ICP-MS法对桂枝茯苓胶囊及药材中多元素的同时测定方法的建立

ICP-MS法对桂枝茯苓胶囊及药材中多元素的同时测定方法的建立王金玲1,2，李家春1,2，胡军华1,2，，黄文哲1,2，王振中1,2，萧伟1,2,3*（1.江苏康缘药业股份有限公司，江苏连云港222001；2.中药制药过程新技术国家重点实验室；3.南京中医药大学）摘要：采用微波消解法对桂枝茯苓胶囊及五味药材（桂枝、茯苓、白芍、桃仁、牡丹皮）进行消解、电感耦合等离子体质谱仪建立了Pb、Cu、As、Cd、Hg、Mg、Mn、Ni、Tl等多元素元素同时检测的方法，以内标法进行定量以改善基体效应和干扰。

实验结果表明各元素的线性关系良好，相关系数R2≧0.9993；方法检出限为0.016 μg·L-1～4.593 μg·L-1，实验重复性良好；加样回收率在75.84 %～118.93 %。

该方法灵敏度高，专属性好，为控制桂枝茯苓胶囊中有害元素控制提供依据，也为监控及制订中药材中有害元素的限量提供参考。

关键词：桂枝茯苓胶囊；电感耦合等离子质谱；微波消解；元素分析；The analysis methodology of multi element in four herbs of GuizhifulingCapsulesWANG Jin-ling, LI Jia-chun, QIN Jian-pin,HU Jun-hua, HUANG Wen-Zhe, WANGZhen-zhong,XIAO Wei（1.Jangsu Kanion Pharmaceutical Co.Ltd, Lianyungang 222001, China；2.State Key Laberatory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process;3.Nanjinguniversity of Chinese medicine）This paper is focused on establishing a ICP-MS method with microwave digestion for simultaneous determination of lead, copper, arsenic, cadmium, mercury, magnesium, manganese, nickel, thallium in cassia tuckahoe capsule and its five raw herbal materials. Internal standard method was adopted to reduce matrix effect and other interference effects. The method established was shown to be simple with high sensitivity, strong specificity and good reproducibility. linear relationship is good as R2≧0.9993 while the average recovery was among 75.84%～118.93%.The detection项目基金：企业大平台“重大新药创制”（2013ZX09402203）作者简介：王金玲（1987-），女，研究员，研究方向为中药质量标准研究。

Tel: (0518)81152321 E-mail: wangjinling198786@**通信作者萧伟（1959-），男，研究员级高级工程师，博士，研究方向为中药制剂和创新中药的研究与开发。

TEL：(0518)81152367 E-mail: kanionlunwen@limit was 0.016 μg·L-1～4.593 μg·L-1.Data in this paper provide the basis for control of deleterious element in Guizhifuling capsules, and further more it is with referencing values for control of deleterious element in other crude drug.Key words:Guizhifuling Capsules; inductively coupled plasma mass spectrometer ( ICP-MS) ; microwaves digest; methodology; element Analysis桂枝茯苓胶囊源自汉代名医张仲景的《金匮要略》，具有活血、化瘀、消癥散结之功效。

临床上常用于卵巢囊肿、子宫内膜异位症、子宫肌瘤、痛经等妇科血瘀证的治疗[1]，目前已经完成美国FDAⅡ期临床实验。

它是由桂枝、茯苓、牡丹皮、白芍、桃仁五味中药组成。

中药是中华民族的瑰宝，对保证人类健康起着重要的作用。

近年来随着相关研究的广泛开展，中药材中的无机元素对人类健康的作用已引起广泛的关注，有研究[2-4]指出中药材所含某些微量元素的对疾病的治疗起着积极的作用，如锂元素对神经紊乱症和糖尿病起到一定的治疗作用；铬元素可协助胰岛素发挥作用，防止动脉硬化；镍可以治疗头痛、神经病和失眠；钴对蛋白素质、脂肪代谢具有重要的作用；锶具有抗癌功效等。

与此同时，环境污染的愈发严重导致中药材中某些有害元素含量超标，严重危害人类的身体健康，而且中药的有害元素（包括铍、铝、镓、镉、锑、汞、铊、铅等）超标是影响中药国际化的重要因素。

因此建立针对中药材中多种元素的准确灵敏、可靠的检测方法具有十分重要的意义。

电感耦合等离子质谱法（ICP-MS法）灵敏度高、专属性强、分析效率高，被广泛用于中药元素分析[5]。

本文基于ICP-MS法建立了桂枝茯苓胶囊成品及药材中包括有益元素、重金属及有害元素在内的24种元素的分析方法，保证桂枝茯苓胶囊生产中药材的安全使用的同时，又可对其所含人体必需的微量元素及有益元素进行分析。

1 仪器与材料NexION 300 电感耦合等离子体质谱仪；Mars高压微波消解仪( 美国CEM 公司) ；硝酸( 优级纯，500 mL，南京化学试剂有限公司)，批号：12032030142；水为经Millipore Milli-Q水处理系统处理后的去离子水。

金单元素标准溶液(1 g·L-1，100 mL，国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号：12616-1)；汞单元素标准溶液(1 g·L-1，100 mL，国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号：12664 )；铟单元素标准溶液(1 g·L-1，100 mL，国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号：129100；锗单元素标准溶液(1 g·L-1，100 mL，国家有色金属及电子材料分析测试中心，批号：12910；灌木枝叶（地矿部物化探研究所提供，批号：06074）；桂枝茯苓胶囊（来源江苏康缘药业股份有限公司）；牡丹皮药材（产地：安徽毫州）；桃仁药材（产地：山西）；桂枝药材（产地：广西）；茯苓药材（产地：湖北）；白芍药材（产地：安徽毫州）。

