现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管电泳法在药物分析中的应用chaj ppt课件
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用摘要毛细管电泳技术又称为高效毛细管电泳。
作为一种新的分离分析技术，以其高效，快速，低实验消耗等优点，受到了广泛重视，而其在药物分析中的应用得到迅速的发展。
在原料分析中的中药材鉴别和质量控制，中药有效成分的分离与测定和中成药制剂。
而在西药复方制剂中，广泛用于解热镇痛药、抗组胺药、消炎药和止咳药，降压药和抗生素、合成抗菌剂及生物技术产品等药物和制剂的分离，鉴定和分析及其对手性分子的拆分，基于手性主—客体络合的毛细管电泳手性拆分，基于手性胶束增溶的毛细管电泳手性拆分和基于蛋白质亲和的毛细管电泳手性拆分，还有临床用药中，都显示了其高效，快速的特点。
毛细管电泳技术正广泛用于药物分析的各个相关的部分中，正越来越受到人们的重视。
AbstractCapillary electrophoresis technology called high performance capillary electrophoresis. As a new kind of separation and analysis technology, with its rapid, efficient, low consumption advantages of experiment was Received widely attention, and its application in pharmaceutical analysis is rapid development. The analysis of Chinese herbal medicine in raw material identification and quality control, the TCM separation and determination and proprietary Chinese medicine preparations. But in western medicine compound preparations, widely used in antipyretic analgesics, the antihistamine drugs, expectorant and cough, antihypertensives and antibiotics, synthetic antibacterial agent and biotechnology product such drugs and preparation of separation, appraisal and analysis and the opponent of chiral molecule split, based on chiral Lord - object complexation of capillary electrophoresis chiral resolution, based on chiral dissociation of increase soluble adopted capillary electrophoresis chiral separation and based on protein affinitive capillary electrophoresis chiral resolution, and clinical medicine, shows its high efficiency, fast characteristic. Capillary electrophoresis technology is widely used in pharmaceutical analysis of each relevant sections, are becoming more and more attention by people.关键词：毛细管电泳技术药物分析应用Keywords: Capillary electrophoresis drug analysis application前言毛细管电泳(CE) 又称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE)，它以弹性石英毛细血管为分离通道，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分的淌度和分配行为上的差别进行分离和分析。
高效毛细管电泳法在药物分析中的运用课件
拓展高效毛细管电泳法在生物样品分析中的应用 ，如血样、尿样等。
05
高效毛细管电泳法在药物分
