2019年血细胞分析中直方图的意义与影响因素.柳斌精品教育.ppt
血细胞仪细胞体积分布直方图特点及临床意义
血细胞仪细胞体积分布直方图特点及临床意义请您点击蓝字“检验医学”快速关注我哟?＿检验医学，中华检验医学网官方微信公众平台！最新报道丨前沿知识丨学术资料等诸多优质内容，您身边最便捷、最时尚、最专业的检验医学交流平台！解放军总医院临床检验科乐家新王成彬丛玉隆（北京100853）传统的血细胞检查完全采用手工方法，不仅操作繁琐费时，而且由于多种原因，计数结果的准确性和精密度难以保证。
1958 年，库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法，发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪，开创了血细胞分析的新纪元。
20 世纪90 年代以来，随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用，使其检测原理不断完善，检测水平不断提高，测量参数不断增加，各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。
但从根本上讲，其检测原理大致分为两部分，即电阻抗法与光散射法。
电阻抗法血细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质，以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定。
光散射法主要应用于白细胞分析，其检测原理就是利用多项技术(如射频、细胞化学染色和流式细胞术) 联同时检测一个白细胞，综合分析实验数据，得出较为准确的白细胞计数和五分类结果。
血细胞分析仪检测血标本时，除给出细胞数量外，还提供相应的细胞体积分布图。
根据仪器检测的原理不同，可将血细胞分布图形分为直方图和散点图。
直方图是血细胞分析仪用电阻抗原理对血细胞进行检测，以细胞体积为横坐标，细胞的相对数量为纵坐标，表示某一种细胞数量分布情况，可反映细胞体积大小异质性。
包括白细胞、红细胞和血小板三种直方图。
散点图是血细胞分析仪用多项技术（激光、射频及化学染色）联合使用对白细胞进行检测后得到的各类白细胞的散点状分布图。
由于电阻抗法计数细胞的原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小与仪器内设定的阈值比较而得出的数据，每个细胞检测时显示的脉冲大小除与细胞本身的大小有关外，还与溶血剂的种类、浓度、用量、溶血时间，稀释液的渗透压、离子强度、pH值、电导率，仪器出厂时仪器内固定的孔电流和脉冲增益等因素有关。
血常规直方图的意义
当我们将体积段无限细分下去方块图就会变成曲线图，如同我们的报告单上的一样。图2_S1表示的是常见血细胞分析仪的红细胞直方图：曲线的每个点对应的坐标（X,Y）表示X体积的红细胞有Y个，而曲线与X轴围成的范围表示的示了两个峰，A峰体积小，峰值也小是PLT（血小板）峰，B峰体积较在，峰值高，显示RBC（红细胞）峰。而A、B峰的面积显示了RBC和PLT的总量，峰值的X坐标显示了RBC和PLT体积大小，峰宽显示了RBC和PLT体积的极差（极差可不是特别差^O^,而是统计学中常用来表示离散程度的指标，即一组观察值中，最大值和最小值之差）.峰的面积越大表示总量越多，峰越宽表示体积大小差异越大，即大小分布不均。曲线向左移（如S2）,即表示，RBC和PLT的体积较小，曲线向右移，即表示，RBC和PLT的体积较大。因此通过红细胞分布直方图，再结合Hb、MCH、MCVH等指标就能知道，是不是贫血，是大细胞正色素性贫血（缺铁？）,还是小细胞低色素性贫血（缺叶酸？）、以及大小分布状况（地海贫？）等临床诊治信息。
同理，白细胞分布直方图（图3）也一样。在图3_a中前一峰是淋巴细胞峰，后一峰是中性粒细胞峰，a1、a2显示了不同大小的粒细胞图。具体分析同红细胞分布图。
