一种肠镜润滑消泡剂的细胞毒性和遗传毒性生物学评价

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中国市售食品接触硅胶制品的细胞毒性评价

包装工程第44卷第19期 ·42·PACKAGING ENGINEERING 2023年10月收稿日期：2023-04-15中国市售食品接触硅胶制品的细胞毒性评价郭一凡，张京伟，范晓洁，王文娟，封棣*（北京工商大学轻工科学技术学院，北京 100048）摘要：目的为了研究不同细胞毒性测试方法之间的差别，本研究利用不同体外细胞毒性评价测试体系下的食品接触硅胶制品（Food Contact Silicone Products, FCSPs ）的整体安全性进行研究。

方法样品在体积分数为95%的乙醇中模拟迁移（70℃保持2 h ）后，通过系统优化实验条件，发展了FCSPs 迁移液的细胞毒性评价方法。

利用HeLa （子宫颈癌细胞）-NRU 、HeLa-CCK-8（CellCountingKit-8，CCK-8）、HepG2（Human Hepatoblastoma ）-NRU 、HepG2-CCK-8共4种测试体系对中国市售的19种FCSPs 进行了细胞毒性评价。

结果样品在不同测试体系下的细胞毒性结果不同，其中65%的样品呈现中度毒性。

结论 FCSPs 的整体生物安全性亟须关注并深入研究。

本研究为食品接触材料的体外生物测定提供了研究思路和科学依据。

关键词：食品接触硅胶制品；模拟迁移；细胞毒性中图分类号：TB487；TS206.4 文献标识码：A 文章编号：1001-3563(2023)19-0042-08 DOI ：10.19554/ki.1001-3563.2023.19.006Cytotoxicity Evaluation of Food Contact Silicone Products Marketed in ChinaGUO Yi-fan , ZHANG Jing-wei , FAN Xiao-jie , WANG Wen-juan , FENG Di *(School of Light Industry, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China)ABSTRACT: The work aims to study the overall safety of food contact silicone products (FCSPs) by different in vitro cytotoxicity evaluation and test systems to study the difference of different in vitro cytotoxicity test methods. After the samples were simulated in 95% ethanol at 70 ℃ for 2 h, the cytotoxicity evaluation method of FCSPs migration was de-veloped by systematically optimizing the experimental conditions. Four test systems including HeLa-NRU, HeLa-CCK-8, HepG2-NRU and HepG2-CCK-8 were used to evaluate the cytotoxicity of 19 FCSPs marketed in China. The samples showed different cytotoxicity results under different testing systems. Among them, 65% of the samples showed moderate cytotoxicity. The overall biological safety of FCSPs needs urgent attention and in-depth study. This study provides re-search ideas and scientific basis for the in vitro bioassay of food contact materials. KEY WORDS: food contact silicone products; simulated migration; cytotoxicity食品接触硅胶制品（Food Contact Silicone Products ，FCSPs ）指各种适用于预期与食品接触或已接触食品的由硅橡胶制成的制品。

润滑油急性生物毒性评定技术及毒性分级标准

ｖｎｅｔｃｕａｅｔａｙａｄｅｏｏｅｔｒｓａｄｔｅｌｅｐｔｍａｅｌｂｃｎｘｃｔ ’ ｄｍｎｒｅｉｎ，ａｃｒｔ，ｓｄｃｎｍｙｆａｕｅｎｈｙａｓｈｌｋｕｒａｔｔｉｉＳｊｇｅｔｅｅｎｏｏｉｏｙｕｍｏ
依据该标准对几种典型润滑油和添加剂进行了评定试验和分级从而验证了润滑油生物毒性评定技术及毒性分级标准的可行性
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第３９卷增刊２００６年６月
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Ｖｏ．９Ｓｐｌ１３ｕｐ
Ｊｕｎｌｆｉ￣ｉｉｅｓｙｏｒａｏａｎＵｎｖｒｉＴｔ
ＡｓａｔｎｒｆｒｎｅｔＳＭｓｎａｄ ’ｗａｒａｃｍｄｔｄｆｃｉｎ（Ｆ）ｔｐｅａｅｓｍｐｅｓｌｔｎｂｔｃ：ＩｅｅｅｃｏＡＴｔｄｒｓｒａｔｃｏｍｏａｅｒｔｅａｏＷＡｏｒｐｒａｌｏｕｉｏ
Ｊｎ０６ｕ．２０
润滑油急性生物毒性评定技术及毒性分级标准
居荫诚，解世文刚，，吕刘召河邵相军，
（．１天津大学内燃机研究所，天津３０７；．００２２军事交通运输研究所，３０６）天津０１１
摘要：润滑油的生物毒性对环境的影响日益明显．以发光细菌为受试生物，参照美国ＡＴＳＭ标准的水融合组分
ｓｉｎｉｃａｄａｃｒｔ．Ａｎｕｄｔｘｅｍｅｔｌｍｏｅｓｐｏｉｅｒｂｏｏｉａｎｐｃｉｎｏａｉｄｏｌｐｌ－ｃｅｔｎｃｕａｅｉｆｐａｅｅｐｒｎａｄｌｉｒｖｄｄｆｉｌｇｃｉｓｅｔｏｆｖｒｅｉｏｌｉｏｌｕｔｏｎｔｄｅｎａｕａｉｃｌｇｃｏｉｉ．Ｔｅａｕｅｔｘｃｔａｉｇｃｔｒａｏｏｎｏｕｌｔｅｓｐｅ — ｉｎａｄｓｕｉｓｏｑｔｅｏｏｉａｔｘｃｔｃｌｙｈｃｔｏｉｉｙｒｔｒｅｆｓｍｅｉｓｌｂｅｍａｔｒｒｓｎｉｉ

