酶中的氢而被还原成一种红色的、稳定的、不扩散的和不溶于水的三苯基甲月替。

四唑染色法测定唐古特大黄种子生活力的研究

关键词：唐古特大黄；种子生活力；四唑测定
中图分类号：Ｒ２８２．７１文献标志码：Ａ文章编号：１００ｌ一４７０５（２０１３）ｏ５－０１１７０３－
唐古特大黄（ＲｈｅｕｍｔａｎｇｕｔｉｃｕｍＭａｘｉｍ．ｅｘＢａｌｆ．）
粒）种子。
野生资源的锐减，人工栽培成为缓解野生大黄生存压力和提供商品大黄的重要途径Ｊ。在农业生产实践中，大黄主要以种子（植物学中称为 “ 瘦果 ” ）进行繁殖＿４Ｊ。种子质量直接影响药材产量和品质，因而种子
为蓼科（Ｐｏｌｙｇｏｎａｃｅａｅ）多年生草本植物 … ，其干燥根和根茎为大黄药材的主要来源之一，具有泻下攻积，清热
泻火，凉血解毒，逐瘀通经，利湿退黄等功效』。随着
１．２试验方法１．２．１１ＴｒＣ最佳染色条件
子胚的染色效果均具有显著影响，在３Ｏ℃ 黑暗条件下，以０．２０％３３＂Ｃ溶液染色３ｈ为生活力测定的最佳条件；同时，建立
了四唑染色法测定唐古特大黄种子生活力的鉴定标准。
以１号唐古特大黄种子为材料，采用二因素随机区组试验，筛选最佳的ＴＹＣ浓度和染色时间。１ＴｒＣ溶液以磷酸缓冲液配制ｊ，设置浓度为０．１５％，０．２０％，０．２５％，０．３０％４个水平；染色时间设置１、２、３、４、５ｈ５个水平。每处理重复３次，每重复３０粒（６０个半

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究作者：何伶俐,易休,杨旻,陈科力来源：《湖北农业科学》2011年第18期摘要：为探讨白花前胡（ＰｅｕｃｅｄａｎｕｍｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍＤｕｎｎ．）种子生活力的适宜测定方法，采用四唑（２，３，５－氯化三苯基四氮唑；２，３，５-Ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＴＴＣ）染色法，设置不同浸种时间、不同染色浓度、不同染色时间的正交试验设计，来研究白花前胡种子的生活力测定条件。

结果ＴＴＣ法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在３０℃环境下，浸种１０ｈ，采用浓度１ｇ／Ｌ的ＴＴＣ溶液在３5 ℃环境里染色１６ｈ。

此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法。

关键词：白花前胡；四唑染色法；种子生活力中图分类号：Ｓ５６７．７＋９；Ｑ９４５．３4文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）18－3775-03Study on TTC Method for Testing Seed Viability of Peucedanum praeruptorumＨＥＬｉｎｇ－ｌｉ，ＹＩＸｉｕ，ＹＡＮＧＭｉｎ，ＣＨＥＮＫｅ－ｌｉ（School of Medicine / ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎｏｎＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｏｕｒｃｅａｎｄＣｏｍｐｏｕｎｄＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＨｕｂｅｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｗｕｈａｎ４３００６５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｅｘｐｌｏｒｅａｐｒｏｐｅｌｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｅｓｔｉｎｇｓｅｅｄｖｉａｂｉｌｉｔｙｏｆＰｅｕｃｅｄａｎｕｍｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍＤｕｎｎ．，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｏａｋｉｎｇｔｉｍｅ，２，３，５－ｔｒｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ（ｔｔｃ）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｓｔａｉｎｉｎｇｔｉｍｅｏｆｔｈｅＴＴＣｔｅｓｔｉｎｇｍｅｔｈｏｄｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒｔｅｓｔｉｎｇｓｅｅｄｖｉａｂｉｌｉｔｙｏｆＰ．ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍｗｅｒｅｓｏａｋｉｎｇｓｅｅｄｓａｔ３０℃ｆｏｒ１０ｈａｎｄｔｈｅｎｓｔａｉｎｉｎｇｉｎ１ｇ／ＬＴＴＣｓｏｌｕｔｉｏｎａｔ３５℃ｆｏｒ１６ｈ．ＴＴＣｍｅｔｈｏｄｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄａｓｔｈｅｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｅｓｔｉｎｇｓｅｅｄｖｉａｂｉｌｉｔｙｏｆＰ．ｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＰｅｕｃｅｄａｎｕｍｐｒａｅｒｕｐｔｏｒｕｍＤｕｎｎ．；２，３，５－Ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅｔｅｓｔ；ｓｅｅｄｖｉａｂｉｌｉｔｙ种子的生活力是种子质量的重要指标，是种用价值的主要组成部分，它与种子田间出苗率密切相关，是反映种子生命过程中十分重要的特性之一［１］。

快速测定林木种子生活力的方法──四唑法

快速测定林木种子生活力的方法──四唑法王印肖;李秀文;管跃义【期刊名称】《河北林果研究》【年(卷),期】2000(000)0S1【摘要】四唑法是快速测定种子生活力的一种有效方法。

