microRNA-let-7

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microRNA let-7a

ｐａｓｅ一８、Ｃａｓｐａｓｅ一９的表达显著升高。ｌｅｔ一７ａｍｉｍｉｃ转染组，ｌｅｔ一７ａ的表达显著升高，Ｃａｓｐａｓｅ一３、Ｃａｓｐａｓｅ一８、Ｃａｓｐａｓｅ一９
・
论
著・ｍｉｃｒｏＩＡｌｅｔ－７ａ调控
中国医药导报２０１５年６月第１２卷第１７期
Ｃａｓｐａｓｅ家族影响白内障发生的机制研究
宇张劲松闵晓洁罗文婷李晶赵江月
秦
１．中国医科大学附属第四医院眼科中国医科大学眼科医院辽宁省晶状体学重点实验室，辽宁沈阳１１０００５；２．中国医科大学附属盛京医院实验研究中心．辽宁沈阳１１０００４【摘要】目的探讨ｍｉｃｒｏＲＮＡｌｅｔ一７ａ靶向调控Ｃａｓｐａｓｅ家族的机制及其在年龄相关性白内障发病过程中的作用。方法收集２０１４年７－９月在中国医科大学附属第四医院（以下简称 “ 我院” ）眼科诊断为年龄相关性白内障（排除其他眼部疾病）的患者晶状体前囊膜标本３Ｏ例，作为实验组；同时收集我院眼科眼库提供的新鲜人眼透明晶状体前囊膜标本１５例，作为对照组。利用生物信息学软件预测ｌｅｔ一７ａ可能调控的Ｃａｓｐａｓｅ家族中的关键基因：采用
实时荧光定量ＰＣＲ（Ｒｅａｌｔｉｍｅｑ－ＰＣＲ）检测实验组和对照组ｌｅｔ一７ａ及其预测靶基因的表达；利用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ

microRNA简介

microRNA简介microRNA的发现（Discovery）1993年，Lee，Feinbaum和Ambros等人发现在线虫体内存在一种RNA（lin-4），是一种不编码蛋白但可以生成一对小的RNA转录本，每一个转录本能在翻译水平通过抑制一种核蛋白lin-14的表达而调节了线虫的幼虫发育进程。

对于出现这种现象的原因，科学家们猜测是由于基因lin-14的mRNA的3'UTR区独特的重复序列和lin-4之间有部分的序列互补造成的。

在第一幼虫阶段的末期降低lin-14的表达将启动发育进程进入第二幼虫阶段。

7年后科学家又发现了第二个miRNA－let-7，let-7相似于lin-4，同样可以调节线虫的发育进程。

自从let-7发现以来，应用随机克隆和测序、生物信息学预测的方式，又分别在众多生物体如病毒、家蚕和灵长类动物中发现了成千的miRNAs。

被鉴定的miRNAs均被miRBase网站整理并加以注释。

此网站由著名的Sanger研究所主办，并对公众开放。

（）microRNA的生物起源（Biogenesis）miRNAs起源于内源性表达转录本，是长约21-25nt的双链RNA 分子，其典型特征是具有发卡结构。

图1表述了对当前miRNA和siRNA起源的理解。

miRNA途径开始于一个miRNA基因的pri-miRNA（PrimarymiRNA）转录本（step 1）；这个70－100nt的发卡RNAs（pri-miRNA）在核内被核糖核酸酶Drosha加工处理而最终成为pre-miRNA（Precursor miRNA，）（step 2）；之后pre-miRNA被核输出蛋白exportin 5转运入胞质（step 3），接着被第二个核糖核酸酶Dicer消化为21－25nt的miRNA（step 4）；这个阶段的miRNA可以结合RISC（RNA-Induced Silencing Complex）并与靶标mRNA互补并列（step5－6）；miRNA和靶序列的互补程度决定了靶基因mRNA要不在翻译水平被部分抑制，要不完全断裂（step 7）。

MicroRNA研究概况以及MicroRNA芯片技术简述MicroRNA的研究

MicroRNA 研究概况以及MicroRNA 芯片技术简述一、MicroRNA 的研究概况1.MicroRNAMicroRNA（miRNA , miR）是由约21-25个核苷酸组成的分子，microRNA 通过抑制mRNA 的翻译或者促进其降解而起到负性调控的作用。

