植物血球凝集素
植物凝集素在植物保护中的研究进展
研究报告收稿日期植物凝集素在植物保护中的研究进展陈达嵩郑月琼福建泉州农业学校,泉州中图分类号: S4 文献标识码:A 文章编号植物凝集素最早发现于1888年, Stillmark在蓖麻(Ricinus communisL·)籽萃取物中发现了一种细胞凝集因子,它具有凝集红细胞的作用。
它是一类具有特异糖结合活性的蛋白,具有一个或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的非催化结构域。
根据植物凝集素亚基的结构特征,植物凝集素分成4种类型:部分凝集素、全凝集素、嵌合凝集素、超凝集素;根据氨基酸序列的同源性及其在进化上的相互关系,植物凝集素分为7个家族:豆科凝集素、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、2型核糖体失活蛋白、木菠萝素家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素。
植物凝集素可识别并结合入侵者的糖结构域从而干扰该入侵者对植物产生的可能影响;植物凝集素的糖结合活性是针对外源寡糖,参与植物的防御反应。
许多植物凝集素可结合到诸如Glc、或Gal 的单糖上,尤其对植物中不常见外来的寡糖具有更高的亲和性。
/dxddfllw/例如:结合几丁质植物凝集素识别真菌细胞壁及无脊椎动物的外骨骼成分中的碳水化合物。
另外,许多凝集素在较高PH范围内稳定、抗热、抗动物及昆虫蛋白酶等等。
有些凝集素甚至是完全稳定的蛋白质,如从刺荀麻茎中分离出的凝集素在三氯乙酸中保持稳定,沸煮也不会失活。
等(1998)认为大多数植物凝集素存在于储藏器官中,它们既可能作为一种氮源,也可以在植物受到危害作为一种防御蛋白发挥功能[1]。
因此植物凝集素是植物防御系统重要的组成部分,在植物保护上起着重要作用。
笔者就植物凝集素在植物保护上的研究进展作一综述。
对植物病原菌的作用植物凝集素作为微生物与植物的共生介质,可防止植物病原菌对植物的危害。
Mishkid等研究发现,植物凝集素常积累于病原菌易侵染的部位,预示着凝集素可能参与对病原菌的防御[2]。
·1 对植物病原真菌的作用已有实验证明,植物凝集素能结合真菌细胞、抑制孢子萌发和菌丝体生长。
植物凝集素提取工艺
植物血凝素也称为植物凝集素（PHA），可自制也可购自商品。
自制的方法常用生理盐水提取法。
（A）干品制备法（1）选广东鸡子豆10g，用蒸馏水冲洗，置培养皿内用75%酒精一次性浸洗，倒掉酒精留间隙置37℃。
恒温箱内24-48小时；（2）在无菌条件下研碎鸡子豆，加生理盐水30ml，摇匀后放入4℃冰箱24小时，第二天再加生理盐水70ml，再置4℃冰箱内24小时。
每8-12小时摇荡一次。
（也可一次（3）无菌条件下移入10-50ml离心管内，3000-4000rpm30性加100ml生理盐水）；分钟。
在无菌箱内把上清液分装于10ml小瓶，置冰箱冷冻层备用；（4）效价：外周血染色体制备每100ml培养基加PHA约2ml。
注：若整个过程未在无菌条件下进行，分装时用G5玻砂漏斗除菌即可。
（B）鲜品制备法：（1）选择完整无破皮鲜菜豆20g，用75%酒精浸泡10分钟；（2）在净化工作中用无菌盐水或蒸馏水漂洗二次，然后置无菌乳钵中捣成糊状，用100ml无菌盐水浸泡封口；（3）移入4℃冰箱中置24小时，中间摇动数次，次日3000rpm30分钟，在无菌情况下分装上清液于10ml小瓶内，置冰箱冷冻层备用。
（4）效价：正式使用前先用一定量作效价测定，按效价使用。
青豌豆的．提取：取青豌豆100克，加含0.15M氯化钠的0.01M pH7.0磷酸缓冲液200ml浸泡过夜，经膨胀后用组织捣碎机捣碎，倒入布袋中压榨出水提液，在沉渣中再力0入磷酸缓冲液100ml搅拌，浸泡1时，压榨出水提液，合并水提液，量出总体积。
加0.01％叠氮钠防腐。
2．蛋白质沉淀：边搅边加入固体硫酸铵达80％饱和（每升溶液加硫酸铵561克）冷藏过夜。
吸取上清液，沉淀再用二层滤纸抽气过滤至干，即得粗制青豌豆素蛋白沉淀物硫酸铵糊。
置冰箱保存。
3．亲和层析分离(1)装柱：取直径为1.0 cm，长度为25 cm的层析柱，按（实验十五）操作，自顶部缓缓加入稀薄的Sephadex G25悬液，待凝胶上升至距顶柱约3-5 cm即可，用1M NaCl溶液平衡10分钟。
凝集素ppt
凝集素的作用及应用
2.作为细胞特殊类型的标记 以多种凝集素对小鼠、大鼠和兔的肾组织切片
进行染色结果表明，刀豆素A和蓖麻素存在于肾脏 的各部，PNA和双花扁豆凝集素（DBA）主要分 布于远曲小管和集合小管上皮细胞，荆豆凝集素 （UEA）主要分布在血管内皮细胞，而麦芽素分 布在肾小球。
凝集素的作用及应用
凝集素的特性及分类
• 另一方面，凝集素具有多价结合能力，能与荧光素、 生物素、酶、胶体金和铁蛋白等示踪物结合，从而在 光镜与/或电镜水平显示其结合部位。
凝集素的特性及分类
凝集素可按糖的特异性、分子结构、结合位点和其功 能进行分类。
动物凝集素按分子结构分为C-型凝集素、S-型凝集素、 P-型凝集素、I-型凝集素和Pentraxins。
凝集素 Lectin
目
录
• 凝集素简介 • 凝集素的特性及分类 • 凝集素的简单作用机理 • 凝集素的作用及应用 • 研究意义
凝集素简介
• 是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯 的糖蛋白或结合糖的蛋白
• 能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素 • 植物凝集素通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A、
微生物凝集素的最早发现时间是1908 年，近几十年 来的研究,已发现了208 种微生物凝集素。目前发现的微 生物凝集素大多通过其壁上凝集素对糖基的识别来实现对 宿主的所以它们往往在吸附作用中发挥重要作用。
和其它来源的凝集素一样,微生物凝集素的一个重要 特征就是对某些糖具有结合性能,并且是可逆的,且有的结 合能力专一性很强,只结合某一种单糖或寡糖. 经分析发 现,微生物凝集素所结合的糖以甘露糖最常见,其次是半乳 糖。
recognition domain）
• 单糖残基的种类具有专一性 • 残基的异头构型、糖苷键类型以及寡糖链的结构
植物血凝素的药理作用
