HIV实验室检测
hiv实验室检测及规范操作课件
hiv实验室检测及规范操作课件一、教学内容本节课我们将学习《临床免疫学》教材中第四章“病毒性疾病的免疫学诊断”，特别是关于HIV实验室检测的详细内容。
具体包括HIV检测原理、检测方法、操作流程、结果判读以及生物安全规范。
二、教学目标1. 理解HIV实验室检测的基本原理及常用检测方法。
2. 掌握HIV实验室检测的标准操作流程，能独立进行规范操作。
3. 能够正确解读HIV检测结果，并了解生物安全相关知识。
三、教学难点与重点教学难点：HIV实验室检测的操作细节、结果判读及生物安全规范。
教学重点：HIV实验室检测原理、操作流程及注意事项。
四、教具与学具准备1. 教具：PPT课件、HIV实验室检测操作视频、实验操作手册。
2. 学具：实验服、手套、口罩、消毒剂、HIV检测试剂盒。
五、教学过程1. 实践情景引入（10分钟）：展示HIV实验室检测在临床诊断中的重要性。
举例说明不规范操作可能导致的后果。
2. 理论讲解（20分钟）：介绍HIV实验室检测的原理、方法及操作流程。
强调生物安全意识及规范操作的重要性。
3. 例题讲解（15分钟）：演示HIV实验室检测操作流程，讲解关键步骤。
分析操作过程中可能遇到的问题及解决办法。
4. 随堂练习（15分钟）：学生分组，根据实验操作手册进行模拟操作。
教师巡回指导，解答学生疑问。
5. 结果判读与讨论（15分钟）：模拟实验结果，让学生尝试解读。
针对结果判读进行讨论，纠正错误观念。
6. 生物安全规范讲解（10分钟）：介绍实验室生物安全等级、防护措施及应急预案。
强调实验过程中遵循生物安全规范的重要性。
七、作业设计1. 作业题目：根据所学内容，简述HIV实验室检测原理及常用检测方法。
列出HIV实验室检测操作流程，并说明注意事项。
阐述生物安全规范在HIV实验室检测中的重要性。
2. 答案：（1）HIV实验室检测原理：利用抗原抗体反应，检测患者体内HIV特异性抗原或抗体。
（2）HIV实验室检测操作流程：样本准备：采集患者血液或体液，进行预处理。
如何判断是否得了艾滋病：实验室检查)
诊断
谢谢!
①HIV抗体筛查试验阳性和HIV补充试验阳性(抗体补充 试验阳性或核酸定性检测阳性或核酸定量>5000 copies/ml)
②分离出HIV
实验室检查判断
艾滋病 急性期
诊断标准
患者近期内有流行病学史和临床表现,结合实验室HIV抗体由阴性转为阳性即可诊 断，或仅根据实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性即可诊断。
无症状期
有流行病学史,结合HIV抗体阳性即可诊断,或仅实验室检查HIV抗体阳性即可诊断。
艾滋病期
有流行病学史、实验室检查HIV抗体阳性,加下述各项中的任何一项，即可诊断为 艾滋病。或者HIV抗体阳性，而CD4'T淋巴细胞数<200个/μl ,也可诊断为艾滋病。
艾滋病
艾滋病期
有流行病学史、实验室检查HIV抗体阳性,加下述各项中的任何一项，即可诊断为 艾滋病。或者HIV抗体阳性，而CD4'T淋巴细胞数<200个/μl ,也可诊断为艾滋病。
临床意义
预测疾病进程、提供开始抗病毒治疗依据、评估治疗效果、指导治疗方案调整, 也可作为HIV感染诊断的参考指标。
艾滋病诊断
艾滋病 CD4+T检测
艾滋病诊断
CD4T淋巴细胞是HIV感染最主要的靶细胞,HIV感染人体后,出现CD4+T淋巴细胞 进行性减少, CD4+/CD8+T淋巴细胞比例倒置现象,细胞免疫功能受损。如果进 行HAART ,CD4+T淋巴细胞在病程的不同阶段可有不同程度的增加。
艾滋病
筛查试验
酶联免疫吸附试验 (ELISA) 化学发光
艾滋病诊断
免疫荧光试验快速检测
补充试验 筛查试验呈阳性反应 免疫印迹法(WB)
艾滋病检测筛查实验室基本标准
艾滋病检测筛查实验室基本标准艾滋病（Acquired Immunodeficiency Syndrome，AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）引起的一种免疫系统疾病，严重威胁人类的健康与生活。
为有效控制艾滋病的传播，艾滋病检测筛查工作的准确性和标准化非常重要。
本文将介绍艾滋病检测筛查实验室的基本标准，以确保检测结果的可靠性。
一、实验室基本建设1. 实验室环境：实验室应设置在独立、封闭的区域内，具备良好通风、充足的阳光照射和患者与外界隔离的条件，确保病毒不会泄露和传播。
2. 设备设施：实验室应配备先进的设备和仪器，如荧光显微镜、PCR仪等，以确保检测的准确性和灵敏度。
