QS2631内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性测定试剂盒说明书
纤维素酶使用说明要点
纤维素酶使用说明精选优良菌株，先进的液体深层发酵工艺，全套不锈钢设备，进口酶分离设备和严格的质量控制程序生产，质量稳定，服务周道。
适用于中草药提取、植物提取、食品加工、果蔬汁加工、纺织、酿造、饲料等多个行业。
1.作用机理纤维素酶由内切葡聚糖酶(C1酶)；外切葡聚糖酶(Cx酶)；β-葡萄糖苷酶（又称纤维二糖水解酶）组成。
C1-酶作用于不溶性纤维素表面，使纤维素链裂开、长链纤维素分子末端部分游离，使纤维素链易于水化。
Cx-酶主要包括内切β-1,4葡聚糖酶和外切β-1,4葡聚糖酶，作用于经C1-酶催化的纤维素，分解β-1，4糖苷键。
前者是从高分子聚合物内部任意位置切开β-1,4键，主要生成纤维二糖、纤维三糖等。
后者作用于低分子多糖，从非还原性末端游离出葡萄糖。
β-葡萄糖苷酶可进一步将纤维二糖、纤维三糖及其它低分子寡聚糖分解为葡萄糖。
通过纤维素酶的作用，可以在不改变原料风味和营养价值的前提下，有效地破坏细胞结构，使有效成份得到充分利用。
2.执行标准及酶活定义【标准】QB2583-2003CMC酶活单位定义（U）：在50℃、pH4.8条件下，1分钟水解底物CMC -Na产生1μg还原糖（以葡萄糖计）所需的酶量定义为1个酶活单位。
3、理化指标外观：黄褐色粉剂pH 值：pH3.5-6.5，最适pH为4.8温度：40-60℃，最适温度为55℃。
4.适用范围本品可应用于中草药提取、植物提取、果蔬汁加工、食品酿造、酿酒、饲料、纺织、食品加工、乙醇等工业。
具体使用方法请与我们联系，用户需根据自己的产品、原料特点及工艺条件确定最佳使用方案。
5.包装规格 20kg/桶，可按顾客要求进行包装。
6.运输与贮存本品为生物制剂，运输、贮存过程应避光。
贮存于阴凉、通风、干燥场所。
保质期为12个月。
多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC2660规格:50T/24S产品简介：多聚半乳糖醛酸酶（Ploygalacturonase,PG）属果胶酶的一种，广泛存在于植物、细菌及真菌中。
其催化多聚半乳糖醛酸分解，在果实软化、花粉授粉、种子发育成熟及器官脱落等方面具有重要作用，并且病原菌在侵染宿主植物时，可分泌多聚半乳糖醛酸酶来降解宿主细胞壁，进而导致病程发展。
PG水解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸与DNS试剂反应生成在540nm有特征吸收峰的棕红色物质，测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体8mL×1瓶，4℃保存。
若溶液中有晶体析出，37℃水浴溶解。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入8mL蒸馏水，60℃水浴助溶。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1支，10mg半乳糖醛酸，4℃保存。
临用前加入0.943mL蒸馏水，配成50μmol/mL 的标准液。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照质量（g）:蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，16000g，离心10min，取上清置于冰上待测。
细菌：先收集细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细菌数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000︰1的比例（建议500万个细菌加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细菌（功率20%或200W，超声3s，间隔7s，总时间5min）；然后4℃，16000g，离心10min取上清置于冰上待测。
液体：直接检测或用提取液稀释后检测。
Caspase1活性检测试剂盒比色法
本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过 100µL 的分光光度检测杯检测时，除标准曲线外可以 检测 20 个样品。
试剂准备 1. 裂解液融化后混匀并置于冰浴上备用。 2. 检测缓冲液融化后混匀并置于冰浴上备用。
气泡。随后再加入 10µL Ac-YVAD-pNA(2mM)。
3. 加入 Ac-YVAD-pNA (2mM)后混匀，注意避免在混匀时产生气泡。37°C 孵育 60-120min。发
ห้องสมุดไป่ตู้
现颜色变化比较明显时即可测定 A405。如果颜色变化不明显，可以适当延长孵育时间，甚至可
以孵育过夜。
4. 样品的 A405 减去空白对照的 A405，即为样品中 caspase 1 催化产生的 pNA 产生的吸光度
二. 样品的收集： 1. 对于悬浮细胞：将没有诱导凋亡的对照品和诱导凋亡的样品，在 4°C 下，600g 离心 5min 后， 收集细胞，小心吸除上清，同时确保尽量没有细胞被吸除，PBS 洗涤一次。同前吸尽上清后，2×106 细胞加入 100µL 裂解液（建议加入 1%蛋白酶抑制剂（CC088）），重悬沉淀，冰浴裂解 15~20min。 下接步骤 4。 2. 对于贴壁细胞：将没有诱导凋亡的对照品和诱导凋亡的样品，吸取细胞培养液，备用。用胰 酶消化贴壁细胞，并收集至备用的细胞培养液中。在 4°C 下，600g 离心 5min 后，收集细胞，
1
小心吸除上清，同时确保尽量没有细胞被吸除，PBS 洗涤一次。同前吸尽上清后，2×106 细胞加
入 100µL 裂解液（建议加入 1%蛋白酶抑制剂（CC088）），重悬沉淀，冰浴裂解 15~20min。
真菌葡聚糖酶活力测定
前 言本标准与Novozymes A/S标准方法：EB-SM-0572.02/02 FBG. Fungal Beta-Glucanase activity by Konelab analyzer(英文版)的一致性程度为等同。
附录A为规范性附录。
本标准由诺维信（中国）生物技术有限公司提出。
本标准由诺维信（中国）生物技术有限公司负责起草。
本标准主要起草人：蔺继尚、关越、翟文景。
本标准于2004年04月首次发布。
诺维信分析方法第112部分：用Konelab分析真菌β-葡聚糖酶活力，FBG1 范围本方法规定了使用Konelab分析真菌β-葡聚糖酶活力的步骤。