一、药物构成及规格：本品又称植物血球凝集素，通过超低温萃取技术从红芸豆中提取得到的植物蛋白，主要成分为D－甘露糖、氨基葡糖醛酸衍生物所构成的低聚糖辅基与蛋白质复合物，并通过冷冻干燥技术制成。
二、理化特性1. 本品为一种植物蛋白质；2. 分子量大约为128KDa；3. 本品为白色至类白色团粉末，性质稳定；4. 本品易溶于水，溶液呈乳浊状。
三、药物特点1. 本品通过超低温提取，并通过包被制剂技术，增强了本品抗热变性能力，同时不会被动物或昆虫胃肠的蛋白酶降解，在很大的pH范围内稳定。
因而不但延长了储存周期，而且在使用时，不受胃肠道中蛋白酶的影响。
2. 本品与聚肌胞诱导干扰素有所不同。
本品主要诱导产生γ-干扰素，而聚肌胞诱导机体产生α-干扰素。
γ-干扰素有自己独有的受体，同时γ-干扰素可以发挥“抗原定位”作用，使免疫系统能够为特殊的病毒筛选出特殊的抗体，并且可以对那些能够吞噬和消灭病原体的免疫细胞产生活化作用。
本品同样对于不同动物使用都可有效诱生干扰素，无种属限制，避免了直接使用干扰素的缺陷。
3. 本品因其独特的糖蛋白复合结构，在体内可迅速代谢掉，不会造成残留危害人类健康，符合当今用药要求。
四、效果分析：1. 本品口服可以与小肠上皮细胞结合，从而促进幼仔畜胃肠道的发育和胃肠道功能成熟，减少肠道大分子的吸收，增加胰腺蛋白和胰岛素的含量，促进了仔畜的食欲，从而减弱了大多数仔畜都会发生的断奶后生长抑制；而注射给药PHA与肠外其他组织结合，增加了肝脏和脾脏的重量。
瑞典农业大学( Swedish University of Agricultural Sciences)的研究小组在2004年国际猪兽医学会(IPVS)猪健康代表大会上报告说：现已证实植物血凝素可促进哺乳仔猪和大鼠肠道的成熟。
Thomsson等研究了植物血凝素是否能促进断乳小猪肠道的发育。
结果显示，使用PHA的断乳小猪在断乳后第一周生长较快（P=0.013），腹泻指数比对照组减少（P=0.10），且采食量增加（P=0.028），小肠屏障特性增加，小肠总长度长于对照组（P=0.063）。
去除植物凝集素最好的方法
去除植物凝集素最好的方法植物凝集素（PHA）是一种天然存在于某些植物中的蛋白质。
它具有多种生物学活性，包括抗肿瘤、免疫调节和凝集作用等。
然而，在一些情况下，植物凝集素可能成为问题，因为它可能导致某些副作用或不良反应。
因此，去除植物凝集素是必要的。
在本文中，将介绍几种去除植物凝集素的方法。
1. 低温处理：植物凝集素对温度敏感，可以通过低温处理来降低其活性。
一般来说，将植物材料置于低温环境中，如冰箱或冷冻室，可以有效地降低植物凝集素的活性。
通过低温处理，可以减少植物凝集素对生物体的影响。
2. 酶处理：酶是一种催化剂，可以降解植物凝集素的结构。
选择适当的酶，如蛋白酶K或胰蛋白酶等，可以将植物凝集素降解为无活性的分子。
酶处理一般需要在适当的温度和pH条件下进行，并在反应一定时间后停止酶活性，否则可能导致过度降解。
3. 离子交换：离子交换是一种常用的分离技术，可用于去除植物凝集素。
通过将植物材料或提取物与具有特定离子交换基团的树脂接触，植物凝集素可以与树脂结合，并从溶液中移除。
这种方法需要控制离子交换的条件，如温度、pH和流速，以确保高效去除植物凝集素。
4. 膜分离：膜分离是一种通过物质分子大小、电荷和亲疏水性等特性分离混合物的方法。
通过使用合适的膜，植物凝集素可以被过滤或逆渗透除去。
这种方法可以高效去除植物凝集素，并且操作相对简单。
但需要注意选择适当的膜孔径和条件，以防止植物凝集素的回吸或损失。
5. 超声波处理：超声波可以破坏植物凝集素的结构，从而降低其活性。
通过将植物材料或提取物置于超声波浴中，超声波的机械效应可以主导植物凝集素的降解。
超声波处理一般需要适当的功率和处理时间，并注意控制温度，以免超声波造成过热。
6. 过滤和沉淀：通过适当的过滤和沉淀步骤，可以去除大部分的植物凝集素。
通过选择适当的滤纸或孔径的膜过滤器，可以将植物凝集素分离并去除。
此外，通过离心沉淀也可以将植物凝集素从溶液中沉淀出来。
需要注意的是，不同的去除方法适用于不同的情况和要求。
植物凝集素报告
植物凝集素报告引言植物凝集素是一类存在于植物中的天然蛋白质，在植物的种子、根、茎、叶等部位广泛存在。
它们具有一定的毒性，并且具备凝集红细胞、抗菌和抗病毒等作用。
本报告将介绍植物凝集素的分类、作用机制以及潜在的应用领域。
分类根据抗原决定糖基的特异性，植物凝集素可以分为四种类型：血凝集素（L）、10株L（L-10）、抗体凝集素（PNA）和特异性其他凝集素（SNA）。
它们均可以通过特定的糖基与糖蛋白或糖类配体相互结合，从而发挥其生物学功能。
•血凝集素（L）：L型凝集素主要具有血凝集活性，能够识别A、B、O血型抗原，有助于血型鉴定和血液凝结的研究。
•10株L（L-10）：L-10型凝集素能够与糖蛋白GlcNAc和Galβ1-3GlcNAc、GalNAc结合，被广泛应用于癌细胞的识别和分离。
•抗体凝集素（PNA）：PNA型凝集素主要特异地与非还原内酰胺型的N-乙酰半乳糖胺（Galβ1-3GalNAc）结合，广泛存在于植物籽粒中，可用作免疫学和糖生物学领域的研究工具。
•特异性其他凝集素（SNA）：SNA型凝集素特异地与Neu5Ac(α2-6)GalNAc或Neu5Gc(α2-6)GalNAc结合，参与多种生理和病理过程，如细胞凋亡和肿瘤细胞的增殖等。
作用机制植物凝集素通过与其配体特异性结合，并介导细胞表面糖基的识别、粘附和聚集。
这些凝集素通常由两个或多个亚单位组成，通过非共价或共价相互作用形成多聚体。
因其特异性与糖类结合，植物凝集素可以抑制病原体的侵入，保护植物免受外界的伤害。
另外，植物凝集素还参与调控细胞生长、分化和凋亡等生理过程。
它们可以与细胞膜上的糖基结合，并通过信号转导途径影响细胞内的活动。
一些植物凝集素还具有抗菌和抗病毒的功能，能够诱导病毒颗粒的聚集和沉淀，从而抑制病毒的复制和传播。
潜在的应用领域由于植物凝集素具有广泛的生物学功能，因此在多个研究领域具有潜在的应用前景。
1.生物医学研究：植物凝集素可以作为分子探针用于细胞表面糖基的定位和检测。
植物凝集素（PHA）的提取及血凝效果研究
