色谱柱知识
色谱柱 原理
色谱柱原理
色谱柱是色谱分析中的关键部分，它是一种固定相和流动相相互作用的介质。
它通常由一种固体或涂覆在固体表面上的液体组成。
色谱柱的原理是利用样品在固定相上的相互作用来进行分离和分析。
色谱柱的固定相可以是多种不同材料，如硅胶、石英、聚合物等。
固定相的选择通常取决于需要分离的化合物的特性。
例如，硅胶色谱柱适用于极性化合物的分离，而聚合物色谱柱适用于非极性化合物的分离。
流动相是通过色谱柱的液体或气体，它分为稳定相和动态相两部分。
稳定相通常是一种不揮发的溶剂，它用来固定样品在固定相上，而动态相是通过柱上的流动相来实现分离。
在进样时，样品溶液被注入色谱柱中。
样品与流动相相互作用后，根据样品与固定相之间相互作用的不同，样品分成了不同的成分。
这些成分经过一段时间后，逐渐从柱中洗脱出来，形成不同的峰。
峰的高度和形状代表了样品中不同成分的含量和化学性质。
通过测量峰的面积或高度，可以定量分析样品中的不同物质。
在色谱分析中，色谱柱的选择非常重要，它直接影响到分离效果和分析结果的准确性。
因此，在选择色谱柱时，需要考虑样品的性质、分离效果和分析要求等因素，并根据实际情况进行选择。
色谱柱基本知识
色谱柱色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
目录1简介2构造3填料4分类1. 4.1 安装2. 4.2 流动相3. 4.3 样品制备4. 4.4 保存操作5发展方向6性能评价7注意事项8新进展柱效；对于同系物分析，只要500即可；对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子，因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，还要有合理的柱结构（尽可能减少填充床以外的死体积）及装填技术。
即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。
这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。
在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
2构造色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。
柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。
为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。
也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。
还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。
色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20µm(5~10µm)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同：①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm（常用4.6mm，国内有4mm和5mm），柱长10~30cm；②窄径柱（narrow bore，又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn），内径1~2mm，柱长10~20cm；③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；④半制备柱，内径>5mm；⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；⑥生产制备柱内径可达几十厘米。
专业技术知识01-色谱柱的分类、维护及管理
适用于离子或可离解的化合物, 如无机离子、有机酸、核苷酸、 氨基酸、抗生素、蛋白质等.
有机共聚物树脂、硅胶微球 离子交换剂、螯合树脂等.
分子排阻色 谱柱
根的大据线分凝团子胶尺的孔寸物隙间质的的保孔相留径对弱大关小系与，高对分溶子质样进品行分分子离，用多于糖分、析聚多乙肽烯、、蛋聚白氯质乙、烯核等酸、
Part 4 色谱柱的常见异常现象
Part4 色谱柱的常见异常现象
色谱柱的常见异常现象与原因
异常现象 1、压力为零，不上升或流动相流量为零 2、有柱前压，但流量为零 3、柱前压上升，流量下降，甚至到零
4、不能调零
5、基线噪声大 6、基线突然起变化 7、基线漂移
原因
色谱柱柱前管路接头处泄露
（1）柱进口堵塞 （2）色谱柱链接件漏液 （1）柱上端不锈钢多孔滤片被胶片碎沫堵塞， （2）柱下端不锈钢多孔滤片被填料细颗粒堵塞 （3）柱子阻力增大，由于以水作为流动相的体系，柱子 内微生物生长而使柱子堵塞
L39 亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱
L40 Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球
L41 球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相
L42 C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相
L43 硅胶微球键合五氟代苯基固定相
L44
多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能 团