3. 安全防护：实验室必须采取严格的生物安全措施，包括实验室人员必须穿戴合适的防护服，使用一次性手套等，以避免病毒的传播。
二、实验室人员要求1. 资质要求：实验室人员需具备相关医学或生物学专业背景并取得相关资质证书，熟悉艾滋病检测筛查的理论和实践操作。
2. 培训和定期考核：实验室人员应定期接受相关培训和考核，保持技能的更新和提高。
3. 团队合作：实验室人员需要具备团队合作精神，有效沟通和协作，以确保实验室工作的顺利进行。
三、标本采集和处理1. 采样器具：艾滋病标本采集应使用一次性器具，以避免交叉感染的发生。
2. 标本种类：常见的标本种类包括血液、唾液等，根据实际需要选择合适的标本类型。
3. 采集操作规范：标本采集操作应符合相关的操作规范，采集时需注意无菌操作和避免污染。
四、实验室操作流程1. 样本登记：在样本送检前，必须进行准确的样本登记和信息记录，包括患者的姓名、年龄、性别等。
2. 样本保存：样本在采集后应妥善保存，并按照规定的时间安排进行检测，以确保结果的准确性。
3. 检测方法：艾滋病检测方法包括酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）、免疫荧光法等，实验室应选择准确可靠的方法进行检测。
hiv检测生物安全要求
HIV检测生物安全要求随着艾滋病的普遍存在，HIV检测在医学领域中占有重要地位。
而为了保障患者、检测人员以及实验室的生物安全，HIV检测需要满足一定的要求。
1. 实验室环境要求HIV检测应该在专门的实验室中进行，实验室具有相应的环境条件，可以保证实验室的安全，减少操作人员的接触风险。
以下是实验室环境需要满足的要求：1.1 实验室装备完备在进行HIV检测的实验室中，必须要有必要的设施和设备来保障实验室的安全，如生物安全柜、安全手套、暴露计数器等。
1.2 实验室应当定期消毒实验室应当对各种设施和设备进行定期消毒，然后再使用，大大降低了实验室内的污染。
1.3 实验室内必须有规范的操作流程HIV检测需要一系列的标准化操作流程，这些操作流程应该在实验室设置之中，以保障操作人员和样本的安全。
2. 人员安全要求2.1 实验人员应该接受专业的培训并持有证书操作人员应该经过足够的培训，掌握HIV检测的操作规程，熟悉HIV检测标准和验收样本检测。
同时，所有操作人员都应该持有证书。
2.2 实验人员应该进行必要的预防措施和保健操作人员应该学会自我保护，减少好接触、免疫接种等3. 生物安全措施要求由于HIV检测样本中存在HIV病毒，因此需要采取生物安全措施以防止病毒扩散。
以下是生物安全措施需要满足的要求：3.1 合适的标本采集容器和运送容器样本采集器和运输器需要是细心、专业的、具备安全特性的。
1次性物品1次性使用，严禁重复使用。
3.2 生物安全柜在HIV检测实验室中，需要具备一个类似于生物安全柜这类设备，以保护检验人员免于与样本接触等工作。
安装位置有要求3.3 防护衣物和手套对于进行HIV检测的专业人员，应该穿戴相应的防护衣物和手套等防护设备，以降低感染风险。
4. 结束和处理措施要求在进行HIV检测后，需要结束最后的处理流程，以下是所需满足的要求：4.1 确定样本的处理方式标本处理方式主要包括处理方法的流程、样本使用前后处理、再处理、储存等措施。
检验科HIV室实验记录(ELISA初筛)
加样蓝图
板子编码：
孔位
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
A
B
C
D
E
F
G
检验科HIV室实验记录(
ELISA初筛 表格编号:JYK-HIV-BG-02
日期：
初筛复检：初筛
样品名称：
实验项目 ： HIV（1+2）
试剂厂家：新创
标本送检时间：
实验方法 ： ELISA
试剂批号：
标本保存方式：
实验室温湿度：
生产时间：
标本数量：
孵育箱温度：
有效期：
质控品批号：
实验时间：
仪器状态：
质控品效期：
样本编号：
质控品来源：
执行标准：检测执行标准《全国艾滋病检测技术规范》（2009修订版）
所用仪器：生物安全柜BSC-970IIA2(档案号：JYK-YQ-121)、酶标仪安图2010（档案号：JYK-YQ-107）、洗板机Anthus fluido（档案号：JYK-YQ-108）、水浴箱SYCIF（档案号：JYK-YQ-433）。
试验记录
1.平衡：试剂盒微孔条应平衡至室温（1配液：按浓缩洗涤液和蒸馏水1:19比例配好洗涤液.(参照试剂盒说明书)。
3.编号：将微孔条固定于支架上，阴性对照2孔，阳性1对照2孔，阳性2对照2孔，质控1孔。