植物凝集素（PHA）的提取及血凝效果研究安徽技术师范学院,2002,16(1):23--25 journalofAnhuiTechnicalTeachersCollege植物凝集素(PHA)的提取及血凝效果研究于敏王志德董志芳(安徽大学生命科学院,安徽合肥230039)摘要:凝集素是一类具有糖专一性,可促使细胞凝集的蛋白质或糖蛋白,本文通过提取8种豆科植物种子中的凝集素.分别与人的四种血型红细胞悬液发生凝集反应(A 型,B型,O型,AB型),通过血凝反应的强弱程度来验证不同凝集素的血型专一性,并进一步测定其相对含量.关键词:植物凝集素;血凝;提取中图分类号:0.946.1文献标识码:A文章编号:1007—3302(2002)01—0023—03凝集素是一种非免疫源性的蛋白质或糖蛋白,在动物,植物及微生物(如细菌,病毒)中广泛存在,几乎见于各种生活的有机体,并不限于特殊的器官和组织.豆科植物的凝集素在成熟种子中占蛋白质总含量的10%左右.它由2个或4个单体组成,每个单体的分子量为25～30KD,有一个结合糖位点_lJ.凝集素不仅具有凝集诸如血细胞,淋巴细胞,精子细胞等作用,而且参与了生物体内的一些重要生理和药理过程,因此是研究生物体内细胞癌变,受精,分化及分子识别等生命过程极其有用的工具,同时作为一种试剂,凝集素不仅在l临床医学检验上有着重要地位,雨且是抗肿瘤药物(如干扰素,白细胞介素一2等)生产所需的促有丝分裂原L3-71,国外近来还报道某些凝集素对爱滋病毒也有抑制作用?.凝集素可能具有的多种生理生化作用.吸引了生物学科研工作者对其进行探讨.某些凝集素与ABO血型物质直接相关.少数凝集素具有血型专一性,即凝集素在凝集红细胞的反应中,其血凝反应与供血动物的种类和血型有密切关系.对这类自然界存在极少的血型专一性凝集素的性质,结构和功能的研究,不仅具有重要理论意义,雨且对l临床及法医学上血型鉴定收稿日期:2001—12—26具有较大应用价值.如油麻藤种子中的凝集素(MsL)即是一种人A型血专一性的凝集素_4】. PIA(利马豆凝集素)对A型血专一,L(欧洲百脉根凝集素)对.型血专一.Watkin和Morgan确立了凝集素的血型专一性和它们的糖结合血专一性的关系【.1材料和方法1.1材料1.11豆科(Leguminosae)植物之八种种子(I{暂于超市):赤豆.豇豆,花菜豆,多花菜豆,白云豆,黑菜豆,白菜,黄豆.1.1.2新鲜人血(A,B,AB,O四种血型)采于合肥市血防站)11.3试剂:0.85%NaCI溶液(生理盐水)11.4仪器:高速组织捣碎机DS一1(上海标本模型厂);冷冻离心机(上海医用分析仪器厂);光学显微镜XSP一16A(中国江南仪器厂);生物显微镜BHS(日本OLYMPUS公司);7230分光光度计(上海分析仪器厂).1.2方法12.1PHA的提取分别取8种豆子各15g,用生理盐水洗净后加100ml生理盐水吸涨24hr 后,将吸涨的豆子放入组织捣碎机中捣碎5rain, 置4℃冰箱中过夜抽提.将抽提物用四层纱布过滤,滤液5000r/min冷冻离心20min,上清液置24安徽技术师范学院2002每烧杯中4℃保存备用.1.22血凝反应测试(1)2%红细胞悬液的制备:取四种血型的新鲜人血各1Oml,加抗凝剂(柠檬酸钠)1g.用085%的生理盐反复洗涤5次,每次20oOr/rain离心5min,去上清,按红细胞压积用生理盐水配成2%的红细胞悬液.(2)平板反应:用滴管吸取豆类PHA提取液和红细胞悬液各一滴滴于载玻片上,充分混匀,静置1O min,在低倍镜下观察血凝现象,并以085%的生理盐水作对照试验.12.3PHA相对含量测定(1)体积相同试管洗净烘干称重后加入PHA提取液5ml,并以0 85%的生理盐水作对照试验.(2)各管分别同时加入2%的红细胞悬液1ml,摇匀,静置,15min之内观察血凝情况.(3)在某种豆子血凝团最先完全沉淀的同时,取出各管的上液.使其在同一刻度.此时再取2ml于7230分光光度计在620nm时测定光密度值(O13).(4)取出各管的悬浮液后,试管内仅存细胞沉淀团,此时烘干称重.1.2.4凝集程度的判别与记录液体澄清透明血细胞全部凝集于管底或平板底,轻摇可见大的凝块.为高度凝集(卅);液体稍混浊,液体中有明显的凝集物.凝集块较小,为中度凝集(+);液体混浊,仔细观察可看到液体中有很小的凝集块,为轻度凝集(+);液体与对照组相似,血细胞分布较均匀,为不凝集(一).2结果与讨论2.1结果2.1.1血凝反应测试豆类PHA提取液和红细胞悬液各一滴滴于载玻片上,观察结果如表1.表l提取液与四种血型血细胞摄集反应情况注:"一"不凝集+轻度凝集"抖"中度凝集"卅斗高度凝集由表1可以看出除豇豆和红豆的提取液外.其余六种豆子的提取液均可以使四种血型都发生凝集反应,且均未表现出血型专一性.只是发生反应的程度有所不同,其中自云豆效果最强,其中的PHA含量最高.2.12PHA相对含量的测定表2PPIA与血细胞稀释液作用后上清液OD值殛血红细胞凝集沉淀鞫干I 由表2可以看出,在同一条件下,加白云豆提取豫的试管吸收值最小,而红细胞沉淀最多,再次证明,白云豆中PHA含量是最高的.由于四种血型红细胞表面糖链的差异,各种豆子PHA一级结构的细微差异致使四种血型与八种豆子PHA的血凝反应有较太差异.但单从某种血型对八种豆子PHA的血凝反应来看,其结果与表1基本符合.四种血型的红细胞沉淀干重与O.D值呈负相关性,即某种提取液与红细胞悬液反应后的O.16卷第1期于敏等植物凝集索(PHA)的提取及血凝效果研究25 D值大,刚红细胞沉淀干重刚小;反之,().D值小,则沉淀重大.基本上达到了预期效果,但由于各种PHA液中均含杂质,且杂质的量不同,各种PHA液透光能力有一定差异,对()D值测量有一定影响,致使有一些豆类的反差不强.22讨论凝集素能和含有其结合位点互补的糖基的任何细胞结台.由于所有细胞和许多亚细胞结构都能与之结合,细胞凝集是细胞表面的糖分子结合,在细胞表面形面许多相互产叉的"桥"的结果影响凝集反应的因素除了PHA自身性质和细胞表面结构外,外界条件如PH值,离子强度及温度等有较大的影响,本实验用0.85%NaCI配制细胞悬液和提取PHA,从而确保PHA的血凝活性.随着科技的发展,预计将来有更多种类的植物凝集素被发现和提纯.更多的能识别新的特异性糖基的植物凝集素的发现将会使植物凝集素的应用更为广泛.从而为生物学,医学基础研究和临床诊断治疗提供新的手段和新的技术.[参考文献][]王遇群豆类植物凝集索及其对根瘤菌的识别作用[J]植物学通报.2000.17(2):127—132[2]孙册主编凝集索[M]北京.科学出版杜.1984[3]扬远和植物凝集紊的主要生物学作用及应用[J].