最初miRNA 的功能在植物学、癌症、病毒性感染和发育生物学中得到了验证。

但最近的研究发现，患有心脏疾病的小鼠对照正常状态miRNAs 失调，并且在肥大的心脏中也检测到了数种miRNA 的上调或者下调，同时体外实验也证实了它们对心肌细胞形态的影响。

2.MicroRNA 的研究进展miRNA现象的最早报道是在佃80年的Genetics和Cell上。

佃93年在线虫中发现的lin-4 是第一个被确定的miRNA [31]，它的基因产物是21 个核苷酸的RNA 分子并且部分序列互补于lin-14 mRNA的3' UTR区域。

这些互补序列使lin-4间断地与lin-14 mRNA结合。

奇怪的是，lin-4没有明显地改变lin-14 mRNA的量，但是Lin-14蛋白表达却明显降低。

2000年又在线虫中发现了与lin-4相似的miRNA ―― let-7，它们参与线虫发育的时空调节。

miRNA基因首先被RNA聚合酶H转录为较长的初始转录本，该转录本含有数千个核苷酸，称其为pri-miRNA。

在pri-miRNA内，miRNA位于由大约70个核苷酸构成的环柄结构内。

在动物体内，该环柄结构在细胞核内被RNA酶川Drosha和其辅助蛋白Pasha/DGCR8 识别和切割，形成pre-miRNA 。

之后，pre-miRNA 迅速被核质/细胞质转运蛋白Exportin5转运至细胞质，被位于细胞质内的RNA酶川Dicer 进一步切割。

产生一个类似于siRNA 的miRNA ：miRNA* 复合体，随后，该双链体解旋为成熟的miRNA和miRNA*，成熟的miRNA在一种ATP-依赖的沉默复合体（RISC ）中，形成非对称的RISC 复合物。

microrna家族分类

microrna家族分类microRNA（miRNA）是一类非编码RNA，长度一般为21-24个核苷酸。

miRNA通过与mRNA靶标相结合，调节基因表达。

根据miRNA的序列相似性和功能特点，miRNA家族被分为不同的分类。

本文将介绍几个常见的miRNA家族。

1. let-7家族let-7家族是最早被发现的miRNA家族之一。

let-7家族在多种物种中高度保守，包括果蝇、线虫、人类等。

let-7家族成员在调节细胞增殖、分化以及胚胎发育中发挥重要作用。

研究表明，let-7家族的异常表达与多种肿瘤的发生和发展密切相关。

2. miR-17家族miR-17家族是一组在哺乳动物中高度保守的miRNA。

miR-17家族包括miR-17、miR-18a、miR-19a、miR-19b、miR-20a和miR-92a等成员。

miR-17家族在调节细胞周期、凋亡和血管生成等生物过程中发挥重要作用。

研究表明，miR-17家族的异常表达与多种人类疾病，如心血管疾病和肿瘤的发生和发展相关。

3. miR-200家族miR-200家族是一组在多种动物中高度保守的miRNA。

miR-200家族包括miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429等成员。

miR-200家族在上皮细胞的形态发生、上皮间质转化以及肿瘤浸润和转移等过程中起重要作用。

研究表明，miR-200家族的异常表达与多种癌症的进展和预后密切相关。

4. miR-155家族miR-155家族是一组在哺乳动物中高度保守的miRNA。

miR-155家族包括miR-155、miR-155-5p和miR-155-3p等成员。

miR-155家族在免疫应答、炎症反应以及肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。

研究表明，miR-155家族的异常表达与多种免疫相关疾病和肿瘤的发生和发展密切相关。

5. miR-34家族miR-34家族是一组在多种物种中高度保守的miRNA。

miRNA let—7对疾病调控机制的研究进展

miRNA let—7对疾病调控机制的研究进展作者：王婷婷王桂香张俊绘来源：《中国医药导报》2018年第34期[摘要] 微小RNA（miRNA）是一种高度保守的单链小分子RNA，具有调控组织细胞的生长发育、分化以及凋亡的作用。

let-7 miRNA家族是目前研究最为广泛的miRNA家族。

let-7能够在人体外周血以及体液中稳定存在，其表达以及平衡状态的维持受到调控因子的相关作用来实现。

这些调控通路的异常将导致let-7家族的表达异常，就从而导致肿瘤，高血压，癫痫，心血管等疾病的发生。

因此，监测let-7表达水平可预防、治疗与其相关的疾病。

本文主要综述了miRNA let-7对这些疾病的调控机制的研究进展。

[关键词] miRNA let-7；机制；基因表达；研究进展[中图分类号] R563.9 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）12（a）-0053-04微小RNA（microRNA，miRNA）属于一种单链非编码RNA，能够对基因的表达过程进行调控，还能够调控组织细胞的时序发育。