HIV实验室检测方法和步骤
HIV实验室检测方法和步骤HIV，也称为人类免疫缺陷病毒，是一种能导致艾滋病的病毒。
HIV实验室检测方法和步骤被广泛应用于检测感染HIV的个体。
以下是一般情况下使用的实验室检测方法和步骤的详细说明。
1.预处理和登记在进行HIV实验室检测之前，需要对样本进行预处理和登记。
预处理包括标识样本的相关信息，如样本编号和患者信息。
这些信息对于结果记录和跟踪是至关重要的。
此外，还需检查样本的适应性和完整性。
2.血液样本采集3.血清分离采集到的血液样本需要进行血清分离。
这可以通过离心来分离血液的不同成分，例如血红蛋白和血清。
离心速度和时间需要根据实验室设备和协议进行调整。
4.酶联免疫吸附测定法（ELISA）最常用的HIV实验室检测方法是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
这种方法使用特定的抗体来检测血液中特定的抗原。
根据ELISA方法的不同，可检测HIV抗原或抗体。
实验室技术人员将患者血清样本加入到已包含HIV相关抗原或抗体的试剂盘中，然后根据试剂盘的建议操作，包括孵育时间、温度和洗涤步骤。
任何与接触抗原或抗体反应的特异性颜色改变，都可作为阳性结果。
否则，结果被视为阴性。
5.确认试验在进行HIV检测的初步结果后，通常会进行一个或多个确认试验。
确认试验的目的是统一确定检测结果的可靠性。
常用的确认试验包括HIV免疫荧光试验（IFA）和西方印迹法（Western blot）。
这些试验通过检测血清中的HIV特异性抗体，以确保先前的结果的准确性。
6.分子检测有时，为了获得更加可靠和敏感的结果，实验室会使用分子检测方法，例如聚合酶链式反应（PCR）。
PCR可以检测和放大病毒的基因或核酸，以确定HIV感染的存在和病毒的数量。
7.结果解读和记录HIV实验室检测结束后，实验室技术人员需要解读并记录结果。
阳性结果意味着存在HIV感染，而阴性结果则表示未检测到HIV感染。
针对不同的检测方法和样本类型，结果的解释可能有所不同。
因此，在结果解读和记录时，实验室人员需要严密遵循实验室的标准操作规程（SOP）。
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程
HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程1. 标本采集1.1 采集过程- 标本采集应由经过相应培训的医务人员进行。
- 采集前应充分向受检者解释采集过程，并获得其知情同意。
- 采集时应采取严格的无菌操作，以避免污染。
- 一般采集静脉全血样本，采集量不少于5ml。
1.2 标本处理- 采集后的标本应尽快送至实验室，避免暴露时间过长。
- 采用专用的血液收集管，确保标本完整无漏。
- 标本送至实验室前，应妥善保存并严禁摇晃。
2. 送检流程2.1 标签标识- 标本送检前，应在采集管上粘贴完整、清晰的条码标签，以确保标本追踪可靠性。
2.2 填写送检单- 标本送检时，应填写完整的送检单，包括受检者个人信息、采集时间、送检目的等相关信息。
2.3 送检方式- 送检可选择邮寄或快递方式，确保标本能够安全送达实验室。
- 快递包装需符合相关规定，避免标本在运输过程中受损。
3. 处理流程3.1 标本分离- 实验室接收标本后，应立即进行核酸分离，以保证分析的准确性。
3.2 核酸提取- 将分离的标本进行核酸提取，提取后的核酸可用于后续的检测操作。
3.3 核酸检测- 采用合适的核酸检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）等，对提取的核酸进行检测。
3.4 结果解读- 核酸检测结果应由经验丰富的专业人员进行解读，并做出相应的结果报告。
4. 结论本文档简要介绍了HIV病毒核酸检测标本采集、送检、处理流程。
标本采集要求医务人员进行，并在采集前向受检者解释采集过程。
送检时需填写完整的送检单，并确保标本的追踪可靠性。
实验室应迅速进行标本分离、核酸提取和核酸检测，并由专业人员进行结果解读。
以上流程的规范实施可提高HIV病毒核酸检测的准确性和可靠性。
HIV实验室检测技术
HIV实验室检测技术
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操作方法
• 实验准备:试验开始前将试剂和样品放置在 室温(18~23℃), 按实验室SOP做好试剂准 备。
• 备好试剂盒、待检样品和外部对照质控血 清后,严格按试剂盒说明书以及质控和安全 防护要求进行筛查检测.