直方图能很直观的看出血分析中的各类指标，但因为只能给人一个感性的认识，对于单独一张报告单，就很难知道这个分布是不是正常，因此有许多血细胞分析仪用了RDW（红细胞分布宽度）PDW（血小板分布宽度）等指标来反映直方图的信息。
血细胞直方图解析
言
血液分析仪：检测速度快，精确度高，操作 简便。
提供白细胞、红细胞、血小板的体积分析直 方图，直观反映细胞的大小分布情况。
为检验师监控仪器工作状态，判断检验结果 提供了强有力的工具。
1.电阻抗原理
根据血细胞是非导电的性质，悬浮在电 解质溶液中的血细胞颗粒，在通过检测 小孔时可引起电阻的变化为基础，对血 细胞进行计数和体积测量。
谷，第一波谷值设为辨别线1。 T2：自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波
谷，第二波谷值设为辨别线2。
（二）辨别线的作用
1.对正常形态的白细胞进行粒度分类
白细胞分类
LYM： WL与T1之间为W-SCR，相当于 LYM。
MEX ：T1与T2之间为W-MCR，相当于 MEX（单核细胞、嗜酸和嗜碱细胞之和）。
红细胞、血小板直方图解析
（一）基本概念
仪器在36－360fL范围内分析红细胞。 横座标表示红细胞体积，纵座标表示不同体积
的红细胞出现的频率。 直方图上可见两个细胞群体，从50－150fL区
域有一个几乎两侧对称，较狭窄的正态分布曲 线，在主峰右侧约分布在125－200fL区域的细 胞为大红细胞和网织红细胞。
仪器在2－30fL范围内分析血小板。 正常血小板直方图呈左偏态分布，
血小板主要集中在2－15fL内。 LD：2-6fl UD：12-30fl 固定鉴别线：12fl
血小板直方图示意图
LD
UD
血小板直方图粒度分布示意图
（二）血小板粒度异常标记
PL
PL：低鉴别线（LD）处相对度数超过设定值。 提示存在电子噪声、冷凝蛋白、破碎红细胞、 白血病性白细胞碎片等的干扰。
非病理因素：
血细胞分析仪检测报告单中的直方图有什么检测意义？
血细胞分析仪检测报告单中的直方图有什么检测意义？血细胞分析仪是用于检测血液中红细胞、白细胞、血小板、血红蛋白等数量的仪器，通过对各类细胞数量的计数，能够分析潜在疾病的威胁，保障机体的健康状况。
很多人对血常规分析的报告单不是太了解，特别是针对红细胞直方图、白细胞直方图和血小板直方图，下面具体给大家分析一下。
什么是直方图？血细胞分析仪在进行细胞分析时，将每个细胞的脉冲数据根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中，每个通道收集的数据被统计出相对数量表示在“Y”轴上，体积数据以fl为单位表示在“X”轴上，即得到细胞直方图。
白细胞直方图：白细胞直方图有三个细胞群体，左侧为高而陡的峰为小细胞群（35～90fl），右侧低而宽的峰为大细胞群（161～450fl），左右两侧之间的波谷为中间细胞群（91～160fl）。
白细胞直方图病理性改变：（1）左侧小细胞波峰明显降低，而右侧大细胞群波峰明显增高。
提示中性粒细胞增高。
（2）左侧小细胞波峰相对增高，而右侧大细胞波峰明显变低。
提示淋巴细胞增高。
（3）在90～160fl区域出现一个明显的细胞峰。
提示中间细胞增多，可有单核细胞嗜酸性粒细胞及各种幼稚细胞增多等。
红细胞直方图：红细胞直方图有两个细胞群体，从60fl开始到120fl之间有一个几乎两侧对称，较为狭窄的正态分布曲线，即红细胞主群；主群右侧，约分布在120～200fl 区域有一个小细胞群，又称“足趾部”，此群含有大红细胞、二聚体或三聚体细胞等。
红细胞直方图病理性改变⑴主峰曲线的波峰左移，波峰基底增宽。
提示为小细胞非均一性贫血，常见于缺铁性贫血。
⑵主峰曲线的波峰左移，波峰基底变窄。
提示为小细胞均一性贫血，常见于轻型B-珠蛋白生成障碍性贫血。