本方法适用于所有Novozymes内部分析真菌β-葡聚糖酶样品的实验室。
2 原理β-葡聚糖酶能水解β-葡聚糖，生成还原糖。
该反应通过加入含有PAHBAH和铋盐（Bi3+）的碱性溶液中止。
含有的PAHBAH和铋盐能与还原糖形成有颜色的混合物，在405nm下检测。
生成的颜色与β-葡聚糖酶活力成比例。
该过程由Konelan分析仪自动完成。
2.1 反应条件(反应体系中)酶反应β-葡聚糖浓度： 0.50%β-葡聚糖酶浓度： （1-5）FBG/L缓冲液： 28 mM磷酸缓冲液pH： 5.0温度: 50℃时间: 20 min酶空白反应β-葡聚糖浓度： 0.50%β-葡聚糖酶浓度： （1-5）FBG/L缓冲液： 28 mM磷酸缓冲液pH： 5.0温度: 50℃时间: 20 min显色反应PAHBAH浓度： 42 mM酒石酸盐浓度： 56 mM铋盐浓度： 4.5 mMNaOH浓度： 146 mMpH： 碱性温度: 50℃时间: 20 min测定波长： 405 nm2.2 样品条件(样品溶液中)工作范围： （6-30）FBG/LQ/12KF 3568.112-2004定量范围： （13-30）FBG/L3 单位定义1 FBG等于在给定条件下每分钟生成相当于1µmol葡萄糖的还原糖所需的酶的量。
β-1,3葡聚糖酶测定试剂盒使用说明
β-1,3葡聚糖酶测定试剂盒使用说明分光光度法货号：BC0360规格：50管/24样产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；试剂二：液体42mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml蒸馏水溶解，配制成10mg/ml葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2mg/ml。
产品说明：β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。
在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
β-1,3-GA水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率，来计算其酶活性。
自备仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：粗酶液提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
12000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：试剂名称（μL）测定管对照管标准管（葡萄糖溶液）样本或标准液100100100蒸馏水100100试剂一100充分混匀，放入37℃水浴60min。
试剂二600600600充分混匀，沸水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，540nm处记录各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定（计算公式乘以相应稀释倍数），ΔA=A测定-A对照。
β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒说明书
货号：QS2611 规格：50管/24样β-1,3 葡聚糖酶（β-1,3-glucanase，β-1,3-GA）试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：β-1,3-GA(EC 3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。
在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理：β-1,3-GA水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；试剂二：液体30mL×1瓶，4℃保存；粗酶液提取：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至550nm，蒸馏水调零。
A，第1页，共2页如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定（计算公式乘以相应稀释倍数），ΔA=A测定-A 对照。
每个测定管需设一个对照管。
β-1,3-GA活性计算：1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0958x -0.0192；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
可溶性果胶含量试剂盒说明书(分光光度法)
货号: QS2635 规格：50管/24样可溶性果胶(WSP)含量试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分，主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸组成。
果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是许多高等植物细胞壁中含量最丰富的多糖成分，其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。
果胶间以Ca2+桥及其他离子键、氢键、糖苷键、酯键和苯环偶联的方式交联，通过不同的抽提方法可以提取各种形式的果胶，如水溶性果胶（WSP）、离子结合型果胶（ISP）和共价结合果胶（CSP）。
测定原理：利用酸溶液提取得到（WSP）可溶性果胶，采用咔唑比色法测定果胶含量。
果胶水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中与咔唑试剂进行缩合反应，生成物质在530 nm处有最大吸收峰。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、80％乙醇、丙酮、浓硫酸（不允许快递）、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体50mL× 1瓶，4℃保存。
试剂二：液体50mL× 1瓶，4℃保存。
试剂三：标准液1mL× 1支，4℃保存。