生物学杂志,1994,(2):I一3[4]曾仲奎油麻腺种子凝集索的纯化及性质研究[J]生物化学杂志.1996,12(3),336—340[5]丁亮豆科植物凝集索对血细胞的凝集反应研究[J].中国细胞生物学第七届学术大会论文选集,1999lI.[6]Isab[eKinneyTcrriradeMirardas∞tos,et.ActivationofT&Bceilsbyacrudeextractofartoc~rpusin.- tegrifoliaismediatedbyaleetindistinctfromjaea[inJImm—noMetlho,1991.140197[7]江红.孙册.轼体动物凝集紊[J】生命的化学,1996,16(5):2B一31[8]FavcroJna1EurJlrranttno[,1993.23:179一l85 AbstrationofPhytohemagglutininandStudyofitsHemagglutininEffectYUMin,WANGZhi-de,DCINGZhi.一fang(SchoolofLiireScience,AnhuiUIrniversity,He{ei230039)Abstract:Phytohemagglufinin(PHA)isakindofproteinorglycoproteinItisabletoagglutini nthe erythrocytesofhumanbloodgroupAbstractPHAfromeightkindsofbeansandhavethemrea ctwiththeerythrocytesoffourhumanbloodgroup(A,.B,AB.O).Thispaperistoillustratebloodgroups pecialPHA anddetermineitscontentaceordingtohemegglutinativeleve1KeyWords:Phytohemagglutinin(PHA);Hemagglutination;Abstration。
植物凝集素作用
植物凝集素是一类存在于植物中的蛋白质或糖蛋白复合物，具有凝集红细胞、白细胞和其他细胞的能力。
它们在植物中起到防御和保护的作用。
植物凝集素的作用主要有以下几个方面：
1. 凝集红细胞：植物凝集素可以与红细胞表面的特定糖分子结合，导致红细胞聚集在一起形成凝集物。
这种作用可以阻止病原体侵入机体，起到一定的免疫防御作用。
2. 凝集白细胞：植物凝集素可以与白细胞表面的特定受体结合，促使白细胞聚集在一起形成凝集物。
这种作用可以增强免疫细胞之间的相互作用，提高免疫系统的效率。
3. 抗菌作用：植物凝集素可以与细菌表面的特定糖分子结合，导致细菌聚集在一起形成凝集物。
这种作用可以阻止细菌的生长和繁殖，起到抗菌作用。
4. 抗肿瘤作用：一些植物凝集素具有抗肿瘤活性，可以通过与肿瘤细胞表面的特定受体结合，诱导肿瘤细胞凋亡或抑制其生长和转移。
需要注意的是，植物凝集素具有一定的毒性，过量摄入可能对人体健康造成不良影响。
因此，在食用植物时，应适量摄入，并避免食用未经烹饪或处理的植物部分，以减少植物凝集素的摄入量。
植物凝集素-是从植物中萃取的一种糖蛋白和蛋白质的混合物,因可引起红细胞凝集而得名
植物凝集素-是从植物中萃取的一种糖蛋白和蛋白质的混合物，因可引起红细胞凝集而得名植物凝集素-是从植物中萃取的一种糖蛋白和蛋白质的混合物，因可引起红细胞凝集而得名。
虽然不同种类植物凝集素中糖蛋白和蛋白质的混合比例不同，但是它们的生物学作用相近。
学术术语来源---植物凝集素刺激外周血单个核细胞增殖及分泌因子表达的变化文章亮点：1 植物凝集素是常用的分裂原，但是植物凝集素对细胞凋亡作用的研究较少。
文章结果显示外周血单个核细胞在植物凝集素刺激下，增殖指标上升的同时蛋白水解酶3表达上升，提示细胞凋亡增加。
2 外周血单个核细胞主要是免疫细胞，也可从中分离培养内皮细胞。
植物凝集素刺激外周血单个核细胞增殖的同时，会促进其活化，但对内皮细胞的作用报道较少。
文章创新性的检测了内皮分泌因子的变化，发现体外培养和植物凝集素的加入会影响内皮分泌因子表达，提示植物凝集素对内皮细胞的生物学活性存在影响。
3 全血培养和外周血单个核细胞分离培养存在差异，提示全血中非外周血单个核细胞物质对体外培养和植物凝集素的作用存在一定影响。
关键词：干细胞；培养；植物凝集素；外周血单个核细胞；细胞因子；细胞增殖；细胞凋亡；炎症因子；内皮分泌因子；全血培养；体外培养；荧光定量RT-PCR；国家自然科学基金主题词：干细胞；植物凝集素类；细胞因子类；细胞增殖；细胞凋亡摘要背景：植物凝集素可以刺激外周血单个核细胞分裂并引起免疫细胞的活化，是常用的细胞增殖模型。
但是全血中的非外周血单个核细胞成分(血浆和无核细胞)在植物凝集素参与的体外培养过程中起到什么作用，以及内皮分泌因子的表达情况尚不明确。
目的：在体外单独培养或全血培养外周血单个核细胞过程中，观察植物凝集素对其增殖和凋亡的影响，以及相关炎症因子以及内皮分泌因子的表达变化。
方法：分离正常核型成人的外周血单个核细胞，应用无植物凝集素培养基和加入植物凝集素培养基分别进行单独培养，观察细胞形态学变化。
收集全血培养或不同条件单独培养的外周血单个核细胞，提取mRNA，荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、凋亡，以及炎症因子和内皮分泌因子的表达变化，并进行统计学分析。
植物凝集素凝集原理
植物凝集素凝集原理一、识别机制植物凝集素（lectin）是一类具有特异糖结合活性的蛋白质。
它们能够识别并特异性地结合糖蛋白或糖脂中的糖链，通常是通过与糖的特定结构域相互作用。
这种识别机制主要依赖于凝集素分子中的特定氨基酸序列，这些序列能够与特定的糖结构形成互补。
这种互补性使得凝集素能够精确地识别并结合细胞表面的糖链，从而在细胞间或细胞与外界物质间形成特定的相互作用。
二、共价交联植物凝集素在识别并结合糖链后，可以通过共价交联的方式将细胞或细胞器连接在一起。
这种交联作用可以发生在细胞表面、细胞内部或细胞间的连接处。
共价交联的形成是由于凝集素能够与糖链上的特定化学基团发生反应，从而形成不可逆的化学键。
这种交联作用在植物的生长发育和生理过程中具有重要的作用，如参与细胞的粘附、形态发生和组织分化等。
三、诱导细胞反应植物凝集素在与细胞表面的糖链结合后，可以诱导一系列的细胞反应。
这些反应可以是生理性的，也可以是病理性的。
例如，某些植物凝集素可以诱导细胞凋亡，而另一些则可以促进细胞的生长和分裂。