⑶主峰曲线的波峰左移，峰底增宽的双峰。
常见于铁粒幼细胞性贫血。
缺铁性贫血经治疗有效时，也可出现峰底更宽的类似双峰图形。
⑷主峰曲线的波峰右移，波峰基底增宽。
提示为大细胞非均一性贫血，常见于巨幼细胞贫血，其经治疗有效时，也可出现双峰图象。
解析血细胞分析仪直方图
解析血细胞分析仪直方图有些自动血细胞分析仪的报告单附带有细胞直方图，那么这些图有什么用，能提供什么临床的信息呢？在国内，大多数医师都不甚了了，一般都不看的，也看不懂。
在以前人工做的时代，在报告RBC、WBC、PLT、Hb等参数的时代，还附带了诸如：RBC 大小、分布等等形态学的报告，但进入自动化时代这些形态学的报告就不再出现在报告中了，因此许多医生很不习惯，总是要求做手工，但实际上在目前几乎所有的报告中都能出关于血细胞的一些形态特征，而细胞直方图就是其中的一种报告方式。
怎样解读细胞直方图呢？首先，我们要知道什么是直方图。
直方图是统计学上常用的来表示样本各组在成分布的一种直观的图表。
如图1所示：X轴表示体积单位，Y轴表示个数（即统计学的频数），柱条表示在某个体积段内的物体个数。
当我们将体积段无限细分下去方块图就会变成曲线图，如同我们的报告单上的一样。
图2＿S1表示的是常见血细胞分析仪的红细胞直方图：曲线的每个点对应的坐标（X，Y）表示X体积的红细胞有Y个，而曲线与X轴围成的范围表示的是红细胞的总数（对于数学模型而言，就是曲线的定积分）。
图中显示了两个峰，A峰体积小，峰值也小是PLT（血小板）峰，B峰体积较在，峰值高，显示RBC（红细胞）峰。
而A、B峰的面积显示了RBC和PLT的总量，峰值的X坐标显示了RBC和PLT体积大小，峰宽显示了RBC和PLT体积的极差（极差可不是特别差^O^,而是统计学中常用来表示离散程度的指标，即一组观察值中，最大值和最小值之差）。
峰的面积越大表示总量越多，峰越宽表示体积大小差异越大，即大小分布不均。
曲线向左移（如S2），即表示，RBC和PLT的体积较小，曲线向右移，即表示，RBC和PLT的体积较大。
因此通过红细胞分布直方图，再结合Hb、MCH、MCVH等指标就能知道，是不是贫血，是大细胞正色素性贫血（缺铁？），还是小细胞低色素性贫血（缺叶酸？）、以及大小分布状况（地海贫？）等临床诊治信息。
血细胞直方图 ppt课件
计数WBC时，加入溶血素，使RBC破坏，而WBC膜受到破坏后胞浆流失， WBC体积大小发生变化。因此，WBC直方图上细胞排列顺序不是细胞的原 始大小，而是经溶血液修饰后的细胞大小。
加入溶血素前的细胞大小
加入溶血素后的细胞大小
仪器是如何分类WBC?
一、设置鉴别线：
低鉴别线(LD)：自动寻找30-60fl之间最适位置 高鉴别线(UD)：定在300fl，用作粒度分布异常监视 鉴别线1(T1):自动寻找从LD~UD之间WBC分布曲线的波谷，第一波谷值设为
“TROUGH”T1 鉴别线2(T2):自动寻找从LD~UD之间WBC分布曲线的波谷，第二波谷值设为
各种大小不同细胞产生的脉冲信号分别送入仪器内电脑的各个通道，运算 出各种细胞参数。
细胞群体大小分布情况的图形，就成为“细胞体积直方图”
脉冲信号经过以下步骤，得出细胞计数：
① 信号发生：各种微粒通过检测小孔时，“信号发生器”产生脉冲信号 ② 放 大： 将血细胞产生的微弱脉冲信号，通过“放大器”放大 ③ 阈值调节： “阈值调节器”在一定范围内调节参考电平的大小，能区分不同群细胞
为使Plat计数有较高的准确性，计算机对Plat和RBC分布图进行判断，将Plat 计数的上限阈值判定线放在RBC和Plat分布图交叉部分的最低处计数。
白细胞直方图
三分类血球仪一般以电阻抗原理进行WBC分类。
电阻抗原理：血细胞非导电性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，通过检测小 孔时，引起电阻的变化，从而对血细胞计数和分类