高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究

生态毒理学报Asian Journal of Ecotoxicology第18卷第6期2023年12月V ol.18,No.6Dec.2023㊀㊀基金项目:国家自然科学基金青年项目(31801644)㊀㊀第一作者:冯敏(2000 ),女,硕士研究生,研究方向为细胞生物学,E -mail:*****************㊀㊀*通信作者(Corresponding author ),E -mail:*********************㊀㊀#共同通信作者(Co -corresponding author ),E -mail:****************DOI:10.7524/AJE.1673-5897.20230714002冯敏,王巧鑫,斯朝金,等.高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究[J].生态毒理学报,2023,18(6):207-216Feng M,Wang Q X,Si C J,et al.Stereoselective toxicity of beta -cypermethrin and its enantiomer exposures on Caenorhabditis elegans [J].Asian Journal of Ecotoxicology,2023,18(6):207-216(in Chinese)高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究冯敏,王巧鑫,斯朝金,李华悦,赵甲元*,廖颖#四川师范大学生命科学学院,成都610101收稿日期:2023-07-14㊀㊀录用日期:2023-09-28摘要:为探究高效氯氰菊酯(β-cypermethrin,β-CYP)及其对映体毒性的立体选择性,以秀丽隐杆线虫(C.elegans )为模型,分别评估了β-CYP 及其4种对映体对线虫的毒性作用,包括生长发育㊁摄食行为㊁运动能力㊁寿命㊁体内活性氧自由基(ROS)及抗氧化酶活性等㊂结果表明,5种药物分别对线虫进行染毒后,暴露组与溶剂对照组相比,生长发育毒性排序为1R -trans -αS>β-CYP>1S -trans -αR>1R -cis -αS>1S -cis -αR ,摄食行为毒性排序为1R -trans -αS>1R -cis -αS>1S -trans -αR>β-CYP>1S -cis -αR ,对线虫运动行为影响不显著,对平均寿命抑制作用排序为1R -trans -αS>1S -trans -αR>1S -cis -αR>1R -cis -αS>β-CYP ,对线虫体内ROS 水平㊁SOD -3和GST -4抗氧化酶的活性抑制作用排序均表现为反式异构体>外消旋体>顺式异构体,不同药物对线虫内部抗氧化酶的调节作用也存在差异㊂综上所述,4种手性对映体对线虫的毒性和抗氧化作用存在选择性差异,其中1R -trans -αS 对线虫的毒性作用普遍强于外消旋体及其他对映单体㊂关键词:高效氯氰菊酯;秀丽隐杆线虫;生态风险;手性对映体;生长抑制文章编号:1673-5897(2023)6-207-10㊀㊀中图分类号:X171.5㊀㊀文献标识码:AStereoselective Toxicity of Beta-cypermethrin and Its Enantiomer Expo-sures on Caenorhabditis elegansFeng Min,Wang Qiaoxin,Si Chaojin,Li Huayue,Zhao Jiayuan *,Liao Ying #College of Life Sciences,Sichuan Normal University,Chengdu 610101,ChinaReceived 14July 2023㊀㊀accepted 28September 2023Abstract :In this study,we investigated the stereo -selective toxicity of beta -cypermethrin (β-CYP)and its four stereoisomers using Caenorhabditis elegans (C.elegans )as a model organism.We assessed the toxicity of β-CYP and its four stereoisomers on C.elegans growth and development,feeding behavior,locomotion,lifespan,intracellular reactive oxygen species (ROS)levels,and antioxidant enzyme activities.The results indicated that,compared to the blank control group,the ranking of toxicity for growth and development was 1R -trans -αS >β-CYP >1S -trans -αR >1R -cis -αS >1S -cis -αR.For feeding behavior,the ranking was 1R -trans -αS >1R -cis -αS >1S -trans -αR >β-CYP >1S -cis -αR.There was no significant impact on locomotion.The suppression on average lifespan followed the208㊀生态毒理学报第18卷order of1R-trans-αS>1S-trans-αR>1S-cis-αR>1R-cis-αS>β-CYP.In terms of intracellular ROS levels and the activities of antioxidant enzymes SOD-3and GST-4,the order of inhibitory effects was generally:trans-isomers >racemate>cis-isomers.Furthermore,different compounds exhibited varied regulatory effects on the nematode s internal antioxidant enzymes.In summary,the stereoisomers displayed selective differences in their toxicity and an-tioxidant effects on C.elegans,with1R-trans-αS consistently demonstrating greater toxicity than the racemate and other stereoisomers.Keywords:beta-cypermethrin;Caenorhabditis elegans;ecological risks;chiral enantiomers;growth inhibition㊀㊀随着手性农药广泛的应用,我国目前已登记使用的手性农药超过270多种,占农药使用总量近40%[1],其中拟除虫菊酯类和有机磷类等手性农药的使用呈逐年上升的趋势[2-4]㊂尽管手性化合物在物理化学性质上几乎相同,但在作用于生物体时往往呈现出一定的差异,表现出生物学上的立体选择性特征[5]㊂例如,在环境中,它们可能在迁移[6-7]㊁降解[8]㊁构型转换[7,9]㊁趋附行为以及生物活性和毒性方面显示出对映体选择性[10]㊂由于手性农药在环境代谢过程中可能会异构化为其他更强毒性或持久性的异构体,导致对其的生态环境和人体健康的毒性评价被高估或者低估㊂然而,受制于单体制备成本高昂和技术复杂等因素,目前关于手性农药的研究大多限于外消旋体的层面,对映体层面的选择性毒性和活性差异的报道相对较少[11-12]㊂因此,揭示手性农药在环境行为中的立体选择性差异具有实质性意义㊂在考量手性对映体异构化的层面上,准确评估手性农药的安全性显得尤为迫切㊂高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin,β-CYP)是一种稳定㊁高效㊁广谱[13-15],对哺乳动物低毒的拟除虫菊酯类手性杀虫剂[16]㊂其具备部分持久性有机污染物(persistent organic pollutants,POPs)的特征,如在环境滞留时间较长㊁脂溶性较高,以及随食物链逐级富集[17],此外,β-CYP还表现出随大气和水等介质传播的特点,从而对全球环境产生影响[18-19]㊂研究表明,指未被利用的β-CYP可能通过农业渗透㊁土地径流等途径进入水生生态系统㊁空气等多种介质[20],最终通过食物链[17,21]的途径富集到人体内㊂因此,对其潜在危害的关注仍然十分必要㊂β-CYP是一种由1R-cis-αSʒ1S-cis-αRʒ1R-trans-αSʒ1S-trans-αR=2ʒ2ʒ3ʒ3(质量比)的比例构成的外消旋混合物[22],其手性对映体结构如表1所示㊂作为一种手性药物,β-CYP在自然环境的迁移㊁降解[23]和生物富集过程中会发生立体选择性转化[5],这可能导致不同的手性对映体表现出不同的毒性效应[24]㊂然而,目前对于β-CYP这类手性农药的毒性研究主要局限在外消旋体层面,缺乏对手性农药立体选择性作用的深入研究㊂为了更加全面地了解β-CYP外消旋体与其手性对映体的毒性差异,本研究选用了秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans, C.elegans,简称线虫)的N2㊁CF1553(SOD-3::GFP)和CL2166(GST-4::GFP)转基因品系为受试生物㊂在基于国家农药使用限定标准的基础上设置了暴露浓度[25],将β-CYP及其4种手性对映体视为5种独立的药物,对线虫进行了不同测试终点的毒性差异评估㊂这一研究旨在为β-CYP的生产㊁管理和使用提供有力的实验数据支持㊂1㊀材料与方法(Materials and methods)1.1㊀实验材料1.1.1㊀供试药品和线虫品系β-CYP(购自广东立威化工有限公司,纯度> 98%),β-CYP的4种手性对映体:1S-cis-αR㊁1R-cis-αS㊁1R-trans-αS和1S-trans-αR(委托大赛璐药物手性技术有限公司制备与分离得到,纯度均ȡ98%)㊂将β-CYP及其4种手性对映体作为5种独立的药物分别溶于二甲基亚砜(DMSO,购自Biofroxx,纯度ȡ99.9%),均制备成7.5mg∙mL-1储备液并避光保存于常温下,实验时,用M9缓冲液(3g KH2PO4㊁15.137g Na2HPO4㊃12H2O㊁5g NaCl㊁1L ddH2O)稀释成工作液,进行后续实验㊂野生型秀丽隐杆线虫N2㊁转基因线虫CF1553 {muIs84[(pAD76)sod-3p::GFP+rol-6(su1006)]}㊁CL2166{dvIs19[(pAF15)GST-4p::GFP:NLS]Ⅲ}均由美国线虫遗传中心(Caenorhabditis Genetics Center, CGC)提供㊂1.2㊀线虫培养和同步化线虫培养于以尿嘧啶缺陷型大肠杆菌(E.coli OP50)为食物的线虫固体生长培养基(NGM)中,所有线虫均在20ħ培养条件中进行㊂将新鲜配制的碱性裂解液(混合比例为V(4%NaClO)ʒV(5mol㊃第6期冯敏等:高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究209㊀L-1NaOH)ʒV(ddH2O)=1ʒ2ʒ7)和线虫悬液按体积比为2ʒ1混匀,裂解产卵期线虫获得同步化的虫卵,培养至L4期进行后续实验㊂1.3㊀线虫生长发育测定根据我国食品安全国家标准GB2763 2021[25],选取β-CYP及其4种对映体,分别设置浓度为0.06㊁0.3㊁1.5㊁7.5mg㊃L-1进行线虫的暴露实验㊂暴露结束后,将线虫置于2%琼脂载玻片上,加入30μL的NaN3溶液进行麻醉处理,DM3000正置荧光显微镜下拍照并测定㊂1.4㊀摄食行为能力测定本实验通过观察线虫头部以下咽泵的跳动频率来判断线虫的进食受到的影响,暴露方法与前述相同,显微镜观察线虫自由进食过程中咽泵的跳动频率,记录60s内线虫咽泵跳动次数,即线虫咽泵跳动指标㊂1.5㊀线虫运动能力测定将暴露结束后的线虫转至每孔含200μL的M9缓冲液的96孔板中恢复1min后,对1min内线虫身体弯曲的次数进行计数㊂线虫相对于其身体长轴方向1个波长的运动记为1次身体弯曲㊂1.6㊀寿命测定将L4期的N2定义为t=0,每组挑取50条L4期线虫于涂布有不同浓度的β-CYP及其4种对映体的NGM中,放置于20ħ生化培养箱培养㊂繁殖期每24h进行1次转移,其余时间段为每48h转移1次㊂转移前在体视显微镜下观察线虫的生存状况,并记录线虫的死亡数和丢失数,计算存活率㊂直至线虫用铂丝轻触虫体,无任何反应即定义为死亡㊂1.7㊀ROS测定采用细胞渗透性荧光探针2 ,7 -二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)反映线虫体内ROS水平㊂处理后的线虫用M9缓冲液反复清洗3次,将线虫转移至终浓度50μmol∙L-1的DCFH-DA中,20ħ孵育3h㊂随后转移至载玻片进行麻醉处理,荧光显微镜(485nm和530nm激发和发射波长)下观察拍照, ImageJ分析各照片荧光强度㊂表1㊀4种高效氯氰菊酯异构体的基本信息Table1㊀Basic information on the four beta-cypermethrin isomers顺反Contrary 化学药品Chemicals化学结构Chemical structuresSMART表达式SMART expression顺式异构体Cis-isomer 1S-cis-αR[#6]-[#6]-1(-[#6])-[#6@H](-[#6]=[#6](-[Cl])-[Cl])-[#6@@H]-1-[#6](-[#8]-[#6@@H](-[#6]#[#7])-c2cccc(c2)-[#8]-c3ccccc3)=[#8]1R-cis-αS[#6]-[#6]-1(-[#6])-[#6@@H](-[#6]=[#6](-[Cl])-[Cl])-[#6@H]-1-[#6](-[#8]-[#6@H](-[#6]#[#7])-c2cccc(c2)-[#8]-c3ccccc3)=[#8]反式异构体Trans-isomer 1R-trans-αS[#6]-[#6]-1(-[#6])-[#6@H](-[#6]=[#6](-[Cl])-[Cl])-[#6@H]-1-[#6](-[#8]-[#6@H](-[#6]#[#7])-c2cccc(c2)-[#8]-c3ccccc3)=[#8]1S-trans-αR[#6]-[#6]-1(-[#6])-[#6@@H](-[#6]=[#6](-[Cl])-[Cl])-[#6@@H]-1-[#6](-[#8]-[#6@@H](-[#6]#[#7])-c2cccc(c2)-[#8]-c3ccccc3)=[#8]注:高效氯氰菊酯的结构表现为1C㊁3C和αC的不对称碳位;SMARTS表达式中@表现为手性逆时针,@@表现为手性顺时针㊂Note:Structure of beta-cypermethrin showing asymmetric carbon positions at1C,3C,andαC;in the SMARTS expression,@is chiral anticlockwise and @@is chiral clockwise.210㊀生态毒理学报第18卷1.8㊀转基因线虫体内GST -4::GFP 和SOD -3::GFP 的表达能力测定将转基因CF1553转基因线虫(SOD -3::GFP)和CL2166突变体线虫(GST -4::GFP)暴露于最高浓度药物的NGM 中进行处理,暴露结束后,荧光显微镜下观察拍照,ImageJ 分析各照片荧光强度㊂1.9㊀数据统计分析采用SPSS 22.0对数据进行统计学分析,组间差异采用单因素方差分析,用Excel 2010,Graphpad Prism 7.0软件进行绘图,以P <0.05为差异有统计学意义㊂2㊀结果(Results )2.1㊀对生长发育影响以秀丽线虫的体长和体宽为评估指标,观察β-CYP 及其4种手性对映体对线虫发育的影响㊂如图1所示,5种药物对线虫的体长抑制率与药物浓度呈正相关,随着高效氯氰菊酯及其4种对映体浓度的增加,线虫的体长受到显著影响(P <0.05)㊂与溶剂对照组和β-CYP 处理组相比,1R -trans -αS 处理组显示出最强的生长抑制效应(P <0.01),是4种手性对映体药物中对线虫体长发育影响最大的㊂而1S -cis -αR 处理组的抑制效果较弱㊂但是,这5种药物/(mg·L −1)Concentration/(mg∙L −1)/(mg·L −1)Concentration/(mg∙L −1)/μmL e n g t h /μm/μm B o d y w i d t h /μm-CYP αR αS αS αRβ-CYP 1S-cis-αR 1R-cis-αS 1R-trans-αS 1S-trans-αR图1㊀β-CYP 及其4种手性对映体对线虫生长发育指标体长(a )和体宽(b )的影响注:0表示0.1%DMSO 溶剂对照组,所有暴露组均与相对应的溶剂对照组相比;*表示P <0.05,**表示P <0.01(β-CYP 暴露组与溶剂对照组相比);һ表示P <0.05,һһ表示P <0.01(1S -cis -αR 暴露组与溶剂对照组相比);#表示P <0.05,##表示P <0.01(1R -cis -αS 暴露组与溶剂对照组相比);ә表示P <0.05,әә表示P <0.01(1R -trans -αS 暴露组与溶剂对照组相比);+表示P <0.05,++表示P <0.01(1S -trans -αR 暴露组与溶剂对照组相比),无标注均表示P >0.05,下同㊂Fig.1㊀Effects of β-CYP and its four chiral enantiomers on nematode growth anddevelopment indexes body length (a)and body width (b)Note:0.1%DMSO represents the solvent control group,and all exposure groups are compared to the corresponding solvent control group;*representsP <0.05,**represents P <0.01(β-CYP exposure group compared to solvent control group);һrepresents P <0.05,һһrepresents P <0.01(1S -cis -αRexposure group compared with solvent control group);#represents P <0.05,##represents P <0.01(1R -cis -αS exposure group compared with solvent control group);әrepresents P <0.05,әәrepresents P <0.01(1R -trans -αS exposure group compared to solvent control group);+representsP <0.05,++represents P <0.01(1S -trans -αR exposure group compared to solvent control group);no label indicates P >0.05;the same as below.第6期冯敏等:高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究211㊀对线虫的体宽没有产生显著影响(P >0.05)㊂2.2㊀对摄食行为影响观察咽泵频率来评估秀丽隐杆线虫在长期药物暴露后的进食速率㊂如图2所示,与溶剂对照组相比,β-CYP 及其4种手性对映体均显著影响秀丽隐杆线虫的进食,且这种影响呈浓度依赖性㊂随着药物浓度的增加,咽泵振动频率逐渐降低㊂1R -trans -αS 处理组与溶剂对照组以及β-CYP 处理组相比,抑制效果最强(P <0.01),而1S -cis -αR 处理组的抑制效果最弱(P <0.01)㊂2.3㊀对运动能力影响通过检测线虫的身体摆动频率,来评估秀丽隐杆线虫的运动行为在长期药物暴露后是否受到影响[26]㊂如图3所示,经过不同药物的不同浓度处理后,与溶剂对照组相比,秀丽隐杆线虫的摆动频率没有发生显著变化(P >0.05)㊂这表明高效氯氰菊酯及其4种对映体在所测试的浓度下并未显著影响秀丽隐杆线虫的运动能力㊂2.4㊀对寿命影响观察不同浓度的β-CYP 以及4种对映体对秀丽隐杆线虫寿命的影响㊂如图4和表2所示,与溶剂对照组相比,β-CYP 处理组中最高浓度(7.5mg ㊃L -1)组导致线虫的平均寿命显著缩短至(10.487ʃ0.579)d ,抑制率为15.6%(P <0.05);1S -cis -αR 和1R -cis -αS 处理组中,最高浓度(7.5mg ㊃L -1)组都显著降低线虫的平均寿命,分别缩短至(9.538ʃ0.724)d 和(9.697ʃ0.721)d ,抑制率分别为19.3%和18.0%(P <0.05);1R -trans -αS 和1S -trans -αR 最高浓度(7.5mg ㊃L -1)组的平均寿命分别缩减至(9.506ʃ0.513)d 和(10.024ʃ0.554)d ,抑制率分别为23.4%和19.3%(P <0.01)㊂这表明,所有药物处理均对线虫寿命产生一定程度的缩短效应,其中1R -trans -αS 的影响最显著㊂与β-CYP 处理组相比,1R -trans -αS 在最高浓度(7.5mg ㊃L -1)下的平均寿命抑制率为9.4%(P <0.05),而其他药物处理组对线虫寿命均无显著影响㊂/( ·m i n −1)P h a r y n g e a l p u m p f r e q u e n c y /(t i m e ·m i n −1)/(mg·L −1)Concentration/(mg∙L −1)β-CYP 1S-cis-αR1R-cis-αS 1R-trans-αS 1S-trans-αR图2㊀β-CYP 及其4种手性对映体对线虫咽泵频率的影响Fig.2㊀Effect of β-CYP and its four chiral enantiomers on the frequency of nematode pharyngealpumps/(mg·L −1)Concentration/(mg∙L −1)/( ·m i n −1)S w i n g f r e q u e n c y /(t i m e ·m i n −1)β-CYP 1S-cis-αR 1R-cis-αS 1R-trans-αS 1S-trans-αR图3㊀β-CYP 及其4种手性对映体对线虫摆动频率的影响Fig.3㊀Effect of β-CYP and its four chiral enantiomers on the oscillation frequency of nematodes212㊀生态毒理学报第18卷图4㊀β-CYP及其4种手性对映体对线虫存活率的影响Fig.4㊀Effect ofβ-CYP and its four chiral enantiomers on nematode survival表2㊀β-CYP及4种手性对映体对线虫寿命的影响Table2㊀Effects ofβ-CYP and four cypermethrin isomers on nematode lifespan浓度/(mg㊃L-1) Concentration/(mg㊃L-1)平均寿命/dAverage life/dβ-CYP1S-cis-αR1R-cis-αS1R-trans-αS1S-trans-αR012.418ʃ0.65111.825ʃ0.77711.825ʃ0.77712.418ʃ0.65112.418ʃ0.6510.0611.588ʃ0.65611.356ʃ0.70210.998ʃ0.71411.647ʃ0.60611.247ʃ0.6350.311.308ʃ0.56611.117ʃ0.72510.796ʃ0.77910.496ʃ0.614*10.985ʃ0.6181.510.545ʃ0.556*10.707ʃ0.76211.007ʃ0.7839.898ʃ0.563**10.812ʃ0.534*7.510.487ʃ0.579*9.538ʃ0.724*9.697ʃ0.721*9.506ʃ0.513**10.024ʃ0.554**注:平均寿命结果以平均值ʃ标准误表示;各药物暴露组分别与对应的溶剂对照组相比,*表示P<0.05,**表示P<0.01㊂Note:Life mean results are expressed as meanʃstandard errors;each drug exposure group was compared with the corresponding solvent control group, *represents P<0.05,**represents P<0.01.2.5㊀对体内活性氧(ROS)水平影响选取β-CYP及4种手性对映体5种药物,以最高浓度7.5mg㊃L-1对线虫进行暴露㊂结果如图5所示,与溶剂对照组相比,各药物处理组中线虫体内的ROS相对荧光强度均显著增加(P<0.01)㊂具体而言,β-CYP㊁1S-cis-αR㊁1R-cis-αS㊁1R-trans-αS和1S-trans-αR处理组的ROS水平分别上升了82.4%㊁42.9%㊁58.1%㊁206.6%和110.6%㊂其中,1R-trans-第6期冯敏等:高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究213㊀αS处理组对线虫体内ROS的促进效果最强㊂与β-CYP处理组相比,1S-cis-αR和1R-cis-αS处理组的ROS水平分别降低了22.6%和14.3%,而1R-trans-αS和1S-trans-αR处理组的ROS荧光强度分别增加了68.1%和15.5%㊂这表明反式异构体对线虫的ROS水平影响普遍强于顺式异构体㊂2.6㊀对转基因线虫体内GST-4::GFP和SOD-3:: GFP表达的影响本实验中,采用转基因线虫CF1553(SOD-3:: GFP)和CL2166(GST-4::GFP)作为研究对象,通过检测相对荧光表达量来评估抗氧化酶SOD-3和GST-4的表达水平㊂其中药物对CF1553转基因线虫SOD-3表达水平的影响如图6所示,与溶剂对照组相比,β-CYP㊁1R-cis-αS㊁1R-trans-αS㊁1S-trans-αR处理组均对抗氧化酶SOD-3的表达产生不同程度的抑制效应,相对荧光强度分别下降了24.0%㊁28.2%㊁37.3%㊁17.9%(P<0.01),而1S-cis-αR处理组SOD-3的表达未受到显著影响(P>0.05)㊂而与β-CYP处理组相比,1R-trans-αS处理组的SOD-3:: GFP荧光强度低于β-CYP处理组的17.5%(P< 0.01),而其他2组1R-cis-αS和1S-trans-αR无显著差异㊂药物对CL2166转基因线虫GST-4表达水平的影响如图7所示,与溶剂对照组相比,1S-cis-αR㊁1R-cis-αS处理组没有发生显著变化(P>0.05),β-CYP和1S-trans-αR处理组GST-4的荧光强度下降了23.3%和27.4%(P<0.05),1R-trans-αS组显著下降了34.4%(P<0.01)㊂而与β-CYP处理组相比,1R-trans-αS处理组GST-4的荧光强度下降了14.5%,而其他对映体药物处理组均未显著抑制GST-4:: GFP表达㊂这些结果说明,5种药物除1S-cis-αR处理组外,均一定程度上抑制了2种抗氧化酶的表达,降低了线虫抗氧化应激的能力㊂3㊀讨论(Discussion)拟除虫剂高效氯氰菊酯在农业领域的广泛使用引发了环境安全的担忧㊂然而,β-CYP并非单一化合物,而是由4种手性对映体(1R-cis-αS㊁1S-cis-αR㊁1R-trans-αS和1S-trans-αR)组成的混合物㊂这个复杂的结构引发了一个重要问题:不同手性对映体是否表现出不同的毒性效应?本研究探讨β-CYP及其手性对映体对秀丽隐杆线虫的生长发育㊁摄食行为㊁运动能力㊁寿命和ROS相对表达水平等指标的影响,从手性对映体层面来综合评判β-CYP的立体选择性毒性差异,并采用GFP标记突变型线虫CF1553(SOD-3::GFP)和CL2166(GST-4::GFP)来分析氧化损伤可能的途径㊂研究表明,将线虫分别暴露于β-CYP及其4种手性对映体中,各药物对线虫生长和摄食速率均呈现出浓度依赖性抑制作用㊂其中,1R-trans-αS和1R-cis-αS表现出较强毒性,而1S-cis-αR和1S-cis-αR相对较弱,这一结果与先前的斑马鱼胚胎孵化率[27]和急性毒性试验[28]结果相一致㊂寿命实验也表明,5种药物的高浓度组都显著缩短了线虫的平均寿命,而与消旋体处理组相比,1R-trans-αS组对线虫寿命的抑制效应最显著,而其他3组的寿命毒性没有显著差异㊂这提示β-CYP及其手性对映体的暴露可能引发线虫应激反应,保持了其运动能力,但明显抑制了生长㊁进食和促进了寿命的缩短㊂然而,值得注意的是,这些毒性效应在不同对映体之间存在一定差异,进一步突显了其立体选择性毒性差异㊂高水平的ROS积累已被广泛认为会导致氧化应激,引发细胞结构损伤,并可能加速衰老和死亡[29-30]㊂本研究表明5种药物的最高浓度组均显著增加了线虫体内ROS积累,其中1R-trans-αS处理组中,线虫体内ROS水平上升了206.6%㊂不容忽视的是,1R-trans-αS处理组同时也表现出了最显著的生长发育抑制和寿命缩短效应,这一结果说明ROS的过量积累可能是导致线虫细胞结构受损㊁抑制生长发育以及促进线虫死亡的主要原因之一㊂为了管理氧化应激,超氧化物歧化酶担任细胞抗氧化保护系统的第一道防线[31-32],而还原型谷胱甘肽S-转移酶在过氧化物的转移过程起着重要作用[33],它们分别在维持细胞氧化还原状态[34]中扮演着重要角色㊂为了更深入地探究这一现象,采用GFP标记的转基因线虫CF1553(SOD-3::GFP)和CL2166(GST-4::GFP),分析氧化损伤的潜在机制㊂结果表明,与β-CYP处理组相比,1S-cis-αR和1R-cis-αS的促ROS增强效应相对较弱,1S-cis-αR处理组对SOD-3和GST-4这2种抗氧化酶没有产生明显的抑制作用,其导致ROS增加的途径需要更多研究㊂而1R-cis-αS处理组则仅对SOD-3的活性具有明显的抑制作用,从而促使线虫体内ROS积累㊂1R-trans-αS和1S-trans-αR处理组均显著抑制了2种抗氧化酶的表达,特别是1R-trans-αS处理组抑制效果最为显著,从而加剧了线虫体内ROS的积累㊂总体而言,5种药物对线虫体内ROS的促进效应普遍表现为反式异构体>外消旋体>顺式异构体㊂这214㊀生态毒理学报第18卷与Mu 等[28]发现1R -cis -αS ㊁1R -trans -αS 和β-CYP 对斑马鱼肝脏和脑中抗氧化酶水平有明显的调节作用结果一致㊂综上所述,本研究明确了β-CYP 型手性农药及其4种手性对映体的明显毒性立体选择性㊂这种立体选择性毒性可能源于反式异构体和顺式异构体在图5㊀β-CYP 及其4种对映体高浓度组对线虫体内活性氧(ROS )的影响注:(a)线虫体内ROS 荧光图;(b)ROS 相对荧光强度㊂Fig.5㊀Effect of β-CYP and its four enantiomeric high -dose groups on reactive oxygen species (ROS)in nematodesNote:(a)ROS fluorescence image in C.elegans ;(b)Relative fluorescence intensity ofROS.图6㊀β-CYP 及其4种手性对映体对CF1553转基因线虫SOD-3表达水平的影响注:(a)线虫体内SOD -3::GFP 荧光图;(b)SOD -3::GFP 相对荧光强度㊂Fig.6㊀Effects of β-CYP and its four chiral enantiomers on SOD -3expression of Caenorhabditis elegansNote:(a)SOD -3::GFP fluorescence image in C.elegans ;(b)Relative fluorescence intensity of SOD -3::GFP.图7㊀β-CYP 及其4种手性对映体对CL2166转基因线虫GST-4表达水平的影响注:(a)线虫体内GST -4::GFP 荧光图;(b)GST -4::GFP 相对荧光强度㊂Fig.7㊀Effects of β-CYP and its four chiral enantiomers on GST -4expression of Caenorhabditis elegansNote:(a)GST -4::GFP fluorescence image in C.elegans ;(b)Relative fluorescence intensity of GST -4::GFP.第6期冯敏等:高效氯氰菊酯对秀丽隐杆线虫毒性作用的立体选择性研究215㊀三维空间构象上的差异,导致它们与生物受体形成氢键的方式不同,最终影响了配体-受体复合物的稳定性和亲和力㊂因此,需要进一步深入研究特定的信号通路和受体,通过分子对接手段来分析不同构型对映体与不同生物受体的结合位点和空间取向,来深刻理解这些立体异构引发的毒性选择性差异㊂这不仅有助于加深对β-CYP型手性农药及其4种手性对映体选择性毒性的理解,更为未来该农药的生产㊁管理和使用提供了重要的理论依据㊂通信作者简介:赵甲元(1984 ),男,博士,副教授,主要研究方向为功能性食品㊁生物降解与转化㊂共同通信作者简介:廖颖(1976 ),女,硕士,副教授,主要研究方向为天然产物的生物学功效与环境污染物和健康相关研究㊂参考文献(References):[1]㊀Ye J,Zhao M R,Liu J,et al.Enantioselectivity in envi-ronmental risk assessment of modern chiral pesticides[J].Environmental Pollution,2010,158(7):2371-2383[2]㊀Sharma B.Nature of chiral drugs and their occurrence inenvironment[J].Journal of Xenobiotics,2014,4(1):14-17 [3]㊀Qu H,Wang P,Ma R X,et al.Enantioselective toxicity,bioaccumulation and degradation of the chiral insecticidefipronil in earthworms(Eisenia feotida)[J].The Scienceof the Total Environment,2014,485-486:415-420[4]㊀王宁,李建华,谭文丽,等.有机磷农药手性对映体生物活性㊁生态毒性及环境行为研究[J].热带农业工程,2019,43(4):49-54Wang N,Li J H,Tan W L,et al.Bioactivity,ecotoxicityand environmental behavior of 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211025951_甘露糖赤藓糖醇脂生产及应用研究进展