试剂四：液体5 mL× 1瓶，4℃保存；样品的前处理：1、细胞壁的提取：取约0.3g样本，加入1mL 80％乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴20min，冷却至室温，4000g 25℃离心10min，弃上清。
沉淀加入1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡2min左右，4000g 25℃离心10min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入1mL 试剂一（去除淀粉）浸泡15小时，4000g 25℃离心10min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。
2、WSP的提取：称取烘干的CWM 3mg，加入1mL试剂二，充分匀浆。
8000g 4℃离心10min，取上清液待测。
江南大学科技成果——耐热、高活性β-葡聚糖酶的构建及生产
江南大学科技成果——耐热、高活性β-葡聚糖酶的构建及生产项目简介β-葡聚糖酶是啤酒工业和饲料工业主要的酶制剂。
目前该酶制剂主要存在的问题是耐热性差和产酶水平不高的问题。
本项目通过基因工程和蛋白质工程手段，从酶分子结构着手，构建耐热、酸性条件下活性高的β-葡聚糖酶。
在不提高酶生产成本的前提下，酶的活性不低于50000U/g，在酸性55-80℃条件下孵育20min，酶活性大于80%。
达到国外同类产品的水平，但价格仅是国外同类产品的三分之一，具有广阔的市场前景。
项目获2009年获国家自然科学基金面上项目资助（30万元），项目编号：30972120；2009年获无锡市科技创业计划项目资助（15万元），项目编号：09132。
创新要点（1）采用基因融合、蛋白质分子改造技术从本质上提高酶分子的耐热性和表达水平；（2）β-葡聚糖酶的耐热性在80℃条件下处理30分钟，酶的残余活性大于90%，酶的活性不低于5000U/g。
效益分析（资金需求总额300万元）本项目可生产高效稳定的β-葡聚糖酶，主要技术性能指标优于国内外同类产品。
按照年产1000吨的β-葡聚糖酶计，每吨酶成本为1万元，销售价按国内同类产品每吨3万元计，年销售额达3000万，毛利润达2000万元，为国家上交税33万。
所以本产品是国内同类产品的升级换代产品，有较大的市场竞争优势和利润空间。
按照β-葡聚糖酶在饲料中0.1%的添加量计算，1000吨β-葡聚糖可添加到100万吨饲料中，按100%大麦、小麦替代玉米，可节约60万吨玉米；按大麦、小麦与玉米的平均差价每吨200元计，每吨饲料成本可降低120元，1000万吨饲料可节约成本12亿元。
所以本产品有明显的市场优势，为缓解我省玉米供需矛盾，开发大麦饲料资源、降低饲料成本，提升肉产品等级、扩大猪肉出口，促进饲料和养殖业健康发展具有重要意义。
推广情况本项目已规模试产，产品受到用户好评。
授权专利β-葡聚糖酶活性测定试剂盒，200910052355.4；饲料用β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因工程菌及其构建，200910031553.2。
β-葡萄糖苷酶试剂盒使用说明
β-葡萄糖苷酶试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号：G8830-100产品简介：β-GC（EC3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。
从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。
β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入10mL双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存。
试剂二：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存。
操作步骤：一、样品的前处理：1.细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；15000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
15000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2.加样表试剂名称（μL）对照管测定管试剂一400试剂二500500样本100100迅速混匀，放入37℃准确水浴30min后，立即放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变）试剂一400充分混匀，8000g，4℃，离心5min，取上清液上清液500500试剂三10001000充分混匀，室温静置2min后，用对照管调零，400nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。
ColiComplete 产品说明书
Page 1 of 2 ColiComplete ®AOAC Official Method 992.30General DescriptionColiComplete ® contains 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-Dgalactopyranoside (X-Gal) and 4-methyl umbelliferyl-ß-D-glucuronide (MUG). Discs are added to LST inoculated with selected dilutions of samples. Samples are incubated at 35–37 °C and examined after 24 and 48 ±2 h for confirmed total coliforms and after 30 ±2 h for confirmed E. coli results. ß-Galactosidase, from coliforms present in samples, cleaves X-Gal into 5-bromo-4-chloro-indoxyl intermediate which undergoes oxidation to yield water-insoluble blue dimer, visually detectable