1/3/2021
HIV实验室检测技术
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注意事项
• ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方 法，但在实际工作中，ELISA抗-HIV的检测 受诸多因素影响。
艾滋病期：保持和发展AIDS早期症状，出现多种机 会性感染，神经细胞和功能损伤的表现，易发生 多种肿瘤
* AIDS的病程通常2年
1/3/2021
HIV实验室检测技术
2
关于检测抗-HIV的残余危险度
含义：在目前条件下，筛查后仍具感染性的机率 称为残余危险度。
影响因素： * 窗口期和检测时机的选择问题 * 实验室质控 * 个别人免疫功能低下，对HIV无反应 * 试剂质量和保存问题 * 是否在有效期内使用 * 试验操作错误：标本或结果登记的差错、仪器校准否、 错误的操作
第4代试剂
• 从理论上来讲，这种试剂是很完美的，但其 敏感度和特异度尚需通过大量的临床评估加 以确认。在初筛诊断试剂上还发展了特异的 HIV IgA，用作围产期儿童诊断，敏感度达 93.1%，特异度在1月龄以上的婴儿可达 100%。此外，在对抗HIV IgM的诊断也正在 积极研究，并取得了可喜的成绩，无形中可 缩短窗口期7—10天。
B
± ±或 ＋ 再次采样，做确证实验
C
±－
报告抗-HIV阴性
D
－ 不必复检 报告抗-HIV阴性
1/3/2021
HIV实验室检测技术
HIV初筛实验室相关工作制度
HIV初筛实验室相关工作制度一、实验室简介HIV初筛实验室是进行人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测的重要场所，其主要任务是对疑似HIV感染者进行血清学检测，为确诊提供科学依据。
为了确保实验室工作的顺利进行，提高检测质量，制定一套完善的工作制度至关重要。
二、工作制度1. 实验室人员编制实验室应配备足够的专业技术人员，包括医生、检验师、实验员等。
工作人员应具备相应的专业技术水平和责任心，经过专业培训并取得相应资格。
2. 实验室设备与管理（1）实验室应配备先进的检测设备，定期进行维护和校准，确保设备正常运行。
（2）实验室应制定设备使用、维护和维修手册，明确设备的使用范围、操作步骤、维护周期等。
（3）实验室应建立设备档案，记录设备的基本信息、购置日期、维修历史等。
3. 实验室生物安全（1）实验室应制定生物安全防护措施，确保工作人员和环境的安全。
（2）实验室应定期进行生物安全培训，提高工作人员的生物安全意识。
（3）实验室应配备必要的生物安全防护用品，如防护服、口罩、手套等。
4. 实验室质量控制（1）实验室应建立质量控制体系，包括内部质量控制和外部质量评估。
（2）实验室应定期进行室内质控，确保检测结果的准确性。
（3）实验室应参加外部质量评估，了解自身检测水平与全国平均水平的差异。
5. 实验室检测流程（1）接收样本：实验室应做好样本的接收、登记和编号工作，确保样本信息准确无误。
（2）检测操作：实验室应按照检测试剂盒说明书进行操作，确保检测过程的准确性。
（3）结果判定：实验室应根据检测结果进行判定，如疑似阳性需进行复检和确认。
（4）结果报告：实验室应按时出具检测报告，并将结果及时通知相关部门。
6. 实验室信息管理（1）实验室应建立信息管理系统，包括样本信息、检测结果、工作人员等信息。
（2）实验室应确保信息系统的安全性、稳定性和可靠性，防止信息泄露。
（3）实验室应定期对信息系统进行维护和升级，提高信息管理效率。
7. 实验室应急预案（1）实验室应制定应急预案，包括突发事件的预防、处置和救援措施。
HIV感染的实验室检测(共36张PPT)
• （3）实验结果
• ①阴性对照（NC），HIV-1阳性对照（PC1），HIV-2阳性对照 （PC2）
NC 必须＜0.25方可用，排除NC≥0.25的值，计算NC平均 值。
NC界限范围：0.6倍NC均值＜NC＜1.4倍NC均值。
• 竞争法、捕获包被法等 4、严格遵守实验室标准操作规程（SOP）。