2 方法与结果2.1 实验条件主要仪器工作参数：载气流量：1.01 L·min-1；等离子体RF功率：1.5kW；脉冲电压：1050 v；工作模式：KED模式；模拟阶段电压：-1800V；脉冲阶段电压：1050V；蠕动泵转数：20rpm；2.2 样品处理取样品粉末约0.5 g，精密称定，置消解罐内，加硝酸10 mL，待气泡散尽，置微波消解仪内进行消解（功率1600 W，25 min内升至185 ℃，持续25 min后自动降温）。

消解完全后取出，待蒸汽挥尽后，转入100 mL容量瓶中，用水洗消解罐并转入容量瓶，加入金单元素标准溶液（1μg·m L-1）200 μL，加水定容至刻度，摇匀即得。

除不加金单元素标准溶液外，其余同法制备试剂空白溶液。

2.3 标准溶液的配制2.3.1 标准溶液的配制精密量取多单元标准溶液，用5‰（v/v）硝酸溶液稀释制成每1 mL含个元素为0.5 ng、1 ng、2.5 ng、5 ng、10 ng、25 ng、50 ng、100 ng、125 ng、200 ng、500 ng系列浓度标准溶液。

另精密量取汞单元素标溶液，用5 ‰（v/v）硝酸溶液稀释制成每1 mL含汞0.2 ng、0.5 ng、1 ng、2 ng、5 ng的溶液（现用现配，配制时加入1 μg·mL-1金元素标准溶液200 μL）。

2.3.2 内标溶液的配制精密量取锗、铟单元素标准溶液适量，用水稀释制成每1 mL各含1 μg的混合溶液，即得。

2.3.3 测定法测元素Li、Be、B、Ti、Mg、Al、V、Cr、Mn、Co 、Fe、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Sr、Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb其中质量数小于100的元素（Li、Be、V、Cr、Co 、Ni、Cu、Ga、As、Sr）以Ge作为内标，Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb以In作为内标。

仪器的内标进样管在仪器分析工作过程中始终插入内标溶液中，依次将仪器的样品管插入各个浓度的标准品溶液中进行测定（浓度依次递增），以测量值（3次读数的平均值）为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

将仪器的样品管插入供试品溶液中进行测定。

从标准曲线上计算得相应的浓度。

2.4 方法学验证2.4.1 线性及检测限在上述实验条件下对系列标准溶液进行测试，仪器自动绘制标准曲线，线性相关系数在0.9993～1.000之间。

所得的线性结果如表1。

表1线性关系结果元素回归方程相关系数线性范围（μg·L-1）检出限( μg·L-1)低浓度RSD(%)高浓度RSD(%)Li Y=1.17539e-005X 0.9999 0.5～50 0.020 2.54 1.37 Be Y=4.332646e-006X 0.9999 0.5～50 0.019 2.45 1.74 B Y=6.14395e-006X 0.9993 0.5～50 0.367 2.38 1.54 Mg Y=1.59031e-005X 0.9998 10～500 1.951 3.22 1.41 Al Y=5.71978e-006X 0.9999 10～500 1.858 5.35 1.47 Ti Y=1.11982e-006X 0.9999 0.5～50 1.451 1.94 2.40 V Y=2.41392e-006X 1.0000 0.5～50 0.036 0.90 1.03 Cr Y=4.90307e-005X 1.0000 0.5～50 0.302 2.82 0.76 Mn Y=2.26109e-005X 0.9999 0.5～100 0.106 2.45 0.99 Fe Y=2.1914e-006X 0.9998 10～500 4.593 5.02 2.51 Co Y=7.36111e-005X 0.9999 0.5～50 0.060 1.47 1.46 Ni Y=2.01939e-005X 0.9999 0.5～50 0.213 1.18 1.28 Cu Y=6.26937e-005X 0.9999 0.5～100 0.246 1.99 1.12 Zn Y=6.57433e-006X 0.9998 10～500 0.309 2.91 1.59 Ga Y=1.01378e-005X 1.0000 0.5～50 0.093 1.70 1.33 As Y=4.01048e-006X 0.9999 0.5～10 0.122 2.63 1.07 Sr Y=2.65801e-005X 0.9999 0.5～50 0.057 1.14 1.09Cd Y=8.10726ee-007X 0.9999 0.5～10 0.018 1.51 1.32 Sn Y=1.25431e-006X 0.9999 0.5～50 0.411 2.06 1.64 Sb Y=1.09743e-006X 0.9999 0.5～50 0.071 1.04 1.59 Ba Y=5.65395e-006X 0.9999 0.5～50 0.107 1.95 1.00 Hg Y=7.82564e-006X 0.9987 0.2～5 0.016 2.33 - Tl Y=1.00207e-005X 1.0000 0.5～50 0.048 1.95 0.48 Pb Y=4.8598e-006X 1.0000 0.5～50 0.104 2.64 1.06 2.4.2精密度试验选取多单元素标准溶液及汞单元素标准溶液，选择低浓度（2 μg·L-1）和高浓度（50μg·L-1）（Hg浓度为1 μg·L-1）标准溶液重复进样6次，记录测量值。