on disc or in surrounding medium as confirmed positive result for total coliform activity. ß-Glucuronidase, from E. coli present in samples, cleaves MUG into glucuronide and methyl umbelliferone which fluoresces under long wave UV light (366 nm) as confirmed positive result for E. coli presence.NOTE : As E. coli O157:H7 does not produce ß-glucuronidase, ColiComplete ® is not suitable for the detection of E. coli O157:H7.A. Sample PreparationPrepare appropriate serial dilutions as indicated in FDA Bacteriological Analytical Manual (BAM), or AOAC Official Methods of Analysis according to sample type.B. InoculationInoculate LST tubes with appropriate sample dilution series selected to determine MPN levels or presence/absence of total coliforms and E. coli in sample. Aseptically add a single ColiComplete ® disc to each tube. Incubate at 35–37 °C.C. Reading ColiComplete ®a. For total coliforms — After at least 24 h incubation, examine each tube for visually detectable blue color on disc or in surrounding medium. Presence of blue color indicates confirmed positive result for total coliforms.NOTE: A wide range of blue color intensity may be expected, depending on sample composition and microflora. All blue reactions are positive regardless of intensity of color.Reincubate at 35–37 °C. After additional 24 ±2 h re-examine. Continued absence of blue indicates negative result; presence of blue indicates confirmed positive result for total coliforms. Read and record the MPN code or presence/absence of total coliforms in the sample.b. For E.coli — After 30 ±2 h from start of initial incubation, examine tubes under long-wave UV light (366 nm). Fluorescent tubes indicate confirmed positive result for E. coli. Read and record the MPN code or presence/absence of E. coli in the sample.D. CONTROLSPositive and negative controls should be used to facilitate interpretation of MUG fluorescent reaction. Use one known positive E. coli tube and two negative controls - one non -E. coli /coliform tube (e.g., Klebsiella spp.) and one uninoculated media tube.NOTE: Use borosilicate glass tubes, flint glass gives fluorescence that may be misinterpreted for a positive result.Lit. No. MK_UG4655EN Merck KGaAFrankfurter Strasse 25064293 DarmstadtGermanyPage 2 of 2 E. Method Modification for Certain JuicesApplicable to juice products/processors which rely on treatments that do not come into direct contact with all parts of the juice, as contained in 21 CFR Part 120: Rules and Regulations. Hazard Analysis and Critical Control Point (HAACP); Procedures for the Safe and Sanitary Processing and Importing of Juice; Final Rule. Vol 66 No. 13. 6137-6202. Use the modified method “Analysis for Escherichia coli in Citrus Juices - Modifi cation of AOAC Official Method 992.30” as stated in Section 120.25 (a).F. StorageStore unused discs at 2–8 °C (36–46 °F) in a sealed container, with desiccant.G. DisposalAfter use, all tubes must be steam-sterilized at 121 °C for at least 30 min before discarding. For in-vitro diagnostic use only.Manufacturing EntityBioControl Systems, Inc, 12822 SE 32nd St, Bellevue, WA 98005, USA.BioControl Systems, Inc is an affiliate of Merck KGaA, Darmstadt, Germany.。