L34 铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9mm球形
L35 锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150Å
L36 5mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰
L37 适合分离分子量2000～40000的聚甲基丙烯酸酯凝胶
色谱柱型号
色谱柱型号
色谱柱的基本概念
色谱柱作为色谱分析领域中的重要组成部分，起着至关重要的作用。
色谱柱的
选择直接影响到分离效果和分析结果的准确性。
在色谱分析中，色谱柱的型号是一个至关重要的参数，不同的色谱柱型号适用于不同的分析目的和条件。
色谱柱型号的分类
根据色谱柱填料的性质和颗粒大小，色谱柱型号主要可以分为不同的类别。
常
见的色谱柱型号包括A、B、C等，每种型号都具有不同的性能特点和适用范围。
在选择色谱柱型号时，需要根据具体的分析需求和样品特性来进行选择。
色谱柱型号的选择原则
在选择色谱柱型号时，需要考虑到样品的分子量、极性、挥发性以及分离目标
等因素。
通常情况下，较小的色谱柱填料颗粒适用于较大分子量的物质分析，而较大的填料颗粒适用于分析分子量较小的物质。
此外，色谱柱型号的选择还受到分析分离目标的影响，需要根据实际情况来进行合理选择。
色谱柱型号的应用案例
以下是一些常见的色谱柱型号及其应用案例：
•型号A：适用于分离较小分子量的样品，常用于生物医药领域的分析。
•型号B：适用于挥发性物质的分离，常用于环境监测和食品安全领域。
•型号C：适用于极性物质的分析，常用于化学品分析和工业生产等领域。
结语
色谱柱型号作为色谱分析中的重要参数，在实际应用中起着至关重要的作用。
正确选择适合的色谱柱型号有助于提高分析效率和准确性，为科研工作和生产实践提供有力支持。
希望本文能够帮助读者更好地理解色谱柱型号的重要性和选择原则。
waters色谱柱相关知识
流动相方面 除去微粒 纯度的要求 超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低 缓冲液的pH值，在填料的允许范围内 缓冲液（盐）的浓度 溶剂：色谱纯，并与填料相匹配 溶剂中的杂质含量 流动相对样品的溶解度 有机溶剂或水的比例
Good Column
Inject
用“5”法计算柱效
色谱柱的正确使用及操作
流动相的转换 特别是GPC柱 流速(压力)的变化幅度 温度的变化幅度 专用色谱柱∶样品及溶剂的要求
正确使用色谱柱（一）
样品方面 除去微粒及杂质 了解样品在流动相中的溶解度 如样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出 了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用
对HPLC柱填料的了解(五)
填料的端基封口 封口残余硅羟基 减少不可逆吸附或拖尾 增加碳含量（0.1% - 1%）
残基处理的效果
NovaPak C18
未封口 C18
① 抗坏血酸 ② 烟酰胺 ③ 对氨基苯甲酸 ④ 哌咯西叮 ⑤ 核黄素 ⑥ 苯酚 ⑦ 盐酸硫胺
对HPLC柱填料的了解（六）
硅胶的活性 主要影响碱性化合物的保留行为：k' 生产硅胶时处理温度不同，硅胶活性也不同 是选择性差异的主要来源 硅胶的杂质含量 重金属含量低，硅羟基活性小，拖尾减小 是色谱柱质量好坏的重要标志
加速色谱柱寿命试验： (pH 10 ，50 °C)
寿命 (小时)
Xterra: 快梯度分析
AU
0.00
0.10
0.20
Minutes
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
1.40
1.60
1.80
2.00
化学分析中的柱色谱法基础知识
化学分析中的柱色谱法基础知识柱色谱法是化学分析的基础技术之一，其广泛应用于分离、分析、净化、提纯等领域。
柱色谱法最早应用于有机化学中，主要用于分离各种有机物。
但随着仪器技术的不断升级，柱色谱法已经可以应用于各种领域，包括无机分析、生化分析、环境分析、食品分析等。
柱色谱法的基本原理柱色谱法主要利用物质分子在不同站点处所受的吸附作用差异，来完成分离、分析等任务。
通俗地说，柱色谱法就像是在不同人群中找到不同特征的一样，将不同的物质分开。
整个柱色谱法的过程主要包括三个步骤：样品进样、分离、检测。
其具体过程如下：1、样品进样：将待分离样品注入到柱子中，并通过色谱柱使样品分离。
2、分离：根据不同物质所受吸附作用的差异，在色谱柱中完成不同物质的分离。
3、检测：通过检测器，对分离出来的物质进行鉴定和定量。
柱色谱法的色谱柱柱色谱法的柱子是柱色谱法的核心部件，柱子的质量和种类对整个柱色谱法都至关重要。
目前常用的柱子有液相色谱柱（Liquid Chromatography Column）和气相色谱柱（Gas Chromatography Column）。
在柱子中，分离物质被分子筛分离，根据色谱柱的不同材料、填充物和分子筛分子的大小，可以分为多种柱子，如反相柱、离子柱、手性柱等等。
不同的柱子适用于不同的分离对象和条件，选用合适的柱子能够明显提高柱色谱法的分析效果。
柱色谱法的应用柱色谱法技术的应用领域十分广泛，可用于制药、食品、环境和生物等行业中的质量控制和检验检疫。
以下是柱色谱法的常见应用领域：1、制药工业中，利用反相柱对药物混合物进行消杂，提纯或分离开来。
2、食品工业中，用于检测食品中的添加剂、色素、香料等成分，以及检测食品中的农药残留。
3、环境监测领域，用于污染物检测和土壤分析等。
4、生物科学领域中，利用手性柱分离和分析手性化合物、蛋白质等。