电阻抗法可精确测出细胞（或类似颗粒）大小，是三分类的主要应用原理，也与光学检测 原理，共同应用于五分类血细胞分析仪中。
血细胞分析仪直方图特点PPT课件
直方图（histogram）的形成
• 每个测量过的细胞，可同时得到细胞体积大小的信 息。根据每个细胞体积大小信息，分别累积他们的 数量，得到每个相应体积通道（channel）中累积 的细胞数量。根据仪器预先设定的域值范围，将每 个通道从小到大排列，同时每个通道中累积的细胞 数量进行堆积，得到最初的直方图分布雏形。
5
白细胞分类（分群）技术
6
三分群法血细胞直方图分析
1 红细胞直方 图和典型病 例介绍
• 红细胞直方 图：正态分 布图形。
• 临床意义参 考60~61页， 66~68页。
7
RDW的计算
8
红细胞体积大小改变
9
红细胞体积分布宽度(RDW)比较
10
小细胞性贫血
11
小细胞性贫血
12
小细胞性贫血
36
3、血小板和直方图（68页）
37
正常血小板体积直方图
38
39
40
41
42
血小板和MPV的关系
43
44
血小板聚集病例 （EDTA依赖性聚集）
45
46
47
大血小板增多病例
48
血小板增多
49
本节重点
• 直方图的形成原理 • 三种血细胞正常直方图特点 • 红细胞直方图异常改变和特点 • 三分类法白细胞直方图异常改变特点 • 血小板直方图异常改变特点
13
大细胞性贫血
14
大细胞性贫血
15
镰刀形红细胞贫血
16
遗传性球 形红细胞
增多症
17
红细胞体积和直径
18
RDW和Price－Jones曲线
19
2、白细胞直方图和典型病例介绍
血细胞直方图解析ppt课件
完整版课件
13
三.白细胞粒度分布异常实例
完整版课件
14
LD度数高，存在T1和T2谷
存在T1和T2谷值的粒度分布时，WBC 的 所 有 参 数 将 标 上 警 号 WL 。 常 见 于 存 在红细胞溶血不全，出现有核红细胞， 大血小板增多，血小板聚集，纤维蛋白 析出等现象时。
完整版课件
15
LD高，有T1，没T2
完整版课件
31
（一）基本概念
仪器在36－360fL范围内分析红细胞。 横座标表示红细胞体积，纵座标表示不同体积
的红细胞出现的频率。
直方图上可见两个细胞群体，从50－150fL区 域有一个几乎两侧对称，较狭窄的正态分布曲 线，在主峰右侧约分布在125－200fL区域的细 胞为大红细胞和网织红细胞。
交点高，提示存在红细胞溶血不全，出现
幼稚粒细胞，白细胞聚集，血小板卫星现
象等情况。 WBC结果标有警号WU，余参
数的结果都没有警号。
完整版课件
25
四. 小结
完整版课件
26
1. 分类结果不输出
T1：监视淋巴细胞区域和中间细胞区域。 T2：监视中间细胞区域和中性粒细胞区
域。
仪器在该分布曲线上找不到谷低T1或T2， 或T1、T2同时找不到时，T1和T2负责监 视的细胞群结果就不输出。
完整版课件
20
T1正常，没有T2
T2警号表示不能设定中间细胞与中性粒细胞之间的波谷鉴 别线，常见于出现原始细胞、幼稚粒细胞、红细胞溶血不全， 标本放置时间过长等情况。
完整版课件
21
仅T1高
警号F2表示T1或T2鉴别线位置
上相对度数超过预定值。常见于存
在原始细胞、幼稚粒细胞，单核细
成教-血细胞分析仪直方图特点52页PPT
xiexie! 38、我这个人走得很慢，但是我从不后退。——亚伯拉罕·林肯
39、勿问成功的秘诀为何，且尽全力做你应该做的事吧。——美华纳
40、学而不思则罔，思而不学则殆。——孔子
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
谢谢！
36、自己的鞋子，自己知道紧在哪里。——西班牙
37、我们唯一不会改正的缺点是软弱。——拉罗什福科
成教-血细胞分析仪直方图特 点
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
血细胞直方图解析PPT.
