链霉素发酵提取工艺

16
(二)摇瓶种子培养
生产斜面的菌落接种到摇瓶培养基中，经过培养即 得摇瓶种子。链霉素发酵经常使用：瓶种子来接种种子 罐。种子质量以菌丝阶段、发酵单位、菌丝黏度或浓度、 糖氮代谢、种子液色泽和无杂菌检查为指标。摇瓶种子 (母瓶)可以直接接种子罐，也可以再扩大培养，用培养 所得的子瓶接种。摇瓶种子检查合格后，贮存于冷藏库 内备用，冷藏时间最多不超过天。
18
(四)发酵培养
链霉素的发酵培养基主要由葡萄糖、黄豆饼粉、硫酸铵、 玉米浆、磷酸盐和碳酸钙等所组成。
()碳源及其代谢 葡萄糖是链霉素发酵的一种较好的碳源，用其
他碳源(如淀粉、糊精、麦芽糖等)发酵单位都比葡 萄糖低。葡萄糖的用量，视补料量的多少而定，总 量一般在以上，以保证在发酵过程中有足够的碳源.
链霉素产生菌诱变育种常用的诱变剂有：紫外 线、γ射线、氮芥、乙烯亚胺、亚硝酸和硫酸二乙 酯等。一些化学诱变剂又经常和紫外线等进行复 合处理。近年来采用亚硝基胍、快中子和激光等， 诱变选育出营养缺陷型或再回复突变型高产菌株。 杂交育种与诱变育种相结合的方法，对提高菌种 的生产能力，收到了较好的效果。
12
大家好
1
链霉素的发酵工艺
2
链霉素结构的图片
3
、概 述
链霉素（）是一种氨基葡萄糖型抗生素，分子式。 年美国 .瓦克斯曼从链霉菌中分离得到，是继青霉素 后第二个生产并用于临床的抗生素。它的抗结核杆菌的特 效作用，开创了结核病治疗的新纪元。从此，结核杆菌肆 虐人类生命几千年的历史得以有了遏制的希望。
8
除了医用外，也有报道将链霉素用于农牧业
的。例我国新疆某生产建设兵团的农场自年起应
用链霉素治疗菜类、瓜类和粮食等作物的病害，
取得较好效果;链霉素还可用于猪肺炎、雏鸡白
痢疾、以及鸡、鸭、鹅的巴氏杆菌感染等的治疗。
国内有些厂家将生产的链霉素作为农用出口，效
益较好。
9
链霉素发酵
.生产菌种 .工艺流程 .链霉素的发酵条件及中间控制
实验室涂片结果
灰 色 链 霉 菌 生 长 状 态
13
液氮保藏(℃)
原斜面孢子 斜面孢子(代) 摇瓶种子 小罐种子 中罐种子
或
沙土管保藏(℃)
.工 艺 流 程
斜面培养恒温恒湿℃，天
斜面培养恒温恒湿℃，天
摇瓶培养℃，转速 装量接种量一块斜面瓶
小罐种子培养±℃，转速， 搅拌功率通气量,罐压
中罐种子培养±℃，转速接种量通气量罐压搅拌功 率 大罐发酵±℃，转速接种量通气量罐压搅拌功率
10
、生产菌种 早期发现产链霉素的生产菌种是灰色链
霉菌。 后来又找到了产链霉素的其他类型链 霉素族抗生素(如羟基链霉素或双氢链霉素) 的菌种。 如比基尼链霉菌、灰肉链霉菌等 。
11
灰色链霉菌的孢子柄直而短，不呈螺旋形。 孢子量很多，呈椭圆球形。气生菌丝和孢子都呈 白色。单菌落生长丰满，呈梅花形或馒头形，直 径约为～。基内菌丝透明，在斜面背后产生淡棕 色色素。
4
链霉素
双氢链霉素
() [()]
硫酸链霉素
5
性状： 白色或类白色粉末，无臭或微臭。
溶解情况： 易溶于水，微溶于乙醇，不溶于甲醇、氯仿
和丙酮。 作用范围： 硫酸链霉素为一种氨基糖苷类抗生素。 链霉素对结核分枝杆菌有强大抗菌作用， 其最低抑菌浓度一般为。非结核分枝杆菌 对该品大多耐药。