总之，柱色谱法是化学分析领域中最为重要的技术之一，它能够通过选择合适的柱子，分离出不同的化合物和成分，进而实现分析和定量等任务。
气相色谱柱的分类
气相色谱柱是气相色谱仪中的关键组件，用于分离混合物中的化合物。
这些柱根据其内部填充物的性质和结构可以进行不同的分类。
以下是常见的气相色谱柱分类：1. 毛细管柱（Capillary Column）：毛细管柱是一种非常常见的气相色谱柱，其内径通常在0.1-0.53毫米之间。
这种柱的填充物常常是液态涂层或固定相，可以提供更高的分辨率和更好的分离效果。
2. 开放管柱（Packed Column）：开放管柱是一种较早期的气相色谱柱，其内部填充有颗粒状的固定相。
这种柱逐渐被毛细管柱取代，但在某些应用中仍然有用。
3. 固定相分类：液体固定相：使用液体涂层或吸附剂，如聚硅氧烷（polydimethylsiloxane，PDMS）。
固定相涂层：可以根据化合物的极性选择不同的固定相，例如聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）。
多相柱：包含两种或两种以上不同类型的固定相，以增强对复杂混合物的分离。
4. 长度分类：短柱（Short Column）：长度通常在10-30米之间，用于快速分离。
中柱（Medium Column）：长度在30-60米之间，用于一般分离任务。
长柱（Long Column）：长度超过60米，适用于高分辨率的分离。
5. 手性柱（Chiral Column）：用于分离手性异构体（对映体）。
手性柱的填充物具有手性选择性，能够区分具有相似物理性质但不同手性的化合物。
6. 膜柱（Capillary Membrane Column）：使用多孔膜作为固定相，提供更高的热稳定性和更快的分离。
气相色谱柱的选择取决于分析的样品性质、目标化合物、分离需求以及仪器性能等因素。
在选择气相色谱柱时，需要仔细考虑这些因素以确保获得准确且可靠的分析结果。
色谱柱基础知识的总结
色谱柱基础知识的总结色谱柱是色谱分析中的重要工具，它是用来分离混合物中不同化合物的设备。
色谱柱的选择和使用对于色谱分析结果的准确性和灵敏度起着至关重要的作用。
下面将对色谱柱的基础知识进行总结。
色谱柱的种类主要包括气相色谱柱（GC柱）和液相色谱柱（LC柱）。
GC柱使得样品在高温下蒸发成为气态，然后通过柱子的分离效应进行分离。
LC柱是将可溶于液相的样品通过柱子的分离效应进行分离。
色谱柱的工作原理是样品分离的基础。
色谱柱的分离效应由固定填充物和流动相的选择决定。
固定填充物是色谱柱中的重要组成部分，分为填充型和包袋型。
填充型色谱柱常用的填充物有硅胶、氧化铝、氮化硅等。
填充型色谱柱适用于对极性物质的分离。
包袋型色谱柱通常是指薄层涂布型的液相色谱柱，常见的包袋型色谱柱有C18、C8、C4等。
包袋型色谱柱适用于对非极性以及中等极性物质的分离。
流动相的选择也是色谱柱分离效应的关键因素。
在GC柱中，通常使用气体作为流动相，常用的有氢气、氦气等。
在LC柱中，流动相一般是有机溶剂和缓冲液的混合物，常见的有甲醇、乙腈等。
流动相的选择要根据要分离的物质的属性，如极性、溶解度等进行合理选择，以提高分离效果。
色谱柱的选择要根据需要分离的物质的性质进行。
对于GC柱的选择，常见的指标有极性、温度范围、长度和内径等。
相对于液相色谱柱，GC柱的选择范围较窄，通常根据物质的极性选择合适的GC柱。
液相色谱柱的选择相对较为复杂，常见的指标有固定相类型、粒径、孔径、长度和内径等。
固定相的选择要根据样品的性质进行，如极性的物质选择极性固定相，非极性物质选择非极性固定相。
粒径和孔径的选择会影响柱子的分离效果和分析时间。
总之，色谱柱是色谱分析中的重要工具，其选择和使用对于色谱分析结果至关重要。
合理选择柱子的类型和填充物，以及优化流动相的组成和条件，能够提高色谱分离效果和分析灵敏度。
同时，良好的色谱柱的使用与保养也是保证色谱分析质量的重要环节。
只有不断深入了解和熟悉色谱柱的基础知识，才能更好地进行色谱分析工作。
色谱柱常用知识
色谱柱使用常识1.色谱柱的安装⑴、用过滤和脱气的流动相（不含缓冲盐）彻底冲洗色谱仪的泵和管路，务必使系统中不含气泡。
⑵、根据色谱柱上所标示的流动相流向，将色谱柱入口与泵端管路相连，柱出口不连。
⑶、将泵的流速设为0.1mL/min或更低，流速缓慢地上升到正常流速（t>5min）。
⑷、当溶剂从色谱柱出口端自由流出时，将流速设为0，把柱出口与检测器端的管路相连。
⑸、用10－30倍柱体积的流动相、正常流速平衡色谱柱。
⑹、氨基柱、氰基柱既可在正相环境下使用，也可在反相环境下工作。
当需要从反相变为正相或正相变为反相时，需要用20－30倍柱体积的THF作为过渡溶剂冲洗系统，否则易使泵的单向阀堵塞，出现压力异常的现象。
2.色谱柱使用注意事项①、流动相：a、溶剂必须是HPLC级的，试剂则尽可能使用高纯度的；b、不与固定相发生化学反应，粘度小，且对样品有适宜的溶解度，要求k在1～10范围内（可用范围）或2～5（最佳范围），k值太小，不利于分离；k值太大，可能使样品在流动相中沉淀；c、流动相使用之前必须过滤和脱气；d、确保溶剂间是相互混溶的；e、流动相必须与检测器相匹配，如用紫外检测器时，不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。
痕量的杂质会极大地降低色谱柱的性能，当需要更换流动相时，确保溶剂（缓冲液）之间是相互混溶的。
若使用的溶剂与色谱柱中的溶剂不能混溶，则需使用过渡溶剂，否则会对色谱柱产生永久性的伤害。
盐或缓冲液从流动相中析出也会对色谱柱产生永久性的伤害。
每次进样前应该检查样品在流动相中的溶解性，如果可能尽量使用流动相溶解样品。