析中的实际案例
案例一：中药材中有效成分的分析
总结词
高效毛细管电泳法在中药材分析中具有高分离效能、高灵敏 度和高分辨率的特点，能够快速准确地测定中药材中的有效 成分。
详细描述
高效毛细管电泳法能够将中药材中的多种有效成分进行分离 ，如黄酮类、皂苷类、生物碱类等，通过紫外可见光谱或质 谱检测器进行检测，实现对中药材的质量控制和药效成分的 定量分析。
通过高效毛细管电泳法，可以研究药 物在体内的代谢动力学，了解药物在 体内的分布、转化和消除过程。
代谢产物鉴定
通过高效毛细管电泳法结合质谱等检 测手段，可以鉴定药物代谢产物的结 构和性质，有助于了解药物的代谢途 径和机制。
03
高效毛细管电泳法在药物分
析中的优势与挑战
优势
高分离效率
高效毛细管电泳法具有极高的分离效 率，能够快速、准确地分离复杂药物 混合物中的各个组分。
分离手性药物
对于手性药物的分离，高 效毛细管电泳法具有独特 的优势，能够实现对手性 药物的拆分和纯化。
分离药物中的杂质
通过高效毛细管电泳法， 可以有效地分离和去除药 物中的杂质，提高药物的 纯度和质量。
药物成分的检测
检测药物浓度
通过高效毛细管电泳法结 合光谱或电化学检测器， 可以实现对药物浓度的快 速、准确检测。
高效毛细管电泳法在 药物分析中的运用课 件
• 高效毛细管电泳法简介 • 高效毛细管电泳法在药物分析中
的应用 • 高效毛细管电泳法在药物分析中
的优势与挑战
目录
• 高效毛细管电泳法在药物分析中 的最新研究进展
《高效毛细管电泳仪》课件
contents
目录
• 高效毛细管电泳仪简介 • 高效毛细管电泳仪的组成与结构 • 高效毛细管电泳仪的操作与使用 • 高效毛细管电泳仪的性能指标与评价 • 高效毛细管电泳仪的发展趋势与展望
01
高效毛细管电泳仪简介
定义与特点
定义
高效毛细管电泳仪是一种基于毛 细管电泳技术的分离分析仪器， 主要用于分析生物、化学、医学 等领域中的各种物质。
检测系统
总结词
检测系统的功能是对分离后的样品进行检测和信号转换，以 便对样品进行分析和数据处理。
详细描述
检测系统通常包括光电倍增管、紫外可见光检测器、电化学 检测器等部件。这些检测器能够将样品中的组分转化为可测 量的电信号或光信号，便于后续的分析和数据处理。
数据处理系统
总结词
数据处理系统的功能是对检测系统获得的信号进行采集、处理、分析和显示，以便对样品进行定性和定量分析。
详细描述
进样系统通常包括注射器、进样阀和 进样针等部件。它能够实现样品的定 量和定时注入，确保样品在电泳过程 中的准确性和稳定性。
分离系统
总结词
分离系统的功能是利用电场作用对不同成分的样品进行分离，是电泳仪的核心部 分。
详细描述
分离系统主要包括毛细管、电源和电解槽等部件。毛细管作为电泳通道，能够使 带电粒子在电场作用下进行迁移和分离。电源提供电场，而电解槽则作为电泳仪 的容器。
详细描述
数据处理系统通常包括数据采集卡、计算机和相关软件等部件。数据采集卡能够实时采集检测系统的信号，计算 机则对这些信号进行处理、分析和显示。相关软件能够对电泳图谱进行解析，提供定性和定量分析结果。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
03
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用
毛细管电泳分析法在药物分析中的应用摘要：毛细管电泳可以分离无机离子、有机离子、小分子和大分子等物质，在生命科学、化学、药学等领域得到了广泛的应用。
随着HPCE技术进入成熟阶段和日益普及，利用其优势特点来解决中药有效成分或特征成分是一种发展的趋势；HPCE可以应用于西药各种剂型中主要成分的测定，可较少许多程序；HPCE课取代微生物效价法来测定抗生素的含量测定；此外在中药的含量测定也会起到强大的力量。
毛细管电泳的其他分离模式也使其优势更为明显，在药物分析中有着一个举足轻重的地位。
Capillary electrophoresis can Separates Inorganic Ions、organic ions、Macromolecule、Small Molecular、and so on.It has found wide applications in life science、chemistry 、Pharmacy and other relative areas.since the de and public use of HPCE technology ,using it’s advantange to solve chinese medicine effective constituents or characteristic components has became the development tendency, HPCE can