当谷值辨别线不能设定，或在设定的辨别线 与客户建立互信的关系要注意以下几点：
1、游泳的时间或水温不当时，容易引起抽筋。
位置的度数比规定值高时，将标有白细胞粒 小提示63：尊重那些勇于承认自己不知道答案的应聘者。
教学过程：
度分布异常警号。
白细胞粒度分布异常警号
WL：LD相对度数超过规定值。 T1：当第一谷值不能决定时。 T2：当第二谷值不能决定时。 F1：T1的相对度数超过规定值。 F2：T1或T2的相对度数超过规定值。 F3：T2的相对度数超过规定值。 WU：UD的相对度数超过规定值。 AG：为小于LD的粒子数超过规定值。
谷，第一波谷值设为辨别线1。 T2：自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波
谷，第二波谷值设为辨别线2。
（二）辨别线的作用
1.对正常形态的白细胞进行粒度分类
白细胞分类
LYM： WL与T1之间为W-SCR，相当于 LYM。
MEX ：T1与T2之间为W-MCR，相当于 MEX（单核细胞、嗜酸和嗜碱细胞之和）。
非病理因素：
仪器因素：凡影响细胞脉冲信号的因素，都可以使 白细胞直方图发生变化。
试剂因素：稀释液的电导率、渗透压、离子强度； 溶血剂的种类、浓度、用量和溶血时间，都会产生 干扰，使细胞直方图发生改变，抗凝剂的种类和浓 度也会影响细胞直方图。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
通过观察血小板直方图可反映被测标本中小红细胞、 大血小板、红细胞碎片及血小板聚集对血小板计数及 MPV值的干扰，必要时做血涂片检查。
8.血小板凝集
结束语
结合血细胞直方图进行综合分析并进行相应的手工复 检，最终获得一份合格准确的血细胞常规检测报告，从而 尽可能的接近及反应患者身体的真实状况。
报告人：临检诊断中心 柳 斌 ——2012年3月28日
前言
血细胞直方图在血细胞检测分析中的作用不容忽 视
正常的血细胞直方图
1．WBC直方图 仪器在3-300fl范围内分析WBC采用四条与纵坐 标平行的虚线，划分三个区域来鉴别小型WBC (定为淋巴细胞)，中 型WBC (定为单核细胞、嗜酸性粒细胞用碱性细胞)．大型WBC (定 为中性粒细胞)。 2．RBC直方图 仪器在25—250fl内分析RBC，正常REc主要分 布在50-150fl范围内，呈左偏态分布。
3. PLT直方图 仪器在28—36fl范围内分析PLT，正常呈左偏 态分布，主要集中在2-20fl范围内。
(一)判断白细胞计数时是否受到其他因素的干扰。白细胞 计数过程是先将稀释的血液加入溶血剂，使红细胞破坏，保留 的白细胞通过小孔进行计数。但由于某些因素：
①如某些贫血的病理红细胞，新生儿红细饱对溶血剂有 较强的抵抗力，使之溶解或不完全溶解而影响白细胞计数； ②血液内多数有核红细胞，溶解后红细肥的核当做白细 胞计数； ③血小板聚集成团，误计数为白细胞等。
(二)红细胞直方图的临床意义 红细胞直方图结合参数对贫血的鉴别诊 断很值，通过观察图形峰的位置，峰底宽度，峰顶的形状及有血小板直方图的临床意义 由于血小板测量与红 细胞测量在同一个通道内，因此，分析血小板直方图是 血小板检测分析后质控的重要步骤。但血小板直方图对 于医生作为诊断与治疗依据价值不大。
(2)判断直方图是否符合筛选标准，决定是否进行涂片 镜检。当白细胞明显增高或减低或末梢血出现形态不典型 或幼稚细胞时，均可导致直方图异常，此时细胞“分类” 的结果是不准确的。因此使用血细胞分析仪进行白细胞 “分类”时，应具备： ①病人白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量均在正常 范围内； ②白细胞体积分布直方图完全正常的情况下，才能作为白 细胞分类结果用于临床，否则必须涂片镜捡。