②、固定相：a、流动相的pH值应保持在2.0－8.0之间（除非有特殊说明）；b、如果有必要可使用预饱和柱和保护柱；c、使用氨基柱时，流动相和样品中尽量避免含醛类和酮类物质。
当前的反相色谱柱填料可分为以下三种：⒈硅胶柱：柱效高，机械强度大，但对pH敏感，低pH值(<2.0)会使键合相水解（除去键合的功能集团）；高pH值（>8.0），硅胶溶解。
色谱柱常识
因此，对于不同的被分析物要按实际情况选择封端或不封端的填料。
硅胶的化学性质—碳覆盖率
碳覆盖率（键合度）：与基体物质相连的键合相的量。
填料的选择性决定于键合的密度，尤其是在分离碳水化合物时，不同键合密度表现出不同的选择性。
碳覆盖率对色谱分离的影响：
* 双体键合：增加色谱柱稳定性，增加色谱柱的载样量
硅胶的化学性质—封端
封端：键合步骤之后，用小分子硅烷将裸露的硅羟基键合，以便获得更大的覆盖率。
封端多用于反相色谱键合中。
封端可消除或减少可能发生的二级反应。
没有封端的反相色谱填料通常比封端的有复杂多样的选择性。
碱性物质在不封端的填料上，容易产生拖尾。
色谱柱填料形状与粒径
基质：硅胶、二氧化铝、聚合物填料等
形状：球形和无定形
* 无定形：易制备、价格低；但涡流扩散大，渗透性差， 比较难填装出稳定的柱床，一般用来做制备柱。
* 球形：涡流扩散小，渗透性好，可填装出稳定的柱床。
* 高碳覆盖率：提高分辩率，分析时间长
* 低碳覆盖率：缩短运行时间
色谱柱分类
反相色谱柱：C18、C8、C3等
正相色谱柱：硅胶柱、氨基柱、氰基柱等
离子交换柱：有强阴、强阳、弱阴、来自阳之分 体积排阻柱：凝胶渗透色谱柱与凝胶过滤色谱柱
疏水作用柱
手性柱
宽径柱（3-21.2mm）-载样量高
柱的内径决定了流速：
流速F2=F1*(ID2/ID1)2
硅胶纯度
硅胶的硅醇基与离子型化合物之间可能进行二级反应
硅胶中的痕量金属会增加硅醇的酸性和峰的不对称性，有利于二级反应的发生，容易引起峰的拖尾。硅胶越纯，金属含量越低时，可以降低表面游离硅胶基的酸性，消除或减少可能发生的二级反应。
色谱柱基础知识简介
2020/5/12
5
色谱柱的分类
• 通常使用填充柱和毛细管柱两类
两类色谱柱的区别
项目
填充柱
毛细管柱
柱材料
柱长 柱内径 柱流速
铜、不锈钢、硅酸硼玻 常用熔凝硅玻璃 璃
2020/5/12
3
• 国外比较知名的品牌有： • 安捷伦公司的Zorbax系列填料柱, • Water公司的μBondapak系列填料柱, • 美国Supelco公司的Supelco柱, • 瑞典AkzoNobel公司的Kroma-sil填料柱, • 迪马公司的Diamonsil柱以及部分日本岛津公司的
0.5~10米 2~4mm
大，通常10~50ml/min
10~150米
0.25mm、0.38mm、 0.50mm 小，通常0.5~5ml/min
样品容量
2020/5/12
大，可加大进样量
小，通常需要分流进样 口
6
填充柱(铜&不锈钢材料)
2020/5/12
7
填充柱(玻璃材料)
Байду номын сангаас2020/5/12
8
毛细管柱
2020/5/12
9
色谱柱按用途可分为分析型和制备型
常用的色谱柱及其尺寸：
• (1)常规分析柱(常量柱)，内径2—smm(常用4.6mm，国内 有4mm和5mm)，柱长10—30cm;
• (2)窄径柱，又称细管径柱、半微柱，内径1—2mm，柱长 10—20cm;
• (3)毛细管柱(又称微柱)，内径0.2—0.5mm; • (4)半制备柱，内径>5mm; • (5)实验室制备柱，内径20—40mm,柱长10—30cm; • (6)生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、
色谱柱知识
液相色谱柱知识1. 色谱柱的构成色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能稳定。
柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。
色谱填料：经过制备处理后，用于填充色谱柱的物质颗粒，通常是5-10粒径的球形颗粒。
色谱柱管：内部抛光的不锈钢管。
典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm，长250mm。
色谱柱：也称固定相，是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的。
2. 色谱柱的填充干法填充：在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直台面墩10-20次。
湿法填充：又称淤浆填充法，使用专门的填充装置。
3. 填料的结构色谱填料是由基质和功能层两部分构成。
基质：又常称作载体或担体，通常制备成数微米至数十微米粒径的球形颗粒，它具有一定的刚性，能承受一定的压力，对分离不起明显的作用，只是作为功能基团的载体。
常用来作基质的有硅胶和有机高分子聚合物微球。
（常用球形全多孔硅胶为化学键合相载体）功能层：是通过化学或物理的方法固定在基质表面的、对样品分子的保留起实质作用的有机分子或功能团。
如图8-10是硅胶基质的冠醚大分子固定相的结构示意图，功能层冠醚分子吸附或键合在硅胶基质的表面。
液相色谱仪（Liquid Chromatograph）由高压输液泵、检测器、进样器及液相色谱柱等四部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。
一、液相色谱柱的安装：1、液相色谱柱的结构：a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。
柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3／16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。
7／16英寸外螺纹与1／4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。
3／16英寸的内螺纹与1／16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。
色谱柱相关知识点总结
色谱柱相关知识点总结一、色谱柱的基本知识色谱柱是色谱分析中用于分离和提取混合物中成分的一种仪器，其主要原理是利用混合物成分在固定相上的溶解度差异，通过流动相的运动使不同成分逐渐分离。
色谱柱通常由柱壁、填料和柱端组成，其内部填充有各种不同材质的固定相，以提供不同的分离机制。
二、色谱柱的分类根据填料的不同，色谱柱可以分为以下几种主要类型：1. 气相色谱柱：主要用于气相色谱分析，填料通常为不活性的多孔硅胶或聚酯。
气相色谱柱广泛应用于各种化学物质的分析和检测。
2. 液相色谱柱：主要用于液相色谱分析，填料通常为全球性组织最具影响力的金属有机框架领域标准协会。
液相色谱柱可根据分离机制的不同分为反相、正相、离子交换、凝胶柱等类型。
3. 离子色谱柱：特殊用途色谱柱，主要用于分离离子物质，填料通常为离子交换树脂。
离子色谱柱常用于水质分析和环境监测中。
4. 通用型色谱柱：用于多种成分的分离和检测，填料通常为较为通用的硅胶或聚酯材料。
通用型色谱柱适用范围广，可以满足多种化学成分的分离需求。
三、色谱柱的特点1. 分离效果好：色谱柱内部填充有固定相，可以提供不同的分离机制，使得不同成分能够得到有效的分离，从而保证分析的准确性。
2. 适用范围广：不同类型的色谱柱可以满足各种化学物质的分离和检测需求，适用范围广泛。
3. 操作简便：色谱柱的操作相对简单，只需要合理选择填料和条件，就可以进行有效的分离和检测。
4. 耐用性强：优质的色谱柱通常具有较长的使用寿命，能够满足长期的分析需求。
四、色谱柱的选择选择合适的色谱柱对于分析结果的准确性至关重要，通常需要考虑以下几个因素：1. 样品性质：不同的样品性质需要选择不同类型的色谱柱，如极性样品使用反相色谱柱，非极性样品使用正相色谱柱。
2. 分离要求：不同的分离要求需要选择不同类型的色谱柱，如需要高效分离的样品可以选择长柱或小颗粒填料的色谱柱。
3. 操作条件：不同的操作条件需要选择不同类型的色谱柱，如高温条件下需要选择耐高温的色谱柱，高压条件下需要选择耐高压的色谱柱。
气相色谱柱专业知识课件
装柱过程： 1）空柱管→酸洗，碱洗，乙醚洗 2）固定液（<20%）→溶解在有机溶剂→载体 3）静态老化 4）动态老化
第四节 检测器
检测器：是将流杰出谱柱旳被测组分旳浓度转变为 电信号旳装置
一、气相色谱检测器分类 二、常用检测器旳特点和检测原理 三、检测器旳性能指标
气相色谱柱
（一）载体
1．作用：承载固定液旳作用
2．要求： 比表面积大（多涂渍固定液） 无吸附性（不吸附被测组分） 化学惰性（不与固定液发生化学反应） 热稳定性好 一定旳机械强度
续前
3．分类： （1）硅藻土类：具有一定粒度旳多孔性固体微粒
红色：吸附力强，与非极性物质配伍 白色：吸附力弱，与极性物质配伍 （2）非硅藻土类：玻璃微球，石英微球，
注：对于中档极性组分，若沸点相同， 则按极性顺序出柱，极性较强旳后出柱
续前
b．按化学官能团相同选择： 固定液与被测组分化学官能团相同，作用力强， 选择性高
酯类——选酯或聚酯固定液 醇类——选醇类或聚乙二醇固定液
（2）按组分性质旳主要差别选择
组分旳沸点差别为主 —— 选非极性固定液 按沸点顺序出柱 沸点低旳先出柱
➢ 小结：
固定液分类，固定液选择，分离条件选择 两种类型检测器特点，检测原理，使用注意 敏捷度与检测限优劣衡量
Sm
A C1
C2 w
60
[mV s / g]
S m 指1秒钟携带1g样品进入检测器所产生的信号强度
A — —峰面积(cm2 )
C1 — —记录器灵敏度（mV / cm） C2 — —记录纸纸速倒数（min/ cm）
w — —进样量（g）
（三）检测限（敏感度）：
液相色谱柱的相关知识
• 如，石墨化碳黑正逐渐成为反向色谱柱填料。这种填料的分离不同于 硅胶基质烷基键合相，石墨化碳黑的表面即是保留的基础，不再需其 它的表面改性。该柱填料一般比烷基键合相硅胶或多孔聚合物填料的 保留能力更强。石墨化碳黑可用于分离某些几何异构体，由于在 HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。
1.2 流动相：
• 流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配 流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将 所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤 其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中 的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
• 以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是 2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为 2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色 谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所 使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用 的流动相。