QS2631内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性测定试剂盒说明书
货号：QS2631 规格：50管/24样内切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）活性测定试剂盒说明书分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：Cx存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，Cx主要作用于非晶态纤维素和水溶性纤维素衍生物，随机水解糖苷键，将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体。
测定原理：采用3,5－二硝基水杨酸法测定Cx催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；试剂二：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；样品测定的准备：1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
混匀， 90℃水浴 10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，测 540nm 下吸光值 A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。
每个测定管需设一个对照管。
第1页，共2页Cx 活性计算1、标准条件下测定回归方程为y=6.4078x-0.0673；x 为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
中性木聚糖酶(NEX)活性检测试剂盒说明书 微量法
中性木聚糖酶（NEX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2595规格：100T/48S试剂组成和配制：缓冲液：液体65mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
产品介绍：木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，NEX一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。
NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算NEX活力。
自备实验用品及仪器：天平、低温离心机、恒温水浴锅，可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
操作步骤一、粗酶提取：1.发酵液：发酵液于8000g，4℃，离心15min，取上清，作为待测样品。
2.酶干粉：称约0.1mg，加缓冲液1mL，震荡溶解待测。
二、测定操作表：第1页，共3页1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至540nm。
2、操作表对照管测定管样品（μL）6060缓冲液（μL）9090试剂一（μL）60试剂二（μL）90混匀，盖紧瓶盖，50℃水浴，反应30min，立即沸水浴10min灭活。
(注意不要让盖子爆开，以免进水，改变了反应体系)试剂一（μL）60试剂二（μL）90混匀，沸水浴显色5min，取200µL于微量石英比色皿/96孔板中，对照管调零，测定A540。
计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y=1.6904x+0.0058，R2=0.99891.发酵液NEX活力计算酶活定义：50℃，pH6.0条件下，每毫升发酵液每分钟分解木聚糖产生1nmol还原糖所需的酶量为一个中性木聚糖酶的活力单位。
β-葡聚糖酶活性测定(精)
β-葡聚糖酶活性测定β-葡聚糖是由葡萄糖单体通过β-1，3和β-1，4糖苷键连接而成的D型葡萄糖聚合物，它主要存在于单子叶禾本科谷实中的糊粉层和胚乳细胞壁中。
β-葡聚糖酶属于水解酶类，能有效地降解β-葡聚糖分子中的β-1，3和β-1，4糖苷键，使之降解为小分子。
由于在饲料中，大麦的β-葡聚糖含量较高，难以被单胃动物消化利用，而且对饲料中各种养分的消化利用具有明显的干扰和抑制作用，成为麦类饲料中的抗营养因子。
在饲料中添加β-葡聚糖酶，能有效地消除β-葡聚糖的抗营养作用，促进饲料中各种养分的消化和吸收利用，增进畜禽健康。
在啤酒生产中，添加β-葡聚糖酶可以加快麦汁和啤酒的过滤速度、提高麦汁得率、增加可发酵糖的含量。
此外，β-葡聚糖酶在造纸工业、日化工业等其它许多方面也有着广泛的应用，对β-葡聚糖酶的研究将越来越受到人们的重视。
β-葡聚糖酶活力的测定方法主要有3种：还原糖测定法（分光光度法）、粘度测定法和底物染色法。
其中还原糖测定法简便实用，比较准确，而且结果重复性好，是广泛使用的一种酶活测定方法。
其原理是：β-葡聚糖酶能将β-葡聚糖降解成寡糖和单糖，其具有的还原基团在沸水浴条件下可与DNS试剂发生显色反应，显色的深浅与还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中β-葡聚糖酶的活力成正比，因此，可以利用比色测定反应液的吸光度值来计算还原糖的生成量，从而得出β-葡聚糖酶的活力。
但在该测定方法的具体操作中存在一些影响酶活力测定结果的因素，本文即对还原糖法测定β-葡聚糖酶活力的几个重要影响因素进行研究，并得出最佳测定条件。
1 材料与方法1.1 菌株与培养基1.1.1 发酵产酶菌株黑曲霉（Aspergillus niger）A47菌株，由本实验室保藏。