apply to the determination of main Composition in various Formulation of western medicine which may decrease many procedures . what is more HPCE class determinates the content in antibiotics instead of microbiological assay of antibiotics.In additions ,italso play an important role in the determination of chinese medicine. The other separation about Capillary electrophoresis are put it into a more high level and occupies a decisive position in the pharmaceutical analysis.关键字：高效毛细管电泳、药学药品分析、中药分析、抗生素含量测定、杂质含量测定毛细管电泳，也称高效毛细管电泳（HPCE），是以高压直流电场为驱动力，以毛细管为分离通道，根据样品中各组份的淌度和分配行为的不同进行分离的一种分析方法，是近年来迅猛发展的分析分离技术，进行高效快速分离的一种新技术。
高效毛细管电泳在药物分析中的应用
展， 在化学、 生命科学和药学领域都有广泛的应用。
Ａ ｔａ ］ 药物 制 剂分 析 、 ｌｉ 对 ｒ［ 孙增 培［和 Ｔ ｏｍ ｎ ［ ３ ］ ｈｒ ａｎ ］ ４ 对 毛细管 胶束 电动色谱 （ Ｃ ） ＭＥ Ｃ 在药物分析中的应
工 业生 产 中也 开 始 应 用 例如 纾 用 内标 法 监测 注 射 浼剂
中 Ｓ ｍ ｔｐａ 质量 ， ｕ ａ ｉ ｎ的 ｒｔ 结果 的 Ｒ Ｄ １ ； 时也 Ｓ ％
分地 尔硫 从和喘速宁［］纳布啡［７ 牛血 清 白蛋 白 ８、 ２ １］ ０， 拆分 ５甲酸 四氢叶酸［］ 洛芬［ ， 素酶 拆分 － ９、 ６布 ８ 纤维 ８ ］ β受 体 阻 滞 药［］手 性 固定 相 拆 分 巴 比妥 类 药 ９， ２
物拆分 ； 微量制备及成分鉴别等 ） 作一综述 ， 并用表 １２ ， 列出了部分应用实例 。 关键词 高效 毛细管 电泳 ， 药物分析
１ 前言
高效 毛细管 电泳 （ Ｐ Ｅ 是样 品中各组 分以高 ＨＣ ） 压 电场 为驱动力 ， 在毛 细管 中按其 淌度和分 配系数
２ 这 主要 是 由 于 Ｈ Ｃ ％， Ｐ Ｅ的 进 样 重 现性 较 差 所 致［。 Ｈ Ｃ ２ 在 Ｐ Ｅ中最好采 用内标法 定量 ， ］ 以提高测 定 的精密度［］ ７。此外 ， 当增 加进 样量 也可获 得较好 １ 适 的峰面积精度［］ ７ ２ ＨＣ Ｐ Ｅ所用分析 时间一般 为 １～４ｍ ｎ ０ ０ ｉ。使 用 短 毛细管柱 可大大缩 短分析时 间。Ａｔａ ０ ｌｉ４先后用 ｒ［ ］
用于注射剂的稳定性研究， 其结果与 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ一
致 ［］ ｌ ｉ等 人测 定 了 ７ ６ 。Ａ ｔａ ５ ｒ 家公 司 生产 的 克仑 特
高效毛细管电泳仪ppt课件
NH3+ OH-
P
P
NH3+
NH2
OH-
P
H+
COOH
COO- H+
COO-
pH＜pI
pH＝pI
pH＞ pI
等电聚焦电泳
等电聚焦电泳具有很高的分辨率，在等电点 上只有有0.01pH单位的差异就能准确地分离
特别适合分离分子量相近而等电点不同的蛋 白质组分
特点：
等速电泳(isotachophoresis,ITP)
一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，在此 体系中，不同的蛋白质即移动到或聚焦于其 相当的等电点位置上，也就是说被聚焦于一 个狭的区带中，电泳技术中的等电点聚焦也 称为聚焦电泳。 两性电解质：就是在不同PH环境下,电解质可 酸性电离,也可碱性电离,如磷酸(二)氢钠
等电聚焦电泳
蛋白质分子在不同pH下的解离状态
溶液离子强度：强度愈高，电泳速度愈慢。适宜强 度0.02~0.20mol/kg.
四、影响电泳的因素
电渗：液体相对于固体支持物的移动。泳动方向 与电渗方向一致时，则加快泳动速度；当颗粒的 泳动方向与电渗方向相反时，则降低颗粒的泳动 速度。
温度：温度每升高10c,迁移率增加2.4% 迁移率：
五、常用的电泳方法
类型 紫外-可见 荧光 激光诱导荧光 电导
检测限/mol 10-13～10-15 10-15～10-17 10-18～10-20 10-18～10-19
特点 加二极管阵列，光谱信息 灵敏度高，样品需衍生 灵敏度极高，样品需衍生 离子灵敏，需专用的装置