5.2 色谱柱的安装
➢ 拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及 柱内贮存的溶剂。
➢ 拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 ➢ 按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接
管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保 护柱)；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、 内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。在接管时一定要设法降低 柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到 底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，切记不 要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，请 用扳手继续顺时针拧1／4圈，直至不漏液为止。
HPLC色谱柱的基础知识及使用技巧
HPLC色谱柱的基础知识及使用技巧一、引言高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。
色谱柱是HPLC系统的核心组成部分，其性能直接影响分析结果的准确性和可靠性。
本文将详细介绍HPLC色谱柱的基本原理、分类、使用及维护等方面的专业知识。
二、色谱柱的基本原理色谱法是一种基于不同物质在固定相和移动相之间的分配平衡进行分离的物理化学方法。
HPLC色谱柱的核心是固定相，它是由硅胶、氧化铝、活性炭等颗粒状物质组成。
当样品溶液通过色谱柱时，不同物质根据其与固定相的相互作用力大小，依次从固定相中解吸下来，从而实现各成分的分离。
三、色谱柱的分类1.正相色谱柱：适合分离极性化合物，如糖类、醇类等。
2.反相色谱柱：适合分离非极性化合物，如脂肪酸、烃类等。
3.离子交换色谱柱：适合分离带电离子或极性化合物，如氨基酸、核酸等。
4.体积排阻色谱柱：适合分离大分子物质，如蛋白质、多糖等。
四、色谱柱的选择与使用1.根据分析物的性质选择合适的色谱柱。
2.确保色谱柱不受污染，使用前需进行清洗和活化。
3.避免过度使用压力，以延长色谱柱的使用寿命。
4.定期更换色谱柱，以保证分析结果的稳定性。
五、色谱柱的维护与保养1.使用后及时清洗色谱柱，防止残留物对柱子的污染。
2.色谱柱应储存于干燥、避光的环境中，避免受潮或暴晒。
3.对于长期不用的色谱柱，应定期检查其性能并进行活化处理。
4.避免将色谱柱置于高温或低温环境中，以防止硅胶固定相产生裂纹或变形。
5.定期更换流动相，以保证流动相的质量和稳定性。
同时，流动相的pH值应控制在固定相所能承受的范围内。
6.在使用过程中，应时刻关注色谱柱的压力变化。
若发现异常压力或突然变化，应及时检查柱子是否堵塞或受损。
若确有问题，应立即停止使用并进行修复或更换。
7.在使用过程中，还应注意观察色谱峰的形状和大小。
若发现异常峰或分离效果变差，应考虑更换流动相或清洗柱子。
若问题仍未解决，应考虑更换色谱柱。
色谱柱报关hs
色谱柱报关hs摘要：1.色谱柱的概述2.色谱柱的报关流程3.色谱柱的HS 编码4.色谱柱报关HS 的关键点正文：色谱柱是一种实验室常用的分离技术工具，主要用于对混合物进行分离和分析。
在我国，色谱柱作为一种商品，需要按照规定的流程进行报关。
本文将详细介绍色谱柱的报关流程、HS 编码及关键点。
1.色谱柱的概述色谱柱是一种具有特定孔径和填充物的分离技术工具，通常由不锈钢、玻璃或硅胶等材料制成。
其工作原理是利用样品中各组分在固定相和移动相之间的分配系数的不同，达到分离的目的。
色谱柱广泛应用于化学、生物、医药等领域。
2.色谱柱的报关流程色谱柱作为实验室常用的一种商品，其报关流程与其他商品并无太大差异。
首先，需要准备相关的报关资料，如发票、装箱单、提单、合同等。
然后，根据我国海关的规定，对色谱柱进行归类，确定其HS 编码。
最后，在海关系统中录入报关单，并按照要求缴纳相应的关税和增值税。
3.色谱柱的HS 编码HS 编码，即海关编码，是对商品进行分类和管理的国际通用编码。
对于色谱柱，其HS 编码为“9027.1000”，属于“分析化学用仪器及器具”类别。
在报关过程中，正确申报HS 编码是非常关键的，因为这将直接影响到关税和增值税的缴纳。
4.色谱柱报关HS 的关键点在色谱柱报关HS 的过程中，有以下几个关键点需要注意：（1）确保报关资料的齐全和准确，以免影响报关进度；（2）正确归类色谱柱的HS 编码，避免因编码错误导致额外费用；（3）了解海关对色谱柱的相关政策和法规，确保报关过程符合要求；（4）如涉及特殊用途的色谱柱，需提前办理相关许可证件，以免影响进口。
总之，对于实验室常用的色谱柱，了解其报关HS 的相关知识是非常重要的。
色谱柱名词解释
色谱柱是色谱分析中使用的一种关键设备，用于将混合物中的成分分离并进行定性和定量分析。
以下是一些与色谱柱相关的常见名词解释：
1. 固定相（Stationary Phase）：色谱柱中的固定涂层或填料，具有特定的化学性质和分离能力。
样品在固定相中发生相互作用，导致不同成分以不同速度移动并被分离。