生物技术进展 2023 年第 13 卷第 2 期 210 ~ 219Current Biotechnology ISSN 2095‑2341进展评述Reviews甘露糖赤藓糖醇脂生产及应用研究进展邱思元，徐晶雪 * ，段育阳，赵金玉，赵文婧，张莉欣，任国领大庆师范学院生物工程学院，黑龙江大庆 163712摘要：甘露糖赤藓糖醇脂（mannosylerythritol lipids, MELs ）是一种生物表面活性剂，除具有可降解、毒性低、生物兼容性好等优点，还因其特有的代谢、合成途径与结构特性，而具有基因转染、广谱抗菌、皮肤修复等多种功能。

MELs 在医疗、日化、食品、农业、生态修复等各领域应用前景巨大，被公认为是现今最有潜力的生物表面活性剂。

然而，不同种属所生产的MELs 之间结构差异性大且生产方式较落后，合成与作用机制尚不清晰，因而无法实现规模商业化生产。

从结构特性、生产纯化、应用途径等方面重点阐述了MELs 相关研究进展，以期阐明其结构与功能的多样性，为实现靶向MELs 的定制生产，降低生产成本，加快实现其规模化应用提供参考。

关键词：甘露糖赤藓糖醇脂；生物表面活性剂；微生物DOI ：10.19586/j.2095‑2341.2022.0131中图分类号：Q549, TQ423 文献标志码：AResearch Progress on Production and Application of Mannosylerythritol LipidsQIU Siyuan ， XU Jingxue * ， DUAN Yuyang ， ZHAO Jinyu ， ZHAO Wenjing ， ZHANG Lixin ，REN GuolingCollege of Bioengineering ， Daqing Normal University ， Heilongjiang Daqing 163712， ChinaAbstract ：As a type of biosurfactant ， mannosylerythritol lipids （MELs ） have merits with biodegradability ， low toxicity and good biocompatibility. Due to its distinct structural ， metabolic ， and synthetic features ， it also performs a wide range of other tasks ， including skin restoration ， gene transfection ， and broad -spectrum antibacterial activity. MELs has a promising future in a numberof industries ， including medicine ， daily chemicals ， food ， agriculture ， and ecological restoration ， which is widely recognized as one of the most promising biosurfactants. However ， because of the great structural heterogeneity ， backward manufacturing styleof MELs generated by various species ， hazy synthesis and uncertain mechanism of action ， it is hard to carry out large -scale commercial production. The paper aimed to clarify the diversity of its structure and function ， so as to provide reference for the realization of customized production targeting MELs. By focusing on the aspects of structural characteristics ， production purification ，application path and so on ， the paper was hoped to help reduce the production cost and accelerate the realization of its large -scale application.Key words ：mannosylerythritol lipids ； bio -surfactants ； microorganism生物表面活性剂是一种两亲性产物，相对于化学表面活性剂更易降解，对环境更友好。