这些反应的发生通常是基于凝集素对细胞表面糖链的识别和交联作用，并通过信号转导途径介导的。
了解这些反应有助于我们深入探究植物的生长和发育机制，并为未来的生物技术应用提供理论基础。
四、生物防御植物凝集素在生物防御方面也起着重要的作用。
许多植物中的凝集素具有抗菌、抗病毒和抗虫的活性，能够识别并清除进入植物体内的病原体和寄生虫。
这些凝集素可以通过与病原微生物表面的糖蛋白或糖脂结合，阻止其入侵和增殖。
同时，凝集素还能够激活植物自身的免疫反应，诱导植物合成更多的抗菌物质，从而提高其抵抗疾病的能力。
了解植物凝集素的生物防御机制对于植物病理学、农业生产和农作物育种等领域具有重要意义。
五、应用领域随着对植物凝集素研究的深入，人们发现了其在许多领域的应用价值。
例如，在食品工业中，植物凝集素可以用于改善食品的口感和质地，或作为天然防腐剂；在医药领域，一些具有特殊糖结合特性的凝集素可以作为靶向载体，用于药物传递或诊断试剂；在农业中，某些具有抗病抗虫活性的植物凝集素可以作为生物农药或育种改良的候选基因。
凝集素
凝集素(lectin)凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。
常用的为植物凝集素（Phytoagglutin，PNA），通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A（C onconvalina，ConA）、麦胚素（Wheat germ agglutinin，WGA）、花生凝集素（Peanut agglutinin，PNA）和大豆凝集素（Soybean agglutinin，SBA）等，凝集素是它们的总称。
凝集素是动物细胞和植物细胞都能够合成和分泌的、能与糖结木菠萝凝集素合的蛋白质,在细胞识别和粘着反应中起重要作用,主要是促进细胞间的粘着。
凝集素具有一个以上同糖结合的位点，因此能够参与细胞的识别和粘着,将不同的细胞联系起来。
凝集素（Lectin）是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球（含血型物质），故名凝集素。
其常见种类见表6-1。
常用的为植物凝集素（Phytoagglutin, PNA），通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A（Conconvalina,ConA）、麦胚素（Wheat germ aggluti nin, WGA）、花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA）和大豆凝集素（Soybean agglutinin, SBA）等，凝集素是它们的总称。
凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们之所以被收入本书，是由于凝集素具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。
因此，Ponder（1983）提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。
凝集素的特性凝集素具有多方面的特性，在此我们仅简要提及其与免疫细胞化学技术方法应用有关的某些特性。
我们知道，生物膜中含有一定量的糖类，主要以糖蛋白和糖脂的形式存凝集素的标记技术在。
凝集素最大的特点在于它们能识别糖蛋白和糖肽中，特别是细胞膜中复杂的碳水化合物结构，即细胞膜表面的碳脂化合物决定簇。
烹饪赛项省赛题库选择题101-200
烹饪赛项省赛题库选择题101-200一、单项选择您的姓名： [填空题] *_________________________________101. 下列含有植物血球凝集素的食物是（）。
（） [单选题] *A.四季豆(正确答案)B.杏仁C.鲜黄花菜D.发芽马铃薯102.副溶血性弧菌有称为（）。
（） [单选题] *A.大肠杆菌B.嗜盐菌(正确答案)C.葡萄球菌D.芽孢杆菌103.下列选项中（）毒素的耐热性强，是强烈的致癌物。
（） [单选题] *A.氢氰酸B.组胺C.黄曲霉(正确答案)D .植物血凝素104.使鱼、牛肉表面发红、发黏的菌属是（）。
（）。
[单选题] *A.葡萄球菌B.沙门氏菌(正确答案)C.芽孢杆菌D.变形菌属105.不需要中间宿主的寄生虫是（）。
（） [单选题] *A.姜片吸虫B.肝吸虫C.华枝睾虫D.蛔虫(正确答案)106.由化学、物理、生物因素引发的人类恶性肿瘤称为（）作用。
（） [单选题] *A.致畸B.致癌(正确答案)C.致突变D.基因突变107.污染食品的细菌能否繁殖生长的主要因素是（）。
（） [单选题] *A 水分B.光线C.湿度D.营养(正确答案)108.我国规定肉类罐头中亚硝酸盐的残留量不得超过（）克/千克。
（） [单选题] *A.0.03B.0.05(正确答案)C.0.15D.0.5109食物中毒是指食用被有毒有害物质污染的食品后发生的（）。
（） [单选题] *A.慢性中毒B.急性疾病(正确答案)C.呕吐D.腹泻110.沙门氏菌属引起的食物中毒属于（）食物中毒。
（） [单选题] *A.感染型(正确答案)B.毒素型C.过敏型D.抗体形111.鱼类组胺中毒属于（）食物中毒。
（） [单选题] *A.感染型B.毒素型C.过敏型(正确答案)D.抗体型112.预防沙门氏菌属食物中毒可对食品进行加热处理，使其深部温度达到80℃以上，并持续（）分钟以上。
（） [单选题] *A.5B.7C.10D.15(正确答案)113. 食品污染按其性质可以分为生物性污染、化学性污染和（）。
植物凝集素
79
6
A
galNAc
Lathyrus odoratus
40-43
4(αβ)
−
α-man
+
Lens culinaris
49
2
−
α-man
+
Limulus polyphemus
400
18
−
NeuNAc
Bacterial agglutinin −
−
−
galNAc, glcNAc
4. Allow to sit for 1 hour at room temperature and then read the results.
Precautions and Disclaimer For Laboratory Use Only. Not for drug, household or other uses.