它是根据种子胚部是否染成红色及染色的部位、形状和大小，来判断种子生活力的。

此法简单快速，准确可靠，不受种子休眠期的限制，可在林木种子收购、贮藏、调运及休眠种子的检验中推广应用。

１测定方法１．１取样从纯净种子中随机抽取２５或５０粒为１组，共取４组，即４次重复。

１．２种子预处理为了软化种皮，便于剥取种仁，要对种子进行预处理。

一般种壳较薄，易吸水、剥胚的种子（如油松等），用始温４０℃水浸种２４ｈ即可。

而种壳较厚且深休眠的种子（如核桃、山杏等），要浸种３～６ｄ或更长时间，注意每天换水。

具有硬粒的豆科种子如刺槐，可用始温８０℃水侵种，搅拌，自然冷却２４ｈ。

种皮致密坚硬的种子如沙枣，可用９８％浓硫酸浸种２０～１２０ｍｉｎ，充分冲洗，再用水浸种２４～４８ｈ。

一般说，浸种时间长的可缩短染色时间。

１．３取胚染色不同树种可采取不同的取胚方法。

１．３．剥离法种子软化后，轻轻剥去种皮，露出胚部，注意勿使种胚受到机械损伤。

此法多用于豆科等种子。

１．３．２纵切法沿胚部正中，经过胚根、胚轴、胚芽的中线，均匀地纵切为两半，取其中的一半进行染色。

多用于小粒针叶树种子如侧柏、樟子松等。

１...【总页数】2页(P)【作者】王印肖;李秀文;管跃义【作者单位】河北省林木种苗管理站【正文语种】中文【中图分类】S722.1【相关文献】1.四唑染色法快速测定小叶黑柴胡种子生活力研究 [J], 彭云霞;张东佳;武伟国;米永伟;蔺海明2.四唑染色法快速测定茄子种子生活力的研究 [J], 余振宙;陶鸿;占梦丹;孟淑春3.用过氧化氢法快速测定林木种子生活力的研究 [J], 张玉英;喻方圆4.介绍几种林木种子生活力快速测定方法 [J], 李基平5.四唑染色法快速测定菊芋种子生活力的研究 [J], 丁鹏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

大豆种子发芽率的快速测定法

大豆种子发芽率的快速测定法一、快速测定大豆种子生活力，快速测定大豆生活力的方法有红四唑法，靛红染色法和红墨水染色法。

下面以红四唑法为主做以介绍，红四唑的化学名称为2·3·5一氧化三苯基四氮哩(简称T·T·C)，其染色原理是凡有生命活力的种子的种胚则无此反应。

当T·T·C渗入种胚的活细胞内，并作为受氢体脱酶（NADH2或NADPH2）上的氢还原时，便由无色的氯化三苯基四氮唑（T·T·C）变为红色的三苯基甲膨（T·T·F），故可根据染色的情况推知种子生活力。

每品种取净种子2份，每份100粒，浸于30。

C的水中3—4小时，取出剥去种皮浸入1%T·T·C溶液中放于35.C恒温下（保持黑暗）浸2—4小时取出，用水冲洗一下观察：种胚全部染色及胚根尖端不染色或子叶有1/3以下面积不染色的为无生活力的种子，而种胚其他部分染色的为有生活力的种子，计算出种子平均生活力百分比。

也可以用0.2%靛红液（靛红2克，加水1000毫升，充分搅拌），置于30。

C恒温箱中，经12小时方可使用。

二、快速换算种子发芽率，经试验得出大豆种子生活力（X）与发芽率（Y）之间回归方程式为Y=-27.1724+1.0371X。

应用本公式可将种子立即换算种子发芽率，并且不受种子休眠期的限制。

例如：已测得大豆丰收10号品种的生活力为96.7%，即X=96.7代入公式Y=-27.1724+1.0371×96.7=73.115即发芽率为73.115%，也可将测得的生活力直接在直线回归图上查出相应的发芽率。

这一结果与我们用普通发芽试验结果一致，是一种比较理想的大豆发芽率快速测定的方法。

四唑染色法测定茄子种子生活力

四唑染色法测定茄子种子生活力作者：余振宙陶鸿占梦丹来源：《江苏农业科学》2016年第05期摘要：根据四唑（2，3，5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，缩写TTC）染色法测定种子生活力的原理，研究不同浓度四唑溶液，不同染色温度和不同染色时间对京茄218茄子种子生活力测定的影响，摸索出测定茄子种子生活力的最佳条件。

结果表明，四唑溶液浓度，染色温度，染色时间三者之间存在一定的相关性，通过改变三者中的一者或两者可以达到改变其他两者或一者的目的，因此，可根据实际需要来确定测定条件。

比较四唑染色法测定京茄218茄子种子生活力的不同条件，本研究提出处理组合11（浸种温度20 ℃、浸种时间18 h、染色液浓度1%、染色温度35 ℃、染色时间18 h）和处理组合23（浸种温度30 ℃、浸种时间4 h、染色液浓度1%、染色温度35 ℃、染色时间18 h）为最理想的2组处理组合，为TTC法快速测定京茄218茄子种子生活力的适宜方法。

关键词：四唑染色；茄子种子；生活力中图分类号： S641.101文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）05-0206-03收稿日期：2015-04-09基金项目：北京市农林科学院青年科研基金（编号：QNJJ201211）；国家科技支撑计划（编号：2012BAK26B03）；北京市农林科学院科技创新能力建设专项（编号：KJCX201202001、KJCX20140111）；北京市科委重大科研项目（编号：D131100*********）。

作者简介：：余振宙（1989—），男，安徽潜山人，硕士。

E-mail：291765585@。

通信作者：孟淑春，副研究员，主要从事蔬菜种质资源和种子技术研究。

E-mail：mengshuchun@。

种子生活力是种子质量的重要指标，是种用价值的主要组成部分，与种子田间出苗率密切相关，是反映种子生命过程中十分重要的特性之一[1]。