人类基因组已经编码了超过2000个miRNA[1]，miRNA能够对基因的表达过程进行调控，成熟的miRNA首先通过与蛋白质结合，形成RNA 的诱导沉默复合体（RNA-induced silencing complex，RISC），然后RISC通过与靶mRNA 3′端的非编码区域进行结合，降解靶RNA，从而调控基因的表达[2]。

此外，miRNA还能够通过与靶mRNA 5′末端的聚嘧啶序列进行结合来抑制翻译过程。

miRNA与多种肿瘤疾病、心血管疾病、炎症等的发生密切相关[3-10]。

let-7属于miRNA家族成员中的一种。

到目前为止，共发现了13个let-7家族成员，即let-7a-1、let-7a-2、let-7a-3、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f-1、let-7f-2、let-7g、let-7i、miR-98和miRNA-202。

let-7a1和let-7c在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

[文章编号]1000-2200(2021)03-0285-06-基础医学-let-7a1和let-7c在非小细胞肺癌中的表达及临床意义李殿明「，柳兆飞2,宁国兰3［摘要］目的:探讨人类微小RNA let-7a1和let-7c在肺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。

方法：收集53例肺组织手术标本及临床资料，其中包括肺癌组织44例(收集其癌组织和癌旁正常组织)和良性肺疾病组织9例。

并收集病人吸烟史、肿瘤TNM分期、病理分化程度及有无淋巴结转移等。

采用Trizol法提取总RNA,采用荧光定量PCR检测let-7a1和let-7c 的表达,分析其在肺癌组织、癌旁正常组织及良性肺疾病组织中的表达差异及与临床特征的关系。

结果:肺癌组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于癌旁正常组织和良性肺疾病组织(P<0.05);癌旁正常组织中let-7a1和let-7c的相对表达量均低于良性肺疾病组织(P<0.05)。

let-7a1表达与分化程度、吸烟和TNM分期有关(P<0.05-P<0.01),与淋巴结有无转移无关(P>0.05)。

let-7c表达与淋巴结转移、分化程度有关(P<0.01),与吸烟、TNM分期无关(P>0.05)。

结论:let-7a1和let-7c 基因在肺癌组织中相对表达量降低，并且随临床分期进展、淋巴结转移呈明显下降趋势，提示两者与肺癌的发生、发展及转移密切相关,let-7a1和let-7c可能成为肺癌早期诊断生物标志因子，并可能成为肺癌的靶向治疗新的靶点,为高危人群的早期干预提供实验依据。