为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的，比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV感染 （4）艾滋病唾液检测卡：在硝酸纤维膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原，可同时检测含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗体，原理为酶 免疫间接法。 监测(为了知晓人群流行状况) Introduction to HIV Testing ⑥在2h内置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。 常用HIV抗体检测方法: 加受检标本，保温反应。 （1）明胶颗粒凝集试验（PA）：PA是HIV血清抗体检测的一种简便方法，是将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用，混匀后 保温（一般为室温）。
ELISA的原理
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗 体复合物与液体中的其他物质分开。再 加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应 而结合在固相载体上。此时固相上的酶 量与标本中受检物质的量呈一定的比例 。
ELISA的原理
加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有 色产物，产物的量与标本中受检物质的量 直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性 或定量分析。由于酶的催化效率很高，间 接地放大了免疫反应的结果，使测定方法 达到很高的敏感度。
ELISA
酶联免疫吸附试验 + ve
HIV
包被了HIV 抗
原的检测板
患者的抗体
hiv感染实验室检测
特异性好、快速、简捷。
定量NASBA技术：
是由一对引物引导的，连续均一的体外特异核苷酸序列的 等温扩增的酶促反应过程。 优点：操作十分简单，只需将制备好的模板直接加到反应体
系中，恒温41℃培育1.5～2小时，即可将模板扩增109倍。 NASBA 反 应 体 系 包 括 AMV 反 转 录 酶 、 RNA 酶 H 、
through, FT)
免疫层析 （Immunochromatograpy, lateral
flow, IF)
快速检测试剂的应用
目前在国内批准注册的国外进口试剂有：Determine HIV1/2（ABBOTT，雅培）、Instant CHEK-HIV1+2 （EY）、麦美华、中新科炬
一般10-30min内出结果。 2003年国内已有产品被SFDA批准。有金豪、万泰、
②仅需少量标本或标本中仅含少量病毒也能检测；
③在病毒感染的急性期抗体尚未出现之前，病毒感染的诊断主 要依靠NAT，适用于早期诊断；
④可对病毒进行定量检测，有助于疗效监测； ⑤可对病毒基因进行基因分型，比血清分型更有价值； ⑥通过对病毒耐药基因的检测，可预测或发现病毒的耐药性；
⑦可用于先天性或围产期获得性病毒感染的诊断；
预约检测后咨询时间。
危险因素评估
1.性行为：具体的性活动方式、性伴数量、性活动频度、 使用安全套的情况和性伴感染的可能性。特别要注意某 些高危行为，如多性伴关系，无保护性交或肛交，性病 史。 2.吸毒行为：吸毒方式、注射器具消毒、共用注射器等。
3.其他接触血液的行为： 输血或血制品史，有无采供血（浆）史、器官移植史或 者被血液污染器具刺伤、纹身、穿耳等等；
2024年hiv实验室检测及规范操作课件
2024年hiv实验室检测及规范操作课件一、教学内容二、教学目标1. 理解HIV实验室检测的基本原理和方法。
2. 学会规范操作HIV实验室检测流程。
3. 掌握HIV检测质量控制措施。
三、教学难点与重点教学难点：HIV实验室检测方法的原理、操作步骤及质量控制。
教学重点：规范操作HIV实验室检测流程，确保实验结果的准确性。
四、教具与学具准备1. 教具：PPT课件、实验操作视频、HIV实验室检测操作手册。
2. 学具：实验室检测器材（如离心机、移液器等）、实验试剂、个人防护用品。
五、教学过程1. 实践情景引入（5分钟）通过展示HIV实验室检测在实际工作中的应用案例，引导学生了解HIV检测的重要性。
2. 理论知识讲解（15分钟）介绍HIV实验室检测的基本原理、方法及操作步骤。
3. 例题讲解（10分钟）通过具体例题，讲解HIV实验室检测中可能遇到的问题及解决方法。
4. 随堂练习（10分钟）学生分组进行HIV实验室检测操作练习，教师巡回指导。
5. 规范操作演示（15分钟）播放实验操作视频，讲解操作要领及注意事项。
6. 质量控制讲解（10分钟）介绍HIV检测质量控制措施，包括实验室内部质量控制、实验室间质量控制等。