一种肠镜润滑消泡剂的细胞毒性和遗传毒性生物学评价

肠镜检查是一种内窥式最直观的肠道检查方法，可以帮助医生了解患者肠道内部的情况，是检查肠道内部病变的一种常用诊断方式。同时，润滑消泡剂的使用是提高肠镜检查效率最简单、最方便、最经济的方法[1]。肠镜润滑消泡剂既可以减少肠镜与肠道黏膜的摩擦进而减轻患者的呕心感和疼痛感，也降低了医生操作肠镜的难度。作为一种表面接触医疗器械，由于它直接与人体肠道粘膜接触且使用
显微镜下观察有少量畸形和退化的细胞袁为轻微的细胞毒性曰Ames 试验样品组回变菌落数均未比阴性对照回变菌落数增加 1
倍或者 1 倍以上且无重复性曰MLA 试验样品组 MF 值与阴性对照相比无超过 126伊10-6 的增长曰染色体畸变试验受试样品组染色体结构畸变率与阴性对照相比袁差异无统计学意义渊跃0.05冤遥结论以二甲基硅油尧甘油尧羧甲基纤维素钠为成分的肠镜润滑
Abstract：Objective To evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of a colonoscopy lubricant defoamer based on dimethyl silicone oil, glycerin and
sodium carboxymethyl cellulose, and provide clinical use for this colonoscopy lubrication defoamer and biosafety basis.Methods The agar diffusion
论著
医学信息 2019 年 8 月第 32 卷第 16 期
Medical Information Aug. 2019 Vol. 32 No.16
一种肠镜润滑消泡剂的细胞毒性和遗传毒性生物学评价

鲨鱼肝油胶丸毒理学安全性评价

肠进行病理组织学检查。
体，比重０９６．３。人体推荐摄＾量为３／０ｇｇ６ｋ。实验时以植物油配制成所需斌度供急性毒性试验、鼠骨髓微核试验、鼠小小
精子畸形试验使用；二甲基亚砜作为溶剂进行Ａｓ验；以ｍｅ试
维普资讯
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中国酱共卫生２００２年第Ｊ第３ＣＮＰＵＬＣＨＥＬＴ８卷期ＨＬＡＢＩＡＨＶｌ８Ｎ．ｏｔｏ３Ｍａ０２ｒ０２
公司提供，浅黄色椭园形软欧囊，容物为浅黄色油状液为内
ｌ４３ｍｅ试验＿．Ａｓ
型菌株Ｔ９、Ａ７Ｔ
采用平板掺入法，鼠伤寒炒门菌实变选
Ｔ】ＩＴ，基因型鉴定合格后进行Ａ【Ｈ和ＡＬ经０２
表２鲨鱼肝油胶丸小鼠微核试验结果
实验活化系统为多氧联苯诱导的Ｓ大鼠肝混台液。阳Ｄ性物：Ｓ者为９一持酮（Ａ７ｒ９）叠氯钠（Ａ！、裂一９Ｔ９、Ａ８、ｒＴ帅）丝霉素ＣＴ；（ＡＬ咀）＋者ＴｌＡ为１８一二轻基蒽醌，７Ｔ、
表ｌ鲨鱼肝油胶丸小鼠精子畸形试验结果
（５０）随机分为６组，雄各半。设１２ｇｋ２～３ｇ，雌．５／ｇ体重、
２５ｇｋ体重、．０／ｇ体重和加ｏｇｋ０／ｇ５０ｇｋ０／ｇ体重４个剂量
组、阳性对照组（植物油）及阳性对照组（环磷酰胺４ｍ／ｇ０ｇｋ体重）。灌胃给药２次（灌胃容量０２／Ｏ．ｍｌｌｇ体重）间隔２ｈ，４，于末次给药后６ｈ处死动物，取股骨常规制片、镜检，鼠计数每１０００十骨髓嗜多染红细胞（Ｃ）观察含微植的细胞数井统ＰＥ，

化妆品新原料安全评价体系建立与应用

化妆品新原料安全评价体系建立与应用第1章引言 (3)1.1 研究背景 (3)1.2 研究目的与意义 (4)第2章化妆品新原料概述 (4)2.1 化妆品原料分类 (4)2.2 新原料的定义及特点 (5)2.3 新原料的法规要求 (5)第3章安全评价体系构建的理论基础 (5)3.1 化妆品安全评价相关法规与指南 (5)3.1.1 我国化妆品安全评价法规 (5)3.1.2 国际化妆品安全评价指南与法规 (5)3.2 国内外安全评价体系现状 (6)3.2.1 我国化妆品安全评价体系 (6)3.2.2 国外化妆品安全评价体系 (6)3.3 安全评价体系构建原则 (6)3.3.1 科学性原则 (6)3.3.2 系统性原则 (6)3.3.3 预防性原则 (6)3.3.4 动态调整原则 (6)3.3.5 透明度原则 (6)第4章化妆品新原料毒理学评价 (6)4.1 毒理学评价方法 (6)4.1.1 经典毒理学评价方法 (6)4.1.2 非经典毒理学评价方法 (7)4.2 毒理学试验项目 (7)4.2.1 急性毒性试验 (7)4.2.2 亚慢性毒性试验 (7)4.2.3 慢性毒性试验 (7)4.2.4 致癌性试验 (7)4.2.5 生殖发育毒性试验 (7)4.3 毒理学评价标准 (7)4.3.1 急性毒性评价标准 (8)4.3.2 亚慢性毒性评价标准 (8)4.3.3 慢性毒性评价标准 (8)4.3.4 致癌性评价标准 (8)4.3.5 生殖发育毒性评价标准 (8)4.3.6 综合毒理学评价标准 (8)第5章化妆品新原料安全性风险评估 (8)5.1 风险评估基本概念 (8)5.2 风险评估方法 (9)5.2.1 危害识别 (9)5.2.2 危害特征描述 (9)5.2.3 暴露评估 (9)5.2.4 风险表征 (9)5.3 风险评估程序 (9)5.3.1 资料收集 (9)5.3.2 危害识别 (10)5.3.3 危害特征描述 (10)5.3.4 暴露评估 (10)5.3.5 风险表征 (10)5.3.6 风险管理 (10)5.3.7 风险沟通 (10)第6章化妆品新原料安全评价方法 (10)6.1 安全评价方法概述 (10)6.2 安全性评价指标 (10)6.2.1 基本评价指标 (10)6.2.2 高级评价指标 (10)6.3 安全评价方法应用 (11)6.3.1 传统安全性评价方法 (11)6.3.2 现代安全性评价方法 (11)第7章化妆品新原料安全评价数据库 (11)7.1 数据库构建意义与目标 (11)7.1.1 构建意义 (11)7.1.2 构建目标 (11)7.2 数据库架构与设计 (12)7.2.1 数据库架构 (12)7.2.2 数据库设计 (12)7.3 数据库应用与维护 (12)7.3.1 数据库应用 (12)7.3.2 数据库维护 (12)第8章化妆品新原料安全评价案例分析 (13)8.1 案例一：植物提取物 (13)8.1.1 案例背景 (13)8.1.2 安全评价流程 (13)8.1.3 案例分析 (13)8.2 案例二：生物技术来源原料 (13)8.2.1 案例背景 (13)8.2.2 安全评价流程 (13)8.2.3 案例分析 (14)8.3 案例三：化学合成原料 (14)8.3.1 案例背景 (14)8.3.2 安全评价流程 (14)8.3.3 案例分析 (14)第9章化妆品新原料安全评价体系应用与优化 (14)9.1 体系应用现状 (14)9.1.1 化妆品新原料安全评价体系在我国的应用已取得显著成果。