糖生物学作业-植物凝集素概述
植物凝集素概述摘要：植物凝集素是来源于植物的一类能凝集细胞和沉淀单糖或多糖复合物的非免疫来源的非酶蛋白质。
植物凝集素具有细胞凝集、抗病毒、抗真菌及诱导细胞凋亡或自噬等多种能力，因此在生命科学、医学及农业方面均有较好的研究价值和应用前景。
本文综述了植物凝集素近年来的研究概况，介绍了凝集素的定义，植物凝集素的结构特性、分类、分离纯化、功能及其应用。
1凝集素的发现及定义目前已经发现了近 1 000 种植物凝集素，并在生理生化及分子生物学方面对它们进行了许多研究，其中豆科植物凝集素有600多种。
植物中，不仅种子中存在凝集素，根、茎、叶、皮、果汁中也发现有凝集素。
1888年Herman和Sti11mark首次在蓖麻萃取物中发现了凝集素，它具有凝集红细胞的作用。
Renkonnen 发现它们对血细胞凝集时具有选择性。
随着对红细胞凝集反应中血型特异性认识程度的逐渐深入， Watkin 和Morgan 建立了人类ABO 血型系统凝集反应中严格的糖特异性结合理论。
Go1dstein 给出了凝集素的第一个较确切的定义：凝集素是自然界广泛存在的一类能凝集细胞、多糖或糖复合物的非源于免疫反应的糖蛋白。
现在研究表明，它还能够特异性识别并可逆结合复杂糖复合物中的糖链，而不改变所结合糖基的共价键结构。
另外，1980 年，Nature 杂志发表了5 位凝集素研究方面著名科学家的联名信，提出了当时较有权威性的凝集素定义：凝集素是指非免疫来源的糖结合蛋白或糖蛋白，并应有使细胞凝集或糖复合物沉淀的能力。
此定义包含三个要点：（1）凝集素是蛋白质或糖蛋白；（2）凝集素必须有专一的与糖基结合的特性，但是排除了免疫来源的针对糖基的抗体；（3）因为规定了能使细胞凝集或是糖复合物沉淀的特性，所以凝集素分子必须具有两个或更多糖结合位点，这样把一些虽有糖结合能力但是糖结合位点仅有一个的酶、转运蛋白、激素、毒素等排除在外。
2植物凝集素的结构特性目前已经获得纯化的凝集素中，阐明氨基酸序列的并不多，多数是对甘露糖（或葡萄糖）专一的凝集素。
植物凝集素的研究进展
第48卷第2期2003年4月武汉大学学报(理学版)J．W uhan Univ．(Nat．Sci．Ed．)V0_-48 No 2ADr．2002．232～ 238文章编号：0253—9888(2002’)02—0232—07植物凝集素的研究进展梁峰，常团结(商丘师范学院生物系，河南商丘476000)摘要：综述了有关植物凝集紊的研究进展，介绍了植物凝集紊的分类、糖结合特性、近年来有关植物凝集隶蛋白晶体结构的研究，以及其与糖结合能力相关的生物学功能．关键词：植物凝集紊{糖结合活性；晶体结构；功能{抗虫植物基因工程中图分类号：Q 946．L 文献标识码：A植物凝集素是一类具有高度特异性糖结台活性的蛋白，存在于许多植物的种子和营养器官中．第一个植物凝集素是在蓖麻籽中发现的，到目前为止，已经发现了多种不同的植物凝集素，在生理生化及分子生物学方面对它们进行了许多研究，特别是近年来，克隆了许多植物凝集素基因，对多种植物凝集素进行了蛋白质晶体结构的研究，对植物凝集素的生物学功能有了更深的认识．随着抗虫植物基因工程的研究进展，植物凝集素在抗虫基因工程上的应用受到了越来越多的重视，获得了许多转植物凝集素基因的抗虫转基因植物．本文介绍植物凝集素近年来的研究进展及其应用．1 植物凝集素的发现植物凝集素最早发现于1888年，Stillmark在蓖麻(Ricinus COYT"t1"YtU~ti$L．)籽萃取物中发现了一种细胞凝集因子，它具有凝集红细胞的作用．以后多种植物凝集素不断得到发现，在单子叶和双子叶植物中都发现有植物凝集素的分布，存在于许多植物的储藏器官和繁殖器官中．植物凝集素长期被认为是一种典型的种子蛋白，这是由于许多凝集素是在种子里发现的．现在许多植物营养器官中均发现了凝集素，非种子来源的凝集素和种子来源的凝集素同样分布广泛．植物凝集素在种子、营养器官中的丰度、分布的部位不尽相同．例如，种子来源的凝集素主要分布在子叶、胚乳和胚轴中．非种子来源的凝集素在营养器官如叶片、茎、茎皮、鳞茎、块茎、球茎、根状茎、根、果实、花子房、韧皮部汁液和花蜜中均有分布 ]．2 植物凝集素的定义随着植物凝集素分子生物学的研究，对凝集素蛋白纯化及其结构的研究表明，植物凝集素是一组高度异质性的具有特异糖结合活性的蛋白．1888年凝集素被发现时，根据它的特性被命名为血细胞凝集素(haemagg|utinln)，在随后的很长时期内一直沿用这个名称直到发现一些植物凝集素选择性地凝集ABO血型系统中某些类型的血细胞，lectin一词被提出，用以说明植物凝集素凝集反应的选择性特征 leetin一词来源于希腊语legere，意思是选择，但是这个名称并不十分严格，因为它同时包括了某些具有凝集活性丽非凝集素的蛋白质．从严格意义上说血细胞凝集素(haemagglutinin)一词更准确地说明了糖结合蛋白凝集红细胞的能力，但是由于血细胞凝集素同时具备凝集其他细胞的能力，所以，凝集素(agglutinin)一词更为台适．尽管haemag一收藕B期：2001-03-06作者简介：粱嶂(1966一)，男讲师，现从事强生物学和细胞生物学研究．维普资讯 第2期粱峰等：植物凝集素的研究进展 233glutinin、lectin、agglutinin的准确含义并不相同，它们通常被用以描述同一类蛋白质，在3个名词中，leetin一词使用相对较多．凝集素最初的定义是指非免疫来源的糖结台蛋白，可以凝集细胞或沉淀糖缀合物．最近凝集素的分子生物学研究进展要求根据凝集素的结构和功能对其进行重新定义．因此，Peumans和Van Damme在1 995年将植物凝集素定义为至少具有一个可与单糖或寡聚糖特异可逆结合的非催化结构域的植物蛋白口]．根据这个定义，一大类具有不同凝集和沉淀糖缀合物能力的植物蛋白均被包括在凝集素的范畴内．3 植物凝集素的种类及其糖结合特异性根据植物凝集素亚基的结构特征，植物凝集素被分成4种类型：部分凝集素(merolectins)、全凝集素(hololectins)、嵌台凝集素(chimerolectins)和超凝集素(superlectins) ．根据氨基酸序列的同源性及其在进化上的关系，植物凝集素可以分为7个家族：豆科凝集索、几丁质结合凝集素、单子叶甘露糖结合凝集素、Ⅱ型核糖体失活蛋白、木菠萝素(ja—ealin)家族、葫芦科韧皮部凝集素和苋科凝集素 ]．本文按后一种分类方法进行介绍．3．