2. 流动相（Mobile Phase）：用于携带样品通过色谱柱的流体，可以是气体（气相色谱）或液体（液相色谱）。
流动相的选择取决于分析目标和色谱柱类型。
3. 柱效（Plate Number）：用于描述色谱柱分离能力的度量。
柱效越高，表示色谱柱的分离效果越好。
4. 保留时间（Retention Time）：在色谱柱中，样品组分从进样到检测器出现的时间。
保留时间可以帮助确定化合物的特征和纯度。
5. 色谱峰（Chromatographic Peak）：色谱图中呈现出的高度峰值，表示在特定保留时间内检测到的样品成分。
6. 柱温（Column Temperature）：色谱柱的操作温度，可以对分离效果和分析速度产生影响。
某些分析方法需要在特定的温度下进行。
7. 柱寿命（Column Lifetime）：色谱柱使用期限，取决于使用条件和期间的保养和维护。
柱寿命的结束通常由分离性能下降或峰形变得不规则来决定。
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1.仪器都有个梯度精度的参数指标，那这个参数的好坏是取决于泵和比例阀两个东西吗？还是还有别的影响？2.液相泵分为串联泵和并联泵，请问两种形式的泵有什么区别？各有什么优点？3.在检测四元比例阀是否漏液时,“将管路里吸入一小段气泡”是在一个管路里吸入气泡吗？如果是，那么另外三个管路的吸滤头是放在流动相中，还是提起来呢？4.如果没有那个压力曲线可查，在平常维护仪器时，是否应该检测四元比例阀是否漏液，多久一次？5.我的Agilent1200二元泵A泵前一段时间出口单向阀漏液，怀疑是压力过大顶坏了，换了一个单向阀，但是换完之后就是走梯度的时候在前几分钟的压力不稳，波动比较大，相应的色谱图也有一些问题，找工程师说是有盐析出，需要用长时间冲洗，但是效果一直不好，不得已只能走等度的样品了，想请你给点意见！6.二元高压梯度系统的阻尼器在泵后的三通后边，四元低压梯度系统的阻尼器在泵的两个柱塞杆之间阻尼器位置不同有什么影响呢?7.一时冲动，就去把入口单向阀给拆了，结果装不回来了，感觉那里面也没有什么太多的元件啊，就一个小铁圆柱，弹簧一个，一个小黑色橡胶垫圈，一个透明圆形垫片，怎么装回的时候就不能将两个部件密闭好呢？有没有单向阀的构件图片呢？8.泵头里的溶剂通过出口球阀压入第二个腔体中，此时第二个腔体吸收全部第一个腔体溶剂，然后打出一半？还是第二个腔体吸收一半，剩下的一半直接流到色谱柱里去了？9.用混合有机相（乙腈：甲醇）的时候，二元高压泵混合器以及出口单向阀那里经常堵，随着实验时间延长，压力也越来越高。
所以不得不用了一段时间就拆下来超声清洗。
这个可能是什么原因导致压力升高？还有使用的此流动相，柱子的寿命明显就缩短了【用的是乙腈甲醇混合有机相，磷酸水（添加三乙胺）】，是不是这样的流动相容易导致填料的流失或结构的破坏？10. 蠕动泵清洗时，只是清洗泵的柱塞杆，还是对单向阀也有清洗作用？11.您说了，高压有利于溶剂的混合，那么低压四元梯度，如何有效保证溶剂的混合？不知道混合池的结果怎么样？12.Waters、安捷伦、岛津您能就三种品牌的泵、单向阀等构造做下简介和对比说明吗？他们的优势都在那里？13.目前市场上关于安捷伦，沃特斯，岛津的液相色谱卖的最多，在泵的性能上，各个厂家有都在宣传彩页上写的非常好，以前记得有一句话：岛津的检测器，安捷伦的柱子，沃特斯的泵！但是现在好像沃特斯的泵的指标在三个厂家中最差，是不是现在安捷伦和岛津泵比沃特斯的好啊？而且三个厂家的泵的主要特点及内部材质有何不同？14.四元梯度，日常用A和D，那么B和C长时间闲置，该如何维护保养?放在甲醇溶剂里，会不会对系统有影响?放在空瓶里，管路有气泡会不会影响到其他两路?15.您讲座里提到的压力曲线，我们几乎从来没有调用过，要怎么调出来？16.我们的是WATERS的，那个四元比例阀的地方一直有液体漏出来，流动相是缓冲盐，是不是结晶了还是那个弹簧坏了啊。
要怎么维护啊，工程师说要用热水冲洗。
要不要拆开看看啊?17.有根柱子的柱压过大，反接冲洗后效果也不明显，还有其他的方法吗？18.我们那个老仪器比例阀经常出现漏液，有什么好的办法可以解决？是不是因为拆卸次数多了引起的呢？还有那个曲线是不是需要经常做？19.aligent1100在线脱气，有机相一切正常，水相当流速为0.8ml/min时压力稳定，大于0.8压力出现倒峰，压力波动在9bar左右，啥地方出了问题？20.泵和比例阀可算液相的核心部件吧？是不是出现故障的几率比较大？21.我的同事们在配制流动相（乙腈、甲醇等）时很少过滤，虽然我们过滤的泵和滤膜都是现成的，我问起来，他们就说用的试剂都是色谱级的就不用过滤了。
请问这样可以吗？22.A的1120梯度泵是双泵还是单泵啊，好像是2元的低压单泵吧，那低压泵和高压泵，对样品测定的影响有多大差别？那双倍的钱花的值吗？那2元梯度的没低压的吗？23.在泵的保养和维护过程中一般注意什么？24.在泵长时间不使用时，泵内需装什么液体已保持清洁（除了乙腈和甲醇还有别的溶剂吗？例如异丙醇水或甲醇水，好像异丙醇水的粘度比较大啊）25.泵如长时间不用最好多久开机一次已保证以后使用状态良好?26.泵不用的时候泵里面不是要充满一些溶剂吗?用异丙醇水可以吗？会不会生锈？27.今天注意到岛津10A 与20A的泵，单向阀上有些差别，还请pandora98老师解说下这两中单向阀不同的设计。