［关键词］肺肿瘤;微小RNA;let-7a1;let-7c［中图法分类号］R734.2［文献标志码］A DOI：10.13898/ki.issn.1000-2200.2021.03.002Expression and clinical significance of let・7a1and let・7c in non・small cell lung cancerLI Dian-ming1,LIU Zhao-fei2,NING Guo-lan3(1.Department of Respiratory and Critical Care Medicine,Anhui Clinical and Preclinical Key Laboratoryof Respiratory Disease,The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College,Bengbu Anhui233004;2.Department of Respiratory Medicine,Linquan People's Hospital,Linquan Anhui236400;3.Department of Respiratoryand Critical Care Medicine,Fuyang Second People's Hospital, Fuyang Anhui236000,China)[Abstract]Objective:To investigate the expression of human microRNA let-7a1and let-7c in lung cancer tissues and its relationship with clinicopathological features.Methods:The surgical specimens and clinical data of53cases of lung tissue were collected,including 44cases of lung cancer used to collect cancer tissue and paracancerous normal tissue,and9cases of benign lung disease tissue.The smoking history, TNM stage,pathological differentiation and lymph node metastasis were collected.The total RNA was extracted by Trizol method, and the expression of let-7a1and let-7c was detected by fluorescence quantitative PCR.The difference of let-7a1and［收稿日期］2020-03-20［修回日期］2020-06-17［基金项目］安徽省教育厅自然科学研究重点项目(KJ2018A0997);安徽省教育厅自然科学研究项目(KJ2010B113)［作者单位］1.蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科，安徽省呼吸系病临床基础重点实验室，安徽蚌埠233004;2.安徽省临泉县人民医院呼吸内科,236400;3.安徽省阜阳市第二人民医院呼吸与危重症医学科,236000［作者简介］李殿明(1970-),男，硕士研究生导师，主任医师，副教授.let-7c expression in lung cancer tissue,paracancerous normal tissue and benign lung disease tissue,and its relationship with clinical features were analyzed.Results:The relative expression of let-7a1and let-7c in lung cancer tissue was lower than that in paracancerous normal tissue and benign lung disease tissue(P< 0.05),and the relative expression of let-7a1and let-7c in paracancerous normal tissue was lower than that in benign lung disease tissue(P<0.05).The expression of let-7a1was related to differentiating degree,smoking and TNM stage(P<0.05to拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾拾[10]SHI J,SLN J,LIL C,et al.All-trans-retinoic acid(ATRA)plusoxaliplatin plus5-fluorouracil/leucovorin(FOLFOX)versusFOLFOX alone as palliative chemotherapy in patients withadvanced hepatocellular carcinoma and extrahepatic metastasis:study protocol for a randomized controlled trial[J].Trials,2019,20(1):245.[11]SCHNEIDER SM,OFFTERDINGER M,HUBER H,et alActivation of retinoic acid receptor琢is sufficient for fullinduction of retinoid responses in SK-BR-3and T47D humanbreast cancer cells[J].Cancer Res, 2000,60(19)：5479.[12]WHEATLEY SP,ALTIERI DC.Survivin at a glance[J].J CellSci,2019,132(7):jcs223826.[13]SANDUR SK,DEORUK11KAR A,PANDEY MK,et al Curcuminmodulates the radiosensitivity of colorectal cancer cells bysuppressing constitutive and inducible NF-k B activity[J].Int JRadiat Oncol Biol Phys,2009,75(2)：534.[14]李晓波，徐芳.姜黄素通过影响NF-k B信号通路促进肺癌细胞的放射敏感性[J].重庆医学,2017,46(6):749.(本文编辑赵素容)P<0.01)，but was not related to smoking and TNM stage(P>0.05).The expression of let-7c was related to lymph node metastasis and differentiating degree(P<0.01)，but was not related to smoking and TNM stage(P>0.05).Conclusions:The relative expression of let-7a1and let-7c genes in lung cancer tissue decreases，and exhibits decreasing trend with the progress of clinical stage and lymph node metastasis，which suggests that let-7a1and let-7c are closely related to the occurrence，development and metastasis of lung cancer.Let-7a1and let-7c may become biomarkers for early diagnosis of lung cancer，and become new targets for targeted therapy of lung cancer，to provide experimental basis for early intervention of high-risk groups.［Key words］lung neoplasms；microRNA；let-7a1；let-7c肺癌是目前发病率与病死率最高的恶性肿瘤,死亡率高主要是由于绝大部分病人确诊时已属中晚期,5年生存率极低［1］o因此,肺癌的早期诊断和有效的治疗方法是改善预后和提咼生存率的关键。

MicroRNA let-7C 在肝细胞癌中的表达及其临床意义

2011年CSCO年会厦门
3.主要试剂
mirVana miRNA Isolation Kit（Abmion公司，美国） TaqMan MicroRNA Reverse Transcription Ki （Applied Biosystems公司，美国） TaqMan Universal PCR Master Mix, No AmpErase UNG（Applied Biosystems公司，美国） TaqMan MicroRNA Assays（has-mir-let-7c、U6 snRNA）（Applied Biosystems公司，美国）
2011年CSCO年会厦门
统计学分析：数据分析采用SPSS16.0统计软件。肝细胞肝癌以及癌旁组织中的let-7c的表达量以均数和标准差表示，对比其两组的表达差异采用配对student’t检验；let-7c的表达与肝癌临床病理各参数的关系用两独立样本资料的t检验.
2011年CSCO年会厦门
2011年CSCO年会厦门
一、材料与方法
1.标本来源 ※32例标本取自浙江大学医学院附属第一月手术切除的肝癌及其癌旁组织。
※标本均经过病理科医师证实为肝细胞肝癌。
※肝癌标本取自病灶中央无坏死部分，另取距肿瘤边缘大于3cm的癌旁非肿瘤组织，离体后立即切成小块，于 10min中内放于液氮中保存，后转存于-80℃冰箱。
2011年CSCO年会厦门
Let-7miRNA是目前研究最为广泛的miRNA之一，其在肺癌，直肠癌等的研究中，let-7被证明是一个抑癌因子。
但到目前为止，let-7与肝癌的诸多临床病理特征的关系很少研究。
2011年CSCO年会厦门
本文通过Real time-PCR方法检测了32例肝细胞肝癌中的let-7c的表达，分析其与临床病理特征的关系，探讨let-7C在肝细胞肝癌中的作用。

micro RNA

RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。

RNA 干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，在2002年度Science评选的10大科学成就中RNAi名列榜首。