3.高效毛细管电泳仪实图
4.毛细管电泳的分离模式
Zeta电势ξw
扩散层 δ
剪切面
《高效毛细管电泳法》课件
演示毛细管电泳的运行过程，通过动 态实验图展示离子的迁移和分离情况。
应用
高效毛细管电泳法 在生物医学研究中 的应用
介绍高效毛细管电泳法在基 因分型、蛋白质分析等生物 医学领域的应用案例和优势。
高效毛细管电泳法 在化学分析中的应 用
探讨高效毛细管电泳法在有 机合成反应、药物分析等化 学领域的应用前景和发展方 向。
实验流程
1
毛细管电泳仪器的准备
2
详细介绍毛细管电泳仪器的使用方法
和重要操作步骤。
3
样品注入
4
演示样品的注入方法，以及避免样品
交叉污染的技巧。
5
数据分析
6
引导分析和解释实验结果，包括峰形、 峰面积等关键参数。
样品准备
指导如何进行样品的制备和处理，确 保样品的纯度和适用性。
毛细管电泳条件的设置
讲解如何调整电泳条件以获得最佳的 分离效果，包括电压、温度等因素。
高效毛细管电泳法的优势是什么？
详细探讨高效毛细管电泳法相比传统电泳法的优越性，包括分离效率、分析速度、样品消耗 等方面。
原理
毛细管电泳法的基本原理
解释毛细管电泳法中离子迁移的基本原理，涉 及电流、电场、电泳缓冲液等关键概念。
高效毛细管电泳法的原理
详细说明高效毛细管电泳法相比传统电泳法的 原理，包括电泳缓冲液、毛细管柱等关键因素。
《高效毛细管电泳法》 PPT课件
高效毛细管电泳法为你揭开了一个全新的电泳世界。通过本课件，您将了解 到什么是毛细管电泳法、为什么需要高效毛细管电泳法以及其卓越的优势。
简介
什么是毛细管电泳法？
介绍毛细管电泳法的基本原理和技术特点，以及其在科学研究和实际应用中的重要性。
《毛细管电泳原理》课件
分离的程度。
分辨率
02
分辨率是指毛细管电泳谱中相邻两峰之间的分离程度，分辨率
越高，分离效果越好。
检测限
03
指在毛细管电泳谱中能够检测到的最小样品浓度，检测限越低
，灵敏度越高。
定量分析
标准曲线法
通过绘制标准曲线，将毛细管电泳谱中的峰高或峰面积与样品浓度进行线性回归 分析，从而进行定量分析。
内标法
通过在样品中加入内标物，利用内标物与样品中各组分的分离度和响应因子相同 的特点，进行定量分析。
数据分析方法
峰高法
通过测量毛细管电泳谱中各组分的峰高，利用峰高与样品浓 度的线性关系进行定量分析。
峰面积法
通过积分毛细管电泳谱中各组分的峰面积，利用峰面积与样 品浓度的线性关系进行定量分析。
05
毛细管电泳的优缺点与展望
优点与缺点
高分离效能
毛细管电泳具有极高的分离效率，可 实现复杂样品的快速分离。
药物分析
毛细管电泳在药物分析中 可用于药物成分的分离和 检测，以及药物代谢产物 的分析。
食品安全
毛细管电泳可用于食品安 全检测，如食品添加剂、 农药残留等的检测。
02
毛细管电泳的仪器与实验条
件
仪器介绍
毛细管电泳仪的基本构成
检测器的选择
包括高压电源、进样系统、毛细管电 泳柱、检测器和数据采集系统等部分 。
配制电解质溶液
按照所需的浓度和比例，配制 电解质溶液。
数据处理与分析
采集实验数据，进行数据处理 和分析，得出结论。
03
毛细管电泳的分离模式与分
离机制
分离模式
毛细管区带电泳（CZE）
胶束电动色谱（MEKC）
毛细管凝胶电泳（CGE）
《高效毛细管电泳》课件
高效毛细管电泳（high-performance capillary electrophoresis）是一种分离和分 析生物分子的先进技术，通过利用电场将样品中的化学物质分离成不同的组 分。本课件将介绍高效毛细管电泳的原理、应用领域、实验步骤、仪器设备 要点、结果分析方法、技术优势以及其发展前景和应用展望。
高效毛细管电泳技术的原理
高效毛细管电泳利用高电场强度和小柱内径的毛细管，通过电荷作用和电泳 迁移对样品中的化学物质进行分离。该技术基于不同化学物质具有不同电荷 和迁移速度的原理。
高效毛细管电泳的应用领域
医学与生物学
用于分析蛋白质、核酸和药 物等生物分子，有助于研究 疾病害物质，有助于评估环 境污染程度。
定量分析
提高分析方法的准确性和灵敏度，广泛应用于 生物和医学领域。
高效分离
改进柱填充材料和分离条件，实现更高效的毛 细管电泳分离。
质谱联用
与质谱技术结合，实现分析结果更加丰富和准 确。
微型化与便携化
减小仪器体积，方便在实验室和野外进行高效 毛细管电泳分析。
高效毛细管电泳仪器设备要点
• 高压电源：提供电场强度。 • 毛细管柱：实现化学物质的分离。 • 自动进样器：精确注射样品。 • 检测器：记录电泳分离结果。
高效毛细管电泳结果分析方法
电泳图谱
通过观察电泳图谱的峰形、峰高 和峰面积等信息进行结果分析。
标准曲线
通过与已知浓度的标准样品进行 定量分析。
光谱荧光
利用化学物质的光谱和荧光特性 进行分析和标定。
高效毛细管电泳技术的优势
1 快速高效