六、板书设计1. 2024年HIV实验室检测及规范操作2. 内容：HIV实验室检测基本原理实验室检测方法操作步骤质量控制七、作业设计1. 作业题目：（1）简述HIV实验室检测的基本原理。
（2）列举三种常用的HIV实验室检测方法。
（3）结合实验操作流程，说明如何进行HIV实验室质量控制。
2. 答案：（1）HIV实验室检测基本原理：通过检测病毒核酸、病毒抗原或抗体等指标，来判断待检样本中是否存在HIV感染。
（2）常用的HIV实验室检测方法：免疫印迹法、ELISA法、PCR法。
（3）HIV实验室质量控制：实验室内部质量控制包括实验器材校准、试剂质量检查、操作人员培训等；实验室间质量控制包括参加外部质控活动、进行室间比对等。
hiv抗体检测标准操作流程
hiv抗体检测标准操作流程
HIV抗体检测是一种常见的临床实验室检测方法，用于检测人
体内是否存在艾滋病病毒（HIV）的抗体。
以下是HIV抗体检测的标
准操作流程：
1. 采集标本，通常使用静脉血作为检测标本。
在采集血液样本
之前，医务人员应该进行充分的消毒，并确保采集器具的无菌。
2. 标本处理，采集的血液标本需要进行离心分离，将血浆与细
胞分离开来。
血浆通常是用于HIV抗体检测的样本。
3. 试剂准备，准备好用于HIV抗体检测的试剂盒，包括酶联免
疫吸附试验（ELISA）试剂盒、免疫层析试纸或其他相应的检测试剂。
4. 检测操作，根据试剂盒的说明书，将标本和试剂按照指定的
比例混合，进行反应。
通常包括加入标本、洗涤、加入检测试剂、
洗涤等步骤。
5. 检测结果读取，根据试剂盒的说明书，进行反应时间的控制，然后通过目测或者仪器读取结果。
6. 结果判读，根据试剂盒的说明书，对检测结果进行判读。
通常根据试剂盒的设定标准，阳性、阴性和可疑结果会有相应的判读标准。
7. 结果确认，对于初步阳性的样本，需要进行复测或者进行其他方法的确认，以确保结果的准确性。
8. 结果报告，将检测结果进行记录和报告，确保结果能够被医生和患者及时获取。
总的来说，HIV抗体检测的标准操作流程包括标本采集、标本处理、试剂准备、检测操作、结果读取、结果判读、结果确认和结果报告等步骤。
在整个流程中，严格遵循操作规程和质量控制标准非常重要，以确保检测结果的准确性和可靠性。
HIV实验室检测及规范操作
快速检测试剂的优缺点
硒标记法和金标记法 与ELISA相比 ►优点 所需时间短 操作简便，不需特殊设备。 试剂贮存于室温。 ►缺点 特异性和敏感性与ELISA有差距。 费用较高。
HIV抗体检测程序及流程图
1、筛查试验 标本验收合格后，用筛查试剂进行检测，如 呈阴性反应，报告为HIV抗体阴性；对呈阳性 反应的标本须进行重复检测。 2、重复检测 用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家 的试剂重复检测，如两种试剂复测均呈阴性 反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应， 或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确 认。
HIV抗体确认检测流程
筛查试验阳性反应样品 免疫印迹法（WB，HIV-1/2混合型）
HIV抗体初筛检测
ELISA）
（阿克苏
结果判定 ⑴阴性对照（Negative Control,，NC）的参考标准 NC必须＜0.250，去除≥0.250的各孔； 计算剩余NC的平均值（NCx） 0.6NCx＜NC＜1.4NCX,如果有一个以上超出此范围， 去除后重新计算NCx。 ⑵判定实验有效性： 至少有2个阴性对照OD值有效。 PC1-NCx≥0.400（PC1：HIV-1抗体阳性对照值） PC2-NCx≥0.400（PC2：HIV-2抗体阳性对照值）
HIV抗体初筛检测结果解释
造成检测结果不确定的原因
(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗 体。 (2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体 水平下降。 (3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫 性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖 等，此时，身体产生的一些抗体与Ｐ２４核 心蛋白抗体相似。 (4)以前接种过HIV疫苗。