1.1.2 固态发酵培养基麸皮70 g、米糠27 g、NH4NO3 2.95 g、微量元素液0.05 ml、蒸馏水100 ml，pH值5.0，121 ℃灭菌20 min。
黄曲霉毒素B1酶联免疫定量检测试剂盒 说明书
1ELISA kit for quantitative detection of aflatoxin B1一、概要黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。
这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。
黄曲霉毒素B1（AFB1）属于自然最强烈的致癌物质，它一般产生于花生、玉米、巴西坚果和棉花种子中。
本试剂盒利用酶联免疫吸附测定法（ELISA）对各种谷物、饲料及其他食品中的AFB1含量进行快速、定量检测。
二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联免疫吸附微孔模式进行检测，灵敏度可达0.1 µg/kg（ppb）。
样品或标准品中游离的黄曲霉毒素B1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点，经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素B1后加入显色剂与反应底物，其与酶标物作用而成蓝色，加入反应停止液后颜色由蓝色转变为黄色，黄色越深则表明黄曲霉毒素B1越少，用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素B1的污染水平。
三、试剂盒构成1、反应板支架……………………………………………………………………………1块2 黄曲霉毒素B1抗体包被反应板……………………………………………………96孔3、黄曲霉毒素B1标准品溶液（0 ppb，0.1 ppb，0.25 ppb，0.5 ppb，1 ppb，2 ppb）…1套4、酶标记物…………………………………………………………………4瓶5、酶稀释液……………………………………………………………………1瓶6、样品稀释液………………………………………………………………1瓶7、显色剂溶液………………………………………………………………………1瓶8、反应底物溶液………………………………………………………………1瓶9、终止液………………………………………………………………………………1瓶10、浓缩洗涤液（20 X）………………………………………………………1瓶四、注意事项1、试剂盒请置放于2-8℃条件下保存，使用过程中不要让微孔干燥，使用后立即将试剂放回至2-8℃条件下冷藏。
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货号：QS2631 规格：50管/24样
内切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）活性测定试剂盒说明书
分光光度法
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
Cx存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，Cx主要作用于非晶态纤维素和水溶性纤维素衍生物，随机水解糖苷键，将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体。
测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定Cx催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
样品测定的准备：
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104
个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，
加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
混匀， 90℃水浴 10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，测 540nm 下吸光值 A，计
算ΔA=A 测定管-A 对照管。
每个测定管需设一个对照管。
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Cx 活性计算
1、标准条件下测定回归方程为y=6.4078x-0.0673；x 为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
2、血清（浆）Cx 活力的计算
单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx 活力(μg /min/mL)= [1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷V 样÷T
=14.305×(ΔA+0.0673)
3、细胞、细菌和组织中 Cx 活力的计算
（1）按照蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min/mg prot)=[ [1000×(ΔA+0.0673)÷6.4078×V反总]÷(V样×Cpr) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx 活力(μg/min/g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W×V样÷V样总)
÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx 活力(μg/min/104cell)=[1000×(ΔA+0.0673)÷6.4078×V反总]÷(500×V样÷V样总)
÷T=0.0286×(ΔA+0.0673)
1000：1mg/mL=1000ug/mL；V 反总：反应体系总体积，0.55mL； V 样：加入样本体积，0.05 mL；
V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
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