6
链霉素对许多革兰阴性杆菌如大肠埃希菌、肠杆菌属、沙门菌属等也具抗菌作用；脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌亦对该品敏感。链霉素对葡萄球菌属及其他革兰阳性球菌的作用差。各组链球菌、铜绿假单胞菌和厌 氧菌对该品耐药。链霉素主要与细菌核糖体亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成。细菌与链霉素接触后极易产生耐药性。链霉素和其他抗菌药物或抗结核药物联合应用可减少或延缓耐药性的产生 也用于结核病 的二线治疗，多与其它抗结核药合用。
19
()氮源
有机氮源包括黄豆饼粉、玉米浆、蚕蛹粉、酵母粉和麸 质水，其中以黄豆饼粉为最佳。无机氮源以硫酸铵和尿素 为最常用，氨水可作无机氮源使用，又可调节发酵。采用 黄豆饼粉浸液(，—℃处理)作为氮源，其发酵单位高峰出 现比未处理者为早，这说明可溶性氮比不溶性氮易于利用， 对缩短周期有好处。
20
()其他无机离子
17
百度文库
(三)种子罐扩大培养
种子罐培养是用来扩大种子量的。种子罐培养为—级， 可根据发酵罐的体积大小和接种量来确定。第一级种子罐 一般采用摇瓶种子接种，—级种子罐则是逐级转移，接种 量一般都为％左右。种子质量对后期发酵的影响甚大，因 此种子必须符合各项质量要求。故在培养过程中，必须严 格控制好罐温、通气搅拌和泡沫控制，以保证菌丝生长良 好，得到合格的种子。
在复合培养基中已经存在，一般就不需再添加。为了 调节，中和代谢过程中所产生的有机酸，尚需加人。是一 种酶的激活剂，又是生物合成维生素的前体，通常需加入 极微量，有促进生长的作用，与维持细胞渗透压有关，通 常加入％左右量的即可，增加用量会明显影响菌的生长繁 殖。、对链霉菌菌丝生长有明显作用。浓度超过／以上， 就要产生毒性，显著影响链霉素的产量，而对菌丝体生长 影响较小，一般适用量在／左右。
7
链霉素研究现状
链霉素()是年发现的第一个氨基糖贰类抗生素，也是继青 霉素后的第二个重要抗生素一般认为链霉素是治疗结核杆菌感 染的首选药物，除此以外，还用于治疗革兰氏阴性菌所引起的 泌尿道感染、结核性脑膜炎、鼠疫、肠道感染、肺炎、败血症、 百日咳等。链霉素的缺点是容易产生耐药性，长期使用对第八 对脑神经有毒害。
21
．链霉素的发酵条件及中间控制
()通气和搅拌：灰色链霉菌是一种高度需氧菌。 在黄豆饼粉培养基内增加通气量能提高发酵单位， 又能使升高。
()温度：灰色链霉菌对温度敏感。一般认为链霉素 发酵温度以．℃左右为宜。
大罐发酵液
提炼车间
14
培养方式
斜面孢子培养 摇瓶种子培养 种子罐扩大培养 发酵培养
15
(一)斜面孢子培养
将砂土管(或冷冻管)菌种接种到斜面培养基上，经培 养后即得原始斜面。
斜面培养基的主要成分有葡萄糖、蛋白胨和豌豆浸汁 等，其中蛋白胨和豌豆浸汁的质量对斜面孢子质量影响很 大。蛋白胨是最关键的原材料，对产孢子数量的影响不容 忽视。豌豆的品种和产地以及培养基的值(以中性或偏酸性 为宜)对产孢子质量亦有影响，需特别注意。