28.如果在在线中没有选择压力曲线，在离线中还能调出来吗？系统会自动保存吗？29.当开机自检通过后，没有开灯，为什么会有吸收？而且随着时间，一直在走？30.四元比例阀,进入阀前各通道都正常,从比例阀出来后中间的管路里有气泡,出现这种情况的原因,怎么解决?只能更换比例阀吗?31.AGILENT LC-1200仪器，更换泵的过滤头（白头）后，总是安装不到位，排液口朝上，需好几次才能装好，有什么巧门可以一次安装到位?32.我最近刚刚把液相色谱由等度换成梯度的，可是自从换成梯度的跑空白怎么都有峰，这些峰一般都是在改变流动相配比时产生，怎么改变梯度都不行，改变流动相也不行，换成进口溶剂也不行，换成新的柱子也不行，怎么冲洗系统还是有峰，也不知道是什么原因了?[ Last edit by emoc98311]老多_小多∙技术∙财富∙∙个人资料加为好友∙给他留言帖子合集板凳只看作者回复于：2009-7-7 20:58:05回复本贴回复主题编辑举报管理第一部分：泵与比例阀的结构与工作原理1. 单向阀单向阀一般由阀体、阀座和红宝石球组成，在压力的作用下宝石球离开阀座，流动相流过单向阀，反之，在反向力的作用下宝石球回到阀座上，此时流动相不能流过。
显然宝石球与阀座之间的配合必须非常适合才能防止流动相的泄漏，为了保证单向阀不发生泄漏，Agilent1 200的出口单向阀中安装了两套宝石球和阀座，入口单向阀阀芯是将宝石球用一个合适的弹簧压在阀座上，用电磁阀通过程序主动控制宝石球的位置，进而控制入口单向阀的开闭，并且为了降低成本和节省维护费用，采用了可置换式的卡套式单元件。
单向阀是实现泵体功能的关键部件，平时出问题最多，使用维护起来也格外需要注意。
Agi lent 1200的入口单向阀是主动电磁阀，配备一个阀芯。
如图：从入口主动电磁阀的底部看，中间有一个带火漆的内六角螺钉，这个螺钉是出厂前校定好的，改变螺钉的位置会导致阀体内磁芯冲程的改变，进而改变泵的实际流速，或者导致磁芯上密封膜片被击穿或阀芯损坏。
阀底四角有四个内六角螺钉，拆掉四个螺钉，取下阀体，阀体内是一个空腔，里边有一个磁芯压在空腔内的弹簧上，磁芯另一端有一段柱状突起，正好可以插到正方形塑料片中间的圆孔上，圆孔中间有一个黑色的垫片，取下正方形的黑色塑料板，黑色垫片下压着一个圆形的透明膜片，这个透明膜片起密封作用，膜片下是一个顶针插在孔里，顶针一直伸到电磁阀状阀芯的凹孔内。
将阀芯用合适的塑料杆从阀芯上部（直径大的一端）对准金色的膜片部位用力往下慢慢顶开（尽量不要划伤金色的膜），阀芯尾部顶出来的依次为：半透明的阀座、宝石球和弹簧，留在阀芯外套里的是不透明的塑料套管，弹簧和宝石球就在套管内运动。
阀芯装到阀体上去的时候顶针插在阀芯尾部阀座上的小孔里，顶在宝石球上，装好后宝石球被顶针顶着，离开阀座，阀芯里的弹簧被压缩，此时电磁阀芯处于打开的状态，流动相可以通过；通电时线圈产生磁场，将阀体内部的磁芯以及顶针吸回去，阀芯里的宝石球在弹簧的作用下落在阀座上，封闭阀座中心的流动相入口，此时电磁阀芯处于闭合状态，流动相不能通过。
常见的电磁阀芯一共有两种，如图所示：图中下方左边纯白色的是普通的阀芯，阀芯外壳整体为塑料结构，主要是二元高压梯度系统和四元低压梯度系统使用；下方右边底部深色的是耐压的阀芯，阀芯尾部塑料壳改为金属结构，主要是快速液相使用，和普通的阀芯主要区别在于其阀座上有金属箍，耐压能力大大提高了，估计新出的1290也是这种阀芯或者更好的。
出口单向阀如图所示：出口单向阀内部结构比入口主动阀阀芯结构稍微复杂一点，但其原理都一样，通过宝石球和阀座来达到密封的效果，只允许液体单向流动。
我一共见过三种1200的出口单向阀，分别是四元梯度系统的――外边有黑色套圈，二元梯度系统的――外边有白色透明塑料套圈，快速液相用的――外边有白色不透明塑料套圈。
三种出口单向阀内部结构大同小异，下图列出常见的两种：1200二元和四元系统使用的普通的出口单向阀外壳都一样，用螺纹扣紧固，快速液相的从底部直接扣压，没有螺纹。
普通的出口单向阀用扳手拧开螺纹扣帽以后，露出里边的螺钉，螺钉是中空结构，螺钉孔里由外到里依次是：盖帽状的膜片、柱状金属坠、宝石球、陶瓷套管、膜片、阀座、膜片、柱状金属坠、宝石球、陶瓷套管、膜片、阀座，快速液相的单向阀是从反方向直接打开，内部的零件顺序正好相反，所以前两种拆开以后装回去的时候有一定难度，拧的太紧，阀座容易压裂，太松了可能会漏液，所以不建议大家拿好的单向阀拆开来研究，快速液相的阀座上有金属箍，且压扣上有胶垫，保证出口阀既耐压又不会因为阀座裂开漏液。
1200出口单向阀采用了两套宝石球和阀座串联的结构，一个阀座配一个套管，阀座和套管之间有垫片密封，套管中有宝石球和柱状金属坠，泵在静止和吸液时，宝石球在金属坠和自身重力的作用下落到阀座上，出口单向阀处于关闭状态，流动相不能通过，泵在排液时，由于入口阀关闭，泵腔内压力将宝石球和金属坠推开，出口单向阀处于打开状态，流动相流过单向阀。
两套宝石球和阀座串联，在出口单向阀密封时起到了双重保护的最用。
另外宝石球上的圆柱体金属坠一端有缺口，装的时候有缺口的一端不接触宝石球，这点一定要注意，这是为了避免宝石球被顶开时柱状的金属坠被推上去以后堵住陶瓷套管上端的液体出口，第一个金属坠上是第二个阀座，第二个上边是单向阀出口。
[ Last edit by emoc98311]老多_小多∙技术∙财富∙∙个人资料加为好友给他留言帖子合集3# 只看作者回复于：2009-7-7 20:58:13回复本贴回复主题编辑举报管理2. 泵几元泵就是能控制几个流动相通路，二元泵有两个流动相通路，能同时使用两种流动相，四元泵有四个流动相通路，能同时使用四种流动相。
最初的液相都是单元泵，通过柱塞杆的往复运动配合入口和出口单向阀的使用来实现流动相的定向输送，流动相只能手动配制混合，不能运行梯度。
二元高压梯度系统解决了单元泵需要手动混合流动相的问题，并且能够运行梯度，调节洗脱强度，但是需要两个泵，仪器成本大大的增加了。
四元低压梯度系统用一个泵配合一个四元比例阀实现了四个流动相通路运行梯度的需要，并且降低了仪器的成本和仪器使用维护的费用。
常见的液相泵有凸轮和齿轮两种柱塞杆驱动方式，1200使用的是齿轮驱动，每个泵里有两个柱塞杆，一个入口主动电磁阀，一个出口单向阀。