HIV抗体检测（明胶颗粒凝集试验）
HIV筛查实验室检测结果报告规程
检测结果报告规程
1、从事HIV检测工作的技术人员必须接受过上岗前的培训和定期复训。
2、HIV检测工作必须在独立的实验室内进行。
3、初筛检测试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、中国药品生物制品检定所批批检合格且在有效期内的试剂。
4、按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求建立健全质量管理制度、实验室安全标准操作规程、安全防护工作等。
5、检测结果报告前应填写好原始实验记录资料，包括试验日期，试验操作记录，检测样品及空白、阴、阳对照结果，S/CO值、临界值、试剂厂家、批号、效期，检测人、复核人签名等。
6、将试验结果存档保存，处理试验废物，擦净实验台，做好实验室消毒卫生。
7、结果报告：对呈阴性反应的样品，可出具“HIV抗体筛查报告”（见附表1）阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复检，不能出阳性报告。
8、复检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。
如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告“HIV抗体筛查报告”（见附表1）阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则应按照《全国HIV检测管理规范》的要求送艾滋病确认实验室进行确证试验。
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HIV检测
•
HIV感染后首先 检测到HIV RNA
第三代及其以前 的试剂均为只检 测HIV抗体 第四代HIV检测 试剂检测到HIV p24抗原，为抗 原抗体联合检测
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HIV-1/2/O抗体 HIV-1/2/O抗体+HIV p24抗原
罗氏HIV试剂 第四代HIV抗原抗体联合检测法 Elecsys ® HIV combi PT 缩短检测窗口 期，早期诊断
确证试验
确证
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仅能检测HIV-1，不能检测HIV-2和HIV Ag，灵 敏度有限，窗口期长，易错过早期感染样本 试剂成本高，操作繁琐，结果判定主观
HIV检测流程
• 美国CDC推荐HIV检测流程 2014修订版
联合试验 • 初始反应必须使用抗原和抗体联合检测 的第四代免疫学方法，这类方法可以同 时检测HIV-1抗体、HIV-2抗体和HIV p24抗原，检测出HIV-1、HIV-2感染和 急性HIV-1感染，初始检测无反应性则无 需进行进一步检测 鉴别试验 • 初始反应阳性标本需经过FDA批准的抗 体鉴别试剂进行HIV-1和HIV-2抗体鉴别 试验，结果以HIV-1抗体阳性、HIV-2抗 体阳性、HIV抗体阳性或无法鉴别来解释 核酸试验 • 初始检测有反应，抗体鉴别检测无反应 性或不明确标本须经HIV-1核酸检测， HIV-1 NAT有反应性而抗体鉴别无反应 性为急性HIV-1感染；HIV-1 NAT有反应 性而抗体鉴别试验不明确为HIV-1感染； HIV-1 NAT无反应性而抗体鉴别不明确 为假阳性结果
Serodia® HIV1/2 8 NA 8 9 NA 10 4
Elecsys HIV Combi PT阳转时间较PCR 方法平均晚2天，早于或等于其它方法 与三种第三代检测方法相比， Elecsys Combi PT 是 1.2 days ，优于Elecsys HIV combi (2.0 days), Zhuhai Livzon anti-HIV(6.2 days) and Serodia® HIV1/2 (7.8 days). 与ADVIA Centaur相比, the Elecsys HIV combi PT’s 的检出时间是 0 days ， ADVIA Centarur’s (1.0 days). 与VIRONOSTIKA® HIV Univ-Form II plus O相比，Elecsys HIV combi PT’s 是 1.5 days ，VIRONOSTIKA® HIV Univ-Form II plus O’s (7.5 days).