随着对小分子RNA研究的不断深入，人们发现有一部分RNA分子通过激活或抑制基因转录控制基因的表达, 在基因组信息转化为分子效应和生物效应过程中发挥着重要的作用。

这种新发现的分子即是我们即将介绍的microRNA(miRNA)。

microRNA是近年来在多种真核细胞及病毒中发现的一类来源于内源性染色体上的非编码单链RNA。

本文依据目前microRNA的研究进展，分别概括了microRNA的发现、合成、特征、功能和应用等方面的内容，应用方面重点介绍了在糖尿病足等慢性创面及瘢痕上取得的一些成果。

最后得出的结论是，microRNA调控着各种生物学过程，在上述疾病的发生上有重要的研究意义，虽然目前研究不甚深入，很多问题有待探索，但可以想象，microRNA的研究将会有深远的影响。

关键词：非编码RNA；microRNA；研究进展；糖尿病足；慢性创面；瘢痕引言分子生物学的中心法则是基因组DNA通过转录产生信使RNA（mRNA），信使RNA翻译成蛋白质。

然而这个法则却因为microRNA及RNAi的发现而受到了挑战，因为一部分DNA转录生成的mRNA前体（pre-mRNA）并非翻译成为蛋白质；相反，这些RNA调节其他基因的表达。

microRNA(miRNA)是近年来在多种真核细胞及病毒中发现的一类来源于内源性染色体上的非编码单链RNA ,长度约为22（18～25）个核苷酸（nt）的短序列,在进化上具有高度的保守性。

它们基于与靶mRNA的序列互补，能够通过与靶mRNA特异性的碱基互补配对从而抑制其翻译。

与siRNA不同的是microRNA一般不诱导mRNA的降解，而是以一种未知的方式诱发蛋白质翻译抑制，从而对基因进行转录后的表达调控。

microRNA 技术

miRNA技术详述摘要: miRNAs是一类重要的内源性小的非编码RNA分子，大约由21-25个核苷酸组成。

miRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过抑制翻译或降解靶标mRNAs而调节基因的表达。

人类基因组中大约存在超过1000条miRNA，其在多种人体细胞类型中大量表达，估计其调节超过60%的哺乳动物基因。

引述精准的基因表达调控对生物体的生长发育和功能至关重要。

过去对基因表达调控的研究主要集中在转录因子介导的基因转录调控方面(激活或抑制基因转录)。

而RNA一度被认为是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明RNA在生命的进程中扮演的角色远比早前的设想重要，晚近发现一系列小分子非编码RNA(small noncoding RNA)，包括miRNA (micrornA)，siRNA (small interfering RNA)，piRNA (piwi-interacting RNA)和esiRNA (endogenous siRNA)等，这些小RNA组成了RNA调控网络，在转录水平、转录后及表观遗传等水平控制基因的表达，参与调控包括细胞增殖、分化和凋亡等进程，影响着生物体的生长发育和多种病理过程。

小RNA的发现也揭示了真核生物全新的基因表达调控方式。

miRNAs是一类重要的内源性小的非编码rna分子，大约由21-25个核苷酸组成。

miRNA通常靶向一个或者多个mRNA，通过抑制翻译或降解靶标mRNAs而调节基因的表达。

人类基因组中大约存在超过1000条miRNA，其在多种人体细胞类型中大量表达，估计其调节超过60%的哺乳动物基因。

miRNA在植物界和后生动物界间表现不同的特性。

在植物中，miRNA 与其靶基因通过近乎完美互补的方式相结合;而在后生动物中，经常是一条miRNA可以和靶基因的多个位点相结合，或是一条miRNA调节多种靶基因。