2 微量样品
分离速度快，分辨率高，适用于高通量分析。
对样品需求量小，适用于分析稀有或有限样 品。
仪器分析毛细管电泳法-PPT课件
毛细管电泳技术不仅在基础科学中得到广泛应用，在临床 医学等领域也有较多应用，如临床疾病诊断、临床蛋白分 析、临床药物监测、代谢研究、病理研究、 PCR产物分析、 DNA片段及序列分析等。
传导电流的作用。
t＝0
t＞0
2. 毛细管等速电泳（CITP）
使用两种电解质：一种为迁移率较高的前导离子 L 电解质， 一种为迁移率较低的尾随离子 T 电解质，被分离组分夹在 L 与 T之间，以同一速度运动，由于迁移率不同而分离。
3. 毛细管等电聚ຫໍສະໝຸດ (CIEF)基本操作步骤：进样、聚焦和迁移，用于生物大分子的分离。
碱 碱
酸 酸
毛细管等电聚焦电泳的运行过程 (a)进样；(b)聚焦；(c)迁移
4. 毛细管电色谱 (CEC) 分为填充柱和开管柱两种方式，可分离离子和中性分子，且 可分离手性分子。
5. 胶束电动毛细管色谱 (MECC) 两相：流动的水相和起固定相作用的胶束相 (准固定相)， 被测组分由于在水相和胶束相之间分配系数的差异而分离。
本章要求
⒈ 了解电泳、淌度、电渗的概念
⒉ 了解毛细管电泳仪的结构 ⒊ 了解六种毛细管电泳分离模式
毛细管电泳（ capillary electrophoresis ， CE ）又 称高效毛细管电泳（ HPCE ），是以毛细管为分离通道、 以高压直流电场为驱动力的液相分离技术。 CE 实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，使分析化 学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃 至单分子分析成为可能。生物大分子如蛋白质的分离分 析也因此有了新的转机。
高效毛细管电泳分析法应用与进展完美版PPT资料
检测体液或细胞中某些代谢产物的分析；
常用手性选择剂：环糊精及其衍生物；手性冠醚；手性 high performance capillary electrophoresis apparatus
高效毛细管电泳分析法应用与 进展
一、离子分析
analysis of ion
阳离子分析
迁移方向和电渗流 方向一致； min内分离了24种金属 离子；
阳极进样，阴极检测； 具有很高的灵敏度；
阴离子分析
阴离子电泳方向和电渗 流方向相反、速度接近，分 析时间长、效率低；
质量小、电荷密度大的 离子如：SO4-2、Cl-、F-等， 电泳速率大于电渗流，阳极 端流出，在阴极端无法检测；
表面活性剂（氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱氧胆酸及其钠
盐、低聚糖等天然手性表面活性剂）
四、氨基酸与蛋白质分析
analysis of amino acids
采用MEKC模式，在25分钟内分离了23种丹酰化氨基酸；
HPCE可取代传统的氨基酸分析仪；
问题：吸附和检测；
蛋白质分析
五、核酸分析及DNA排序
第五三、节核酸R高分-效析反毛及细D应管N电A停排泳序仪是器 安眠药，S-式致胎儿畸形；
analysis of nucleic acids and sequence of DNA
m高i效n内毛分细离管了电2泳4种分H金析P属法C离应E子用分；与进离展分析手性化合物的方法：加入手性选择剂；
整体化学分析系统（TAS）及TAS微型化 应用于人类基因DNA测序；
结束
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现代仪器分析-高效毛细管电泳法在药物分析中的应用 ppt课件
ppt课件
17
❖ 缓冲溶液中加入离子型表面活性剂，其浓度达到临界浓 度，形成一疏水内核、外部带负电的胶束。在电场力的 作用下，胶束在柱中移动。
ppt课件
18
❖ 电泳流和电渗流的方向相反，且u电渗流 ＞u电泳 ，负电胶 束以较慢的速度向负极移动；
❖ 中性分子在胶束相和溶液（水相）间分配，疏水性强的 组分与胶束结合的较牢，流出时间长；
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24
毛细管电泳的几种分离模式 (续)
（5）亲和毛细管电泳 (Affinity capillary electrophoresis, ACE)
在毛细管内涂层或在凝胶在中加入亲和配 基，以亲和力的不同达到分离目的。可用于研 究抗原-抗体或配体-受体等特异性相互作用。
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25
毛细管电泳的几种分离模式 (续)
ppt课件
14
Typical Buffer Systems/FSCE(CZE)
BUFFER
Useful pH Range