1 豆科凝集素豆科凝集素是来自豆科植物的一类同源蛋白，目前已经从7O多种植物中纯化了豆科凝集素，其中大部分来自种子，豆科凝集素还存在于叶片、茎皮、根等营养器官中口’．目前还发现一些豆科植物具有两种或多种凝集素，例如荆豆(Ulex europaeusL．)的种子含有两种具有不同糖结合活性的凝集素，扁豆属(Dotichos biftorus L．)的种子、茎、叶片、根中至少有4种具有不同糖结合活性的凝集素 ]．豆科凝集素的糖结合特异性差异很大，大部分属于甘露糖／葡萄糖和半乳糖／N 乙酰半乳糖胺结台凝集素，有些识别L岩藻糖、Neu5Aca(2，3)Gal／Gal—NAc，还有的不结台单糖，仅识别寡聚糖．3．2 几丁质结合凝集隶许多几丁质结台凝集素均包含有一个或多个橡胶素(hevein)结构域．橡胶素是从橡胶树的乳液中分离的、由43个氨基酸组成的小分子质量蛋白质，属于具有一个几丁质结合位点的单凝集素．目前已经在禾本科、荨麻科、罂粟科、商陆科和茄科中发现了几丁质结台凝集素的存在，它们具有高度的序列同渌性。
植物血球凝集素
简介
植物血球凝集素（PHA） phytohaemagg lutinin对原来从植物中发现的，具有凝集红血球作用的物质，而 命名的，后来发现了很多具有同样作用的物质，扩大其含义为细胞凝集素中植物来源的总称——植物凝集素 （phytoagglutinin，plant agglutinin）或凝集素（lectin）的同义词涵义模糊。缩写pHA的多数是指从菜豆 属（Phaseolus Vulgaris）和金雀花（P．Communis）中提取的凝集素。提纯后蛋白质含量多的称为PH A－P， 糖蛋白多的称为PHA－M。它具有凝集红血球，促进淋巴球（主要是T细胞）的幼化和分裂的作用。类似细胞凝集 素作用的物质还有伴刀豆球蛋白A，美国商陆（phytolacca am－ericana）的促细胞分裂剂（mitogen）及革兰 氏阴性菌的脂多糖。
植物血球凝集素
凝集红血球作用的物质
01 简介
目录
02 药理作用
植物血球凝集素（PHA） phytohaemagg lutinin对原来从植物中发现的，具有凝集红血球作用的物质，而 命名的，后来发现了很多具有同样作用的物质，扩大其含义为细胞凝集素中植物来源的总称——植物凝集素 （phytoagglutinin，plant agglutinin）或凝集素（lectin）。
2.用于迁延性肝炎：1日量为10～20mg，每日1次静滴，20日为1疗程。
少数病例曾出现一过性过敏反应，偶有过敏性休克。
Hale Waihona Puke 注射用植物血凝素：每支含冻干粉剂10mg。
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药理作用
适应症 用量用法
注意事项 规格
临床用于免疫功能受损引起的疾病，如急性白血病（急淋、急粒）、晚期绒癌及恶性葡萄胎、乳腺癌、肠癌、 鼻咽癌、再生障碍性贫血、迁延性肝炎等。
植物血凝素
功能功用
植物血凝素(Phytohaemagglutinin)是一种有丝分裂原，能激活小淋巴细胞转化为淋巴母细胞，继而分裂增 殖，释放淋巴因子，并能提高巨噬细胞的吞噬功能。作为干扰素诱导剂可以刺激机体产生白介素-2和干扰素；还 可以刺激机体产生非特异性抗体。由于其较难提纯，且成本极高，所以一直以来仅在实验室中作为刺激淋巴细胞 增殖的试剂。
1．利用鸡的白细胞脾细胞鸡胚成纤维细胞以有机锗（Ce—123）新城疫弱毒株（NDV-F）植物血凝素（PHA） 聚肌胞（POLYI:C）为诱生剂，对外源性干扰素（IFN）诱生条件如诱生剂量诱生时间及培养条件进行了比较分析 和探讨，结果发现以Ce—123诱生IFN的能力为最强，其他依次为：PHA NDV-F POLYI:C；且鸡脾细胞和鸡白细胞 产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞；并且最佳诱生剂量依次为：Ce—123为70微克/毫升；鸡NDV-F为128HAU/毫 升；POLYI:C为60微克/毫升；PHA为20毫克/毫升。该研究表明，植物血凝素在机体内刺激机体产生干扰素的能力 是聚肌胞的30倍，所以服用1mg植物血凝素相当于服用30mg的聚肌胞和直接服用300mg干扰素。
2..PHA同时可刺激B细胞转化为浆母细胞然后增殖分化为浆细胞，浆细胞产生大量的非特异性抗体来中和病 毒。
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2．PHA对家禽的新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、脑脊髓炎、流感等疾病的预 防及治疗效果。结果表明PHA对下列病毒感染的保护率分别为新城疫77。5%、传染性法氏囊病92。5%、传染性支 气管炎85%、传染性喉气管炎77。5%、脑脊髓炎90%、流感80%。
作用机理
1．PHA刺激T细胞增殖分化产生大量效应T细胞和细胞毒T细胞；效应T细胞分泌产生大量细胞因子（如干扰素 等）杀伤病毒；细胞毒T细胞可直接杀伤病毒。
植物凝集素的研究进展1
·综述·收稿日期:2006207207植物凝集素的研究进展舒晓燕1 ,阮期平2 ,侯大斌1(1. 西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳621000 ;2. 绵阳师范学院分子生物学与生物制药重点实验室,四川绵阳621000)摘要植物凝集素是一类具有高度特异性糖结合活性的蛋白,广泛分布于植物界。
本文综述了植物凝集素近年来的研究概况,介绍了植物凝集素的分类、结构特性、功能、基因克隆及其应用。
关键词:植物凝集素;分类;性质;功能;基因克隆;应用中图分类号:R282. 71 文献标识码:A 文章编号:100422199 (2006) 0620053204植物凝集素是指能可逆结合特异单糖或寡糖的蛋白质。
随着植物凝集素家族成员的增加,对其结构、功能研究的深入和分子生物学水平上新的发现,植物凝集素的定义已几经修正, 1995 年Willy J .Peumans 和El s J . M. Van Damme 认为确定蛋白质为凝集素的唯一前提条件是至少应有一非结构域,且其能可逆地结合到特异碳水化合物上[ 1 ] 。
植物中,不仅种子中存在凝集素,根、茎、叶、皮、果实中也发现有凝集素。