另外,在后生生物中，miRNA 靶位点位于mRNA的3’UTR，而在植物中，miRNA靶位点可以位于3’UTR，更多情况下是位于mRNA的编码区内。

干货--microRNA必备知识系列

⼲货--microRNA必备知识系列简介MicroRNA (miRNA) 是⼀类内⽣的、长度约为20-24个核苷酸的⼩RNA，其在细胞内具有多种重要的调节作⽤。

每个miRNA可以有多个靶基因，⽽⼏个miRNA也可以调节同⼀个基因。

这种复杂的调节⽹络既可以通过⼀个miRNA来调控多个基因的表达，也可以通过⼏个miRNA的组合来精细调控某个基因的表达。

据推测，miRNA调节着⼈类三分之⼀的基因。

最近的研究表明⼤约70 %的哺乳动物miRNA 基因是位于TUs区( transcription units , TUs ) ( Rodriguez et al ,2004) ,且其中⼤部分是位于内含⼦区( Kim &Nam , 2006) 。

⼀些内含⼦miRNA 基因的位置在不同的物种中是⾼度保守的。

miRNA 不仅在基因位置上保守, 序列上也呈现出⾼度的同源性(Pasquinelli etal , 2000 ; Ruvkun et al , 2001 ; Lee & Ambros ,2001) 。

miRNA ⾼度的保守性与其功能的重要性有着密切的关系。

miRNA 与其靶基因的进化有着密切的联系, 研究其进化历史有助于进⼀步了解其作⽤机制和功能。

MicroRNAMicroRNA（miRNA）是⼀类内⽣的、长度约20-24个核苷酸的⼩RNA，⼏个miRNAs也可以调节同⼀个基因。

可以通过⼏个miRNAs的组合来精细调控某个基因的表达。

据推测，miRNA调节着⼈类三分之⼀的基因。

MicroRNA存在多种形式，最原始的是pri-miRNA，长度⼤约为300~1000个碱基；pri-miRNA经过⼀次加⼯后，成为pre-miRNA即microRNA前体，长度⼤约为70~90个碱基；pre-miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为长约20~24nt的成熟miRNA。

实际研究中，pre-miRNA应⽤最早，也最⼴泛，很多商业化的MicroRNA库都是pre-miRNA形式的。

MicroRNA-16及Let-7a在支气管哮喘患者中表达水平及与严重程度的关系

结果
一、三组基线资料比较三组在年龄、性别、BMI方面比较，差异无统计学意义(P >0. 05)；在 FEV1、FVC、IL-13、IgE、FeNO、 EOS计数、外周中性粒细胞计数方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)(见表2 )。二、三组血清miR-16和Let-7a相对表达量比较三组血清miR-16和Let-aa相对表达量比较，差异有统计学意义(P >0. 05)，其中，对照组血清miR1 6和Let-7a相对表达量高于轻、中度组及重度组,
F：5 --AAAUGCACGACGAU-3 R：5 --UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3 -
三、统计学方法采用SPSS 22. 0软件进行统计学分析。服从正态分布的计量资料用均数土标准差(z ± s)表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 SNK-q检验。计数资料用例或率［n ( %)］表示，采用卡方检验。采用Logistic回归分析影响支气管哮喘严重程度的相关因素。采用受试者工作特征曲线 (ROC)分析模型A、模型B、模型C评估支气管哮喘严重程度的价值。P<0. 05为差异有统计-16
表1基因序列
序列 F：5' -OAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-a ' R：5' -GTCAGTCGCTTGGGCTGT-3'
, F：5 -0GAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU-3' , R：5 -AACUAUACAACCUACUACCUCA-3'
资料与方法
—'、一'般资料前瞻性选取2017年7月至2019年7月我院收治的128例支气管哮喘患者作为研究对象。参照《中国支气管哮喘防治指南(基层版)+ ［10］中标准进行诊断。并按照指南将患者分为轻、中度组(n = 85)和重度组(n =43 )o轻度为第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second, FEV1 ) ! 80% 或最大呼气流量(peak expiratory 2ow, PEF) ! 80%个人最佳值；中度为60% % FEV［ %79%或为 60% % PEF% 79% ；重度为 FEV1 <60% 或 PEF < 60%o纳入标准：(1)符合支气管哮喘诊断标准; (2)年龄高于18岁；(3)入组前未服用皮质激素类、免疫抑制剂及炎症递质拮抗剂类药物；#4)签署知情同意书。排除标准：(1)合并恶性肿瘤;(2)合并肺炎、慢阻肺、肺纤维化等疾病；(3 )合并其他过敏性疾病；(4)合并严重心、脑血管疾病。选取同期 120例体检健康者作为对照组，均无免疫系统或其他炎症性疾病，肝肾功能正常。轻、中度组男性38 例，女性47例，年龄20 ~49岁，平均年龄(37. 14 ± 4. 18)岁;重度组男性16例，女性27例，年龄22 50岁，平均年龄(37.02 ±4. 20)岁；对照组男性55 例，女性65例，年龄19 ~48岁，平均年龄(36.68 ± 4.27)岁。三组其余基线资料(见表1 )。本研究获得本院医学伦理委员会批准。二、方法抽取受试者入组次日清晨空腹外周静脉血10 mL,室温下4000 r/min离心15 min,离心半径8 cm, 分离上层血清，置于-20 C冰箱,待测。采用LH 755全自动血常规细胞分析仪(美国贝克曼库尔特)