Phosphate
1.1-3.1
Formate
2.8-4.8
Acetate
3.8-5.8
MES* (2-(N-吗啉)乙磺酸介绍)
5.2-7.2
Citrate (柠檬酸盐 )
《高效毛细管电泳》PPT课件
vepqfE6qE (球形粒子）
不同物质在同一电场中，由于它们的有效电荷、 形状大小的差异，它们的电泳速度不同，所以可 能实现分离
2．电泳淌度
我们把溶质在给定溶液中和单位电场强度下的
电泳速度称为电泳淌度，用μep表示。
ep
vep E
q 4
编辑ppt
11
在一定条件下，不同粒子的形状、大小以及所 带电量都可能有差别，则电泳淌度也可能不同。
编辑ppt
17
VOS可通过实验测定
v os
L ef t os
Lef—毛细管有效长度； tos—电渗流标记物 （中性物质）的迁移时间。
电渗流的速度是电泳速度的5～7倍。
一般情况下，石英毛细管内壁表面带负电荷， 则电渗流带正电荷，向负极移动。但如果将毛细 管内壁改性，比如在在内壁表面涂渍或键合一层 阳离子表面活性剂，将使壁表面带正电荷，则电 渗流带负电荷，向正极移动。
2.分离过程
电泳和色谱的分离过程都是差速迁移过程，可 用相同的理论来描述。色谱中所用的一些名词概 念和基本理论，如保留值、塔板理论、速率理论 等均可借用于毛细管电泳中。
编辑ppt
4
3.仪器流程
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5
色谱仪和电泳仪（HPLC和CE），都包括进 样部分、分离柱、检测器和数据处理等。 二、毛细管电泳的特点
编辑ppt
34
小内径毛细管散热面积大，温度梯度小，谱 峰展宽小。但是，内径过细会带来检测、进样 等方面的一系列困难，又易造成柱的堵塞。因 此目前采用的多是内径25～75μm柱子。
采用低淌度缓冲液，如Tris [三-（羟基甲基） 氨基甲烷]等。这种粒子的质荷比很大，可以 减小工作电流。
采用温度控制装置，尽快除去热量，使系统尽 可能地保持恒温，是目前常采用的办法。冷却 温控的方法有两种，气冷和液冷，一般条件下， 用气冷已可以满足要求。
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09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
8
电泳法在药物分析中的应用chaj
几种常用的毛细管电泳分离模式
（1）毛细管区带电泳 （Capillary Zone Electrophoresis, CZE=FSCE） 是指溶质在毛细管内均一的背景电解质缓冲溶
液中以不同速率迁移而形成彼此分离的溶质带的电 泳模式，分离的基础是淌度的差别。
CZE只能分析带有电荷的离子而不能分离中性
物质，是最基本、最普遍的一种分离模式。
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
9
电泳法在药物分析中的应用chaj
❖ CZE中背景电解质的浓度一般高于试样，起运 载电流的作用，其离子有一定的迁移率。当电流通 过时，缓冲溶液中的阴、阳离子以一特定的速度分 别向正极和负极移动。同时试样中的不同离子将按 各自的恒定速度移动，形成背景电解质离子流动中 伴随有试样离子的流动。如果试样中不同离子的迁 移率差别很大，就能将不同离子分离。
3.8-5.8 5.2-7.2 5.4-7.4 5.8-7.8
Phosphate HEPES* (羟乙基哌嗪乙硫磺酸) Tricine*(三(羟甲基)甲基甘氨酸) Tris (三羟甲基氨基甲烷 ） Borate (硼酸盐) CAPS* (3-(环己胺)-1-丙磺酸钠)
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
5
电泳法在药物分析中的应用chaj
高效毛细管电泳技术上的重要突破
高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进：
➢ 一是采用了25~75µm内径的毛细管；
➢ 二是采用了高达数千伏的电压。
毛细管的采用使产生的热量能够较快散发，大大 减小了温度效应，使电场电压可以很高。
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
10
电泳法在药物分析中的应用chaj
带电粒子的迁移速度=电泳和电渗流速度的矢量和。
正离子：两种效应的运动方向一致，在负极最先流出； 中性粒子：无电泳现象，受电渗流影响，在阳离子后流出；
阴离子：两种效应的运动方向相反； u电渗流 ＞u电泳时,阴离子在负极最后 流出,在这种情况下,不但可以按类 分离,同种类离子由于差速迁移被 相互分离。
…
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