1888 年俄国Dorpt 大学的Stillmark 首次发现了蓖麻凝集素。
1936 年Summer and Howell 发现凝集素专一性结合糖的性质。
1960 年Nowell 报道了植物细胞凝集素有促进有丝分裂的作用。
1975 年Becker 等研究了刀豆凝集素分子的三级结构,揭开了研究植物凝集素分子空间结构和功能的序幕[2 ] 。
目前已经发现的植物凝集素近1 000 种,广泛分布于豆科、茄科、大戟科、禾本科、百合科和石蒜科等众多植物类群中,其中豆科植物凝集素最丰富,有600 多种。
通过分离鉴定,对它们的性质、分子结构及功能作了大量的研究,许多工作已深入到基因水平。
近年来,随着对凝集素研究的展开,人们已认识到凝集素的重要性。
饲料中的抗营养因子_植物凝集素的快速检测
饲料中的抗营养因子植物凝集素的快速检测戴大章 刘建新 叶均安 吴跃明 浙江大学动物科学学院动物营养研究室植物凝集素(lectin)是一种广泛存在于各种植物性饲料及其原料中的抗营养因子,采食过量时动物表现为日增重减少,饲料利用率下降,并影响免疫系统功能。
由于lectin具有凝集兔或人等红细胞的能力(凝集作用是凝集素与细胞表面的糖分子结合在细胞表面形成许多交叉的 桥 的结果),且凝集效价与lectin的量成线性关系,因此可以利用凝血反应测定其凝集效价,然后通过对标准品与待测样品的凝集效价的比较对lectin进行定量检测。
试验以大豆凝集素(SB A)为研究对象,建立了实验室快速检测SBA的方法 血凝法。
1 材料和方法1.1 红细胞悬液的制备试验选用兔红细胞作为检测指示物。
心脏采血后,注入装有玻璃珠的椎形瓶中摇动,以脱去纤维。
取脱纤维血液2.5mL,加入50mL pH值=7.2的PBS(0.02mol/L磷酸缓冲液,0.1mol/L NaCl)将红细胞配成5%(V/V)悬液,再加入含4%戌二醛的、等体积PB S,立即混匀,再加入叠氮钠至0.2% (W/V)。
室温(20~25 )下静置10h,其间每隔2h 搅拌一次。
然后用相同的PBS洗涤数次,除去未作用的戌二醛,用100mL相同的PB S配成2.5%的红细胞悬液(每 L红细胞悬液中红细胞数目约为1.6 105个),4 保存备用,可保存3~6个月。
1.2 大豆凝集素的提取取适量待测饲料样品,用微型植物材料粉碎机粉碎过80目筛,然后定量称取1g粉碎样品用30~60 沸程的石油醚8mL抽提10h,其间每隔2h搅拌一次。
过滤后滤渣以8mL生理盐水抽提10h,离心(3000r/min,10min)后取上清液进行检测。
1.3 大豆凝集素的检测收稿日期:2002-08-21 在72孔 V 型血凝板中每孔加入15 L血球缓冲液(0.02mol/L磷酸缓冲液,0.1mol/L NaCl,pH值为7.2)。
凝集素在生物分子分离提取中的应用
凝集素在⽣物分⼦分离提取中的应⽤植物凝集素最早发现于1888年，Stillmark在蓖⿇(Ricinus communis L．)籽萃取物中发现了⼀种细胞凝集因⼦，它具有凝集红细胞的作⽤。
它是⼀类具有特异糖结合活性的蛋⽩，具有⼀个或多个可以与单糖或寡糖特异可逆结合的⾮催化结构域。
植物凝集素对真菌的抗⽣效应可能与它特异结合暴露于真菌细胞壁表⾯的糖复合物并导致真菌细胞壁及菌体结构形态改变有关，凝集素可与真菌表⾯的葡聚糖、半乳糖、⽢露糖等多糖结合，⼲扰真菌细胞壁的合成，影响其细胞的正常代谢。
凝集素（Lectin）是指⼀种从各种植物，⽆脊椎动物和⾼等动物中提纯的糖蛋⽩或结合糖的蛋⽩，因其能凝集红⾎球（含⾎型物质），故名凝集素凝集素最⼤的特点在于它们能识别糖蛋⽩和糖肽中，特别是细胞膜中复杂的碳⽔化合物结构，即细胞膜表⾯的碳脂化合物决定簇。
⼀种凝集素具有对某⼀种特异性糖基专⼀性结合的能⼒，如⼑⾖素与α—D—吡喃糖基⽢露糖（α—D —Mannopyranosy）结合；麦芽素与N—⼄酰糖胺（N—acetyl glucosamine）结合；菜⾖凝集素与N—⼄酰乳糖胺结合（见本章表6—1）。
因此，凝集素可以作为⼀种探针来研究细胞膜上特定的糖基。
另⼀⽅⾯，凝集素具有多价结合能⼒，能与荧光素、⽣物素、酶、胶体⾦和铁蛋⽩等⽰踪物结合，从⽽在光镜与/或电镜⽔平显⽰其结合部位。
凝集素可为荧光素、酶和⽣物素等所标记，分别进⾏下列染⾊法：直接法标记物直接标记在凝集素上，使之直接与切⽚中的相应糖蛋⽩或糖脂相结合。
直接法的优点是简便，⽬前商品⽤的凝集素药盒已能购得。
但灵敏性不够⾼。
间接法将凝集素直接与切⽚中的相应糖基结合，⽽将标记物结合在抗凝集素凝集素受体表达抗体上间接法较直接法和直接法敏感性⾼5～10倍或更多⼀些，但必须购买或⾃制抗凝集素抗体。
糖—凝集素—糖法本法是利⽤过量的凝集素与组织切⽚中特定的糖基相结合。
经冲洗后，凝集素上还存在未被占⽤的结合部位，将这些部位与有过氧化物酶标记的特异性糖基相结合，形成⼀个三明治样的糖—凝集素—糖的结合物。
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植物血球凝集素
华越洋
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华越洋-植物血球凝集素说明：生化研究，可用于有丝分裂的研究。
血型测定和红细胞凝集实验。
别名：Phaseolus vulgaris agglutinin；Lectin；PHA
特性：来源：菜豆
效价：<62.5 μg /ml 凝集活性<10 μg/ml促有丝分裂活性
S：22-24/25
溶解性：溶于PBS(PH7.2), 参考浓度：1 mg/ml
储存条件：2-8℃
植物血球凝集素（PHA）phytohaemagg lutinin 对原来从植物中发现的，具有凝集红血球作用的物质，而命名的，后来发现了很多具有同样作用的物质，扩大其含义为细胞凝集素中植物来源的总称——植物凝集素（phytoagglutinin，plant agglutinin）或凝集素（lectin）的同义词涵义模糊。
缩写pHA的多数是指从菜豆属（Phaseolus Vulgaris）和金雀花（P．Communis）中提取的凝集素。
提纯后蛋白质含量多的称为PH A－P，糖蛋白多的称为PHA－M。
它具有凝集红血球，促进淋巴球（主要是T细胞）的幼化和分裂的作用。
类似细胞凝集素作用的物质还有伴刀豆球蛋白A，美国商陆（phytolacca am－ericana）的促细胞分裂剂（mitogen）及革兰氏阴性菌的脂多糖。