肠源性毒素三甲胺-N-氧化物在慢性肾脏疾病中的研究进展

㊃综述㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2023.24.027肠源性毒素三甲胺-N-氧化物在慢性肾脏疾病中的研究进展*陈杰1,黄娟2,管茜3,左萍2,程献杰4,何艳丽5,唐露5,肖敏6综述,毕津莲1ә审校1.湘雅博爱康复医院G C P,湖南长沙410100;2.湘雅博爱康复医院检验科,湖南长沙410100;3.湖南星怡康健康体检中心,湖南长沙410100;4.湘雅博爱康复医院乳甲外科,湖南长沙410100;5.湘雅博爱康复医院健康管理中心,湖南长沙410100;6.湖南省药品审评与不良反应监测中心,湖南长沙410013摘要:肠源性毒素三甲胺-N-氧化物(T MA O)作为人类肠道菌群的重要代谢产物之一,被认为与心脑血管疾病㊁阿尔茨海默病㊁慢性肾病和2型糖尿病等疾病相关㊂其通过促进内皮细胞损伤㊁炎症反应㊁氧化应激㊁斑块形成等参与疾病的发生与发展㊂该文主要就T MA O与肾损伤相关疾病发生㊁发展关系的研究进展作一综述,旨在为临床医师及肾病患者探寻更多预防及治疗的可能性㊂关键词:三甲胺-N-氧化物;慢性肾脏疾病;肠道代谢产物;炎症反应;肠道微生物中图法分类号:R692文献标志码:A文章编号:1672-9455(2023)24-3702-05R e s e a r c h p r o g r e s s o f e n t e r o g e n i c u r i n a r y t o x i n t r i m e t h y l a m i n eN-o x i d e i n c h r o n i c k i d n e y d i s e a s e*C H E N J i e1,HU A N G J u a n2,G U A N X i3,Z U O P i n g2,C H E N G X i a n j i e4,H E Y a n l i5,T A N G L u5,X I A O M i n6,B I J i n l i a n1ә1.D e p a r t m e n t o f G C P,X i a n g y a B o a i R e h a b i l i t a t i o n H o s p i t a l,C h a n g s h a,H u n a n410100,C h i n a;2.D e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,X i a n g y a B o a i R e h a b i l i t a t i o n H o s p i t a l,C h a n g s h a,H u n a n410100,C h i n a;3.H u n a n X i n g y i k a n g H e a l t h E x a m i n a t i o n C e n t e r,C h a n g s h a,H u n a n410100,C h i n a;4.D e p a r t m e n t o f B r e a s t a n d T h y r o i d S u r g e r y,X i a n g y a B o a i R e h a b i l i t a t i o n H o s p i t a l,C h a n g s h a,H u n a n410100,C h i n a;5.H e a l t h M a n a g e m e n t C e n t e r,X i a n g y a B o a i R e h a b i l i t a t i o nH o s p i t a l,C h a n g s h a,H u n a n410100,C h i n a;6.H u n a n P r o v i n c i a l C e n t e r f o r D r u gA p p r a i s a l a n d A d v e r s e R e a c t i o n M o n i t o r i n g,C h a n g s h a,H u n a n410013,C h i n aA b s t r a c t:I n t e s t i n a l t o x i n t r i m e t h y l a m i n e N-o x i d e(T MA O),a s o n e o f t h e i m p o r t a n t m e t a b o l i t e s o f h u-m a n i n t e s t i n a l f l o r a,i s c o n s i d e r e d t o b e a s s o c i a t e d w i t h c a r d i o c e r e b r o v a s c u l a r d i s e a s e s,A l z h e i m e r's d i s e a s e, c h r o n i c k i d n e y d i s e a s e,t y p e2d i a b e t e s a n d s o o n.I t p r o m o t e s t h e o c c u r r e n c e a n d d e v e l o p m e n t o f d i s e a s e s b y p r o m o t i n g e n d o t h e l i a l c e l l i n j u r y,i n f l a mm a t o r y r e a c t i o n,o x i d a t i v e s t r e s s,p l a q u e f o r m a t i o n,e t c.T h i s a r t i c l e r e v i e w s t h e r e s e a r c h p r o g r e s s o f t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n T MA O w i t h t h e o c c u r r e n c e a n d d e v e l o p m e n t o f k i d-n e y i n j u r y-r e l a t e d d i s e a s e s i n o r d e r t o e x p l o r e m o r e p o s s i b i l i t i e s o f p r e v e n t i o n a n d t r e a t m e n t f o r c l i n i c i a n s a n d p a t i e n t s w i t h k i d n e y d i s e a s e.K e y w o r d s:t r i m e t h y l a m i n e-N-o x i d e; c h r o n i c k i d n e y d i s e a s e;i n t e s t i n a l m e t a b o l i t e s;i n f l a mm a t o r y r e a c t i o n;g u t m i c r o b e s慢性肾脏疾病(C K D)是一种临床综合性病变,常继发于肾脏结构和功能的改变,肾脏损害标志物异常超过3个月或至少持续3个月[1]㊂C K D影响全球近15%的人口[2],是一种严重且不可逆的疾病,导致高发病率和高病死率,如果能早期发现并成功干预,将延缓病情进展㊁改善预后㊂研究发现,高浓度的肠源性毒素三甲胺-N-氧化物(T MA O)在内皮细胞高通透性和炎症㊁氧化应激㊁胆固醇代谢㊁斑块形成㊁血小板活化和血栓形成中起着至关重要的作用[3],对心脑血管疾病㊁糖尿病等慢性非传染性疾病的预防㊁诊断㊁治疗及预后评估具有重要的临床意义㊂近年来,T MA O 在肾损伤相关疾病的发生㊁发展与预后中也发挥重要作用[4]㊂本文主要就T MA O与C K D的关系和相关治疗的研究进展作一综述,以期为下一步科学研究和临床治疗提供参考㊂1 T MA O介绍T MA O是由肉碱㊁胆碱㊁甜菜碱等含量丰富的食物,如蛋类㊁牛奶㊁红肉及咸水鱼类等[5],经肠道微生㊃2073㊃检验医学与临床2023年12月第20卷第24期 L a b M e d C l i n,D e c e m b e r2023,V o l.20,N o.24*基金项目:复杂基质样本生物分析湖南省重点实验室资助项目(2017T P1037)㊂ә通信作者,E-m a i l:n h f y j g b g s@163.c o m㊂网络首发h t t p s://l i n k.c n k i.n e t/u r l i d/50.1167.R.20231120.1216.006(2023-11-21)物的作用形成三甲胺(T MA),再经肝脏黄素单加氧酶(F MO)家族(主要是F MO3)氧化而生成,并进入血液循环的胺类小分子化合物,其最终通过呼吸㊁汗液㊁肾脏等途径代谢清除[6]㊂目前,已知约有100万亿肠道微生物在健康成年人的肠道中与人体共存,是人体不可分割的一部分[7]㊂特别是在C K D患者中,肠道微生物的平衡关系被打破,导致如T MA O等相关的毒素合成增加,并进入体循环,随着T MA O的肾脏清除率下降,从而导致T MA O水平在C K D患者中升高㊂2 T MA O对肾脏的影响机制C K D发病机制仍未被完全阐明,炎症反应㊁氧化应激反应㊁微血管内皮功能障碍㊁肾小管上皮细胞损伤等均是C K D发病的潜在机制㊂因此,本文着重关注了T MA O在肾损伤机制中的作用㊂2.1 T MA O与内皮细胞损伤及炎症反应 T MA O 可通过多种途径介导血管损伤和炎症反应㊂T MA O 能通过琥珀酸脱氢酶复合体B亚基/活性氧簇(S D H B/R O S)信号通路破坏线粒体的结构和功能,减少三磷酸腺苷(A T P)的产生并诱导内皮细胞凋亡㊂S A A O U D等[8]在动物模型中的研究也证实,T MA O 可通过蛋白激酶R样内质网激酶(P E R K)途径,诱导线粒体R O S,促进血管炎症细胞因子,如细胞间黏附分子-1(I C AM-1)㊁白细胞介素(I L)-1β㊁I L-6等的表达㊂Y O N G等[9]建立体内和体外TMA O损伤模型,发现T MA O可以增加血尿素氮(B U N)和胱抑素C (C y s C)的水平,加重肾小管上皮细胞凋亡,而紫苏提取物可以通过抑制体内凋亡信号调节激酶1-c-J u n氨基末端激酶(A S K1-J N K)磷酸化来减少T MA O诱导的肾小管上皮细胞的凋亡㊂L A I等[10]发现T MA O 能显著加重肾衰竭以及炎症细胞浸润,其通过激活磷酸化p38和上调人类抗原R(H u R)来上调单核细胞趋化蛋白-1(M C P-1)㊁肿瘤坏死因子-α(T N F-α)㊁I L-6㊁I L-1β和I L-18等炎症因子,并促进隐热蛋白(N L-R P3)炎症小体的形成以及肾组织中植物半胱氨酸蛋白酶-1(C a s p a s e-1)和I L-1β的活化,证实T MA O是导致肾炎性损伤和肾功能损害的因素之一,并提出抑制TMA O合成或促进其清除可能是未来C K D的潜在治疗方法㊂此外,血管钙化在C K D患者中也非常普遍㊂T MA O可以通过激活N L R P3炎症小体和核转录因子-κB(N F-κB)信号,促进血管钙化,表明肠道微生物代谢与血管钙化之间存在一定的联系[11]㊂2.2 T MA O与肾纤维化既往动物模型中已证实,膳食胆碱和膳食T MA O均能促进肾小管间质纤维化和功能障碍,且C K D抵抗小鼠体内早期肾损伤敏感指标肾损伤分子-1(K I M-1)与血浆C y s C的水平均升高,同时伴有转化生长因子-β(T G F-β)/肾纤维化重要调节因子S m a d3基因的磷酸化水平升高,这些结果则表明T MA O可能会直接导致进行性肾纤维化和功能障碍[12]㊂O R G A N等[13]发现使用富含T MA O或胆碱饮食喂养的大鼠,其循环T MA O水平显著增加,在血管炎症因子和超氧化物歧化酶(S O D)表达增加的同时,内皮型一氧化氮合酶(e N O S)的表达降低,并引起血管内皮一氧化氮表达降低,导致老年大鼠和C K D 大鼠血管内皮细胞功能障碍,加剧了肾纤维化,且停止食用富含T MA O的饮食后纤维化反应显著降低㊂K A P E T A N A K I等[14]也发现T MA O通过P E R K/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P E R K/A K T/ m T O R)途径㊁N L R P3和C a s p a s e-1信号传导活化肾成纤维细胞,增加胶原蛋白的合成,促进肾间质纤维化㊂此外,高尿酸血症也是发生肾损伤的独立危险因素,可诱导肾纤维化㊂Z HO U等[15]发现高尿酸血症肾病(H N)大鼠血清T MA O水平显著增加,而通过调节微生物-T MA O-人磷脂酰肌醇三羟基激酶(P I3K)/ A K T/m T O R信号通路的级联反应可推迟H N大鼠肾纤维化㊂2.3 T MA O与氧化应激反应 C K D患者的内皮功能依赖于一氧化氮,而C K D相关一氧化氮缺乏症的一个重要机制是氧化应激增加㊂T MA O通过氧化应激作用,促进与年龄相关的内皮功能障碍㊂这在高胆碱食物摄入的实验中也得到了证实[16]㊂同时,促炎性细胞因子和超氧化物生成的增加,e N O S表达减少,也与年龄呈正相关,衰老增加了循环T MA O水平㊂而使用含抗氧化剂的食物,也许是提高抗氧化酶产量㊁减少T MA O介导的氧化应激的一种有前途的策略[17]㊂2.4 T MA O与斑块形成和血栓 C K D患者是发生血栓并发症的高风险人群㊂很多临床和实验模型研究都证明了T MA O可以激活血小板并增加血栓风险,其通过多种机制在动脉粥样硬化的发生㊁发展过程中呈促进作用,并且甜菜碱和胆碱作为磷脂酰胆碱代谢物,均与促进动脉粥样硬化风险呈明显相关[18]㊂T MA O可通过增加与动脉粥样硬化有关的巨噬细胞清道夫受体C D36和A1类清道夫受体(S R-A1)水平,抑制脂质逆转,促进内源性泡沫细胞增加,加速动脉粥样硬化的形成㊂而降低T MA O能通过促进巨噬细胞M2极化和胞葬作用来增强粥样硬化斑块的稳定性㊂此外,T MA O还可削弱内皮细胞的自我修复能力,增加单核细胞黏附能力[19];并与血小板相互作用,诱导血小板高反应性,导致血栓形成;通过激活肌醇-1,4,5-三磷酸(I P3)和P E R K/R O S途径,增加细胞内质网钙的释放,从而导致血小板聚集和血栓形成,引起肾损伤[20]㊂早期M e t a分析发现,C K D患者动脉粥样硬化负荷与血液循环中T MA O水平呈明显正相关,且严重影响患者预后[21]㊂T MA O水平每增加10μm o l/L,不良事件发生率升高26%㊂此外, T MA O还降低胆汁酸合成所必需的两种关键酶㊃3073㊃检验医学与临床2023年12月第20卷第24期 L a b M e d C l i n,D e c e m b e r2023,V o l.20,N o.24细胞色素P450家族成员7A1㊁27A1(C Y P7A1/ 27A1)的表达,降低胆汁酸量,导致逆向胆固醇转运减少并堆积于细胞内,促进动脉粥样硬化形成[22]㊂而斑块和血栓的形成,是导致肾功能受损的重要因素之一㊂3 T MA O在C K D中的应用TMA O不但在基础研究方面进展迅速,也被越来越多地应用到了临床,与C K D的诊断㊁治疗㊁预后息息相关㊂3.1 T MA O与肾功能损伤关于高血压导致的肾损害的诊断,主要是基于肾小球滤过降低和(或)检测到蛋白尿,暂无其他敏感和特定的指标用于早期诊断和治疗㊂有研究发现在高血压肾功能损伤患者中,就存在十余种分布异常的氨基酸,且相对于非C K D患者,C K D患者尿液中含有包括T MA O在内的多种代谢标记物[23]㊂Z E N G等[24]在一项纳入了32项临床研究的M e t a分析中得出结论,肾小球滤过率下降与T MA O浓度升高具有相关性㊂P E L L E T I E R等[25]测定C K D和血液透析患者的血浆T MA O水平,发现C K D组的血浆T MA O水平显著升高,并与肾小球滤过率呈负相关㊂这些研究都表明,T MA O与肾功能损伤有一定的相关性㊂笔者认为,通过药物干预或健康管理等手段,或许可以抑制因T MA O产生而导致的肾损伤㊂3.2 T MA O与饮食指导对于部分C K D患者而言,肠道微生物失调是导致C K D发生㊁发展的罪魁祸首,而T MA O的代谢途径也高度依赖肠道微生物,这种双向交流之间的任何干扰都会导致或加重C K D的发生㊁发展㊂Y O O等[26]发现高脂饮食会损害结肠上皮细胞线粒体的功能,使肠道氧气和硝酸盐的浓度增加,促进大肠埃希菌的生长以及对胆碱的分解,导致T MA水平增加,最终导致循环中有害代谢物T MA O水平的升高㊂W I E S E等[27]回顾了目前关于将植物性饮食作为饮食干预,减少C K D患者肠道T MA O产生的证据,提出植物性饮食是减缓C K D进展和降低心血管疾病风险的一种干预措施㊂而WA N G等[28]则发现一些鱼类和海鲜含有高水平的T MA O,对于有心血管疾病或肾功能受损的患者,就需要谨慎选择T MA O含量低的鱼类㊂K Y AW等[29]证实,长期服用高剂量味精可能会降低因急性肾损伤而导致的肾脏排泄率,从而引起T MA O在血液中积聚㊂不过,也有学者提出,肠道微生物群落的结构和功能与由T MA O等尿毒症毒素引起的肠道微环境改变相关[30]㊂如果不同时改善肠道微环境,只是尝试通过引入有益微生物来恢复所需的肠道菌群并不一定有效㊂因此,如果在预防和治疗中多关注肠道㊁相关微生物和肾脏之间的双向或多向通信连接,即肠道-肾脏轴 ,注意健康管理中的饮食调节和肠道微生物的治疗,可以潜在地延缓C K D的发生㊁发展以及心血管疾病风险㊂3.3 TMA O与预后的关系 T MA O与C K D的发生㊁发展及预后关系的临床研究也取得了一些成果㊂早在2000年,就有研究通过检测尿液和血浆中T MA O水平作为指标之一来评估器官移植中移植物功能障碍与肾髓质损伤程度,指导肾脏保存及预测保存后的肾损伤情况[31]㊂K O N I E C Z N Y等[32]也发现T MA O水平升高与心血管事件和心血管疾病病死率的增加呈正相关㊂C H A N G等[33]探讨了T MA O与腹膜透析(P D)患者预后之间的关系,发现血清T MA O水平与P D患者首发腹膜炎和心脑血管疾病死亡的风险呈正相关㊂T A I N等[34]研究母体C K D模型是否影响后代患有高血压和肾病,结果表明,C K D 后代患高血压和肾肥大与血浆T MA O水平增加㊁氧化应激和肠道微生物变化有关㊂此研究结果为靶向肠道微生物群以减少T MA O的产生提供了深入的见解,具有预防母代C K D导致的后代高血压的治疗潜力㊂L A U C Y T E-C I B U L S K I E N E等[35]发现终末期肾病患者体内新心脑血管疾病生物标志物,如生长分化因子-15(G D F-15)㊁血清甲壳质酶蛋白40(Y K L-40)㊁基质金属蛋白酶9(MM P-9)水平与肠道微生物㊁血管钙化㊁炎症㊁共病和全因死亡率之间还存在一定的性别特异性,发现G D F-15水平的增加仅与女性T MA O 升高相关,为性别差异化治疗提供了一定的思路㊂4讨论综上所述,肠道微生物的代谢物T MA O与多种肾脏疾病的发生㊁发展密切相关,血液中T MA O水平升高可明显增加肾脏相关疾病的发病风险㊂大量实验研究表明,通过加强健康管理㊁改善饮食结构㊁调整微生物代谢等手段可以使肾相关疾病的发生率下降,并能有效改善预后㊂但是,临床上由于生活习惯及饮食结构的不同,以及药物之间相互作用等因素,针对T MA O与肾脏相关疾病的临床研究还是比较少,给饮食调节㊁健康管理㊁疾病防治提供的参考也就相对较少,而且目前很多临床方面的研究都是单次研究,所提供的依据还不够充分㊂目前降低血中T MA O水平或阻断T MA O的影响主要有4种可能的方法[36],包括减少饮食中T MA前体的摄入,调节肠道菌群以减少T MA的产生,中断F MO亚型的作用以减少T MA O的产生,以及阻断P E R K途径㊂后续可通过增加此4类相关的研究,或是探寻其他信号通路,进一步明确T MA O与各种疾病的相关性及敏感性,则T MA O等相关肠道代谢产物有望成为常规的检测指标以及治疗靶标用于临床,给医患双方提供更明确的参考和指导临床治疗㊂参考文献[1]MA N N J F E,C HA N G T I,C U S HMA N W C,e t a l.㊃4073㊃检验医学与临床2023年12月第20卷第24期 L a b M e d C l i n,D e c e m b e r2023,V o l.20,N o.24C o mm e n t a r y o n t h e KD I G O2021c l i 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n.1672-9455.2023.24.028肌少症与认知障碍的相关性及机制研究进展*张金英,陈春暖,杨滢霞,陈雅芳综述,杨美丽ә审校福建医科大学附属第二医院神经内科,福建泉州362000摘要:肌少症既涉及复杂的遗传因素,也涉及可改变的危险因素,如缺乏锻炼㊁营养不良和神经动力减弱㊂认知障碍指的是智力和(或)智力功能减弱或受损㊂肌少症可促进认知障碍的发展,认知障碍可引起肌少症,两者互为因果㊂该文阐述了肌少症㊁认知障碍的危险因素,从肌动蛋白分泌失衡㊁血管功能障碍㊁神经肌肉系统的完整性受损㊁维生素D㊁慢性炎症㊁氧化应激㊁糖尿病㊁胰岛素抵抗㊁生活方式等方面对肌少症和认知障碍关联的可能机制进行初步探讨,以期为及时识别肌少症和认知障碍个体提供参考㊂关键词:肌少症;认知障碍;机制;肌动蛋白;胰岛素抵抗中图法分类号:R685;R749文献标志码:A文章编号:1672-9455(2023)24-3706-05R e s e a r c h p r o g r e s s o n c o r r e l a t i o n b e t w e e n s a r c o p e n i a a n d c o g n i t i v e i m p a i r m e n t a n d i t s m e c h a n i s m*Z HA N G J i n y i n g,C H E N C h u n n u a n,Y A N G Y i n g x i a,C H E N Y a f a n g,Y A N G M e i l iәD e p a r t m e n t o f N e u r o l o g y,S e c o n d A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f F u j i a n M e d i c a l U n i v e r s i t y,Q u a n z h o u,F u j i a n362000,C h i n aA b s t r a c t:S a r c o p e n i a i n v o l v e s b o t h c o m p l e x g e n e t i c f a c t o r s a n d m o d i f i a b l e r i s k f a c t o r s s u c h a s l a c k o f e x-e r c i s e,m a l n u t r i t i o n a n d d i m i n i s h e d n e u r o d y n a m i c s.C o g n i t i v e i m p a i r m e n t r e f e r s t o d i m i n i s h e d o r i m p a i r e d i n-t e l l i g e n c e a n d/o r i n t e l l e c t u a l f u n c t i o n i n g.S a r c o p e n i a c a n c o n t r i b u t e t o t h e d e v e l o p m e n t o f c o g n i t i v e i m p a i r-m e n t,a n d c o g n i t i v e i m p a i r m e n t c a n c a u s e s a r c o p e n i a,w h i c h a r e m u t u a l l y r e i n f o r c i n g.T h i s a r t i c l e e l a b o r a t e s ㊃6073㊃检验医学与临床2023年12月第20卷第24期 L a b M e d C l i n,D e c e m b e r2023,V o l.20,N o.24 *基金项目:福建医科大学校启航基金项目(2020Q H1122)㊂ә通信作者,E-m a i l:274006569@q q.c o m㊂。