3
电泳法在药物分析中的应用chaj
第二节 HPCE基本知识回顾
毛细管电泳(CE: Capillary Electrophoresis)又称高 效毛细管电泳(HPCE),是指离子或带电粒子以弹性石 英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依 据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实 现分离的液相分离分析技术。
现代仪器分析
第一讲: 高效毛细管电泳法 在药物分析中的应用
College of Pharmacy, Shanxi Medical University
Prof. Anjia CHEN
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
1
电泳法在药物分析中的应用chaj
第一节 仪器分析法概述 (generalization)
7
电泳法在药物分析中的应用chaj
二、毛细管电泳的主要模式
毛细管区带电泳（CZE） 毛细管凝胶电泳（CGE） 毛细管等电聚焦（CIEF） 毛细管电动色谱（ MECC; MEEKC etc.） 毛细管电色谱（CEC） 毛细管等速电泳（CITP） 亲和毛细管电泳（ACE） 非水相毛细管电泳（NACE）
色谱分析法 √
光谱分析法 √
仪器分析法
电化学分析法
质谱分析法
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
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电泳法在药物分析中的应用chaj
其他仪器分析法有：
➢ 流动注射分析 (Flow Injection Analysis, FIA) ➢ 热分析 (Thermal Analysis, TA) ➢ X射线分析 (X-ray Analysis)
➢ 电渗迁移：电渗迁移指在电场作用下溶液相对于带电管壁 移动的现象。当毛细管内充满缓冲溶液时，毛细管壁上的 硅羟基发生解离，生成的氢离子溶解在溶液中，这样就使 毛细管壁带上负电荷与溶液形成双电层，在毛细管的两端 加上直流电场后，带正电的溶液就会整体的向负极端移动， 这就形成了电渗流。
➢ 带电微粒在毛细管内实际移动的速度为电泳流和电渗流的 矢量和。
HPCE: 以内径10~200µm的毛细管柱为分离通道， 对大分子和小分子等进行高效分离和检测的有关技 术的统称。
09.11.2020
现代仪器分析 第一讲_ 高效毛细管
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电泳法在药物分析中的应用chaj
一、HPCE原理
分离的原因：电泳迁移，电渗迁移
➢ 电泳迁移：在高压电场下，样本中各带电离子依据其所带 电荷的性质、多少及大小、形状的不同向相反方向移动。
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电泳法在药物分析中的应用chaj
Buffer Considerations
1. Typical [buffer]: 25-200mM 2. Good buffering capacity within the desired range 3. Minimal UV absorbance（低紫外吸收） 4. Low conductivity if possible (低电导) 5. Inexpensive/available (廉价/有效)
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Typical Buffer Systems/FSCE(CZE)
BUFFER
Useful pH Range
Phosphate
1.1-3.1
Formate
Байду номын сангаас
2.8-4.8
Acetate MES* (2-(N-吗啉)乙磺酸介绍) Citrate (柠檬酸盐 ) PIPES (哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸) )
电压升高，电场推动力大，又可进一步使柱径变 小，柱长增加，
高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱，理 论塔板数高达几十万块/米，特殊柱子可以达到数 百万甚至数千万。
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电泳法在药物分析中的应用chaj
毛细管电泳原理示意图
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