microRNA let-7调控动物个体发育的研究进展

microRNA let-7调控动物个体发育的研究进展赵拴平;贾玉堂;徐磊;阮永明【摘要】microRNA(miRNA)是一类广泛存在于多细胞动物中的进化保守的大小为18～25 nt的非编码小分子RNA,可以通过与靶基因mRNA的非编码区(3' UTR)结合导致mRNA降解,或阻断mRNA翻译而调节基因表达.let-7是在线虫中发现的具有转录后调节功能的小分子RNA,具有高度的保守性,研究发现,let-7参与动物个体多个器官组织的发育过程.作者综述了近年来let-7参与调控脑、神经系统、心肺系统和肌肉发育等组织器官的研究成果,初步阐述了let-7调控组织器官发育的作用机制,以期为进一步探索let-7在动物体内的功能奠定基础.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2015(042)002【总页数】5页(P342-346)【关键词】microRNA;let-7;个体发育;组织器官【作者】赵拴平;贾玉堂;徐磊;阮永明【作者单位】安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,合肥230031;安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,合肥230031【正文语种】中文【中图分类】Q522microRNA(miRNA)是一类进化保守的大小为18～25 nt的非编码小分子RNA，可以通过与靶基因mRNA的非编码区(3′UTR)结合导致mRNA降解，或阻断mRNA翻译而调节基因表达。

研究发现，miRNA广泛存在于多细胞动物中，在动物机体发育、免疫、细胞凋亡、增殖、分化和代谢等许多生物学过程中发挥重要作用。

let-7是Reinhart等[1]在秀丽隐杆线虫中发现的具有转录后调节功能的小分子RNA，是miRNA 家族中的重要成员，广泛存在于各种动物中，在无脊椎和脊椎动物中具有高度的保守性。

目前已发现人let-7 家族成员主要有let-7a-1、let-7a-2、let-7a-3、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f-1、let-7f-2、let-7g、let-7i、miR-98和miR-202[2]，研究发现，let-7能调控细胞分裂的时序[3]，调控动物脑、神经及心肺系统等发育过程[4]。

microRNA let―7a调控Caspase家族影响白内障发生的机制研究

microRNA let―7a调控Caspase家族影响白内障发生的机制研究[摘要] 目的探讨microRNA let-7a靶向调控Caspase 家族的机制及其在年龄相关性白内障发病过程中的作用。

方法收集2014年7～9月在中国医科大学附属第四医院（以下简称“我院”）眼科诊断为年龄相关性白内障（排除其他眼部疾病）的患者晶状体前囊膜标本30例，作为实验组；同时收集我院眼科眼库提供的新鲜人眼透明晶状体前囊膜标本15例，作为对照组。

利用生物信息学软件预测let-7a可能调控的Caspase家族中的关键基因；采用实时荧光定量PCR（Real time q-PCR）检测实验组和对照组let-7a及其预测靶基因的表达；利用Lipofectamine 2000瞬时转染let-7a mimic和inhibitor，调节人晶状体上皮细胞中let-7a的表达，利用Real time q-PCR法验证转染效率，并检测预测靶基因的表达变化。

结果3种不同的生物信息学软件预测到Caspase 家族中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9可能为let-7a的靶基因。

与对照组比较，实验组let-7a的表达显著降低，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著升高。

let-7a mimic转染组，let-7a的表达显著升高，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著降低；let-7a inhibitor转染组，let-7a的表达显著降低，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达显著升高；差异均有高度统计学意义（P < 0.01）。

结论let-7a 可能通过靶向调控Caspase家族成员Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达，在年龄相关性白内障发病过程中发挥重要作用，let-7a可能成为白内障非手术治疗的新靶点。