1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)通过保护肠黏膜屏障功能缓解炎症性肠病的作用

(IFN-酌)水平。结果野生型(WT)小鼠存活率及体重高于S1PR2-/-小鼠，差异有统计学意义(P＜0.05)oSlPR2-/-
小鼠的结肠缩短比WT小鼠更明显，差异有统计学意义(孕＜0.05)。DSS处理组小鼠结肠细胞悬液中IFN-*IL-6
和TNF-琢浓度较对照组水平升高，差异有统计学意义(孕＜0.05)。结论S1PR2通过保护肠黏膜屏障功能缓解炎
炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)是一种胃肠黏膜存在持续性炎症反应导致胃肠结构和功能紊乱的特发性肠道炎症性疾病，临床表现为腹泻、腹痛，甚至可有血便,主要包括溃疡性结肠炎(Ul cerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD)o
•基础医学-
中国现代医生2021年5月第59卷第15期
1-磷酸鞘氨醇受体圆(S1PR2)通过保护肠黏膜屏障功能缓解炎症性肠病的作用
薛海波1
宋冰欣1
丁莉1
马丽丽2
潘贻飞3
陈坛辀S
1 .温州医科大学附属第一医院消化内科,浙江温州325000 ； 2.温州医科大学附属第一医院风湿免疫科,浙江温州
325000；3.温州医科大学附属第一医院结直肠肛门外科，浙江温州3体2(S1PR2)通过保护肠黏膜屏障缓解炎症性肠病的作用。方法构建S1PR2
基因敲除鼠。用硫酸葡聚糖钠盐(DSS)诱导结肠炎。血清荧光素异硫氰酸酯(FITC)浓度测定体内外小鼠肠道渗透
性。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞悬液中的肿瘤坏死因子-琢(栽晕云-琢)、白细胞介素-6(IL- 6)和干扰素-酌
科大学附属第一医院伦理委员会。 1.2.2小鼠一般状况观察以喂食DSS开始算起，取 0、4、7和14 d小鼠结肠和血，每个时间点各取WT和 KO 6只，解剖小鼠并检测结肠长度。每天称量小鼠体重和收取粪便，记录小鼠体重变化和生存情况。 1.2.3小鼠肠通透性检测使用异硫氰酸荧光素(Fluo rescein isothiocyanate, FITC)标记的葡聚糖(FITC -葡聚糖,Sigma-Aldrich,St.Louis, MO, USA)测量活体小鼠肠通透性。采小鼠外周血与磷酸缓冲液(Phosphatic buffer solution,PBS)溶液1：3体积稀释,测血清中 FITC含量,进而绘制标准曲线。简单来说，先将小鼠禁食6 h,然后给予50 mg/mL的FITC-葡聚糖灌胃处理(0.6 mg/g体重)。1 h后,经尾静脉采血120 pX。然后按照前述方案给予小鼠DSSO 14 d后，在实验结束或处死小鼠前同样给予50 mg/mL FITC-葡聚糖灌胃 (0.6 mg/g体重),后经心脏采血120 pLo将收集到的血液离心，用PBS溶液1：1体积稀释血浆。使用多功能酶标仪(BioTek, Winooski, VT, USA)在激发波长 485 nm 和发射波长535 nm下测FITC-葡聚糖浓度。 1.2.4结肠组织学10%福尔马林固定结肠切片组织，苏木精和伊红染色(匀&耘)遥显微镜(Olympus IX70, Olympus, Shinjuku, Tokyo, Japan )下观察。 1.2.5制备结肠组织细胞悬液颈椎脱位法处死小鼠，取仰卧位,打开腹腔。切取结肠测量长度,清理肠道内容物，并用含1%胎牛血清(Foetal bovine serum,FBS) 和不含钙镁离子的平衡盐溶液(Free of calcium and magnesium, CMF-HBSS )清洗肠道。将结肠切至2 mm 大小，浸泡在含有3 mM［3］乙二胺四乙酸(Ethylene di amine tetraacetic acid,EDTA)的 CMF-HBSS 中，置于台式恒温振荡器振荡,37益, 180 rpm/min。振荡30 min 后离心，用含1 mg/mL郁型胶原酶和DNA酶I的HBSS 溶液消化沉淀1.5 h,300目网筛过滤去除杂质和未消化的组织块后,得到小鼠结肠组织的细胞悬浮液。 1.2.6酶联免疫吸附试验(ELISA)将上述得到的小鼠结肠细胞悬液离心，用PBS液洗2次，然后用含10% FBS的无血清细胞冻存培养基(Roswell park memorial institute,RPMI)1640重悬。细胞计数后，接种细胞至 24孔板(每孔4x105细胞)，培养24 ho ELISA试剂盒 (R&D Systems,Minneapolis,MN,USA)测上清中肿瘤坏死因子-琢 ( Tumor necrosis factor-琢, TNF-琢)、白介素一6 (Interleukin-6,IL-6)、酌一干扰素(Interferon-酌, IFN-酌)浓度。 1.3统计学处理

HMS-01的遗传毒性评价

HMS-01的遗传毒性评价
陈弋;孙青䶮;黎翔;孙旸;刘霞
【期刊名称】《药学实践与服务》
【年(卷),期】2024(42)4
【摘要】目的检测HMS-01的遗传毒性,并对其进行临床前安全评价研究,为后续该药物进入临床试验提供支持。

方法采用鼠伤寒沙门氏菌进行细菌回复突变试验(Ames试验)评价HMS-01的遗传毒性。

结果HMS-01在20.6、61.7、185.2、555.6、1666.7、5000μg/皿的6个剂量下,无论有无代谢活化条件,对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性。

结论在本实验剂量范围内,HMS-01未见致突变性。

【总页数】5页(P147-150)
【作者】陈弋;孙青䶮;黎翔;孙旸;刘霞
【作者单位】海军军医大学药学系临床药学教研室;先导物成药性研究全国重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】S85
【相关文献】
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4.益母草碱对胚胎-胎仔发育毒性和遗传毒性的评价
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医疗器械生物学评价标准清单

2020-06-01
SAC/TC248
77
YY/T0870.3-2019
医疗器械遗传毒性
试验第3部分：用小鼠淋巴瘤细胞进行的TK基因突变试验
2019-07-24
2020-08-01
SAC/TC248
序号
标准编号
标准名称
发布日期
实施日期
替代关系
（已发布尚未实施的标
准适用）
归口单位
78
YY/T0870.4-2014
2019-06-04
2020-01-01
SAC/TC248
58
GB/T 16886.4-2003
医疗器械生物学评
价第4部分：与血液相互作用试验选择
2003-03-05
2003-08-01
SAC/TC248
59
GB/T 16886.5-2017
医疗器械生物学评
价第5部分：体外细胞毒性试验
2017-12-29
SAC/TC248
62
GB/T 16886.9-2017
医疗器械生物学评
价第9部分：潜在降解产物的定性和定量框架
2017-12-29
2018-07-01
SAC/TC248
63
GB/T
医疗器械生物学评
2017-12-29
2018-07-01
SAC/TC248
16886.10-
价第10部分：刺
2017
实施日期
替代关系
（已发布尚未实施的标
准适用）
归口单位
88
YY/T0879.1-2013
医疗器械致敏反应
试验第1部分：小鼠局部淋巴结试验（LLNA）放射性同位素掺入法