HIV实验室检测
实习生：叶贝 2017/4/28
目录
HIV病原学及流行病学特点
HIV实验室检测方法
罗氏第四代HIV检测试剂特点
HIV病原学
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HIV人类免疫缺陷病毒，由包膜及 核心组成，为RNA病毒
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HIV核心部分包括两条单股RNA链， 核心结构蛋白及复制所需酶类（蛋 白酶、逆转录酶、整合酶）
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HIV病毒逆转录酶无校对功能，故 病毒变异性强，导致检测结果假阴 性
HIV病原学
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病毒识别易感细胞膜表面受体，在逆 转录酶作用下由RNA逆转录为DNA
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经DNA转录及翻译后形成蛋白外壳， 将病毒RNA包裹其中，生成新的 HIV
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主要侵入T淋巴细胞及神经细胞， 导致细胞免疫功能缺陷，增加机会
性感染
HIV流行病学
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HIV主要分为两种HIV1和HIV-2两型； HIV-1类为全球主要流 行类型，分为M、 O、 N三个亚型组 全国呈低流行态势，部
Elecsys HIV combi PT 0 8 0 0 0 6 0 ADVIA Centaur HIV Ag/Ab combo 4 NA 0 NA 0 NA 0 ARCHITECT VIRONOSTI HIV KA® HIV Ag/Ab Univ-Form II combo plus O 0 8 0 0 0 6 0 8 NA NA 9 3 10 NA
缩短检测窗口 期，早期诊断
Seroconversion panel PRB 930 PRB 958 Nabi 0759 Nabi 1436 Nabi 4009 Nabi 9003 Nabi 25165
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Elecsys HIV combi 4 NA 0 0 NA 6 0
Zhuhai Livzon anti-HIV 8 NA 4 9 NA 6 4
急性期
第一个血清转换窗口期 2nd 代抗体检测 3rd 代抗体检测 4th 代抗原抗体检测 p24 抗原检测 核酸检测方法
无症状期
艾滋病期
p24 抗原检测 核酸检测方法
01 2 3 4 5 6 7 8 9 周
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 年
从初始感染后的时间
罗氏HIV试剂 第四代HIV抗原抗体联合检测法 Elecsys ® HIV combi PT
染及肿瘤
HIV实验室指标
初筛试验+确证试验
备注
筛查试验：ELISA, CIA, ECLIA 确证试验：WB, RIBA 仅测抗体 早期灵敏度更高 HIV Ag/Ab combi PT: ELISA, ECLIA, CIA
血清学检测
HIV抗体 HIV p24抗原 HIV抗原+抗体
核酸检测
HIV RNA 定性 辅助确证试验
备注
Taqman荧光实时PCR试剂
HIV RNA 定量
辅助确证试验，监测治疗效果 与疾病进展
靶核酸扩增试剂
淋巴细胞检测
CD4+和CD8+ HIV感染分期，抗病毒治疗指针
备注
CD4+/CD8+比值下降
HIV检测流程
• 全国艾滋病检测技术规范-2015年修订版检测流程
初筛试验
筛查
复检
HIV检测流程
• 全国艾滋病检测技术规范-2015年修订版检测流程
无症状期 可持续6-8年，HIV在感染 者体内不断复制，具有传 染性 •
ห้องสมุดไป่ตู้
艾滋病期 HIV感染最终阶段，HIV血 浆病毒载量明显升高， CD4+T淋巴细胞<200个/ul
巴结肿大为特征
可检出HIV及p24抗原， CD4+/CD8+倒置
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可检测HIV及抗体，CD4+
T淋巴续保逐渐下降
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主要表现为各种机会性感
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分地区疫情严重
HIV传播途径
1、传染源：病人及无症状携带者 • 血液、精子、子宫和阴道分泌物、唾液、眼泪和乳汁等传播 2、传播途径
• 性传播：同行、异性、双性性接触
• 母婴传播：经胎盘、分娩及哺乳时传播 • 血液制品传播：共用针具静脉注射毒品，
介入性医疗操作，纹身，耳洞等
HIV感染自然史
急性期 • • • 初次感染HIV 2-4周，传 染性最强 主要以发热、关节痛、淋 •