一种通用型水基消泡剂的毒理学安全性研究

一种通用型水基消泡剂的毒理学安全性研究苑麟勇;安立龙;陈春亮【摘要】为了探讨一种通用型水基消泡剂DREWPLUS 5350 EP的毒理学安全性,以昆明系小鼠为研究对象,依据毒理学中国试验标准,通过小鼠急性毒性试验、蓄积毒性试验、骨髓微核试验、亚急性毒性试验方法,研究了其对小鼠的毒性,并对其进行了评价.结果表明:急件毒性试验小鼠经口LD50＞24414mg·kg-1(bw),属实际无毒级;蓄积毒性试验、小鼠微核试验为阴性;在高剂量大于等于5375mg·kg-1(bw)的试验条件下,亚急性毒性试验小鼠血清谷丙转氨酶与对照组相比差异极显著,肝脏系数差异极显著;其它检测指标均未观察到有毒理学意义的异常变化;小鼠经口摄入DREWPLUS 5350 EP消泡剂小于等于2688mg·kg-1(bw)是安全的.在使用过程中对环境不会造成二次污染.【期刊名称】《生态毒理学报》【年(卷),期】2010(005)001【总页数】6页(P143-148)【关键词】消泡剂;毒理学;安全性【作者】苑麟勇;安立龙;陈春亮【作者单位】广东海洋大学农学院,湛江,524088;广东海洋大学农学院,湛江,524088;广东海洋大学海洋资源与环境监测中心,湛江,524088【正文语种】中文【中图分类】R991各种工业生产中会产生大量的泡沫，为了消除生产中的危害泡沫，需要在生产中使用消泡剂（Joshietal.,2005;Denkov,2004;Bulland Kempe,2004;王芸等，2008;黄劲松和张庆怀，1999）.消泡剂可降低表面张力，消除泡沫，目前已广泛应用于食品加工、蔗糖生产、医药生产、饲料工业、酶制剂、微生态制剂等一些饲料添加剂的生产过程中（程玉来等，2006;覃先武等，2006;赵乐义，2001;石明理和张锐奋，1984;徐江伟，2002）.其中一些产品可被人或畜禽直接食用，或排入江河湖海等环境中，因此可能会对生态环境和人体健康造成影响.消泡剂卫生安全问题目前已引起广泛重视（黎鹰，2000;吴蕙岭和杨百南，1992;叶永茂，2005）.DREWPLUS 5350 EP消泡剂是一种通用型水基消泡剂，主要用于水处理系统，它的消泡性能基于德鲁独特的凝胶粒子技术，当水中的硬度比较高时，凝胶颗粒会变成非常疏水的颗粒，然后使泡沫破裂，使用效果较好.但该种消泡剂是否安全，对人、动物及环境是否有影响尚未见详细文献资料.为此本文选取DREWPLUS 5350 EP消泡剂，对其进行毒理学安全性研究，以便为消泡剂的安全利用提供参考.2.1.1 消泡剂DREWPLUS 5350 EP消泡剂，由亚什兰管理（上海）有限公司提供.物理状态：粘性液体；颜色：白色；密度0.96g·cm-3，易溶于水.2.1.2 样品处理将样品用蒸馏水制备成各剂量组所需浓度.2.1.3 试验动物体重18～32g昆明系小鼠（KM小鼠），购于广东医学院实验动物中心（合格证号：2003A067）.2.1.4 动物饲养环境室温控制在（20～25）℃，相对湿度为50%～70%.2.1.5 基础饲料广东医学院实验动物中心提供的常备全价饲料，其中含蛋白质22%.根据GB1519.3-2003《急性毒性试验》进行.2.2.1 急性毒性试验（1）LD50的测定：选60只体重为（20±2）g健康小鼠，雌雄各半，禁食8h，不禁水，随机分为6组，每组10只，雌雄各半，分笼饲养.各组剂量分别为0、10000、12500、15625、19531、24414mg·kg-1（bw），按等容量法灌胃给药，于24h内分两次经口灌胃小鼠，对照组灌胃蒸馏水.连续观察7d小鼠中毒及死亡情况，清点各组的死亡小鼠数，按改良寇氏法计算LD50.（2）最大耐受量（MTD）的测定：选30只体重为（20±2）g健康小鼠，随机分为3组，每组10只，雌雄各半，以24000、21500、19265mg·kg-1（bw）3个剂量，分3次于24h内对小鼠进行灌服给药.实验前禁食8h，不禁水.连续观察7d，记录动物反应情况，以不产生死亡的最大剂量为最大耐受量.2.2.2 蓄积毒性试验取体重为（20±2）g的小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半，设4个暴露组和1个对照组，按0、1000、2000、4000、8000mg·kg-1（bw）的剂量连续灌胃给药20d，给药期间观察小鼠的精神、食欲、饮水及死亡情况和有无异常反应，并定期测定各组小鼠的体重和采食量.给药停止后7d内观察小鼠的死亡情况及体重的一般变化.2.2.3 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验选健康小鼠50只，体重为25～30g，随机分成5组，每组10只，雌雄各半（分笼喂养），3个暴露组分别按1/30 MTD、1/3 MTD、MTD剂量灌胃药液；阴性对照组灌等量蒸馏水；每天同一时间给药，连续给药5d.阳性对照组一次给予环磷酰胺（40mg·kg-1（bw））.最后一次给药后24h处死动物，取股骨，用2%柠檬酸钠将骨髓细胞冲入离心管，洗涤离心3次，最后一次离心后弃去上清液，留少量悬浮细胞液进行涂片.片晾干后在甲醇中固定10min，用10%Giemsa应用液染色5min左右，以常水冲洗干净，在油镜下选择细胞分散好，形态完整，染色良好的部位，按一定顺序进行计数.每只小鼠计数嗜多染红细胞（PCE为蓝灰色）及含微核细胞（MN-PCE）共1000个，计算微核的千分率（‰）（公式：嗜多染红细胞微核率（‰）=（含微核的嗜多染红细胞数/嗜多染红细胞总数）×1000‰）.2.2.4 亚急性毒性试验根据国家行业标准NY/T 1031-2006《饲料安全性评价亚急性毒性试验》进行.选50只体重为（20±2）g健康小鼠，随机分为5组，每组10只，雌雄各半（分笼喂养）.3个暴露组分别按1/8 MTD、1/4 MTD和1/2 MTD剂量灌胃药液；阴性对照组灌等量蒸馏水；阳性对照组给予环磷酰胺（40mg·kg-1（bw））.每天同一时间给药，连续给药14d.1）测定小鼠体重变化与饲料利用率：给药后每天观察小鼠的体重变化、采食量和行为等情况.在试验开始时各组称重1次，以后每周末称1次体重，在第35d试验结束时称重1次.2）血液生化指标：于试验结束时，空腹12h眼球取血，采用南京建成生物工程研究所的试验盒，722S分光光度计（上海精密科学仪器有限公司生产）进行谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）测定.3）脏器系数测定：于试验结束处理动物前称体重，处死小鼠后取肝、肾脾、心脏、脾、心脏精确称重，计算相应的脏体比（以百克体重计算），脏器系数（%）=（脏器重量/体重）×100%.4）病理组织学：试验结束处理动物，除肉眼观察外，取肝、肾、脾、心脏放入波恩氏液中固定，石蜡切片，H·E·染色，在显微镜下观察组织形态的变化.小鼠经口毒性试验，随着剂量的加大，拉稀、精神不振趋于明显.24414mg·kg-1（bw）组中个别可见轻微中毒反应，并有一只雄性小鼠死亡，其它各组生长状况良好，均无死亡发生（表1）.由表1可知小鼠经口LD50（半数致死量）>24414mg·kg-1（bw）.根据国家标准GB1519.3-2003，DREWPLUS 5350 EP消泡剂属实际无毒级.由于无法测出LD50，需进行最大耐受量的测定. 当以24000mg·kg-1（bw）剂量灌胃小鼠后，有一只小鼠死亡.当以21500mg·kg-1（bw）剂量灌胃小鼠后，小鼠活动明显减少，24h后活动状态恢复正常，观察期间除有个别小鼠出现拉稀、精神不振外，无死亡发生.因此本试验确定此消泡剂对小鼠的经口MTD为21500mg·kg-1（bw）.在给药期间及停药7d内，小鼠未出现死亡，除刚灌胃后出现精神萎靡不振和个别小鼠拉稀外无异常表现.各组小鼠的体重变化和摄入的饲料量及药物量见表2.由表2可知，连续给药20d后各剂量组小鼠未出现死亡，在停止给药后7d内动物仍未出现死亡，经20d给药后，各剂量组小鼠的平均增加体重与对照组相比较差异均不显著（p>0.05）.结果显示该消泡剂对小鼠无蓄积毒性.小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验镜检结果见表3.由表3结果可见，环磷酰胺阳性对照组微核发生率明显高于各剂量组，随着剂量的增大，微核细胞数有增多的趋势，但各试验组与阴性对照组比较无显著性差异（p＞0.05），各试验组之间也无显著差异（p＞0.05）.说明DREWPLUS 5350 EP消泡剂对小鼠体细胞染色体无致突变作用.3.5.1 对生长状况的影响试验期间观察各组动物摄食、饮水、粪便均正常，未出现中毒性临床症状.各组小鼠的生长状况、采食量、饲料利用率如表4所示.由表4可知，各试验组与对照组之间的体增重、采食量与饲料利用率差异均不显著（p＞0.05），各试验组之间差异也不显著（p＞0.05）.表明该消泡剂对小鼠体增重、采食量、饲料利用率没有明显影响.3.5.2 血液生化指标检测结果试验结束时第35d采血，检测小鼠血液生化指标.结果如表5所示.由表5得知，各剂量组与对照组之间血清谷草转氨酶、尿素氮、肌酐含量差异不显著（p＞0.05），各试验组之间谷草转氨酶、尿素氮、肌酐含量差异也不显著（p＞0.05）.而1/2 MTD、1/4 MTD剂量组谷丙转氨酶含量和对照组之间差异极显著（p＜0.01）；1/2 MTD、1/4 MTD剂量组谷丙转氨酶含量和1/8 MTD之间差异极显著（p＜0.01）；1/8 MTD剂量组谷丙转氨酶含量与对照组之间差异不显著（p＞0.05）；1/4 MTD、1/2 MTD剂量组之间谷丙转氨酶含量差异不显著（p＞0.01）.各剂量组谷丙转氨酶/谷草转氨酶＜1.表明当对小鼠经口灌胃5375、10750mg·kg－1（bw）剂量时对肝功能有一定的影响.3.5.3 对脏器发育的影响试验结束时第35d采血后，处死受试小鼠，取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏称重，进行脏器系数计算.结果如表6所示.由表6可知，各试验组与对照组之间的心脏系数、脾脏系数、肺脏系数、肾脏系数差异均不显著（p＞0.05），各试验组之间的心脏系数、脾脏系数、肺脏系数、肾脏系数差异也不显著（p＞0.05）.1/4 MTD、1/2 MTD剂量组与对照组之间的肝脏系数差异极显著（p＜0.01）；1/4 MTD、1/2 MTD剂量组与1/8 MTD剂量组之间的肝脏系数差异极显著（p＜0.01）.表明当对小鼠经口灌胃5375mg·kg－1（bw）剂量时对肝脏发育有一定影响.对心脏、脾脏、肺脏、肾脏发育无影响.3.5.4 解剖及病理组织学检查结果大体解剖各组小鼠各脏器未见明显异常.组织学检查小鼠心脏、肝、肾、脾、肺，未见其他特异性病理学改变.说明该消泡剂对小鼠心脏、肝、肾、脾、肺无实质性损害.DREWPLUS 5350 EP消泡剂含有脂肪醇、液体石蜡及微量的1,2-苯并异噻唑-3-酮（BIT）、氢氧化钠等成份.其中BIT是重要的工业杀菌防霉、防腐剂.毒性研究表明，BIT大白鼠急性经口LD50为1400mg·kg－1；亚急性慢性毒性研究未发现致癌、致畸、致突变性，被认为是安全、无害的绿色环保产品之一（倪越等，2004）.氢氧化钠有详细的毒理学资料，经小鼠腹腔注射LD50为40mg·kg－1.但在DREWPLUS 5350 EP消泡剂中氢氧化钠浓度低于0.1%，故对该消泡剂毒性影响不大.脂肪醇是表面活性剂的原料之一，直链脂肪醇的毒性随链长的增加（体积增大）而增大，但是研究表明，从正十三醇开始，毒性明显降低（王树兰等，1996）.然而，由于时间和试验经费的限制，每一种脂肪醇的毒性不可能都通过试验而获得，因此，王连生和支正良（1992）已采用分子连接性指数法对其进行了研究并获得了较好的结果.另一成份液体石蜡，文献资料显示急性毒性试验结果属于低毒（王遵尧等，2004），液体石蜡油有泻药的作用.所以本试验中经口灌胃的小鼠有拉稀现象发生，可能与液体石蜡有关.本次毒理学试验，除对DREWPLUS 5350 EP消泡剂进行了急性毒性和蓄积毒性的检测外，还探讨了亚急性试验期间未观察到毒性效应的剂量水平，并为慢性试验寻找了灌胃剂量及观察指标，此外还采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验，对其致突变性进行了研究.实验结果显示，DREWPLUS 5350 EP消泡剂毒性分级属实际无毒级；无蓄积毒性；微核试验检测为阴性，表明其对细胞染色体无明显的致突变性效应.但在亚急性试验中，当大剂量灌胃1/4 MTD（5375mg·kg－1（bw））、1/2 MTD（10750mg·kg－1（bw））时，血清谷丙转氨酶、肝脏系数明显升高，与对照组有极显著差异，然而病理组织学检查未观察到其他特异性病理学改变，提示当对小鼠灌胃高剂量1/4 MTD（5375mg·kg－1（bw））、1/2 MTD （10750mg·kg－1（bw））时，该消泡剂对肝脏的功能和发育会有一定的影响，但对肝脏没有实质性的损害.综上所述，小鼠经口摄入DREWPLUS 5350 EP消泡剂小于等于2688mg·kg－1（bw）是安全的.DREWPLUS 5350 EP消泡剂具有生物可降解性，在实际应用时使用剂量很低，对环境不会造成二次污染.Bull D N,Kempe L L.2004.Influence of surface active agentson oxygen absorption to the free interface in a stirred fermentor［J］.Biotechnology and Bioengineering,13（4）:529-547Cheng Y L,Tian X R,Yang Y F.2006.Application of organic silica antifoam agent in soybean product processing［J］.Science and Technology of Food Industry,27（4）:162-163Denkov N D.2004.Mechanism s of foam destruction by oilbased antifoams ［J］.Langmuir,20（22）:9463-9505JoshiKS,JeelaniaSAK,BlickenstorferC,NaegeliI,Windhab E J.2005.Influence of fatty alcohol antifoam suspensions on foam stability［J］.Colloids and Surfaces A:Physicochemical Engineering Aspects,263（1-3）:239-249Li Y.2000.Assessment and cautions of defoaming agent［J］.Paper and Paper Making,（4）:60-61（in Chinese）Ni Y,Yan W C,Geng J Y,Zhao J.2004.Preparation of new industrialanti-mildewbactericide:1,2-benzisothiazdin-3-one［J］.Fine and Specialty Chemicals,12（20）:21-22（in Chinese）Qin X W,Chen H,Kuang J B,Xiao D G.2006.Application of antifoam to baker’s yeast production［J］.Liquor-Making Science&Technology,（12）:87-89Shi M L,Zhang Y F.1984.Antifoaming agents of polyethers with antibiotic fermentation［J］.Chinese Journal of Antibiotics,9（1）:55-61（in Chinese）Wang S L,Zhu S F,Gao Z Q,Li J P.1996.Studies on the toxic effects of liquid paraffin［J］.Carcinogenesis,Teratogenesis&Mutagenesis,8（1）:43-46（inChinese）Wang Y,Wu F,Cao Z P.2008.Presentstudy situation and prospect of antifoam［J］.Chemical Engineer,22（9）:26-28（in Chinese）Xu J pounding of defoamers and 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医疗器械生物学评价

引言：医疗器械的生物学评价是确保器械在人体内安全、有效使用的重要过程。

它涉及对器械材料的生物相容性、毒性、致敏性等因素进行全面评估和测试。

本文将以医疗器械生物学评价为主题，通过分析其定义、重要性和现有的评价方法，以及应注意的问题，探讨如何确保医疗器械的安全性和可靠性。

概述：医疗器械生物学评价是指通过实验评估医疗器械与生物体接触时产生的生物学效应，并评估其对人体健康的安全性。

生物学评价主要包括生物相容性、毒性和致敏性等方面的测试和评估。

确保医疗器械的生物学安全性是保证患者安全的重要环节，也是获得政府监管机构批准的必备条件。

正文：1.生物相容性的评价1.1组织相容性评价1.1.1组织刺激性测试1.1.1.1皮肤刺激性测试1.1.1.2眼刺激性测试1.1.1.3黏膜刺激性测试1.1.2组织损伤性测试1.1.2.1细胞相对增殖率测定1.1.2.2组织病理学评估1.2免疫相容性评价1.2.1细胞毒性测试1.2.2免疫原性测试1.2.3淋巴细胞激活测试2.毒性的评价2.1急性毒性评价2.1.1均匀化学品分类系统测试2.1.2眼损伤性测试2.1.3皮肤腐蚀性测试2.2亚慢性毒性评价2.2.128天剂量反应曲线测试2.2.2主要器官系统功能检测2.2.3组织病理学评估2.3慢性毒性评价2.3.1长期毒性研究测试2.3.2长期肿瘤研究测试2.3.3遗传毒性检测3.致敏性评价3.1皮肤致敏性测试3.1.1封闭斑贴试验3.1.2白化试验3.1.3高敏感斑贴试验3.2呼吸系统敏感性测试3.2.1吸入过敏源测试3.2.2湿式室内环境敏感性测试3.2.3尘螨过敏性测试4.评价方法的选择和实施4.1标准测试方法4.1.1ISO标准4.1.2FDA指南4.1.3CDRH要求4.2非标准测试方法4.2.1新技术的应用4.2.2客观指标的探索4.2.3动物模型的改进4.3临床试验的重要性4.3.1早期临床试验的必要性4.3.2中期和后期临床试验的应用4.3.3临床试验的监测与管理5.注意事项和挑战5.1合理选择测试方法5.2减少动物使用5.3数据分析与解释5.4多中心研究的挑战5.5器械更新和评价的问题总结：医疗器械的生物学评价是确保其在人体内安全有效使用的关键过程。

医疗器械生物学评价要点

医疗器械生物学评价要点1、生物安全性原则：安全、科学、有效。

目的在于消除生物材料对人体器官的破坏性，比如细胞毒性和致癌性。

另外，生物材料对于宿主是异物，在体内必定会产生某种应答或出现排异现象。

生物材料如果要成功,至少要使发生的反应被宿主接受，不产生有害作用。

2、生物功能性原则：相容、安全、有效生物功能性是指其在特殊应用中“能够激发宿主恰当地应答”的能力。

随着对生物材料生物相容性的深入研究，人们发现不仅要对生物材料的毒副作用要进行评价，还要进一步评价生物材料对生物功能的影响。

生物学反应1、血液反应：血小板血栓、凝血系统激活、纤溶系统激活、溶血反应、白细胞反应、细胞因子反应、蛋白黏附。

2、免疫反应：补体系统激活、体液免疫反应、细胞免疫反应。

3、组织反应：炎症反应、细胞黏附、细胞增殖、形成囊膜、细胞质的转变。

4、材料反应（1）物理性质变化引起生物医用材料变化的因素：1）生理活动中骨骼、关节、肌肉的力学性动态运动；2）细胞黏附吞噬作用。

（2）化学性质变化引起生物体反应的因素：1）材料中残留有毒性的低分子物质；2）材料聚合过程残留有毒性、刺激性的单体；3）材料及制品在灭菌过程中吸附了化学毒剂和高温引发的裂解产物；4）材料和制品的形状、大小、表面光滑程度；5）材料的酸碱度。

生物相容性的分类1、血液相容性：材料用于心血管系统与血液直接接触，主要考察与血液的相互作用。

血液相容性要求：抗血小板血栓形成、抗凝血性、抗溶血性、抗白细胞减少性、抗补体系统抗进性、抗血浆蛋白吸附性、抗细胞因子吸附性。

2、组织相容性（一般生物相容性）：材料与心血管系统外的组织和器官接触，主要考察与组织的相互作用。

组织相容性要求：细胞黏附性、无抑制细胞生长性、细胞激活性、抗细胞原生质变化性、抗炎症性、无抗原性、无诱变性、无致癌性、无致畸性。

1、ISO中生物学评价标准的特点（1）明确了医疗装置的分类，将接触部位分为表面接触、体外与体内接触、体内植入三大类；（2）在接触时间上将小于24h的接触列为一时接触，短、中期接触时间大于24h至30天，30天以上为长期接触；嘉峪检测网编辑整理（3）生物学评价试验分为基本评价试验和补充评价试验两大类。

微生物油脂PUFAs微囊粉胶囊剂的安全性评价

微生物油脂PUFAs微囊粉胶囊剂的安全性评价陈明锴;何东平;李道忠;胡怀友;瞿永华;陈涛【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2006(22)1【摘要】已报道生产微生物油脂菌株深黄被孢霉（Moritorella isabellinaAS3．3410）突变株的毒力研究，未观察到受试小鼠有毒性反应或死亡，以该菌进行发酵生产微生物菌丝体经提萃油脂、皂化、精炼、提纯、均质喷雾干燥等一套工艺制取含PUFAs（polyunsaturated fatty acids，PUFAs，下同）的20％亚油酸和10％γ-亚麻酸的微囊粉剂再装填成胶囊。

将该制剂进行急性毒性试验，遗传毒性试验和30d喂养试验，观察其安全性，现将结果报道于下．【总页数】1页(P125-125)【作者】陈明锴;何东平;李道忠;胡怀友;瞿永华;陈涛【作者单位】武汉大学人民医院消化内科,湖北,武汉,430060;武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北,武汉,430023;武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北,武汉,430023;随州中科生物工程有限公司,湖北,随州,441300;随州中科生物工程有限公司,湖北,随州,441300;武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北,武汉,430023;武汉工业学院食品科学与工程学院,湖北,武汉,430023【正文语种】中文【中图分类】R-332;R344.7;R379.9;R927;R944.5;R977.6【相关文献】1.微生物油脂微囊粉胶囊剂卫生学检测和Ames试验 [J], 何东平;李道忠;胡怀友;瞿永华;陈涛2.微生物PUFA微囊粉剂的免疫调节作用 [J], 邓利斌;何东平;李道忠;胡怀友;瞿永华;陈涛3.微生物油脂微囊粉剂有效成分及其稳定性检测 [J], 瞿永华;何东平;李道忠;胡怀友;陈涛4.微生物油脂PUFAs微囊粉胶囊剂的安全性观察 [J], 陈明锴;何东平;李道忠;胡怀友;瞿永华;陈涛5.纳米微囊型血液代用品的制备及体内外血液安全性评价 [J], 赵健;单晓茜;盛燕;吴凡;袁媛;刘昌胜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

【人物与科研】四川大学化学学院刘波教授课题组：乌药烷倍半萜二聚体天然产物的发散式全合成

【⼈物与科研】四川⼤学化学学院刘波教授课题组：乌药烷倍半萜⼆聚体天然产物的发散式全合成导语乌药烷倍半萜⼆聚体，作为从⾦粟兰科植物分离得到的最具代表性的天然代谢物，因其具有复杂的结构和优良的⽣物活性⽽受到⼈们⼴泛的关注。

迄今为⽌，国内外已有多个课题组报道了对这类倍半萜单体或⼆聚体的全合成研究⼯作。

最近，四川⼤学刘波教授课题组取得新突破，以发散式策略完成了8个乌药烷倍半萜⼆聚体天然产物的全合成研究（图1，Nat. Commun. 2019, 10, 1892），该⼯作⼀经发表即被Nat. Commun.选为亮点⼯作，这是该课题组对于乌药烷倍半萜⼆聚体的第⼆代合成。

图1 乌药烷倍半萜的发散式全合成刘波教授课题组简介刘波教授课题组研究兴趣主要以萜类为主的多环复杂天然产物为合成⽬标，借助仿⽣合成策略，注重结合串联反应和⼀锅多组分反应，开展⽬标分⼦的⾼效全合成和相关合成⽅法学研究⼯作。

承担了国家⾃然科学基⾦（重点项⽬、⾯上项⽬、优秀青年基⾦）、科技部“973”计划、教育部新世纪优秀⼈才⽀持计划等多个项⽬的研究⼯作。

刘波教授简介刘波，四川⼤学化学学院教授，国家优秀青年基⾦获得者。

1998年毕业于西南师范⼤学，获理学学⼠学位。

2001年在中科院成都有机化学研究所获理学硕⼠学位，师从冯⼩明研究员与蒋耀忠研究员。

2004年于中科院上海有机化学研究所获理学博⼠学位，师从周维善研究员。

2004年9⽉-2007年3⽉，在美国德克萨斯⼤学西南医学中⼼从事博⼠后研究，主要从事过渡⾦属催化的反应研究及天然产物全合成，导师为Prof. Jef K. DeBrabander。

2007年6⽉⾄今，就职于四川⼤学化学学院。

刘波教授在J. Am. Chem. Soc., Angew. Chem. Int. Ed., Org. Lett., Chem.Commun., Eur. J. Chem.等专业期刊上发表SCI论⽂60多篇。

⼀些研究成果被评选为Org. Lett.和J. Am. Chem. Soc.的most read articles，被收录进⼊化学专业⽹站Organic Chemistry Highlights，被化学博客brsmbog. com和chemblogs. net 以及专业评述性杂志Synfacts收录和正⾯评价。

甲基嘧啶磷对三种水生生物的急性毒性及安全性评价

甲基嘧啶磷对三种水生生物的急性毒性及安全性评价作者：马纪孔玄庆喻快欧阳文森李雨露金晨钟郭军李建明欧晓明来源：《南方农业·上》2023年第09期摘要為评估甲基嘧啶磷对水生生物的毒性效应，在实验室条件下，以斜生栅藻、大型溞和斑马鱼为试验研究对象，参照OECD试验指南和《化学农药环境安全评价试验准则》，研究甲基嘧啶磷对这3种水生生物的急性毒性。

结果：甲基嘧啶磷对斜生栅藻的生物量半抑制浓度（72 h-EyC50）为1.437 mg·L-1（a.i.）、生长率半抑制浓度（72 h-ErC50）为2.678 mg·L-1（a.i.）；对大型溞的活动半抑制浓度（48 h-EC50）为5.27×10-3 mg·L-1（a.i.）；对斑马鱼的半致死浓度（96 h-LC50）为0.496 mg·L-1（a.i.）。

根据毒性等级划分标准，甲基嘧啶磷对斜生栅藻、大型溞、斑马鱼分别为中毒、剧毒和高毒。

表明甲基嘧啶磷对水生生物毒性较高，在使用过程中，应避免其进入流动水体，防止对湖泊、河流等水生生态系统造成危害。

关键词甲基嘧啶磷；急性毒性；斜生栅藻；大型溞；斑马鱼中图分类号：S181 文献标志码：A DOI：10.19415/ki.1673-890x.2023.17.002甲基嘧啶磷（Pirimiphos-methyl）是1974年英国帝国化学工业集团开发的一种低毒、高效、低残留的嘧啶类有机磷杀虫杀螨剂[1]，属于胆碱酯酶（ChE）抑制剂，其致毒机理为阻抑昆虫神经突触上乙酰胆碱酯酶（AchE）的活性，引起乙酰胆碱（ACh）蓄积，使胆碱神经受到持续冲动，导致害虫持续兴奋后死亡[2-4]。

常被用于粮食仓储防虫，是联合国粮农组织和世界卫生组织推荐使用的储粮防护剂[5]。

目前对甲基嘧啶磷的研究主要集中在合成开发和复配[6]、仓储防效[7-8]、残留[9-10]、分析方法开发[11]及废水处理[12]。